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水分胁迫对圆叶决明生理生化特性的影响



全 文 :任丽花,王义祥,罗旭辉,等.水分胁迫对圆叶决明生理生化特性的影响 [J].福建农业学报,2013,28 (11):1093-1098.
REN L-H,WANG Y-X,LUO X-H,et al.Effect on Physiological and Biochemical Charateristics in Chamaecrista Rotundifolia Under Water
Stress[J].Fujian Journal of Agricultural Sciences,2013,28 (11):1093-1098.
水分胁迫对圆叶决明生理生化特性的影响
任丽花1,2,王义祥3,罗旭辉3,翁伯琦3
(1.福建省农业科学院中心实验室,福建 福州 350003;2.福建省精密仪器农业测试重点实验室,
福建 福州 350003;3.福建省农业科学院农业生态研究所/农业部福州农业环境
科学观测实验站,福建 福州 350003)
收稿日期:2013-09-27初稿;2013-10-29修改稿
作者简介:任丽花 (1977-),女,助理研究员,研究方向:植物营养与环境生态
通讯作者:翁伯琦 (1957-),男,研究员,研究方向:土壤肥料与生态农业技术 (E-mail:wengboqi@163.com)
基金项目:“十二五”国家科技支撑计划 (2012BAD14B15);福建省科技计划重大专项 (2012NZ0002);福建省科技计划项目———省属
公益类科研院所基本科研专项 (2011R1027-2)
摘 要:运用聚乙二醇 (PEG-6000)模拟水分胁迫,研究水分胁迫下CPI86134幼苗叶片若干生理生化指标的变
化情况。结果表明:随着胁迫程度的加重,圆叶决明叶片相对含水量减小,叶片叶绿素含量增加,渗透调节物
质增加,作为细胞保护酶的SOD、POD活性均升高,同时,细胞膜受到伤害,膜透性增加,作为膜脂过氧化产
物的丙二醛含量也随之增加;随着胁迫时间的延长,POD活性先升高后降低,说明干旱胁迫下细胞保护酶活性
升高,但当胁迫超出了植物可以忍耐的程度后,酶活性降低。
关键词:水分胁迫;圆叶决明;生理生化特性;聚乙二醇
中图分类号:Q 945.1 文献标识码:A
Effect on Physiological and Biochemical Charateristics in Chamaecrista Rotundifolia Under Water Stress
REN Li-hua1,2,WANG Yi-xiang3,LUO Xu-hui 3,WENG Bo-qi 3
(1.Central Laboratory,Fujian Academy of Agricultural Science,Fuzhou,Fujian 350003,China;
2.Fujian Key Laboratory of Test in Agricultural Field by Precision Type instrument,Fuzhou,
Fujian 350003,China;3.Agricultural Ecology Institute,Fujian Academy of Agricultural
Science/Fuzhou Scientific Observing and Experimental Station of Agro-Enviroment
Ministry of Agriculture,Fuzhou,Fujian 350003,China)
Abstract:The effects of water stress on several physiobiochemical indexes of Chamaecrista rotundifolia under PEG-
6000treatment were studied in a series laboratory tests.The results showed that the RWC was decreased,the
content of Chl and osmotic adjustment matter were raised,the activity of SOD and POD were increased,meanwhile,
the cel membrane systems of mulberry were damaged and osmotic capability was boosted,relative electric
conductivity and MDA content were increased along with the increasing of water stress.Furthermore,along with
the time prolonged of water stress,the activity of POD was increased at first and then decreased,demonstrated that
the activity of cel protective enzymes was increased under drought stress,but then decreased with the heavier stress
to exceed the endurance for Chamaecrista rotundifolia.
