全 文 ：沿海滩涂甘紫菜挥发油成分提取及抗氧化性研究
刘兴宽1 , 郁建平 2
(1.江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室 /盐城师范学院生命科学与技术学院 ,江苏盐城 224002;
2.贵州大学生化研究所 ,贵州贵阳 550025)
　　摘要:研究沿海滩涂甘紫菜(PorphyrateneraKjellm.)的干燥藻体挥发油的提取方法及抗氧化活性 , 结果表明 ,挥发油的
最佳提取方法是不加乙醚的挥发油提取器的水提取法 ,收油率为 0.98%;沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油对二苯代苦味肼
基自由基(DPPH)有较为明显的清除作用 , 在 0.01 ～ 1.00 g/L浓度范围内随剂量增加 , 清除作用增强。
　　关键词:甘紫菜;挥发油;抗氧化
　　中图分类号:S946.2　　文献标志码:A　　文章编号:1002-1302(2009)01-0273-01
收稿日期:2008-06-16
基金项目:江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室资助项
目(编号:JLCBE06027);盐城师范学院引进人才科研启动基金。
作者简介:刘兴宽(1969—),男 ,江苏东海人 ,硕士 ,讲师 ,从事天然活
性成分的分离及检测研究。 Tel:(0515)88921875;E-mail:
xingkuanliu@sina.com。
　　紫菜是一种营养价值较高的海洋藻类植物 ,人类食用及
药用已有上千年历史 。紫菜含有丰富的蛋白质 、碳水化合物 、
不饱和脂肪酸 、维生素和矿物质 ,具有很高的营养价值 。近年
来有研究表明 ,紫菜具有抗衰老 、降血脂 、抗肿瘤等效用 ,探讨
紫菜的药用价值 ,从紫菜中开发出具有独特活性的海洋药物
和保健食品 ,是紫菜研究和利用的新方向 [ 1 -3 ] 。甘紫菜(Por-
phyrateneraKjelm.)属红藻门红毛菜科 ,生于海湾中潮带岩
石上 ,广泛分布于渤海至东海 ,主要供食用 ,入药有软坚散结 、
化痰利尿和降血脂等功效 [4 ] 。笔者对沿海滩涂甘紫菜挥发
油的提取方法及抗氧化活性进行了研究 ,旨在为沿海滩涂甘
紫菜的进一步研究与开发应用提供科学依据 。
1　材料与方法
1.1　主要仪器与试剂
挥发油提取器装置(自制);水蒸气蒸馏装置(自制);UV
-916型紫外可见分光光度计 (澳大利亚 GBC公司);DPPH
(Sigma公司),分析纯;水为二次蒸馏水 。
1.2　样品及挥发油的提取
甘紫菜于 2007年 7月采自东台市一紫菜养植户 ,将新鲜
藻体于日光下晒干 、粉碎 ,样品置于 105℃下恒温干燥 2h备
用 。分别用水蒸气蒸馏法和挥发油提取器提取法以及配合其
他条件(本试验是加入有机溶剂无水乙醚)来提取甘紫菜的
挥发油 ,对提取液萃取处理后 ,用无水硫酸钠干燥 ,再比较其
挥发油的收油率 。
方法 1:称取干燥 、粉碎的甘紫菜藻体 100.000 0g,置于 1
L圆底蒸馏烧瓶中 ,加水 450ml浸泡 14h,放于挥发油提取器
中 ,用常规蒸馏法加热蒸馏 6 h,待蒸出的挥发油成分不再增
加时停止加热 。馏出液以无水硫酸钠干燥 ,得到淡黄色透明
的挥发油液体 0.876 8g,有特殊的香味 ,收油率为 0.88%。
方法 2:称取干燥 、粉碎的甘紫菜藻体 100.000 0g,置于 1
L圆底蒸馏烧瓶中 ,加无水乙醚 300ml,加二次蒸馏水 300 ml
左右 ,浸泡 14h,放于挥发油提取器 ,加热蒸馏 6h,待蒸出的
挥发油成分不再增加时停止加热 。馏出液用无水硫酸钠干
燥 ,得到淡黄色透明的挥发油液体 0.335 2 g,有特殊的香味 ,
收油率为 0.34%。
方法 3:称取干燥 、粉碎的甘紫菜藻体 70.000 0 g,置于
500ml圆底蒸馏烧瓶中 ,加水 200 ml浸泡 14 h,再用常规水
蒸气蒸馏法加热蒸馏 8h,待蒸出的挥发油成分不再增加时停
止加热 。馏出液以无水硫酸钠干燥 ,得到淡黄色透明的挥发
油液体 0.175 3g,有特殊的香味 ,收油率为 0.25%。
方法 4:称取干燥 、粉碎的甘紫菜藻体 100.000 0g,置于 1
L圆底蒸馏烧瓶中 ,加水 400 ml,浸泡 14 h,加入挥发油提取
器中 ,加热蒸馏 6 h,待蒸出的挥发油成分不再增加时停止加
热 。馏出液用无水硫酸钠干燥 ,得到淡黄色透明的挥发油液
体 0.976 8 g,有特殊的香味 ,收油率为 0.98%。
