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肉碱对微绿球藻和四膜虫种群生长的影响



全 文 :中国饲料 2010 年第 23 期
硫酸铵/(mg/L) 1000
过磷酸钙/(mg/L) 150
EDT/(mg/L) 50
海水/L 10
尿素/(mg/L) 50
配方组成 含量
表 1 培养液配方
左旋肉碱作为一种饲料添加剂广泛应用于饲
料加工中,其能够提高鱼类相对生长率、增加鱼体
绝对重量并降低饲料系数 (周文礼等,2009)。 饲
料中添加适量左旋肉碱能减少鱼体内脂肪含量。
微绿球藻(Nannochloropsis oculata)是一种海洋单
细胞微藻,在水产养殖中应用广泛,多用于培养轮
虫等动物性生物饵料及亲贝,在河蟹育苗中应用
也获得良好的效果 (李海军等,2006)。 向枭和唐
龙碧(1999)报道了不同浓度的左旋肉碱对微绿球
藻增殖的影响,但对四膜虫增殖的影响尚未见报
道。 本试验测定了不同的左旋肉碱浓度下微绿球
藻和四膜虫的增殖情况。
1 材料与方法
1.1 试验材料 试验藻种来源:试验用微绿球藻
Nannochloropsis oculata 来源于吉林农业大学动物
科技学院水产养殖实验室。 试验海水:由海水晶
(山东潍坊海化天灵海水晶厂) 与曝气 24 h 后的
自来水配制而成的,盐度为 26.9 ‰。试验药品:左
旋肉碱,美国 Sigma 公司生产。
1.2 试验设计 试验共分为 4 组 ,A 组为对照
组,B、C、D 组分别添加 50、100 mg/kg 和 1000 mg/
kg 左旋肉碱,每组设 3个重复。
1.3 试验方法
1.3.1 接种 接种前用高锰酸钾对试验用具严格
消毒, 试验用三角烧瓶为 2000 mL, 培养体积为
2000 mL,用无菌封口膜封好瓶口。
1.3.2 培养条件 培养液采用表 1培养配方。 室
内培养用日光灯作为光源, 光照强度约为 3500
lx,24 h光照。 温度控制在(22±3)℃。 培养用海水
盐度为 26.9 ‰,pH近中性。
1.3.3 培养方法 试验藻种在试验条件下培养
1 d 后供接种用。 培养时,每个三角烧瓶内各放
入一个充气沙头,使培养瓶内溶液充分摇匀。
1.3.4 测定方法
1.3.4.1 藻细胞密度的测定 每天 08∶30 取样一
次, 每瓶分别从不同深度取出 1 mL, 静置 3 ~ 5
min后,藻细胞下沉,用血球计数板计数。
1.3.4.2 四膜虫密度的测定 用 0.1 mL 的计数
框计数。
肉碱对微绿球藻
和四膜虫种群生长的影响
吉林农业大学动物科学技术学院 葛晨霞 董晓庆 李月红 陈 洋
[摘要] 本试验研究了不同浓度的左旋肉碱(分别为 0、50、100、1000 mg/L)对微绿球藻(Nannochloropsis oculata)
和四膜虫(Tetrahymena sp)种群生长的影响。 结果表明:添加高剂量左旋肉碱对微绿球藻种群生长有显著抑制作用
(P < 0.05),对四膜虫种群生长有显著促增殖作用(P < 0.05)。
[关键词] 左旋肉碱;微绿球藻;四膜虫;增殖
[中图分类号] S816.7 [文献标识码] A [文章编号] 1004-3314(2010)23-0038-02
[Abstract] The effects of supplementation of L -carnitine (0,50,100,1000 mg/L respectively)on the population
growth of Nannochloropsis oculata and Tetrahymena sp were revealed.The results showed that high dose of L-carnitine
could inherent the growth of Nannochloropsis oculata (P < 0.05),while inhance mulitiplication of Tetrahymena sp signifi-
cantly(P < 0.05).
