全 文 ：Ｃ ｈｉｎｅ ｓｅＪｏｕｒｎａｌｏ ｆＶ ｅｔｅｒｉｎ ａｒｙＭｅｄ ｉｃｉ ｎｅ中国兽医杂志２ ０ １ ６年 （第 ５ ２卷 ）第 丨 期１〇９
功 劳 叶 提 取 物 的 体 外 抗 菌 活 性 研 究
蒲忠 慧 ， 王保 山 ２ ， 陈希文 １ ， 王雄清 １ ， 邓思 霞 １ ， 周 小琴 １
（ １ ．绵阳师范学院生命科学与技术学院 ， 四川 绵 阳 ６２ １ ０００；２ ．北京生泰尔生物科技有限公司 ， 北京 大兴 １０２６００ ）
摘要 ： 采用水提法和 乙醇回流加热法分别提取功劳叶 ，应用牛津杯法和试管二倍稀释法分别检测功劳叶提取物对
试验菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度 （Ｍｉｎ ｉｍｕｍＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙＣ〇ｎｓｉｓ ｔｅｎｃｙ ， ＭＩＣ ）和最低杀菌浓度 （ＭｉｎｉｍｕｍＢ ａｃ ｔｅｒｉｃ ｉｄａｌＣｏｎｓｉ ｓ －
ｔｅｎＣｙ ， ＭＢＣ ） 。 结果显示 ，功劳叶醇提物金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为 ２０ ．６９ ｍｍ 、 １ ５，４０ ｎｍ ｉ ； ＭＩＣ值分
别是 ３ １ ．３ｍｇ／ｍＬ 、 １ ２５ｍｇ／ｍＬ ； ＭＢＣ值分别是 ６２ ．５ｍｇ／ｍＬ 、 ＞５ ００ｍｇ／ｍＬ 。 功劳叶水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈 １ ３．５４
ｍｒａ ，其ＭＩＣ值 、 ＭＢＣ值分别是 ６２．５ ｍｇ／ｍＬ 、 ５００ｍｇ／ｍＬ ，对大肠杆菌抗菌活性较弱 ，其 ＭＩＣ值为 ５００ｍｇ／ｍＬ ， ＭＢＣ＞５ ００ ｍｇ／
ｍＬ。 功劳叶不 同提取物对细菌的抗菌活性有所差异 ， 功劳叶醇提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均由不 同程度的抑
菌或杀菌能力 。
关键词 ：功劳叶 ，？ 抗菌活性 ； ＭＩＣ；ＭＢＣ
中 图 分 类号 ：Ｒ２ ８ １ ． ４文献标志码 ： Ａ文章编 号 ： ０５２ ９－６０ ０５ （ ２０ １ ６ ） ０ １ －０ １ ０９－ ０３
ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｘｔｒａｃｔｆｒｏｍ Ｍａｈｏｎｉａｉｎ ｖｉｔｒｏ
ＰＵＺｈｏｎｇ－ｈｕｉ，ＷＡＮＧＢａｏ－ｓｈａｎ２ ，ＣＨＥＮＸｉ －ｗｅｎ １ ，ＷＡＮＧＸｉｏｎｇ－ｑｉｎｇ１，ＤＥＮＧＳｉ－ｘｉａ １，ＺＨＯＵＸｉａｏ－ ｑｉｎ １
（ ｌ ．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆ ＭｉａｎｙａｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓ ｉｔｙ ，Ｍｉａｎｙａｎｇ６２１０００ ， Ｃｈ ｉｎａ ；
２ ．Ｂｅｉｊ ｉｎｇＣｅｎ ｔｒｅＢ ｉｏｌｏｇｙ Ｃｏ ． ，Ｌｔｄ ．Ｂｅｉｊｉｎｇ １０２６００ ， Ｃｈｉｎａ ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ ：Ｔｈ ｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆ Ｍａｈｏｎ ｉａ ｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔ ｉｏｎａｎｄ９５％ ｅｔｈａｎｏｌｒｅｆｌｕｘｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ． Ｔｗｏｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅ
ｕｓｅｄ ｔｏｄｏｄｒｕｇｓｅｎｓ ｉｔｉｖｅｔｅｓ ｔｂｙＯｘｆｏｒｄ Ｐｌａｔｅａｎｄ ｔｈｅｔｕｂｅｄｉｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｎｎｉｎｅｔｈｅＭｉｎｉｍｕｍ Ｉｎｈｉｂｉ ｔｏｒｙＣｏｎｓ ｉｓ ？
ｔｅｎｃｙ （ＭＩＣ ）ａｎｄＭｉｎｉｍｕｍＢａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌＣｏｎｓｉｓ ｔｅｎｃｙ （ＭＢＣ ） ａｇａｉｎｓ ｔ Ｓｔａｐｈｙ ｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓａｎｄＥｓｃｈｅｒ ｉｃｈ ｉａｃｏ ｌｉ ． Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔａｎ ｔｉｂａｃ ｔｅｒｉａｌｃｉｒｃｌｅｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｔｈｅｅｔｈａ ｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｇａｉｎｓｔ没ａｐ／ｉｙＺｏｃｏｃｏｗｏｕｒｅ ｉｗ ａｎｄｗａｓ２０． ６９ｍｍａｎｄ
１ ５．４０ｍｍ
，
ｔｈｅＭＩＣｗａｓ３ １ ．３ｍｇ／ｍＬａｎｄ１２５ ｍｇ／ｍＬ ， ａｎｄ ｔｈｅＭＢＣｗａ ｓ６２ ．５ｍｇ／ｍＬ ａｎｄｇｒｅａｔｅｒ ｔｈａｎ ５００ｍｇ／ｍＬ ， ｒｅｓｐｅｃｔ ｉｖ ｅｌｙ ． Ａｎ？
ｔ ｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｃｉｒｃｌｅｄｉ ａｍｅｔｅｒｏｆ ｔｈｅｗａｔｅ ｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｇａｉｎｓｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ ｗａｓ１３ ．５４ｍｍ ， ｔｈｅＭＩＣ ａｎｄＭＢＣｗｅｒｅ６２ ．５ｍｇ／ｍＬ
ａｎｄ５００ｍｇ／ｍＬ ， ｒｅｓｐｅｃｔ ｉｖｅｌｙ ．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌ ｉｗａｓ ｌｅｓｓｓｅｎｓ ｉｔｉｖｅ ｔｏｔｈｅｗａｔｅ ｒｅｘ ｔｒａｃｔ ｉｏｎｏｆ ｔｈｅ Ｍａｈｏｎｉａ ． ＴｈｅＭＩＣｗａｓ５００ｍｇ／ｍＬ
ａｎｄｔｈｅＭ ＢＣｗａｓｇｒｅａｔｅｒ ｔｈａｎ５００ｍｇ／ｍＬ ． Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｓｓｈｏｗｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉｂａｃ ｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｏＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓａｎｄ
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ ． ＴｈｅＭａｈｏｎｉａｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｈａｓｇｏｏｄ ｉｎｈｉｂｉ ｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｎ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓａｎｄＥｘｏｌｉ ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ：Ｍａｈｏｎ ｉａ；ａｎ ｔｉｍｉｃｒｏ ｂｉａｌａｃｔｉ ｖｉｔｙ ；ＭＩＣ；ＭＢＣ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ ：ＷＡＮＧＸｉｏｎｇ－ｑｉｎｇ
十大功劳 （Ｍａ／ｉｏｍ＇ａ
ｙａｐｏｒａ ｉｃａ）属于小檗科 （Ｂｅｒ－选用当地生长的功劳叶 ，采用水提法与醇提法分
ｆｔｅｒｉｄａｃｍｅ ）十大功劳属 （ＭａＡｏｎｉａ ） ，该属植物为多别对猪源 的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行抑
年生小灌木 ＇ 资源 丰富 ， 产量多 ， 在我 国 民 间药菌试验 ， 旨为在畜禽疾病防治中充分利用 当地资
用 已久 ， 以 根 、茎人药的称为功劳木 ， 以 叶人药的源和进一步开发植物药提供了新的途径 。
称为功劳叶 。 现代药理研究证明 ，功 劳 叶具有抗１ 材料与方法
菌 ［２ ］ 、消炎 ［３ ］ 、抗癌Ｍ 、抗病毒 、抗心率失常 、抗血小１ ． １ 菌株与培养基 致病菌 ： 金黄色葡萄球菌 、
板聚集以及清热燥湿 、泻火解毒 的功效 ［ １ １ 。 其主大肠杆菌 ， 均 由绵 阳师范学院生物基础实验 中心
要活性成分为小檗碱 ｗ ， 又称黄连素 ， 临床上用于从绵 阳市某猪场患病猪的病料中分离所得 。
细菌性痢疾 、伤寒 、肺结核 、急性扁桃体炎等症 。 ＭＨ 肉汤培养基 （ Ｍｕｅｌｌｅｉ＾Ｈｉｎｔｏｎｂｒｏｔｈ ） ，购 自北
近年来 ，关于十大功劳属植物主要集 中 于其京奥博星生物技术有限责任公司 ， 批号 ： ２０ １３０７２６ ；
化学成分进行的研究 ， 虽有功劳在抗病原微生物营养琼脂培养基 （ Ｎｕｔｒｉｅｎｔａａｇａｒ ） ，购 自北京奥博星
的初步应用探索 ［３７］ ，但对畜禽细菌性疾病的 主要生物技术有 限责任公司 ，批号 ： ２０ １３０７０２ 。
致病菌的抑制作用报道较少 。 基于此 ， 本研究拟 １ ．２ 中药 功劳叶 （产地 四 川 ， 批次 １ ３０３５０ ） ， 购
輔 日 期 ． ２０ １ ４－Ｕ－２ ８自成都 中药材市场 。 按照 《 中华人民共和 国兽药
基金项 目 ： 四川省科技厅科研项 目 （ ２０ １ ３厕２７ ）典》 （ ２〇 １〇年版－部 ）＾大功方属项下鉴定合格 。
作者简介 ： 蒲忠慧 （ １９８２－ ） ， 女 ，讲师 ，博士生 ， 从事 中药药理 １ ＿３ 器材 旋转蒸发仪 Ｒ５〇２Ｂ（ 上海亚荣生化仪
研究 ， Ｅ－ｍａ ｉ ｌ ： ｚ ｈｏｎｇｈｕ ｉ ．ｐｕ＠ １ ６３ ．ｃ ｏｍ 器厂 ） ； ＹＸＱ－ＬＳ 立式压力蒸汽灭菌锅 （上海博迅
通讯作者 ： 王雄清 ， Ｅ－ｍａｉｌ ： ｗａｎｇｘｑ ｌ９３＠ １２ ６． ｃｏｍ实业有限公司 ） ； ＳＷ－ＣＪ－２Ｄ 型双人单面净化工作
１ １０中国兽医杂志２０１ ６年 （第 ５ ２卷 ） 第 １期Ｃｈ ｉｎｅｓｅＪ ｏｕｒｎａｌｏｆＶ ｅｔ ｅｒｉｎａｒｙＭｅｄ ｉｃｉｎｅ
台 （ 苏州净化设备有限公司 ） ； ＤＮＰ－９０５２ＢＳ—ＨＩ 电培养板上无菌落生长的最低浓度记为 ＭＢＣ 。 试