Key words:Water stress;Chamaecrista rotundifolia;Physiological and biochemical charaters;PEG
  干旱是农牧业生产中植物最常遭受的胁迫形式
之一,水分不足不仅限制植物的分布,也会影响到
作物的产量。干旱对植物的影响可以表现在植物生
长发育的各个阶段,同时影响各种生理代谢过
程[1-3]。牧草在其生长进化过程中,由于生长环境
相对恶劣,在生理、生化和分子水平上产生了适应
性变化,形成了较强的抗性,从而增加逆境存活机
会。红壤地区虽然属于中亚热带、南亚热带和热
带,高温多雨,但由于时空分配不均,干、湿季节
十分明显,常会有周期性、季节性或临时性的干旱
福建农业学报28(11):1093~1098,2013
Fujian Journal of Agricultural Sciences
文章编号:1008-0384 (2013)11-1093-06
发生,成为该区域发展农业与草业生产的主要障碍
因素之一。圆叶决明是近年来新引进且在南方红壤
山地推广种植的豆科决明属牧草,是一种优质的丘
陵山地红壤改良绿肥和牧草品种。目前,有关学者
对圆叶决明品种选育、适应性评价的研究[4-10]较
多,对其抗逆性、植物营养的研究则相对较少。本
研究采用PEG模拟干旱胁迫探讨圆叶决明受旱后
体内若干生理代谢的响应,以期为红壤地区草业建
设中圆叶决明水分管理及其生产应用提供科学
依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料与试验设计
供试材料为福建省农业科学院农业生态研究所
提供的圆叶决明品系CPI86134。将培养在砂基盘
中的圆叶决明幼苗,在室外培养至苗长至25~30
cm时,取若干,将根系洗净,用营养液培养于光
照培养箱内 (培养条件为:温度 (25±1)℃,光周
期12h,光照度3 000lx左右),营养液配方见表
1。待幼苗恢复正常生长后,分别用0、7.5%、
15.0%、22.5%、30%的PEG-6000模拟干旱胁迫
处理,分别于胁迫处理24、48、72、96、120h取
植株中上部叶片进行相关生理指标的测定,每个指
标设3个重复。
表1 F.W.Smith营养液配方
Table 1 The nutrient formula of F.W.Smith
成分
浓度/
(mg·kg-1)
成分
浓度/
(mmol·L-1)
Cu  0.01 MgSO4 1
Fe(FeNaEDTA) 1 KNO3 6
B  0.25 Ca(NO3)2 1
Mo  0.005 NaCl  0.5
Zn  0.025 NaH2PO4 0.1
Mn  0.125
1.2 测定项目及其测定方法
叶片相对含水量采用称重法[11]测定;光和色
素含量用混合液法[12]测定;游离脯氨酸、可溶性
糖可溶性、蛋白质含量采用比色法[13]测定;膜相
对透性采用相对电导率[14]来衡量;CAT活性参照
西北农业大学植物生理生化教研组的碘量法[15]进
行;SOD活性参照朱广廉等的方法[16]略作修改;
POD活性参照华东师范大学生理教研组的方法[17]
略作修改;MDA 含量的测定参照朱广廉等的方
法[16]略加修改;O·2 含量测定参照王爱国的方
法[18]测定。试验结果采用excel 及DPS软件进行
分析。
2 结果与分析
2.1 水分胁迫对 CPI86134叶片相对含水量的
影响
相对含水量反映了植物体内的水分状况及其生
理生化代谢的活跃程度。由图1可以看出,随着
胁迫程度的加深和胁迫时间的延长,CPI86134叶
片相对含水量下降。方差分析结果表明,相同取样
时间,7.5%PEG胁迫处理的圆叶决明叶片相对含
水量与对照间的差异不显著,而其他PEG胁迫处
理与对照间的差异达到了显著或极显著的水平。
图1 水分胁迫对CPI86134叶片相对含水量的影响
Fig.1 Effect of water stress with PEG-600 on relative water
content in the leaves of CPI86134
2.2 干旱胁迫对圆叶决明叶片光合色素含量的
影响
从表2可知,随着PEG浓度的增加及胁迫时
间的延长,CPI86134叶片内Chla、Chlb以及Chl
(a+b)含量逐渐降低。Chla/Chlb值则在整个胁
迫期间与对照相比无显著差异,变化规律不明显。
