全 文 ：长蕊万寿竹野生资源开发利用的组织培养研究
蒋天仪1 ,石大兴2 ,王波3 　(1.成都农业科技职业学院农学园艺系 ,四川成都 611130;2.四川农业大学林学系,四川雅安 625014;3.四川工程
职业技术学院建筑工程系 ,四川德阳 618000)
摘要　[目的]为长蕊万寿竹的大规模生产和进一步研究提供技术支持和参考依据。[ 方法] 以长蕊万寿竹茎段为外植体 ,灭菌后将带
芽茎段剪成 1～ 2 cm的小段 ,接种于培养基中。研究外源激素的种类与配比对诱导生根和丛生芽的影响。[结果] 启动培养时 ,外源激素
为 6-BA 1.0 mg/ L+2 , 4-D 0.01 mg/L+NAA0.1 mg/L+IBA 1.0mg/L的培养基的效果最好 , 启动率达到 85.20%。1/2 MS添加外源激素
NAA 1.0 mg/L+AC 5 g/L的培养基的生根效果极显著地高于其它处理 , 生根率达到 96.13%。适合丛生芽诱导的培养基是 6-BA 0.5
mg/L+KT 1.5 mg/L +NAA 0.2 mg/ L+蔗糖 30 g/L ,丛芽增殖系数达到 6.1。[结论]建立了以长蕊万寿竹茎段为外植体的组织培养技术
体系 ,可有效地启动培养 ,诱导生根和丛生芽。
关键词　长蕊万寿竹;野生资源;组织培养
中图分类号　S 722.3+1　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2008)31-13549-01
Study on Tissue Culture of Disporum bodinieri(Levl.et.Vnt.)Wang et Tang
JIANGTian-yi et al　(Department of Agriculture and Horticulture, Chengdu Vocational College of Agricultural Science and Technology , Chengdu ,
Sichuan 611130)
Abstract 　[Objective] The study aimed to provide the technical support and reference for large scale production and further research of Disporum bod-
inieri (Levl.et.Vnt.)Wang et Tang.[Method] With the stem of D.bodinieri seedlings as explants , the sterilized stem with bud was cut into 1-2 cm
small part and then inoculated into the medium.The effects of type and ratio of exogenous hormone on rooting and cluster bud induction were studied.
[ Result] When the culture was initiated , the effect of medium with exogenous hormone of 6-BA 1.0 mg/ L + 2 , 4-D 0.01 mg/L+NAA 0.1 mg/L+
IBA 1.0 mg/L was the best , the initiation rate reached 85.20%.The rooting effect of 1/2MS medium with the exogenous hormones of NAA 1.0 mg/L
+AC 5 g/Lwas extremely higher than that of other treatments and the rooting rate reached 96.13%.The medium suitable for cluster bud induction was
6-BA 0.5 mg/ L+KT 1.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L + sucrose 30 g/L , and themultiplication coefficient of cluster bud reached 6.1.[ Conclusion] The
technique system of tissue culture with the stem of D.bodinieri seedlings as explants was established , with which the culture could be initiated and the
rooting and cluster bud could be induced effectively.
Key words　 Disporum bodinieri(Levl.et.Vnt.)Wang et Tang;Wild resources;Tissue culture
