作 者 ：陈定虎
期 刊 ：中国农业科学院 2002年 01期 页码：144
关键词：美洲商陆抗病毒蛋白；表达；烟草；玉米；小麦及棉花的遗传转化；
摘 要 ：从美洲商陆(Phytolacca americana)叶片中通过异硫氰酸胍法提取出了完整的总RNA，经RT-PCR分别扩增出全长的及缺失突变型PAP基因，将该基因与克隆载体pGEM-T Easy相连接，从SP6和T7两端同时对其进行序列测定，结果发现该序列与国外报道的PAP基因序列仅有一个碱基的差别，其同源性达99.9％：同时将PAP基因克隆到原核表达载体pET-5a上，转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)-plysS，在0.4mM IPTG的诱导下表达，经SDS-PAGE分析，只有N，C端皆缺失的PAP基因在大肠杆菌中得到了特异性表达，表达蛋白大小为27Ku，与预期值相符...