方差 分 析 结 果 表 明,相 同 取 样 时 间 15.0%、
22.5%和30%PEG-6000胁迫处理下,CPI86134叶
片叶绿素总量与对照相比,差异显著 (P<0.05)。
2.3 PEG水分胁迫对CPI86134叶片渗透调节物
质的影响
2.3.1 对脯氨酸含量的影响 由图2可以看出,
正常供水情况下圆叶决明幼苗叶片中的Pro含量没
有明显的变化,稳定在一个较低的水平。在水分胁
迫条件下,叶片中的脯氨酸随着水分胁迫强度加大
含量增加,均高于对照水平。在轻度胁迫下,
86134叶片中脯氨酸含量缓慢增加,随着胁迫时间
的延长,胁迫96h之后脯氨酸的积累量迅速增加。
4901 福建农业学报 第28卷
游离脯氨酸含量在胁迫后期迅速积累,这是圆叶决
明对干旱胁迫的一种适应策略。方差分析结果表
明,相同取样时间圆叶决明各胁迫处理与对照间存
在显著性差异 (P<0.05),其含量比对照高约5~
6倍。
2.3.2 对可溶性糖含量的影响 可溶性糖是一种
干旱忍耐的适应物质,干旱胁迫下大量积累以维持
细胞膨压。从图3可以看出,随着干旱程度的加重
和胁迫时间的延长,CPI86134叶片中的可溶性糖
含量均有不同程度的增加,15%、22.5%和30%
PEG胁迫处理与对照相比叶片可溶性糖含量存在
明显差异 (P<0.05),说明CPI86134可通过主动
积累可溶性糖参与降低其体内渗透势,以利于其在
干旱生境下维持植物体正常生长所需水分。
表2 PEG水分对86134叶片光合色素含量的影响
Table 2 Effect of water stress with PEG-6000 on content of Chl in the leaves of CPI86134
取样时间
/h
PEG浓度
/%
光合色素含量/(mg·g-1 DW)
Chla  Chlb  Chl(a+b)
Chla/Chlb
24  0  5.544±0.239  1.857±0.079  7.396±0.317  2.985±0.006
7.50  4.041±0.368  1.276±0.125  5.314±0.493  3.172±0.03
15.0  3.461±0.291  1.164±0.103  4.621±0.394  2.977±0.014
22.5  3.409±0.099  1.135±0.033  4.541±0.131  3.004±0.025
30.0  2.712±0.368  0.85±0.117  3.56±0.485  3.193±0.021
48  0  5.275±0.244  2.511±0.074  7.782±0.081  2.419±0.544
7.50  3.785±0.377  1.297±0.107  5.078±0.482  2.91±0.054
15.0  3.08±0.249  1.011±0.064  4.088±0.312  3.039±0.078
22.5  2.768±0.103  0.855±0.032  3.621±0.134  3.238±0.005
30.0  2.241±0.455  0.716±0.145  2.955±0.6  3.133±0.021
72  0  4.023±0.315  1.334±0.107  5.353±0.42  3.017±0.033
7.50  3.529±0.146  1.131±0.051  4.657±0.197  3.122±0.013
15.0  2.786±0.428  0.863±0.124  3.646±0.548  3.358±0.153
22.5  2.749±0.323  0.917±0.101  3.663±0.423  2.994±0.046
30.0  2.044±0.228  0.686±0.025  2.728±0.221  3.282±0.378
96  0  3.748±0.358  1.208±0.104  4.953±0.457  3.101±0.097
7.50  3.422±0.497  1.112±0.169  4.531±0.666  3.083±0.022
15.0  2.589±0.135  1.198±0.009  3.785±0.14  2.322±0.103
22.5  2.376±0.672  0.805±0.231  3.179±0.902  2.959±0.043
