全 文 ：　 　２０１１，Ｖｏｌ．２８Ｎｏ．１０化学与生物工程
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
３２
基金项目：陕西省教育厅重点实验室基金资助项目（０８ＪＺ０８），宝鸡文理学院院级重点项目（ＺＫ０８４４）
收稿日期：２０１１－０８－０２
作者简介：王晓梅（１９６２－），女，陕西宝鸡人，博士，副教授，从事药学教学与科研工作，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉａｏｍｅｉ２６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１１．１０．００８
朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶的抑制作用
王晓梅，袁菊丽
（宝鸡文理学院化学化工系 陕西省植物化学重点实验室，陕西 宝鸡７２１０１３）
摘　要：分别提取朱砂七鞣质和朱砂七多糖，以对硝基苯－α－Ｄ－吡喃葡萄糖苷（ｐＮＰＧ）为底物，考察朱砂七提取物对
α－葡萄糖苷酶活性的影响。结果发现，两种提取物对α－葡萄糖苷酶均具有抑制作用，其中朱砂七鞣质的抑制作用较朱砂
七多糖更强；朱砂七鞣质和朱砂七多糖对α－葡萄糖苷酶活性的最大抑制率分别为９１．３％和４１．１８％，ＩＣ５０值分别为１．６
μｇ·ｍＬ
－１和１．３μｇ·ｍＬ
－１。朱砂七鞣质和朱砂七多糖对α－葡萄糖苷酶活性的抑制机理分别属于非竞争性抑制类型和
综合性抑制类型。
关键词：朱砂七；提取物；鞣质；多糖；α－葡萄糖苷酶；抑制
中图分类号：ＴＱ　４６０．１　　　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２－５４２５（２０１１）１０－００３２－０３
　　随着人们生活方式的改变，糖尿病的发病率日趋
升高。糖尿病主要是由于体内胰岛素相对或绝对不足
所引起的糖代谢紊乱所致。降低餐后血糖、减少并发
症的发生是糖尿病治疗的重要内容。中药治疗糖尿病
虽然降糖效果较西药弱，但疗效稳定、作用温和、不良
反应少，能有效防治并发症。近年来，从中草药及其提
取物中筛选α－葡萄糖苷酶抑制剂的研究引起了很多学
者的关注并取得了一定进展［１～３］。
朱砂七为蓼科植物毛脉蓼［Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ
（Ｎａｋａｉ）Ｏｈｗｉ］的干燥块根，主产于陕西秦岭，是“太
白七药”之一。朱砂七含有多种活性成分，具有清热解
毒、凉血利咽、止血止泻、祛风湿、强腰膝、抗肿瘤的功
效［４，５］。
作者在此分别提取朱砂七鞣质和朱砂七多糖，考
察其对α－葡萄糖苷酶的体外抑制作用，拟为探讨其降
糖机理及扩大朱砂七的治疗范围提供参考。
１　实验
１．１　材料、试剂与仪器
朱砂七购自太白山区，经陕西中医学院胡本祥教
授鉴定。
α－葡萄糖苷酶，美国Ｓｉｇｍａ公司；对硝基苯－α－Ｄ－吡
喃葡萄糖苷（ｐＮＰＧ，纯度９９％），美国 Ｍｅｒｃｋ公司；二
甲基亚砜（ＤＭＳＯ），莱阳化工实验厂；去离子水，自制；
其余试剂均为市售分析纯。
ＤＫ－９８－１型电热恒温水浴锅，天津市泰斯特仪器
有限公司；７５２Ｎ型紫外可见分光光度计，上海精密科
学仪器有限公司；ＫＱ５２００Ｅ型超声波清洗器，昆山市
超声仪器有限公司；ＢＳ－２４４－ＳＳ型电子天平，赛多利斯
科学仪器有限公司；Ｒ－１００２型旋转蒸发仪，郑州长城
科工贸有限公司。
１．２　方法
１．２．１　朱砂七提取物的制备
１．２．１．１　朱砂七鞣质的提取
称取粉碎的５０ｇ朱砂七，加入７５０ｍＬ　６０％乙醇，
于７０℃下超声提取２次，每次５０ｍｉｎ。合并２次提取
液，抽滤，弃去残渣，将滤液减压蒸馏，回收乙醇，馏分
即为鞣质粗液。加入等体积乙醚萃取，分出水液层，再
用等体积乙酸乙酯萃取，水液层经减压浓缩得朱砂七
鞣质，乙酸乙酯层经减压浓缩、回收乙酸乙酯而得朱砂
七鞣质。
１．２．１．２　朱砂七多糖的提取
称取６０ｇ朱砂七，加入６００ｍＬ蒸馏水，于９５℃
回流提取２ｈ，收集提取液，药渣如法再次提取。合并
２次提取液，减压浓缩，向浓缩液加入９５％乙醇至乙醇
浓度为８０％，静置过夜，抽滤，收集滤渣。用９５％乙
醇、石油醚、乙醚依次洗涤，在５０℃的干燥箱中烘干而
得朱砂七多糖。
王晓梅等：朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶的抑制作用／２０１１年第１０期 　３３　
１．２．２　朱砂七提取物的分析检测
朱砂七鞣质检测采用醋酸锌络合滴定法及磷钼钨
酸比色法。
朱砂七多糖检测采用硫酸－蒽酮法、α－萘酚法。
１．２．３　朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶活性的影响
参照文献［６，７］，测定朱砂七提取物对α－葡萄糖
苷酶的抑制活性。
