全 文 ：藏药大籽蒿提取物体外抗菌活性研究
徐福春 土旦卓玛 桑 吉 措 姆 罗桑西热 边巴次仁 达 珍 杜宝中
（西藏大学医学院 西藏拉萨 850000）
摘要：目的：研究藏药大籽蒿全草和花蕾提取物的体外抗菌活性。方法：以试管稀释法测定提取物对
大肠埃希菌（ATCC25922）、金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和铜绿假单胞菌（ATCC27853）标准菌株的最
小抑菌浓度（MIC），同时测定最小杀菌浓度(MBC)。结果：藏药大籽蒿水、乙醇提取物在体外对大肠埃希
菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抗菌作用，并有一定的杀菌作用；乙醇的热提取物对铜绿假单胞菌也具
有明显的抑菌和杀菌活性。结论：藏药大籽蒿对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌标准菌株具
有一定抗菌作用，其抗菌活性部位为水提取物和乙醇提取物；同一溶剂的大籽蒿全草与花蕾提取物具有
相同的抗菌活性。
关键词：藏药；大籽蒿；抗菌活性
中图分类号：R29 文献标识码：A 文章编号：1005-5738（2013）01-046-04
收稿日期：2013-04-08
第一作者简介：徐福春，男，汉族，甘肃兰州人，西藏大学医学院讲师，主要研究方向为藏药物质基础及质量标准研究。
通讯作者简介：杜宝中，男，汉族，河南郑州人，西藏大学医学院副教授，主要研究方向为病原微生物耐药机制研究。
西藏大学学报(自然科学版）
JOURNAL OF TIBET UNIVERSITY
Vol.28 No.1
May 2013
第 28卷第 1期
2013 年 5月
大籽蒿（Artemisia sieversiana Willd.）为菊科蒿属植物，藏语称其为“坎巴”、“坎甲”等。其全草或地上
部分晒干后供药用，是藏医传统习用药物，并收载于藏药部颁标准。大籽蒿具有消肿（外洗）、止血、清热消
暑的功效；治暑热胸闷、痢疾、刀伤等；外用水煎洗治疥疮、风湿等[1]；高原地区还用于治疗太阳紫外线辐
射引起的灼伤[2]。中医则以其花蕾入药，具有消炎止痛的作用；水煎服可治疗痈肿疔毒，外用水煎洗患处
可治疗黄水疮、皮肤湿疹、宫颈糜烂。
目前，有关大籽蒿全草和花蕾的抗菌活性研究报道较少，本文通过研究其全草和花蕾提取物对大肠
埃希菌（ATCC25922），金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和铜绿假单胞菌（ATCC27853）标准菌株的抗菌作用，为
大籽蒿全草和花蕾的临床应用和开发提供理论依据。
1材料
1.1实验药材
大籽蒿全草及花蕾，于2012年8月采自西藏大学校园，由西藏大学医学院药学系卓玛东智老师鉴定
为藏药大籽蒿，全草与花蕾阴干，备用。
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1.2 供试菌株
大肠埃希菌（ATCC25922），金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和铜绿假单胞菌（ATCC27853），由西藏大学医
学院基础部微生物学教研室保存提供。
1.3 培养基
M-H肉汤培养基、M-H琼脂培养基及营养琼脂（均为OXOID公司出品）。
1.4 仪器与设备
恒温培养箱、恒温干燥箱、超净工作台、高压蒸汽灭菌器、OXOID菌量浊度计、微量移液器(Gilson)、蜗
旋振荡器。
2方法
2.1 大籽蒿提取物制备方法
2.1.1 冷浸提液的制备
称取大籽蒿全草和花蕾粉末各10g，分别加入100mL蒸馏水、无水乙醇、氯仿和石油醚，室温下浸泡
24h，抽滤，取滤液真空减压浓缩，室温下挥干剩余溶剂，称重，计算提取率。水提取物中加入10mL灭菌蒸
馏水溶解，配制成1g/mL的母液（以生药量计算，以下同），乙醇、氯仿和石油醚浸提物分别以10mL灭菌
10%吐温-80溶解，配制成1g/mL的母液,将其置于4℃冰箱冷藏备用。
2.1.2 热提取物的制备
称取大籽蒿全草和花蕾粉末各10g，分别加入100mL蒸馏水、无水乙醇、氯仿和石油醚，然后置于适当
温度水浴锅中分别回流提取3次，每次2h，抽滤，滤液真空减压浓缩，室温下挥干剩余溶剂，称重，计算提
取率。配制母液方法同2.1.1。
2.1.3 供试药液的稀释
取各提取物母液以无菌 M-H 肉汤 2 倍稀释 7 个稀释度备用。稀释后的供试药液浓度分别为：
1000mg/mL、500mg/mL、250mg/mL、125mg/mL、62.5mg/mL、31 g/mL、15.5mg/mL。
2.2 大籽蒿抗菌实验[3-5]
2.2.1 供试菌液的准备
取斜面保存之大肠埃希菌（ATCC25922）、金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和铜绿假单胞菌（ATCC27853）
划线接种于普通琼脂平板，37℃培养18h～24h。挑取4～8个单菌落或适量菌苔混悬于4ml无菌生理盐
水中，蜗旋振荡器上震荡15s，以0.5麦氏比浊标准液为参照，浊度计比浊，调整其浊度为0.5麦氏比浊
单位后，以无菌M-H肉汤10倍稀释备用，制备好的菌液在15分钟内接种完毕。