热恒温培养箱 （ 上海新苗医疗器械制造有限公验重复 ３次 。
司 ） ； ＳＹＣ－ Ｃ 电热恒温调速振荡器 （上海新苗医疗２ 结果
器械制造有限公 司 ） ； 牛津杯 内径 （ ６ ．０±０ ． １ ）ｍｍ ，２． １ 功劳叶粗提物的抑菌活性 比较 采用牛津
外径 （ ７ ．８±０ ． １ ）ｍｍ ， 高 （ １０ ．０±０． １ ）ｍｎ＾杯法分别测定了 功劳叶水提物 、 醇提物在 ２ｇ／ｍＬ
１ ．４ 功劳叶粗提物的制备 将功劳叶粉碎后过的生药浓度下为对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌
２０ 目 筛 ，分别用 ９５％乙醇 回流提取 、水煎煮 。 料的体外抑菌活性 ， 结果见表 １ 及前插彩版图 １？
液 比 １ ： １２ ， 每种溶剂重复提取 ３ 次 ， 时间分别为３ 。 由表 １ 可知 ： 与 阴性对照相比 ： 功劳叶醇提物
３ ｈ 、 ２ ｈ 、 ｌｈ 。 将每种溶剂 ３次所得滤液减压浓缩对 ２ 种供试菌具有不同程度的抑菌活性 ，对金黄
至生药质量浓度为 ２ｇ／ｍＬ ，真空干燥至恒重 ，精密色葡萄球菌抑菌效果最好 ， 抑菌圈直径为 ２０ ．６９
称量 ，计算浸膏得率 。ｍｍ ；呈极敏性 ， 对大肠杆菌 （ １５ ．４０ｍｍ ）表现出 高
１ ．５ 体外抑菌试验 敏性 ； 功劳叶水提物对金黄色葡萄球菌抑菌效果
１ ．５ ． １ 菌悬液的制备 将供试菌种接种于营养琼相对较好 ， 抑菌圈直径 为 １ ３ ．５４ｍｍ 表现出 中敏
脂斜面培养基上进行活化 ， ３７ｔ 恒温培养 １ ８？性 ，对大肠杆菌抑菌直径＜ １〇 ｍｍ为低度敏感 。 以
２４ｈ ， 然后在超净工作台 内用接种环挑取活化后 上结果说明 了 功劳叶醇提物抑菌效果优于水提
的单个菌落接种于新鲜的 ＭＨ 肉汤培养基中 ， 置物 ， 从提取得率来看 ， 水提物得率 （ １６ ．６４％ ） 略高
３７ 丈恒温箱中培养 １８？ ２４ｈ作为原菌液 ，采用平于醇提物 （ １３ ．５ ８％ ） 。
板菌落计数法 ，用无菌生理盐水将受试菌株调至表 １ 功劳叶提取物对供试菌的体外抑菌活性
１Ｘ １０６？ １〇７ＣＦＵ／ｍＬ ，备用＇ 抑麵施
１ ．５ ． ２ 牛津杯法测定抑菌活性 采用 牛津杯法测细菌乙醇提取物 水提取物阴性对照 －定抑菌活性 ［９ ］ 。 用微量移液器吸取 ０ ．２ｍＬ菌液于 ｅ ＞ｏｏ±ａｏｏ
制备好 的营养琼脂固体培养基中 ，用无菌玻璃耙大肠杆菌 １５ ．４０±０．３７６．００±０ ．００６ ．００＊０ ．００
涂布均匀 ，并用慑子将无菌的牛津杯轻轻放入培提取率 ／ ％ １１５８
１ ６ ．６４６．００±０．００
养皿中 。 在水平放置的平皿中均勾地放置 ４个牛 ２ ．２ 最低抑菌浓度 （ ＭＩＣ 值 ） 采用试管二倍稀津杯 ，其中 ３个各加人同种药液 ５０ｆｉＬ ， 另外 １ ＾释法测定 了功劳叶提取物对供试菌的 ＭＩＣ值 ，结加人相应 的溶剂作阴性对照 。 随后放人 恒 果见表 ２ ， 当功劳 叶醇提物 的浓 度为 ３ １ ． ３ｍｇ／ｍＬ温培养箱中培养 ２４ ｈ 后 ，移去牛津杯 ， 用游标 卡 时 ， 金黄色葡萄球菌生长受到抑制 ，试管中液体尺测量抑菌圈的直径 （按十字交叉法测量菌落直 培养基澄清 ， 当醇提物浓度为 １ ２５ｍｇ／ｍＬ ， 大肠杆ｇ２ ？欠 ， 平均值 ） 。菌生长明显受到抑制 ； 当功劳叶水提物的浓度为抑菌效果判定 ［ １°］ ：抑菌圈直径 ＞２０ｍｍ 为极敏 ２５０ ｍｇ／ｍＬ时 ， 金黄色葡萄球菌生长受到抑制 ， 当感 ； 在 １５？ ２０ｍｍ为高度敏感 ； 在 １ ０？ １ ５ｍｍ之间 水提物浓度为 ５００ｍｇ／ｍＬ ， 大肠杆菌试管仍显浑为 中度敏感 ；抑菌圈直径＜１０ ｍｍ为低度敏感 。浊 。 阴性对照组中各试验菌均表现出 较强 的生