酶活力单位定义为：３７℃、ｐＨ值６．８条件下，每
分钟水解ｐＮＰＧ释放１μｍｏｌ对硝基苯酚（ｐＮＰ）所需
的酶量，定义为一个酶活力单位（Ｕ）。
向１０ｍＬ试管中依次加入ｐＨ值６．８的磷酸盐缓
冲溶液１．８５ｍＬ、０．１Ｕ·ｍＬ－１的α－葡萄糖苷酶５０
μＬ、不同浓度（０ｍｇ·ｍＬ
－１、０．５ｍｇ·ｍＬ－１、１．０ｍｇ
·ｍＬ－１、１．５ｍｇ·ｍＬ－１、２．０ｍｇ·ｍＬ－１、２．５ｍｇ·
ｍＬ－１、３．０ｍｇ·ｍＬ－１、３．５ｍｇ·ｍＬ－１）的朱砂七提
取物溶液５０μＬ、０．０１１６ｍｏｌ·Ｌ
－１ｐＮＰＧ　５０μＬ，将上
述反应体系在３７℃保温３０ｍｉｎ后，加入０．１ｍｏｌ·
Ｌ－１　Ｎａ２ＣＯ３ 溶液８ｍＬ终止反应，然后在４００ｎｍ波
长处测吸光度（Ａ）。朱砂七提取物终浓度分别为０μｇ
·ｍＬ－１、２．５μｇ·ｍＬ
－１、５．０μｇ·ｍＬ
－１、７．５μｇ·
ｍＬ－１、１０．０μｇ·ｍＬ
－１、１２．５μｇ·ｍＬ
－１、１５．０μｇ·
ｍＬ－１和１７．５μｇ·ｍＬ
－１。每个浓度体系同时作３个
平行，取平均值。同时设不加酶的样品空白组、不加样
品的无样品组、不加样品和酶的无样空白组。
按下式计算朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶的抑制
率。通过Ｐｒｉｓｍ软件求出ＩＣ５０值。
抑制率＝
（Ａ无样品－Ａ无样空白）－（Ａ样品－Ａ样品空白）
Ａ无样品－Ａ无样空白 ×１００％
式中：Ａ样品 为加入朱砂七提取物后酶反应的吸光
度值；Ａ样品空白为体系中加入朱砂七提取物但未加酶的
吸光度值；Ａ无样品 为酶与底物反应后的吸收度值；
Ａ无样空白为体系中既无朱砂七提取物也无酶的吸光度值。
１．２．４　朱砂七提取物的抑制动力学研究
取不同浓度（０ｍｇ·ｍＬ－１、１ｍｇ·ｍＬ－１、２ｍｇ·
ｍＬ－１）的朱砂七鞣质和朱砂七多糖，再分别加入不同
浓度的底物（０．０５ｍｏｌ·Ｌ－１、０．１ｍｏｌ·Ｌ－１、０．１５ｍｏｌ
·Ｌ－１、０．２ｍｏｌ·Ｌ－１、０．２５ｍｏｌ·Ｌ－１），测定反应速
度，用Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｒｋ作图法确定抑制类型。
２　结果与讨论
２．１　朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶活性的抑制作用
（图１）
　　由图１可知，在一定浓度范围内，朱砂七鞣质和朱
砂七多糖对α－葡萄糖苷酶活性均有抑制作用，且抑制
图１　朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶活性的影响
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ
ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎα－ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
作用均随提取物浓度的增大而增大。朱砂七鞣质浓度
为１５．０μｇ·ｍＬ
－１时抑制率最大，为９１．３％；浓度继
续增大，抑制率无明显变化，ＩＣ５０值为１．６μｇ·ｍＬ
－１。
而朱砂七多糖的抑制作用明显较朱砂七鞣质弱，当浓
度为１５．０μｇ·ｍＬ
－１时抑制率最大，为４１．１８％；浓度
继续增大，抑制率无明显变化，ＩＣ５０值为１．３μｇ·
ｍＬ－１。
２．２　朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶抑制类型的测定
在含不同浓度朱砂七鞣质的测活体系中，改变底
物浓度（［Ｓ］），测定酶促反应的初速度，Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－
Ｂｕｒｋ双倒数作图，结果见图２。
图２　朱砂七鞣质对α－葡萄糖苷酶抑制机理的判断
Ｆｉｇ．２　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｏｎα－ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ
由图２可知，得到一组相交于ｘ轴的直线，直线斜
率随样品浓度的变化而改变，最大反应速度（ｖｍａｘ）随
样品浓度的变化而改变，而米氏常数（Ｋｍ）不变。这可
能是因为鞣质是多元酚类化合物，易与酶蛋白活性中
心以外的多个部位结合，进而引起酶蛋白发生构象改
变以至于活性降低，而对酶与ｐＮＰＧ的结合影响不
大。由此判断朱砂七鞣质对α－葡萄糖苷酶的抑制机理
当属非竞争性抑制类型。
在含不同浓度朱砂七多糖的测活体系中，改变底
物浓度，测定酶促反应的初速度，Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｒｋ双
　 王晓梅等：朱砂七提取物对α－葡萄糖苷酶的抑制作用／２０１１年第１０期３４　