2.2.2 供试菌株最小抑菌浓度（MIC）测定
取各稀释度供试药液2mL加入灭菌试管中，各管加入供试菌液100μL，并设各稀释度药物阳性对照
(供试药液2mL加入无菌M-H肉汤2ml)、阴性对照(无菌M-H肉汤培养基2mL加入供试菌液100μL)以及
空白对照(2mL无菌M-H 肉汤培养基)。接种完毕之实验试管震荡混匀15秒，置37℃培养18h～24h，观察
接种菌生长情况，以无菌生长供试药液最小稀释度为供试菌的最小抑菌浓度（MIC）。
2.2.3 供试菌株最小杀菌浓度（MBC）测定
取2.2.2中37℃培养18h～24h后无菌生长各试管培养液划线接种于M-H琼脂平板，接种后平板室
温放置，待平板表面液体干燥后于37℃培养18h～24h，观察细菌生长情况，以无菌生长的供试药液最小
稀释度为最小杀菌浓度（MBC）。
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3结果
大籽蒿全草和花蕾不同溶剂提取物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌标准菌株的抗菌
作用见表1、表2和表3。
表1结果表明，大籽蒿全草和花蕾的水热提物和浸提物对金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用，全
草的水热提物和浸提物对大肠埃希菌也有明显的抑制作用。其中全草的水热提物对大肠埃希菌、金黄色
葡萄球菌的MIC均为125mg/mL。但是将具有抑菌作用试管中的培养液转接到M-H琼脂平板上，依然有菌
生长，表明水提物的以上抗菌作用主要表现为抑制细菌生长。
表2结果表明，大籽蒿的4种乙醇提取物对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌有很强的抑菌作用；全草
和花蕾乙醇热提取物对铜绿假单胞菌也有较强的抑制作用，其中大籽蒿花蕾乙醇热提物对3种供试菌抑
菌作用显著，MIC分别为：125mg/mL、62.5mg/mL和250mg/mL。
表3结果表明，乙醇4种提取物对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌都具有杀菌作用；全草和花蕾乙醇
热提取物对铜绿假单胞菌也有较强的杀菌作用，二者杀菌作用相当。
此外，通过试验表明，大籽蒿全草和花蕾的氯仿提取物、石油醚提取物对以上3种供试菌均无抗菌活性。
4讨论
大籽蒿是藏医常用药物，其药用部位为地上部分或全草；而中医则以大籽蒿花蕾入药，两者的功效相
似，临床都具 抗菌作用。但目前并未有相关研究证明二者具有相同的抗菌活性。本研究结果表明，大籽蒿
全草和花蕾乙醇提取物和水提取物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌标准菌株均有抑制作
用。而乙醇提取物抑菌活性更强，是大籽蒿的抑菌活性部位，可以作为有效抑菌部位应用。大籽蒿全草和
花蕾具有相似的抗菌活性，且抗菌活性部位相同，均为水提取物和醇提取物。
注：“－”为供试药液为最低稀释度时仍有菌生长。
菌种 全草热提物 全草浸提物 花蕾热提物 花蕾浸提物
大肠埃希菌 250 125 125 250
金黄色葡萄球菌 125 125 62.5 250
和铜绿假单胞菌 500 － 250 －
表2 大籽蒿乙醇提取物对标准菌种抑菌作用的最小浓度（MIC） 单位：mg/mL
注：“－”为供试药液为最低稀释度时仍有菌生长。
菌种 全草热提物 全草浸提物 花蕾热提物 花蕾浸提物
大肠埃希菌 125 250 － 1000
金黄色葡萄球菌 125 250 500 500
铜绿假单胞菌 － － － －
表1 大籽蒿水提取物对标准菌种抑菌作用的最小浓度（MIC） 单位：mg/mL
注：“－”为供试药液为最低稀释度时仍有菌生长。
菌种 全草热提物 全草浸提物 花蕾热提物 花蕾浸提物
大肠埃希菌 500 1000 500 1000
金黄色葡萄球菌 125 500 125 250
铜绿假单胞菌 500 － 250 －
表3 大籽蒿乙醇提取物对标准菌种杀菌作用的最小浓度（MIC） 单位：mg/mL
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大籽蒿中主要含有黄酮类、木脂素类、倍半萜类以及挥发油类等多种化学成分。有国外学者研究发现
倍半萜类化合物具有显著的体外抗菌活性，这可能是大籽蒿具有抗菌活性的物质基础。
大籽蒿全草和花蕾的水和乙醇提取物具有显著体外抗菌活性，具有开发为抑菌藏药的潜力。
参考文献
[1]中国科学院西北高原生物研究所.藏药志[M].西宁:青海人民出版社,1991:33-34．
[2]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志（第 76 卷，第二分册）[M].北京:科学出版社,1991:8-11．
[3]杜宝中,仁增,次旺卓玛.藏药螃蟹甲提取物体外抗菌作用研究[J].西藏大学学报(自然科学版）,2010,25（1）:27-30．
[4]徐福春,罗布占堆,杨东娟.肾茶水浸液抑菌作用研究[J].西藏大学学报(自然科学版）,2010,25（2）:82-86．
[5]李影林.临床微生物学与检验（第一版）[M].北京:人民卫生出版社,1995:77．
徐福春，土旦卓玛，桑吉，等：藏药大籽蒿提取物体外抗菌活性研究