30.0  1.912±0.081  0.614±0.05  2.524±0.13  3.263±0.15
120  0  3.253±0.047  1.079±0.014  4.329±0.059  3.014±0.017
7.50  2.664±0.066  0.897±0.026  3.559±0.088  2.972±0.055
15.0  2.55±0.143  0.84±0.037  3.388±0.18  3.033±0.038
22.5  2.337±0.418  0.809±0.169  3.143±0.585  2.931±0.11
30.0  1.843±0.278  0.738±0.094  2.579±0.372  2.484±0.055
2.3.3 对可溶性蛋白质的影响 PEG模拟试验的
结果 (图4)显示,随胁迫程度的加重,CPI86134
叶片可溶性蛋白质的含量增加,且均显著高于对照
水平 (P <0.05)。随 着 胁 迫 时 间 的 延 长,
CPI86134叶片中可溶蛋白质的含量有增加,但增
加的幅度不大。
2.4 PEG干旱胁迫对圆叶决明叶片 O·2 产生速
率、MDA含量与PMP的影响
2.4.1 对O·2 产生速率的影响 图5显示,随着
干旱程度的加重CPI86134叶片O·2 产生速率逐渐
增加,同时随着胁迫时间的延长O·2 产生速率虽有
增加,但增加幅度不大,在不同水分胁迫处理中,
O·2 产生速率随着水分胁迫程度的增大而增加,在
5901第11期 任丽花等:水分胁迫对圆叶决明生理生化特性的影响
图2 水分胁迫对CPI86134叶片游离脯氨酸含量的影响
Fig.2 Effect of water stress with PEG-6000 on the content
of proline in the leaves of CPI86134
图3 水分胁迫对CPI86134叶片可溶性糖含量的影响
Fig.3 Effect of water stress with PEG-6000 on the content
of soluble sugar in the leaves of CPI86134
图4 水分胁迫对CPI86134叶片可溶性蛋白质含量的影响
Fig.4 Effect of water stress with PEG-6000 on the content
of soluble protein in the leaves of CPI86134
4种水分处理下,方差分析表明,相同取样时间
CPI 86134不同干旱胁迫处理间O·2 产生速率差异
显著 (P<0.05)。而30.0%PEG胁迫时CPI86134
O·2 产生速率明显高于其他处理,说明严重干旱持
续较长时间后使CPI 86134受到较重的伤害。
图5 水分胁迫对CPI86134叶片产生O·2 速率的影响
Fig.5   Effects of water stress with PEG-6000 on
O·2production rate of leaves of CPI84134
2.4.2 对 MDA含量的影响 MDA是脂质过氧化
的主要产物之一,其积累的多少及其变化幅度表明
了植物质膜系统的稳定性及受到的伤害程度。图6
显示,圆叶决明叶片 MDA含量随着干旱胁迫程度
的增大而增加,但7.5%PEG胁迫处理与对照间的
差异不显著。随着胁迫时间的延长,CPI86134叶
片中 MDA含量增加呈现先增后减的趋势,反映了
CPI86134在经受干旱胁迫时膜系统受到伤害,
MDA含量增加,之后植物启动自身的防御系统,
增强了抵抗力,MDA含量下降。
图6 水分胁迫对CPI86134叶片 MDA含量的影响
Fig.6 Effects of water stress with PEG-6000 on MDA
content of leaves of CPI86134
2.4.3 对细胞脂膜透性的影响 细胞膜系统是植
物与外界接触的最初和关键部位,其相对透性的大
小表明植物受到伤害的程度。从图7可知,随着胁
迫时间的延长,CPI86134细胞膜透性增大,但增
加幅度较小;随着胁迫程度的加重,细胞膜透性增
大,说明它在反映植物抗逆性差异上是比较敏感
的。方差分析表明,除7.5%PEG胁迫处理外,在
相同取样时间内PEG胁迫处理的质膜透性与对照
6901 福建农业学报 第28卷
相比差异显著 (P<0.05),说明干旱胁迫对圆叶