１ ．５ ． ３ 最小抑菌浓度的测定 采用试管二倍稀释 长优势 。 由此得出 ， 功劳叶醇提物对金黄色葡萄
法 ［ １ １ － １ ２ ］ 。 取 已灭菌且编号试管 ９ 支 ， 先在 １？ ８号 球菌 、 大肠杆菌 的 ＭＩＣ 值分别 为 ： ３ １ ．３ｍ ｇ／ｍＬ 、
试管加 ＭＨ 肉汤 ２ｍＬ ，然后吸取功劳 叶提取物 （浓１２５ｍｇ／ｍＬ ； 功劳叶水提物对金黄色葡萄球菌 、大
度为 １ｇ／ｍＬ ） ２ｍＬ移人 １ 号试管 ， 充分混匀后倍半 肠杆菌的 ＭＩＣ 值分别 为 ： ２５０ｍｇ／ｍＬ 、 ＞５００ｍｇ／稀释 ， 向上述每管加菌悬液 ５０ｊｊｌＬ ， 同时设 ＭＨ 对ｍＬ 。
照管 、菌液对照管 ， 使每管中 的药物浓度分别为２ ．３ 最低杀菌浓度 （ ＭＢＣ 值 ） 在最低抑菌浓度
５００ｍｇ／ｍＬ 、 ２５０ｍｇ／ｍＬ 、 １２５ｍｇ／ｍＬ 、 ６２ ．５ｍｇ／ｍＬ 、的基础上 ， 测得 的 ＭＢＣ值结果见表 ３ 。 由表 ３ 可
３０ｍｇ／ｍＬ 、 １５． ６ｍｇ／ｍＬ 、 ７ ． ８ｍｇ／ｍＬ 、 ３ ．９ｍｇ／ｍＬ 。知 ， 功劳叶醇提物对金黄色葡萄球菌 、 大肠杆菌
每管 ３ 个重 复 ， 置 ３７ 丈置摇床 （ １５０ｒ／ｍ ｉｎ ） 培养的 ＭＢＣ值分别为 ： ６２．５ｍｇ／ｍＬ 、 ５００ｍｇ／ｍＬ ；功劳叶
２４ｈ后 ， 肉眼观察试管 内 液体澄清的最低药物浓水提物对金黄色葡萄球菌 、 大肠杆菌的 ＭＢＣ值分
度记为最低抑菌浓度 （ ＭＩＣ ） 。别为 ： ５ ００ｍｇ／ｍＬ 、 ＞ ５００ｍｇ／ｍＬ 。
１ ． ５ ．４ 最小杀菌浓度的测定 在 Ｍ ＩＣ结果的基础３ 讨论
上 ， 从肉 眼可见无浑浊 的试管 中吸取 ５０ｐＬ液体本试验探讨 了乙醇 、水堤物对功劳叶活性成
涂布 于营养琼脂 固体平板上 ［ １ ３ １ ， ３７Ｔ 恒温培养分抑菌效果 的影响 ，结果显示 ， 功劳 叶醇提物抑
２４ｈ 后 ， 以杀灭 ９９ ．９％细菌数量的最低浓度或者菌效果优于水提物 ， 根据 “ 相似相溶 ” 原理可知 ，
Ｃｈｉｎ ｅｓｅＪ ｏｕｒｎａｌ ｏｆＶ ｅｔｅ ｒｉｎａｒｙＭｅｄｉ ｃｉｎｅ中国兽医杂志２０１ ６ 年（第 ５２卷 ）第 １ 期１ １ １
表 ２ 功劳叶提取物对供试菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ值 ）
醇提物 （ｍｇ／ｍＬ）对照水提物 （ｍｇ ／ｍＬ）
５００２５０１２５６２．５３ １ ．３１５ ．６７． ８３ ．９
５００２５０１ ２５６２ ．５ ３ １ ． ３１ ５ ．６７ ．８３ ，９
金黄色葡萄球菌－－－－－＋＋＋＋－－＋＋＋＋＋＋
———＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
￣
试管澄清 ， 七 ：试管浑独
表 ３ 功劳叶提取物对供试菌的最低杀菌浓度（ＭＩＣ值 ）
醇提物 （ｍｇ／ｍＬ）对照水提物 （ ｍｇ／ｍＬ）
５００２ ５０１２５６２ ．５３ １ ．３１５ ．６７．８３ ．９
５００２５０１２５６２．５３ １ ．３１ ５ ．６７ ． ８３ ．９
金黄色菌－－－－＋＋＋＋＋－＋＋＋＋＋＋＋
大肠杆菌－＋＋ ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋
￣
无菌生长 ， ＋ ：有菌生长
其极性强弱 为水 ＞乙醇 ， 由此说明 了功劳 叶抑菌机理有关 ， 功劳叶可能与抗生素作用机制不同 ，
