全 文 ：V o l
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1 3N 0
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4 水 产 科 `学
新月菱形藻 ( N i tz s` h l’ a。 z 。 、 t。 : i’ u m )
增殖速度与培养密度关系的初步研究
张 胜 利
( 辽宁省海洋水产研究所 , 大连 1 1 6 0 2 3)
提 要
本文对新月菱形藻 ( N ; t。 ,h 、 以。 l o lt , n) 不同培养规模 (一 、 二 、 三级 ) 、 周期 ( 3 、 5 、 6 、 7 天 ) 、 生态 条件 ( 温度 、 光照 、
P H 值 )下 , 不同培养密度与增殖速度进行了实验测 试及归纳总结 , 得出如下结论 : 在培养规模 、 周期及生态条件相同
情况下 , 在一定密度范围内 ,新月菱形藻的增殖速度 - 一 相 对生长常数 ( K ` )值随培养密度的提高而降低 , 即呈 负相 关
性 。
关钮词 : 新月趁形蕊 培养密度 相对生长常数 ( K ’ ) 负相关性
近年来 , 随着海产贝类苗种生产规模的不
断扩大 , 对饵 料的需求量 日益增加 ;同时 , 随着
人工育苗技术的提高 ,工 厂化育苗 已成为水产
苗种生产的发展方向 。 所有这些都要求我们了
解 、 掌握饵料繁殖规律 ,提 高繁殖速度 , 增加产
量 , 以确保饵料供应 , 并适应生产的要求 。 影响
饵料增殖速度 的因素很多 , 人们也做过大量工
作 ,尤其生态方面的工作 。但做为饵料培养上可
控性很强 ,且非常重要的培养密度 , 对增殖速度
影响方面的工作 ,未见详细报道 。笔者通过对新
月菱形藻的培 养实验及生产实践 , 总结 了培养
密度与增殖速 度的关系 , 目的在于为饵料培养
工作 ,尤其是生产性培养 , 提供实验依据 。
一 、 实验仪器 、 设备 、 条件和方法
(一 >培养容器及培养液制备 :
1
. 培养容器 :
一级培养 : 分别采用 Z 0 0 0m l 、 s 0 0 0m l 三角
烧瓶 。
二级培养 : l m “ 水泥池 、 池深 60 o m 。
三级培养 : 4 m 3 水泥池 ,池深 70 o m 。
2
. 水处理方法 :
一级培养 : 高温消毒法 。
二 级 培养 : 砂滤 ~ 10 6 过滤器 ~ 酸化至
P H 3
,时间为 4 ~ 1 Zh r 。
三级培养 : 砂滤 ~ 1 07 过滤 器~ 次氯酸钠
2 0 P Pm
,
4 ~ 1 2 h r
。
3
. 营养盐 :
一级培养 :康威营养液 、 施加量 1%。 。
二 、 三 级 培 养 : N a N O 。 : 6o p p m 、 K H ZP ( ) : :
S P p m
、
F e ( C
o
H
S
O
:
)
: : 0
.
s p p m
。
<二 )培养方法及条件 :
1
. 培养方式 、 方法 :
一次性 、 静止培养 、 定期搅拌 。
.2 培养条件 :
自然光照 , 自然室温 (有供热设备 ) 。
<三 )测试仪器 :
光照 : 上海嘉定学联仪表厂 Z D S一 10 型照
度计 。
温度 : 普通水银温度计 。
P H 值 : 福州产 “ 福光 ” 牌笔式酸度计 , 误差
士 0 . 1 。
定量 : 血球计数板 。
二 、 实验内容及结果
<一 )一级培养实验 :
实验一 : 时 .旬 1 9 9 3 年 1 0 月 2 7 日一 1 1月 3
日 。 培养容器 : Z 0 0 0 m l 三 角烧瓶 , 温度变化范
围 : 1 6℃ ~ 18 C , 光照 : 中午最 强光照 2 0 0 0 ~
3 0 0 0 L u x
。
P H 值变 化范围 : 8 . 3 ~ 9 . 6 ,培养周期
为 7 天 , 实验结果见表 1 。
农 1 密度 x 10 喀细胞 /mI
锹 日 期 K 11 0 月 27 日 1 0月 29 日 1 1月 l 日 1 1 月 3 日8 l 6 1 1 4 3 23 5 4 1 1 0 . 1 18
8 2 12 3 1 8 1 34 6 5 1 4 0
.