Studies on Antibacterial Activity in vitro of Extracts from
Artemisia sieversiana Willd
Xu Fu-chun Tudan-Zhuoma Sang-Ji Cuo-Mu Luosang-Xire
Bianba-Ciren Dazhen Du Bao-zhong
(Medical College of Tibet University, Lhasa Tibet 850000, China)
Abstract: The antibacterial activity in vitro of extracts from whole plant and flower bud of Artemisia siever－
siana was studied by the tube dilution determining the minimum inhibitory concentration (MIC) for standard
strains of extracts on Escherichia coli (ATCC25922), Staphylococcus aureus (ATCC25923) and pseudomonas
aeruginosa (ATCC27853), and the minimal bactericidal concentration (MBC). The results showed that the ex－
tracts with water and ethanol have significant antibacterial effect in vitro against ATCC25922 and
ATCC25923; extracts with hot ethanol has obviously antibacterial and bactericidal activity against
ATCC27853. In conclusion, Artemisia sieversiana has antibacterial effect on Escherichia coli, Staphylococcus
aureus and Pseudomonas aeruginosa, and its active sites of antimicrobial were water extracts and ethanol ex－
tracts; the same solvent of whole plant and bud extracts had the same active of antibacterial.
Keywords: Tibetan Medicine; Artemisia sieversiana Willd.; Active of Antibacterial
[责任编辑：郭小芳]
Research on Preferring the Extraction process of Tibetan
medicine Trazisaiman based on the Orthogonal Experiment
Method
Liu Feng-ling① Hang Lu-yu② Liu-Zhong③ Wang Ju-le④
（①Heze Professional college，Heze Shandong 274300, China; ②Shanxian Maternal and Child Health Hospital, Heze Shandong 274300, China;
③④School of Medicin, Tibet University, Lhasa Tibet 850000, China）
Abstract: The Extraction process of Tibetan medicine Trazisaiman was determined based on the orthogonal
experiment method with three factors and three levels. The results showed that the order of the factors affect－
ing the extraction is boiling time, plus in multiples of water and soaking time, and among those the boiling
time significantly impact on extraction efficiency and the best extraction process is A3 B3 C1. In conclusion,
the condition of extraction is reasonable, stable and feasible.
Keywords: orthogonal experiment; Trazisaiman; extraction process
[责任编辑：索郎桑姆]
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