倒数作图，结果见图３。
图３　朱砂七多糖对α－葡萄糖苷酶抑制机理的判断
Ｆｉｇ．３　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｏｎα－ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ
由图３可知，得到一组相交于左上象限的直线，直
线斜率随样品浓度的变化而改变，ｖｍａｘ随样品浓度的
变化而改变，Ｋｍ 值随样品浓度的增大而增大。这可
能是因为所提取的多糖为混合性成分，所含多糖种类
较混杂，多糖与酶的结合位点可能为活性中心及活性
中心以外的部位。由此判断朱砂七多糖对α－葡萄糖苷
酶的抑制机理当属综合性抑制类型。
３　结论
分别提取朱砂七鞣质和朱砂七多糖，以对硝基苯－
α－Ｄ－吡喃葡萄糖苷（ｐＮＰＧ）为底物，考察朱砂七提取物
对α－葡萄糖苷酶活性的影响。结果发现，两种提取物
对α－葡萄糖苷酶均具有抑制作用，其中朱砂七鞣质的
抑制作用较朱砂七多糖更强；朱砂七鞣质和朱砂七多
糖对α－葡萄糖苷酶活性的最大抑制率分别为９１．３％
和４１．１８％，ＩＣ５０值分别为１．６μｇ·ｍＬ
－１和１．３μｇ·
ｍＬ－１。朱砂七鞣质和朱砂七多糖对α－葡萄糖苷酶活
性的抑制机理分别属于非竞争性抑制类型和综合性抑
制类型。
参考文献：
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Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　Ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ　ｏｎα－Ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ
ＷＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｍｅｉ，ＹＵＡＮ　Ｊｕ－ｌｉ
（Ｓｈａｎｘｉ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｆｏｒ　Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，
Ｂａｏｊｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ａｒｔｓ　ａｎｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂａｏｊｉ　７２１０１３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｔａｎｎｉｎｓ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ
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－１ａｎｄ　１．３μｇ·ｍＬ
－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏ－
ｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｔｏα－ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｂｅｌｏｎｇｅｄ　ｔｏ　ｎｏｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｈａｔ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ
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Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃｉｌｌｉｎｅｒｖｅ；ｅｘｔｒａｃｔ；ｔａｎｎｉｎｓ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；α－ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ；

ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
扬子江石化投建年产１２０万ｔ丙烯项目
近日，张家港扬子江石化拟投建年产１２０万ｔ丙烷脱氢生产丙烯装置，总投资约４０亿元。该项目分两期建
设，一期计划投资年产６０万ｔ装置，预计３年内达产，并在５年内完成全部年产１２０万ｔ项目投资并实现达产。
一期达产后，预计可年产丙烯６１万ｔ，项目税后内部收益率为２７％。扬子江石化为东华能源、江苏飞翔化工、华
昌化工合资建设，三方分别占股３０％、４０％和３０％。 （摘编）