全 文 ：天然产物研究与开发 NatProdResDev2009, 21:303-305
文章编号:1001-6880(2009)02-0303-03
　
　
　收稿日期:2007-12-05　　　接受日期:2008-01-14
　基金项目:淮北市科技攻关项目(05027)
＊通讯作者 Tel:86-561-3802025;E-mail:xuejp2000@yahoo.com.cn
月腺大戟抑菌活性的初步研究
薛建平 1, 2＊ ,张爱民 1 ,盛　玮 1
1淮北煤炭师范学院生命科学学院 , 淮北 235000;2资源植物生物学安徽省重点实验室 ,淮北 235000
摘　要:以小麦赤霉病菌 , 辣椒疫霉病菌 , 葡萄黑曲霉病菌 , 苹果炭疽病和玉米大斑病菌为实验菌种 ,采用生长
速率法测定月腺大戟根部提取物对病原菌菌丝生长的抑制作用。结果表明 , 月腺大戟根部提取物对 5种农作物
常见病菌都有抑制作用 ,其中对 3种病原菌(小麦赤霉病菌 、苹果炭疽病菌 、玉米大斑病菌)的菌丝抑制作用强
烈;乙醇相提取物对病原菌抑制作用比水相提取物的抑制活性强。
关键词:月腺大戟;抗菌活性;植物源农药
中图分类号:Q946.887;R285 文献标识码:A
PrimaryStudiesontheAntifungalActivityofEuphorbiaebracteolataHayata
XUEJian-ping1, 2＊ , ZHANGAi-min1 , SHENGWei1
1SchoolofLifeScience, HuaibeiCoalIndustryTeachersColege, Huaibei235000 , China;
2AnhuiKeyLaboratoryofPlantResourcesandBiology, Huaibei235000 , China
Abstract:TakingGibberellazeae, Phytophthoracapsici, Aspergillusniger, Coletorichumgloeosporioides, Exserohilumturci-
cumastheexperimentalbacterialgermtostudyantifungalactivityoftherootextractsfromEuphorbiaebracteolata
throughtheuseofthegrowspeedlaw.TheresultsshowedthatrootextractsofE.ebracteolatahadinhibitionagainstfive
commoncropgerms, andhadstrongantifungalactivitiesagainstthreetestedfungi(Gibberellazeae, Coletorichumgloeos-
porioides, Exserohilumturcicum).Rootethanolextractshadbeterantifungalactivitiesthanwaterextracts.
Keywords:EuphorbiaebracteolataHayata;antifungalactivity;botanicalfungicide
　　随着环境保护的加强和人类自身健康利益需要
的提高 ,植物源农药以其无残留性 、安全性 、不易产
生抗药性等优点受到国内外研究者的关注和重
视 [ 1, 3] 。现在对植物源农药的研究主要集中在以下
两个方面:一是从植物中寻找农药活性成分 ,判明结
构 ,以此作为先导化合物 ,通过 “仿生 ”合成得到系
列衍生物作为杀菌杀虫剂;二是从资源丰富的植物
中直接提取活性成分 ,开发生物农药 [ 4] 。
月腺大戟 (EuphorbiaebracteolataHayata)为大
戟科植物 ,其根是传统中药狼毒的一种 [ 5] 。根据报
道 ,月腺大戟根部提取物的化学成分主要为鞣质类 、
黄酮类 、苯乙酮类 、萜类以及甾醇类化合物 [ 6-9] ,对各