作者简介　蒋天仪(1982-),女,四川成都人 ,助教,从事园林技术研究。
收稿日期　2008-01-11
　　长蕊万寿竹(Disporum bodinieri (Levl.et.Vnt.)Wang et
Tang)为百合科万寿竹属多年生草本 ,为中国特有种[ 1] ,多生
于林下和林缘灌丛中 ,其叶色翠绿 ,四季常绿 ,春季盛开白色
花朵。植株高 30～ 70 cm ,可用盆栽置于室内观赏或在林下
种植 ,是具开发前景的一种野生花卉。目前对该属的植物 ,
有研究者进行了核型分析[ 2-4] 和形态解剖观察[ 5] 。其组织
培养体系的建立可为其大规模生产和进一步研究提供技术
支持。
1　材料与方法
1.1　材料　从雅安周围山上采集长蕊万寿竹 ,将采回的植
株栽植于四川农业大学林木遗传育种实验室苗圃。
1.2　方法
1.2.1　外植体的处理。以长蕊万寿竹幼嫩枝条为试验材
料 ,剪取 3～ 4 cm带芽的幼嫩茎段 ,用自来水冲洗 2 ～ 3 h;转
入超净工作台上 ,用浓度 75%酒精溶液浸泡 15 s;转入浓度
0.1%的升汞溶液中灭菌 6 min ,用无菌水冲洗 5～ 6次;将带
芽茎段剪成 1～ 2 cm的小段 ,接种于培养基中 。
1.2.2　初代培养与有效苗的诱导。基本培养基为MS ,以
6-BA 0.5～ 2.0mg/L与 2 ,4-D 0.01～ 0.50 mg/L , NAA 0.05～
0.50mg/L ,IBA 0.1～ 1.0mg/L不同浓度组合进行启动培养。
培养 30 d ,观察统计芽启动率。
1.2.3　生根培养 。将苗高≥3 cm的小苗接种于生根培养基
中 ,基本培养基为 1/2 MS ,添加不同浓度配比的NAA 0.1 ～
1.0mg/L ,AC(活性炭)1～ 5 g/L ,蔗糖 15 g/L。40 d观察 ,统计
生根率。
1.2.4　丛生芽诱导。将生根后的小苗接入丛芽诱导培养
基 ,基本培养基为MS 。以 6-BA 0.5～ 2.0mg/L ,KT 0.5 ～ 1.5
mg/L ,NAA 0.01～ 0.20mg/L ,蔗糖 15～ 30g/L组合 ,进行丛生
芽诱导 ,每 7 d观察 1次 ,40 d后统计增殖系数。经诱导可从
根颈处产生大量丛芽 ,以达到快速增殖的目的。
1.2.5　培养条件。若无特别说明 ,培养基附加琼脂 0.7%～
0.8%,蔗糖 30 g/L ,pH值 5.8～ 6.0;培养条件均为培养温度
(25±2)℃,光照每天 12 h ,光照强度 1 500～ 2 000 lx。
2　结果与分析
2.1　不同激素组合对启动培养的影响　经观察 ,带芽茎段
培养 7 d腋芽开始萌动 ,逐渐在叶腋处萌生出小芽。14 d后
抽生新梢明显 ,长出绿色小叶 。试验结果显示 ,外源激素的
种类与配比对芽启动率的影响呈现出明显的差异 ,其中 6-BA
1.0 mg/L+2 ,4-D 0.01mg/L +NAA 0.1mg/L +IBA 1.0mg/L
对芽的诱导效果最好 ,培养 30 d时启动率达到 85.20%,与其
他的处理差异极显著。
2.2　不同培养基对生根的影响　生根培养进行至 10 d后即
可观察到白色突起的根状物 ,15 d后大多数培养基上的植株
都可以观察到白色的细根 。试验结果表明 ,培养基中激素种
类和其浓度配比对该植物的生根率影响差异较大。培养基
1/2MS+NAA 1.0mg/L+AC 5 g/L的诱导生根效果极显著地
高于其他处理 ,生根率达到 96.13%。其次是培养基 1/2MS
+NAA 1.0mg/L+AC 3 g/L和 1/2 MS+NAA 1.0mg/L +AC
1 g/L的诱导效果。
2.3　不同浓度激素配比对丛生芽诱导的影响　试验结果表
明 ,在生根苗培养后10d从根颈处萌发出小苗。培养 40 d后
增殖系数大多能达到 4.0以上 ,发挥了组织培养快速繁殖的
优势 ,达到快速繁殖的目的 。经方差分析 , 6-BA 、KT 、蔗糖浓
(下转第 13595页)
安徽农业科学 ,Journal of Anhui Agri.Sci.2008, 36(31):13549, 13595　　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　张杨林　责任校对　张士敏
抽穗率相同 ,都最高 ,分别达 90.0%(2006年)和 100%(2007
年),而CP85-1491和HoCP93-746无论在 2006年还是 2007年 ,
它们的抽穗率都表现最低 ,前一季节分别为 31.2%和
33.3%,后一季节均为 16.0%。
D2 处理下不同年份各参试材料的抽穗率均明显比D1处
理的低 , 2006年除CP85-1491和HoCP93-746的抽穗率分别为
6.7%和 10.5%外 ,其他参试材料的抽穗率都高于 30.0%,抽
穗率最高的是US90-1013 ,达 77.8%;在 2007年 ,参试品系中 ,
CP85-1491和HoCP93-746的抽穗率亦属最低 ,分别为 3.9%和
5.5%,其次是崖城 93-26(13.6%)和 CP72-330(25.0%),其余