1.3　沿海滩涂甘紫菜干燥藻体挥发油的抗氧化性
用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)法 [ 5-6 ]测定挥发油的
抗氧化性 。在最大波长 517 nm处 ,于直径 1cm比色皿中 ,按
表 1加样测定各吸光度 A,总体积 3.0ml。每吸光度平行测 2
次 ,取平均值 ,然后根据以下公式计算清除率 。
表 1　DPPH试验加样
吸光度 加样
Ac 2.5 ml0.25mmol/LDPPH溶液 +0.5ml试样的溶剂(甲醇),甲醇调 0
Ai 2.5 ml0.25 mmol/LDPPH溶液+0.5ml试样 ,甲醇调 0
Aj 2.5ml0.25mmol/LDPPH溶液的溶剂(甲醇)+0.5ml试样 ,甲醇调 0
　　注:(1)DPPH溶液配制:以无水甲醇为溶剂配制成浓度为 2.5 mmol/L的
储液 ,于冰箱存放 ,临用时将储液以同一种溶剂(甲醇)稀释至 0.25mmol/L;
(2)试样溶液的配制:试样为沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油 ,以无水甲醇
为溶剂分别配制成浓度为 0.01、0.10、1.00g/L的试样溶液。
清除率 K(%)=(1-Ai-AjAc )×100
2　结果与分析
2.1　挥发油的提取
方法 1 ～ 4的收油率依次为 0.88%、0.34%、0.25%、
0.98%,可以看出 ,采用挥发油提取器法提取(方法 1、2、4)收
油 率高于普通水蒸气蒸馏法(方法3),加入有机溶剂无水乙
(下转第 274页)
—273—江苏农业科学　2009年第 1期
DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2009.01.118
RP-HPLC法测定火腿肠中的苯甲酸和山梨酸
苏爱梅 , 李　锋
(南通农业职业技术学院 ,江苏南通 226007)
　　摘要:采用 RP-HPLC法测定火腿肠中防腐剂苯甲酸和山梨酸的含量 ,色谱柱为 Symetry-C18(10 cm×4.6 mm, 5μm),
以 0.02 mol/L乙酸铵 -甲醇(97 ∶3)为流动相 ,检测波长为 230 nm。结果 ,两者浓度在 0 ～ 0.05 g/L范围内线性很好(r=
0.999 6);山梨酸检出限为 0.024 g/L, 平均回收率为 100.4%, RSD为 0.68%(n=5)。该方法简便快速 , 准确可靠。
　　关键词:火腿肠;苯甲酸;山梨酸;反相高效液相
　　中图分类号:TS207　　文献标志码:A　　文章编号:1002-1302(2009)01-0274-02
(上接第 273页)
醚提取 ,收油率反而下降 ,因为乙醚是一种易挥发的物质 ,沸
点为 55 ℃。挥发油是一种混合油类 ,沸点在 70 ～ 300 ℃之
间 ,易溶解在乙醚中 。在蒸馏过程中 ,挥发油低沸点的部分随
乙醚一起被蒸发掉 ,导致收油率降低 。因此 ,最佳提取方法是
不加乙醚的挥发油提取器装置中的水提取法 。
2.2　挥发油的抗氧化性
沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油抗氧化性试验结果如
表 2所示 。由表 2可见 ,沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油
对二苯代苦味肼基自由基 (DPPH)有较为明显的清除作用 ,
在 0.01 ～ 1.00g/L浓度范围内随剂量增加 ,清除作用增强。
表 2　沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油对 DPPH的清除率
挥发油浓度(g/L) 0.01 0.10 1.00
DPPH清除率 K(%) 58.53 75.63 89.19
3　结论
用挥发油提取器蒸馏装置提取沿海滩涂甘紫菜干燥藻体
的挥发油 ,设备简单 ,操作易行 ,一次处理量较大 ,生产成本较
低 。具体哪种溶剂更合适挥发油的提取 ,有待进一步研究 。
沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油对二苯代苦味肼基自由基
(DPPH)有较为明显的清除作用 ,且在 0.01 ～ 1.00 g/L浓度
范围内随剂量增加 ,清除作用增强 。
参考文献:
[ 1]范　晓 ,韩丽君.中国沿海经济海藻化学成分的测定 [ J] .海洋
与湖沼 , 1995, 26(2):199-207.