种杆菌 、球菌和真菌都有很强的体外抑制作用 [ 10] 。
但月腺大戟作为植物源农药的研究报道较少 ,目前
仅有月腺大戟根部丙酮提取物抑菌作用的报道 [ 11] 。
本研究主要对月腺大戟根部水相和乙醇提取物对几
种植物病原菌的抑制作用进行研究 ,为月腺大戟开
发制备生物农药提供理论和技术上的支持。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试样品[ 12]
月腺大戟根部提取物 ,水相提取物 0.0951 g/
mL,无水乙醇提取物 0.051 g/mL(即 1 mL提取液
相当于 1 g植物干样品)。
1.1.2　供试菌种
小麦赤霉病菌 Gibberelazeae,辣椒疫霉病菌
Phytophthoracapsici,葡萄黑曲霉病菌 Aspergilusni-
ger,苹果炭疽病菌 Coletorichumgloeosporioides,玉米
大斑病菌 Exserohilumturcicum, 以上菌种由河南省
农科院植保所提供 。
1.2　方法
1.2.1　培养基的制备
采用马铃薯培养基 [ 13] ,其组成为马铃薯 200 g,
蔗糖 20g,琼脂 15 g, pH值自然 。马铃薯去皮 ,切成
块煮沸 30 min,然后用纱布过滤再加琼脂 、蔗糖 ,溶
DOI :10.16333/j.1001-6880.2009.02.034
化后补水至 1000mL, 121 ℃高压灭菌 20 min。
1.2.2　含药培养基的制备
取月腺大戟根部提取物 3 mL,分别加入培养基
27 mL制成 1/10稀释度;取 1/10稀释度培养基 3
mL加入纯培养基 27 mL制成 1/100稀释度;取 1/
100稀释度培养基 15 mL加入纯培养基 15 mL制成
1 /200稀释度;如此稀释 ,分别制成 1/400、1 /800、1/
1600和 1/3200等 7个稀释浓度 。每个处理的对照
为供试液的相应溶媒 。
1.2.3　菌饼的制备和接种
用接种环分别挑取上述菌种的孢子放入盛有无
菌水及玻璃珠的三角烧瓶中 ,振荡 5 min,使孢子充
分散开 ,制成孢子悬液然后将孢子悬液涂布于纯培
养基上 ,培养至菌丝长满培养皿 ,用打孔器(Υ=4.0
mm)打制成菌饼 ,然后用接种环将菌饼移至含药培
养基上(菌丝面朝下), 28 ℃培养 72h。
1.2.4　抗菌活性的测定
培养 72 h后 ,在菌丝生长速率法中[ 14] ,用十字
交叉法测定每个菌落的直径 ,以其平均值代表菌落
的直径 ,每个处理进行 3个重复试验 ,用下列公式计
算相对抑制率。
菌落直径(mm)=测量菌落直径平均值 -4.0
相对抑制率(%)=(对照菌落生长直径 -处理菌落
生长直径)/对照菌落生长直径 ×100%
2　结果与分析
2.1　对小麦赤霉病菌菌丝的抑制作用
从表 1可以看出 ,月腺大戟根部两种提取物对
表 1　提取物对小麦赤霉病菌菌丝生长的抑制效果
Table1　AntifungalactivityofextractsagainstGibberellazeae
浓度
Concentration
相对抑制率 Inhibitionrate(%)
水相 Waterextract 乙醇相 Ethanolextract
1/10 61.10 69.10
1/100 53.20 67.201)
1/200 43.10 63.002)
1/400 18.10 42.602)
1/800 18.00 34.901)
1/1600 0.023 27.702)
1/3200 0.025 0.044
　　注:乙醇相与水相比较 , 1)P<0.05, 2)P<0.01(下同)。
Note:Thedatahasbeenstatisticalanalyzedinthispaperbetween
ethanolextractandwaterextract.1)wassignificant(P<0.05);2)wasex-
tremelysignificant(P<0.01).Theymeanthesamebelow.