成分可能为中等极性成分 。其是否作用于毒素表达 、表面蛋 白活性或耐药性
体外抑菌试验表明 ，不同的菌种对药物的敏等方面 ，有待于进一步的研究 。
感度不同 。 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌对功劳叶参考文献 ：
ｍｍ ） １５ ．４０［ １ ］ 刘安莉 ， 何顺志 ． 中国十大功劳属药用植物资源 利■类与地理
［
２
］敏 （ ＜ １０ｍｍ ） 。 由 此：说明 了革二阳性菌对？功劳叶初步研究［Ｊ］ ． 亚热带植物科学 ， ２０１ ２ ， ４ １ （ ３ ） ： １ －６ ．提取物的敏感性大于革兰 阴性菌 ） ， 即功劳叶革［ ３］ 王筠默 ． 中 药十大功劳的研究［Ｊ ］ ． 中 医药研究 ， ２００２ ， １８ （ ５ ） ：
兰阳性菌的抑制作用强于革兰 阴性菌 。 据金兰《 ？
梅等 ［ １４ ］报道 ， 功劳叶对金黄色葡萄球菌抑菌效果［４］ 浙江植物志编委会．浙江植物志岡 ．杭州 ： 浙江科技出版社 ，
１ ＱＯＯ较强 ，且优于大肠 ＿ ，与本试验的结果相符 ， ｉ兑
［５］Ｌ ｉｎ Ｊ Ｇ ＞ Ｃｈｕ？ｇ Ｊ Ｇ ， Ｗｕ Ｌ Ｔ ）＾ ． Ｅｆｅｃｔ Ｓ 〇ｆ ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ ｏｎ ａｒｙｌ －明功劳叶抑菌谱广 ，具有较大的开发价值 ，但其ａｍｉｎ ｅＮ－ａｃｅ ｔｙｌ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅａｃ ｔｉｖ ｉｔｙｉｎｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎｔ ｕｍｏｒｃｅ ｌｌｓｆｊ］ ．
抑菌活性具体成分 尚 不明确 ， 有待进￣＇步分离ＴｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆ Ｃｈｉｎｅｓ ｅＭｅｄｉｃ ｉｎｅ ， １９９９ ， ２７（ ２ ） ：２６５＿
纯化 。２７５ ．
功劳奸椹取物对伴试茴 的 Ｍｉｒ 倌 ＭＢＣ倌结［６］ 駄５ ，辟 ．＋＊雌Ｓ輸龄齡雖倾 １４ ［Ｊ］ ＿ ａ
？＊ｍ 外医药 ？植物药分册 ， ２００５ ， ２０ （ ５ ） ： １ ８５－ １９０．果表明 ，功男？ 叶醇提物对 ■金黄色■葡萄球菌 、 大肠
［
７］ 欧阳 蒲月 ，朱翠霞 ， 陈功锡 ， 等 ．宽荀十大功劳提取物抑菌活杆菌均有一定的抑菌和杀菌效果 ， 对金黄色葡萄性 的初步研究 ｍ ． 中南林业科 技大 学学报 ， ２０ １２ ， ３２ （ ３ ） ：
球菌的ＭＩＣ值为３ １ ． ３ｍｇ／ｍＬ ， ＭＢＣ值为６２ ．５ｍｇ／ １６６－ １７０ ．
ｍＬ ；对大肠杆菌的 ＭＩＣ 值为 １２５ｍｇ／ｍＬ ， ＭＢＣ 值 生物学实验教程岡．北京 ：北京大学出版
为 ５００ｍｇ／ｍＬ 。 功劳叶水提物仅对金黄色葡萄球
［
９］ 刘冬梅
，
李理 ，杨晓泉 ， 等 ．用牛津杯法测定益生菌的抑菌活菌有抑菌活性 ， 其 ＭＩＣ值为 ２５０ｍｇ／ｍＬ ， ＭＢＣ值为力 ［Ｊ］ ．食 品研究与开发 ， ２００６ ， ２７ （ ３ ） ： ｌ ｉ〇－ ｉ １ １ ．
５００ ｍｇ／ｍＬ ， 对大肠杆菌 的 ＭＩＣ 与 ＭＢＣ值均大于［ １０］ 马兴铭 ，李红玉 ， 尹少甫 ，等 ． 西藏砂生槐生物碱抑菌抑瘤 的
５００ ｍｇ／ｍＬ 。 实验研究 ［Ｊ］ ． 兰州 大学学报 （ 自 然科学？ ） ， ２００３ ， ３ （ ６ ） ： ７４－