参试材料的抽穗率则都高于 35.0%,抽穗率最高的仍是
US90-1013 ,达 84.6%。由此可知 ,在该试验光照强度条件下 ,
大多数甘蔗早花品系经断夜处理 15～ 26 d后都能延迟开花
并保持较高的抽穗率 ,而少数对断夜天数较敏感的品系 ,如
HoCP93-746和CP85-1491 ,用不超过 15 d 的断夜处理才可能
获得较好的结果 ,且同一处理下两个年份之间抽穗率相关系
数显著性测验结果(表 2)进一步表明 ,各参试品系抽穗率对
断夜处理持续天数的反应在不同年份间表现一致。
3　结论与讨论
(1)不同年份间参试品系对断夜天数反应的敏感程度变
化。抽穗率降低程度和延迟开花天数等指标在一定程度上
反映了品系对断夜处理的敏感性。该试验中 ,2006年和 2007
年各参试材料经断夜处理后的平均抽穗率由低到高顺序大
致相同 ,依次为CP85-1491、HoCP93-746、崖城 93-26 、CP72-330、
CP72-3591 、CP72-2086 、CP67-412、CP82-1592、LCP85-384、CP57-
614、桂糖 92-66和US90-1013 ,其中 ,除CP72-330外 ,前 6个品
系不同年份下D1 、D2 处理的平均延迟开花天数都超过 25 d。
CP85-1491和HoCP93-746无论在 2006年还是 2007年 ,它们经
D1和 D2断夜处理后都表现抽穗率最低和延迟开花天数最
大 ,故它们对不同断夜天数的反应最敏感;其他品系在这两
个年份下对不同断夜天数的反应敏感程度亦变化不大 ,从大
到小依次为崖城 93-26>CP72-330>CP72-2086>CP67-412>
LCP85-384>CP72-3591>CP82-1592>CP57-614>桂糖 92-66>
US90-1013。
(2)不同年份下参试品系的适宜断夜天数。两个年份的
试验结果 ,在海南甘蔗育种场自然条件下 ,除CP72-330和崖
城 93-26外 ,其余参试品系的终花期 2006年基本上在 12月上
旬之前 , 2007年则基本上在 12月中旬之前 ,均有必要采取适
当的措施以延迟花期 。2006年和 2007年试验结果均表明 ,
CP72-330和崖城 93-26的开花持续期较长 ,其始花期对断夜
处理反应敏感 ,但终花期受影响不大 ,为增加每年 12月中 、
下旬杂交高峰期花茎的比例 ,可对部分材料进行不超过 15 d
的断夜处理;CP85-1491和 HoCP93-746对断夜天数的反应较
为敏感 ,且不同年份下抽穗率和延迟开花天数表现一致 ,该
试验的光照强度条件下 ,以断夜不超过 15 d为宜 ,此时它们
将延迟开花约 28～ 42 d ,前者开花持续约 32 d ,后者开花持续
6 ～ 26 d ,抽穗率大于 16.0%;CP57-614和桂糖 92-66以断夜 26
d左右为宜 ,此时它们将延迟开花约 18～ 34 d ,开花持续约 25
～ 38 d ,抽穗率大于 35.0%;其余品系不同年份下均可选择断
夜天数在 15 ～ 26 d ,这一段时间内它们都将延迟开花约 14 ～
35 d ,开花高峰期推迟约 25～ 37 d ,开花持续约 13 ～ 44 d(部分
参试材料两个年份间开花持续期表现不太一致),抽穗率均
大于 30.0%。
上述一些甘蔗的终花期和开花持续期随着年份的变化
而有所变化 ,且不同处理间(含对照)这种变化趋势大致保持
一致 ,但各断夜处理的花期仍主要分布在较理想的杂交利用
时间内 ,表明该试验的处理方案适宜在不同年份应用。不同
年份间甘蔗开花情况的变化主要是由于气温 、湿度等因素的
年份间变化所致 ,但目前对相关因素的具体影响仍缺乏了
解 ,这方面有待于进一步研究。
参考文献
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(上接第 13549页)
度对丛生芽诱导增殖系数的影响均达极显著水平。在丛生
芽诱导中 , 6-BA 0.5mg /L+KT 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+
蔗糖 30 g/L的丛生芽增殖系数达到 6.1 。
3　结论与讨论
试验中初代培养时 , 6-BA 1.0 mg/L+2 , 4-D 0.01 mg/L
+NAA 0.1 mg/L+IBA 1.0 mg/L培养基对芽的诱导效果最
好。经方差分析还发现 ,2 , 4-D与 IBA对长蕊万寿竹芽的启
动诱导影响不显著 。生根培养时 , 1/2MS+NAA 1.0mg/L+
AC 5 g/L培养基的效果最好。而在诱导丛生芽的时候 , 6-
BA 0.5mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖 30 g/L培
养基的增殖系数最高 ,培养 40 d时达到了 6.1。
参考文献
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1359536卷31期　　　　　　　　　　　　　张垂明等　不同年份间断夜处理对甘蔗开花影响的差异