[Key words] L-carnitine;Nannochloropsis oculata;Tetrahymena sp;multiplication
基金项目:国家自然科学基金(30671621)
38
DOI:10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2010.23.008
中国饲料2010 年第 23 期
组别 第 1 天 第 3 天 第 5 天 第 7 天 第 9 天
A 组 247±2.70a 50 ±1.73a 62±4.71a 47±2.11a 61±4.58a
B 组 247±3.12a 35 ±4.30a 62 ±4.72a 28 ±2.22b 23±2.18b
C 组 247±1.25a 35±2.92a 65 ±5.03a 180±3.96c 301±4.4c
D 组 247±2.49a 48 ±4.21a 80±7.62b 192±17.68c 404 ±32.6d
表 4 肉碱对四膜虫增殖的影响
组别 第 1 天 第 3 天 第 5 天 第 7 天 第 9 天
A 组 841±0a 1375±100a 2245±240a 3258±590a 5091±720a
B 组 841±0a 1610±350a 2326±810a 3245±570a 4440±670b
C 组 841±0a 1343±680a 1781±740a 2600±320b 3993±670c
D 组 841±0a 1598±340a 2148±480a 2920±630b 3990±980c
表 2 肉碱对微绿球藻增殖的影响
万个/mL
注 :同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P > 0.05),不含相同字母表示差异显著 (P <
0.05);下同。
表 3 不同浓度组微绿球薻的
相对生长常数和平均倍增时间
组别 K G/d
A组 0.0869 3.4638
B 组 0.0803 3.7484
C 组 0.0752 4.0027
D组 0.0751 4.0080
表 5 不同浓度组四膜虫的
相对生长常数和平均倍增时间
组别 K G/d
A组 -0.180 -0.226
B 组 -0.121 -2.469
C 组 -0.114 -2.620
D组 -0.016 -18.580
万个/mL
1.3.4.3 计算公式 相对生长常数 (K)=(lgOD1-
lgOD0)/T(刘平和边强,2003)。 平均倍增时间(G/
d)=0.301/K, 式中 OD1为培养结束时藻浓度,OD0
为培养开始时的藻浓度 ,T为培养时间,d;
1.4 数据处理 使用 SPSS 11.0 统计软件, 按线
性模型进行因子方差分析。 各处理平均数用邓肯
氏方法进行差异显著性比较, 试验数据以平均
值±标准差表示。
2 结果与讨论
2.1 不同浓度的左旋肉碱对微绿球藻增殖的影
响 表 2表明, 左旋肉碱对微绿球藻的增殖有显
著抑制作用(P < 0.05)。 从试验第 1 ~ 5天 4组间
微绿球藻密度无显著差异, 从试验第 7天差异开
始显现,C 组、D 组与 A 组、B 组间差异显著 (P <
0.05),A 组与 B 组间无显著差异(P > 0.05),C 组
与 D 组间无显著差异(P > 0.05),第 9 天 A 组与
B 组、C 组、D 组间差异显著 (P < 0.05),B 组与 C
组、D组间差异显著 (P < 0.05),C 组与 D 组间无
显著差异(P > 0.05)。
由表 3 可见, 各试验组的 K 值低于对照组,
G/d 值则高于对照组。 与 A 组相比,B、C、D 组 K
值分别减少 7.59 %、13.46 %、13.58 %,G/d 值分
别增加 8.22 %、15.56 %、15.71 %。这表明,在左旋
肉碱浓度为 1000 mg/L 时, 微绿球藻的相对生长
常数 K 明显低于浓度为 0 mg/L 的 A 组和浓度为
50 mg/L的 B组。 由表 2、表 3可见,D组与 A组、
B组之间存在显著性差异, 说明该浓度左旋肉碱
对微绿球藻种群生长具有显著抑制作用。
2.2 不同浓度的左旋肉碱对四膜虫增殖的影响
表 4表明, 左旋肉碱对四膜虫的增殖有显著影响
(P < 0.05)。 从试验第 1 ~ 3 天 ,4 组间无显著差
异(P > 0.05),从第 5 天 ,D 组与 A、B 组和 C 组
间差异显著(P < 0.05),而 A 、B、C 组间无显著差
异(P > 0.05)。从第 7天开始,D组和 C组与 A、B
组间存在显著差异 (P < 0.05),B 组与 C 组、D 组
间存在显著差异(P< 0.05),C、D 组间无显著差异
(P > 0.05)。 第9天,A、B、C组和 D组间均存在显
著差异(P< 0.05)。
从表 5 可以看出,各试验组的 K 值明显低于
对照组,G/d 值则明显高于对照组。 与 A 组相比,
B、C、D 组 ,K 值分别减少 32.78 % 、36.77 % 、
90.11 %,G/d值分别增加 10.9、11.7 倍和 82倍。
3 结论
本试验结果表明, 左旋肉碱浓度在 50、100
mg/L和 1000 mg/L时对微生物群落中的微绿球藻
种群生长具有一定的抑制作用, 对四膜虫种群生
长有促增殖作用。
参考文献
[1] 向枭,唐龙碧.L-肉碱在鱼类营养上的应用[J].饲料工业,1999,20(5):30 ~ 31.
[2] 李海军, 邵庆均, 聂月美.L-肉碱在水产动物中的应用 [J]. 饲料工业,
2006,5(20):56 ~ 58.
[3] 周文礼,唐学玺,乔秀英,等.Ingestion of Brachionus plicatilis under different
microalgae conditions[J].中国海洋与湖沼学报:英文版,2009,27(3):473 ~ 479.
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