小麦赤霉病菌菌丝生长均有抑制作用 ,乙醇相提取
物的活性较强 ,在 1/200稀释度下抑制率为 63%。
2.2　对玉米大斑病菌菌丝生长的抑制作用
从表 2看出 ,两种供试样品对玉米大斑病菌菌
丝生长的抑制作用有较强活性 ,在 1/200稀释度下
抑制率分别为:水相 54.4%,乙醇相 63.49%。
表 2　提取物对玉米大斑病菌菌丝生长的抑制效果
Table2　 AntifungalactivityofextractsagainstExserohilum
turcicum
浓度
Concentration
相对抑制率 Inhibitionrate(%)
水相 Waterextract乙醇相 Ethanolextract
1 /10 72.90 77.00
1 /100 67.80 66.10
1 /200 54.40 63.491)
1 /400 49.80 51.80
1 /800 29.60 45.402)
1 /1600 26.40 27.76
1 /3200 18.32 13.071)
2.3　对苹果炭疽病菌菌丝生长的抑制作用
表 3　提取物对苹果碳疽病菌菌丝生长的抑制效果
Table3　AntifungalactivityofextractsagainstColetorichum
gloeosporioides
浓度
Concentration
相对抑制率 Inhibitionrate(%)
水相 Waterextract乙醇相 Ethanolextract
1 /10 66.70 63.70
1 /100 55.10 61.30
1 /200 46.30 55.501)
1 /400 35.90 52.402)
1 /800 28.50 46.502)
1 /1600 20.42 23.30
1 /3200 10.89 19.301)
　　从表 3可以看出 ,两种提取物对苹果炭疽病菌
菌丝生长也有较好的抑制作用 ,在 1/200稀释度下
抑制率分别为:水相 46.3%,乙醇相 55.5%。
2.4　对葡萄黑曲霉病菌菌丝和辣椒疫霉病菌菌丝
生长的抑制作用
从表 4和表 5可以看出 , 2种月腺大戟根部提
取物对葡萄黑曲霉病菌和辣椒疫霉病菌菌丝生长的
抑制作用较弱 ,在 1/10稀释度抑制率都在 50%以
下。
304 天然产物研究与开发　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　Vol.21
表 4　提取物对葡萄黑曲霉病菌菌丝生长的抑制效果
Table4　AntifungalactivityofextractsagainstAspergilusniger
浓度 Concentration 相对抑制率 Inhibitionrate(%)水相 Waterextract乙醇相 Ethanolextract
1/10 29.60 34.301)
1/100 18.80 23.301)
　　注:表中未列出抑制率在 20%以下的试验结果。 Note:Inhibi-
tionratebelow20% wasnotlisted.
表 5　提取物对辣椒疫霉病菌菌丝生长的抑制效果
Table5　AntifungalactivityofextractsagainstPhytophthora
capsici
浓度
Concentration
相对抑制率 Inhibitionrate(%)
水相 Waterextract 乙醇相 Ethanolextract
1/10 38.30 40.30
1/100 18.10 25.001)
　　注:表中未列出抑制率在 20%以下的试验结果。 Note:Inhibi-
tionratebelow20% wasnotlisted.
3　讨论
月腺大戟根部水相和乙醇相 2种提取物对小麦
赤霉病菌 、玉米大斑病菌和苹果炭疽病菌菌丝的生
长有较强抑制作用。两种提取物在 1 /200稀释度下
对上述 3种菌的菌丝抑制率分别为:水相 43.10%,
54.4%, 46.3%;乙醇相 63%, 63.49%, 55.5%。 2
种提取物的抑制效果相比 ,乙醇相的提取物比较好 ,
说明乙醇相提取物中含有较多的有效成分 [ 7-9] 。 2
种提取物对葡萄黑曲霉病菌 、辣椒疫霉病菌菌丝的
生长抑制作用相对较弱 ,在 40.3%以下 。
对杀菌剂而言有许多成份如乙膦铝 、三环唑 、噻
瘟唑等在离体条件下没有活性 ,在活体植物上则表
现出极强的抑菌活性 [ 10] ,而本实验仅初步进行了离
体试验 ,其作用方式和作用机制及在活体植物上的
抑菌活性 ,均有待进一步研究和探讨 。
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