0 89
a 3 1 6 8 2 1 7 2 4 1 4 6 1 0
.
0 6 3
8 名 23 0 26 7 27 6 52 5 0 . 0 5 1
DOI : 10. 16378 /j . cnki . 1003 -1111. 1994. 04. 004
水 产 科 学 1 9 9 4
买验 三 ` 口泣间 1 9 9 4 年 3 月 2 5 日一 4月 8 2 0 0 0m l, 比值为 1 : 4 。 第二阶段 : 3 月 2 8 日一 4
日 。 一 养容器 为 s o 0 m l 三角烧瓶 ,温度范 围 : 月 3 日 , 培养周期 6 天 , P H 值变化 8 . 4 ~ 10 . 3 。
i8 一 扮 . S C 。 光照 : 中午 测平均值为 3 0 0 0 ~ 接种比例 : 藻种 2 5 0Om l , 培养液 2 5 0 0m l , 比值
只。。 孙二 一 实验分三 阶段进行 , 第一阶段 : 3 月 为 1 : 1 。 第三阶段 4 月 3 日一 4 月 8 日 ,培养周
2 5 日一 3 月 2 8 日 , 培养周期 3 天 , P H 值变 化 期 5 天 , P H 值变化范围 10 . 2~ 10 . 5 , 补加营养
范围 8 . 3 一 , . 5 : . 接种比例 : 藻种 50 o m l ,培养液 盐 2 . 5m l/ 1 5 0 0 m l 藻液 。 实验结果见表 2 。
表 2 密度 x 1 0 ` 细胞 /m l
御 日 } 期 K l 日 期 K 1 日 期 K 1勺兔少, 飞 }3 月 2 5 日 }“ 月 2阳3 2 8 日 3 月 2 8 日 4 月 3 日 4 月 3 日 4 月 8 日
b } 14 0 三5 8 0
.
2 0 0 2 7 9 6 2 9 0
.
0 5 9 6 2 9 1 1 70 0
.
0 5 4
一飞丁一 1盯 一 5 2 6 0 . 1 6 6 26 3 7 1 7 0 。 0 7 2 7 1 7 8 8 2 0 。 0 1 8
一— 一 l 一 三8 2 0 1 7 8 2 9 1 6 74 0 。 0 6 1 6 74 9 6 0 0 . 0 3 1
b
:
,
1 了l 」
} , 1 9 2 5 76 0
.
1 5 9 2 8 8 6 6 7 0
。
0 6 1 6 6 7 8 1 2 0
.
0 17
_几 二级培养实验
时间 呈, 8 , 年 3 月 9 日一 3月 2 0 日 。 培养
穴注 l m ’ , 池深 弓O c m ,穴温变 化 5 一 1 o C , 照度
2 0 0 0 ~ 4 0 0 o L u x
,
P H S一 9 。 每隔 l ~ Z h r 搅池
次 ,培养周期 6 天 。 培养结果见表 3 。
表 3 密度 x 10 4 细胞 /m l
二亨一公轰月- 一一华竺二聋竺 -— 终 止 日 期 K l八 钊 \ \ 久 k , 3 月 9 日 } 3 月 ` 。 日 …“ 月 ` 4 日3 10 3 14 3 月 1 5 日 3 月 16 日 3 月 2 0 日
C
l - … 6 2 2 2 8 0 . 0 9 4
l
8 5 l 2 4 1 0
.
0 7 5厂气 .又 介 :
C
:
i ] 2 1
l — 3 1 0 0 . 0 6 8一一
c { 16 6 3 8 8 0
.
0 6 1
(三 、 三级培养实验 。
时问 1 9 9 4 年 3 月 23 日一 3 月 26 日 , 培养
六、 :土 1二飞 , 池深 7 OC m , 水温变化 1 0 ` C 一 1 2 . 4 C ,
照 度 : 中午 测光照范 围 4 0 0 0 ~ s 0 0 0 o L u x , P H
值 8 . 2一 9 . 6 , 每隔 1一 Zhr 搅池 l 次 。 培养周期
3 天 , 结果请见表 4 。
表 4 密度 x 10 ` 细胞 /m l
、 /誉一创一 日 期 K l
\ 怜 次 1一 1 1补 、 、 代 3 月 2 3 日 3 月 2 4 日 3 月 2 5 日 3 月 2 6 日
〔人1 } 9 8 1 8 2 2 0 6 2 6 5 0
、
1 4 4
月 , 13 8 1 9 9 2 7 7 2 8 7 0
.