[ 2]范　晓 ,韩丽君.我国常见食用海藻的营养成分分析 [ J] .中国
海洋药物, 1993, 12(4):32-38.
[ 3]张全斌 ,赵婷婷 , 綦慧敏 ,等.紫菜的营养价值研究概况 [ J].海
洋科学 , 2005, 29(2):69-72.
[ 4]郑汉臣.药用植物学 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 1999:120-
121.
[ 5]许申鸿 ,杭　瑚.一种筛选自由基清除剂的简便方法 [ J] .中草
药 , 2000, 31(2):96-97.
[ 6]许申鸿 ,杭　瑚.20种植物水提物对 DPPH的清除作用 [ J].中
国野生植物资源 , 1999, 18(3):50-51.
　　火腿肠是以畜禽肉为主要原料 ,辅以淀粉 、植物蛋白粉等
填充剂 ,再加入食盐 、糖 、酒 、味精 、香辛料等调味品 ,并添加品
质改良剂卡拉胶和维生素 C以及护色剂 、保水剂 、防腐剂等
物质加工而成 。由于它食用方便 ,营养丰富 ,味道鲜美 ,已成
为人们居家生活特别是旅途中不可或缺的一种美食 ,深受人
们的欢迎 。
为了尽可能保持火腿肠的新鲜美味 ,在火腿肠的加工过
程中会采取各种方法和措施延长火腿肠的保质期 ,其中一项
就是适当添加防腐剂 。目前国内允许用于肉制品的防腐剂主
要有山梨酸钾 、双乙酸钠 、乳酸链球菌素 、单辛酸甘油酯 、纳他
霉素等几种 。根据我国 GB2760—1996《食品添加剂使用卫
生标准 》规定 ,在火腿肠类肉制品中 ,食品防腐剂苯甲酸和苯
甲酸钠不得检出 ,山梨酸及其钾盐(以山梨酸计)的使用量不
收稿日期:2008-07-28
基金项目:江苏省南通市生物技术重点实验室项目。
作者简介:苏爱梅(1971—),女 ,江苏如皋人 ,硕士 ,讲师 ,主要从事食
品加工和质量检测的教学和研究。 Tel:(0513)85232917。
得超过 1.5g/kg。但是市场上滥用这两种防腐剂的违法行为
经常发生 ,常见检测出加了苯甲酸和山梨酸严重超标的火腿
肠 。应用高效液相色谱法进行火腿肠中苯甲酸 、山梨酸的测
定 ,具有分离效率高 、快速 、色谱相选择范围宽、灵敏度高 、样
品前处理简单等特点 ,准确可靠 ,简便快速 ,便于推广 。
1　材料与方法
1.1　仪器
Waters高效液相色谱仪 , Waters1525泵 , Waters2487双
通道紫外检测器 , Breeze色谱系统管理工作站 ,色谱柱:Sym-
etry-C18柱(10 cm×4.6mm, 5μm)。
1.2　试剂
苯甲酸 、山梨酸标准品 ,甲醇(色谱纯), 0.02 mol/L乙酸
铵(经 0.45μm滤膜过滤),氨水 (1+1), 100 g/L亚铁氰化
钾溶液 , 200 g/L乙酸锌溶液 。
1.3　仪器测定条件
检测波长 230 nm,流动相:甲醇 -0.02 mol/L乙酸铵
(3 ∶97),流速 1 ml/min,进样量 20μl。
—274— 江苏农业科学　2009年第 1期