决明细胞膜有不同程度的伤害,水分缺失越严重伤
害程度越大。
图7 水分胁迫对CPI86134叶片相对质膜透性的影响
Fig.7   Effects of water stress with PEG-6000 on
premeability of membrane plasma of leaves of
CPI86134
2.5 PEG干旱胁迫对圆叶决明叶片SOD、POD
活性的影响
SOD、POD是植物细胞中清除超氧自由基、
过氧化物等的主要酶类,从图8可以看出,随着
PEG浓度的升高和胁迫时间的延长,SOD酶活性
呈现升高的趋势;方差分析结果表明,对照处理
CPI86134叶片SOD酶活性与7.5%PEG胁迫处理
间差异不显著,但与15.0%、22.5%和30.10%
PEG处理间的差异均达到显著性水平。从图9可
以看出,POD活性随胁迫时间的延长呈现先升后
降的变化趋势,其中CPI86134在胁迫第72h时达
到最高值,之后下降。说明在一定程度的水分胁迫
下,由于一定量的氧自由基离子的积累,诱导了保
护酶SOD、POD产生一定的适应性变化,活性提
高;胁迫进一步加强,这时植株已失去对严重水分
胁迫的适应性调节,活性逐渐降低,植株将受到
伤害。
3 讨论与结论
3.1 叶绿素是绿色植物吸收光能及将光能转化为
化学能的活性物质,叶片组织在水分缺乏时叶绿素
的合成受到抑制,从而其总量下降,导致叶片的光
合速率和同化功能下降。本试验中,随着PEG胁
迫浓度的升高,圆叶决明叶片叶绿素含量升高,说
明干旱胁迫能够促进圆叶决明叶片对光能的捕获,
使受害叶片同化功能升高。
3.2 可溶性蛋白质有很强的持水力,能通过提高
图8 水分胁迫对CPI86134叶片SOD活性的影响
Fig.8 Effects of water stress with PEG-6000 on SOD
activity of leaves of CPI86134
图9 水分胁迫对CPI86134叶片POD活性的影响
Fig.9 Effects of water stress with PEG-6000 on POD
activity of leaves of CPI86134
细胞质的浓度来降低质膜的透性,从而保证了细胞
正常生理活动与功能的进行,为细胞抵御外界不良
环境提供了良好的生理基础,有研究认为水分胁迫
下可溶性蛋白含量下降[19];也有研究表明轻度水
分胁迫下可溶性蛋白含量增加[20],可知试验材料
不同,所得结论会有差别。本试验中,水分胁迫下
CPI86134叶片可溶性蛋白含量升高,表明圆叶决
明在抵御干旱时也能启动一些渗透调节物质进行自
我保护。
3.3 正常情况下,植物细胞中活性氧的产生和清
除处于动态平衡状态,逆境胁迫情况打破了这种平
衡,促进了活性氧的产生,膜系统受到伤害。但是
植物体内均有一套完整的活性氧清除系统,能将这
些活性氧转变为活性较低的物质,保护机体免收伤
害。在作物抗旱性机理研究中,保护酶 SOD、
POD的变化已广泛作为判断植物抵御逆境伤害的
指标。干旱胁迫下抗氧化酶活性高低在一定程度上
反映了植物抵抗干旱的能力强弱。有关干旱胁迫对
酶活性的研究较多,但试验结果不尽相同。本试验
7901第11期 任丽花等:水分胁迫对圆叶决明生理生化特性的影响
研究结果表明,随着PEG浓度的升高,细胞中活
性氧积累,使膜发生膜脂过氧化作用,MDA 积
累,PMP增加,导致膜功能受损,从而引起细胞
的衰老和死亡,对圆叶决明产生毒害作用。同时,
SOD、POD活性随水分胁迫程度的加深而升高,
随着胁迫时间的延长,SOD在胁迫后期活性不断
增强,而POD活性则在胁迫初期升高后期降低,
说明干旱胁迫初期活性氧的增加对POD酶活性升
高有诱导作用,随着胁迫时间的延长,活性氧代谢
的平衡被打破,POD活性下降。
3.4 牧草的抗旱性是一个较为复杂的综合性状,
不仅与干旱发生的时间、严重程度、持续时间和作
用方式等自然条件相联系,还与牧草的种类或品种
特性有关。已获得的结果往往只能局部解释植物抗
性某一方面的生理反应,不能解释抗性的另一些反
应,其中每个相关的因素对抗旱性作用都是微弱
的,在大量因素的综合作用下才促成了牧草的抗旱
性。目前很多更深的生理机理还不成熟,有待于进
一步的研究。
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(责任编辑:林海清)
8901 福建农业学报 第28卷