1 0 6
d 1 4 8 2 8 4 2 8 8 2 9 8 0
.
1 0 1
d 1 6 0 1 9 8 2 7 0 2 8 9 0
.
Q8 6
d 3 6 3 2 5 0 2 5 2 3 2 6 0
.
0 9 7
d
。 1 8 2 2 2 9 2 9 3 3 1 8 0
.
0 8 1
- 一几 : } 18 6 2 6 0 3 5 2 3 5 5 0 . 0 9 2
渔 2 0 6 2 4 4 3 1 3 0
.
0 5 3以 。
Vo l
.
13 N O
.
4 水 产 科 学
三 、 讨论
(一 )将一 、 二 、 三级培养结果绘制成图 , 见
图 1 。 1 、 2 、 3 ,分别为实验一 、 二级培养 、 三级培
养的培养起始 密度和相对生长常数 K ` 的相关
曲线 。
0
.
1 5
玛
留
鬓。 . 1。
华
州十曰
p 咬
口刀申护
0
.
0 5
0 1 0 0 2 0 0
培养起始密度 义 1 04 细胞 / IT’ l
从图中我们可 以看出 , 在培养条件 (温度 、
光照 、 P H 、 规模 、 周期 )确定的条件下 ,在一定密
度范围内 ,随着培养起始密度 ,即接种密度的增
加 , 其相对生长常数值呈明显下降趋势 。 从表 2
的分析我们也不难得 出相 同结论 。 分析这一现
象的原因 ,笔者认为 ,在生产性培养中 , 主要和
光照有关 ,在藻类细胞的培养液中 ,光透入的强
度随透入深度的增加而迅速减少 。 随细胞密度
增加 ,光透入深度将更加降低 ,必然影响其光合
作用 , 一般生产单位饵料培养池均可达到 60 c m
左右 ,也有达 s o e m ~ l o o e m 左右的 。 如不采取
充气 、 增加搅拌等措施 , 其增殖效果往往不够理
想 。 当然影响饵料增殖的因素很多 ,也很复杂 ,
只有各因子间的合理搭配 , 才能达到理想的效
果 , 要做到这一点 , 还有很多工作和 问题 , 有待
于进一步研究和探讨 。
( 二 )任何研究和结果都有一定 的应 用范
围 。 本实验结果也不例外 。 增殖速度随接种密
度的增加而降低是有一定使用范围的 。 如果接
种密度过低 ,可能会出现延缓期加长 、 光照强度
超过饱和光照强度 、 造成细胞伤害 。如果水处理
不当 ,还会造成原生动物污染 ,致使新月菱形藻
不能形成优势而导致培养失败等一系列问题 。
同时培养密度过低 ,达到预期培养密度的周期
也会加长 。一般来说 ,新月菱形藻的接种密度在
1 0 万细胞 /m l 左右 , 在生产上是切实可行 的 。
在具体培养过程 中 ,应根据培养条件和时机灵
活掌握 。
参 考 资 料
1
. 海洋饵料生物培养 ,湛江水产专科学校 主编 , 1 9 8。 。 农
业出版社 。
2
. 徐秉权等 , 1 9 8。 。 温度 、 光照 、 营养盐对三角褐指藻生长
影响的多因子试验 . 山东水产学会会刊 , 第 3 期 。
3
. 王淑萍 , 19 91 年 。 几种单细胞藻类高密度保种技术初
探 。 水产科学 , 1 0 ( l ) : 3 1 ~ 3 2 。
P r e l im i n a r y s t u d y o n t h e r e la t i o n s h i P
b e t w e e n t h e e u l t u r e d e n s i t y a n d r e p r o d u e t io n s p e e d o f
N i t z s e h i a e lo s t e r iu m
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a b s t r a e t
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s e v e r a l e x p e r im e n t s w e r e e a r r i e d o u t t o t e s t th e
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N i t z s e h i a e lo s t e r i u m o n d i f f e r e n t e u l t u r e s e a le s
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、
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-
e d t h a t o n t h e s a m e e u l t u r e s e a le
、
p e r i o d
、
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d i t io n
, t h e r e p r o d u e t i o n s p e e d— r e la t l v e g r o t h (o n s t a n t v a l -u e e k l ) d e e r e a s e a s th e e u l t u r e d e n s i t y in e r e a s e in a e e r t a in
d e n s i t y r a n g e s
·