道十大功劳叶水提物对大肠杆麵 ｆｔ ｌ ｌ ］７ｐ７ｕｚＨ ＞ Ｙ ｉｎｚ心 ＲＹ＾ ａｅｔ ；ｖｉ ｔｙ度 （ＭＩＣ ）范围为１ ５ ．６ ？ ２５０ｍｇ／ｍＬ （生药 ） ， 醇提物ｄｅｅ ｅｎｄｅ ａｃ ｉ ｄ－ｈ ｅＭｄｅｅａｎｏｉ ｅ ａｃ ｉｄ－ ｔｅｔ ｒａｈｙｄｒｏｆｕｒａｎ－３ ， ４－ ｄｉ ｙｌｅｓ＿
对大肠杆菌的的 ＭＩＣ均大于２５０ｍｇ／ｍＬ（生药 ） ， ｔｅｒ ｆｒｏｍＮｅｅｍＯ ｉｌ［Ｊ］ ． ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉ ｅｎｃｅｓ ｉｎＣｈｉｎａ ， ２０ １０ ， ９
周琰冰等 ［ １ ６１ 、赵鑫荟等？报道 ，功劳叶大肠杆菌的 ｉｍ－ ｉ〇５ －
ＭＩＣ为６２． ５ｍｇ／ｍＬ ， 本研究结果与以上报道相 比网ＰｕＺＨＪｉａＲＹ ’ Ｙ ｉｎＺ Ｑ ， ｅ＊ｏＺ ． Ａｍｉｂａｃｔｅ ｒｉａ ｌａｃ ｔｉｖ ｉｔｙｏｆ ｔｈｅｃｒｕｄｅ
Ｍ ， 一ｖ 、 ｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＰｒｉｎｓｅｐｉａＵｔｉｌｉ ｓＲｏｙｌｅ ｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊｌ ． Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ Ｎｏｒｔｈ－有明显的差异 ， 出现这种差异胃能与＿叶＿ｅａＳｔＡｇｒｉｃｕｌ ｔｕｒａｌ ｕｌ ｅｒｓｉｔｙ ． ２０ １０ ， １ ： ４８－５２ ．类 、产地 、提取方法 ， 以及相同的细菌不同来源的［ １３］ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｉ ｔｔｅｅｆｏｒＣｌ ｉｎｉｃ ａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＳｔａｎｄａｒｄｓＭｅ ｔｈｏｄｓｆｏｒ
菌株有关 ， 有待今后进￣＇步探讨 。ｄｉｌｕｔ ｉＤｎ ａｎｔ ｉｍｉ ｃｒｏｂｉａｌ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂ ｉｌ ｉｔｙ ｔｅｓ ｔｓｆｏｒｂａｃｔｅｒｉａ ｔｈａｔｇｒｏｗ
临床研究证明 卩８—２０］ ， 功劳叶体 内治疗许多感ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ ；ａｐｐｒｏ ｖｅｄｇｕｉｄｅ ｌｉｎｅ５ｔｈｅｄ （ Ｍ ＊７－Ａ５ ） ［Ｊ ］ ．Ｎａｔｉｏｎａｌ
染性疾病 （细菌性痢疾 ７流感病毒 、 伤寒 、肺结核 、 ＆ＯｉｎｉｅａｌＵｂＣＴａｔＯＴｙＳ ｔａｎｄａｒｄＳ ’ ２０００ ’ ３Ｕ ）＝ １
急性扁桃体炎 ）效果很好 ，但本研究结果表明 ， 其
［ １４］ 金兰梅 ，伍清林 ， 陆小松 ，等 ． 竹叶等植物提取物对畜禽致病体外 ＭＩＣ值偏大 ，究其原因可能与功劳叶 的抑菌菌抑菌效果的研究 ［Ｊ ］ ．金陵科技学院学报 ， ２０ １ ３ ， ２９ （ ４ ） ： ８０￣
１ １２中 国兽医杂志２０ １ ６年 （第 ５２卷 ） 第 Ｉ期ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＶ ｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃ ｉｎｅ
８４ ．［ １８］ 姚凤莉 ，尹晓丹 ，安育林． 十大功劳叶 、生甘草联合阿奇霉素
［
１５］ 张秀英 ，高光 ，段文龙 ，等 ？十大功劳对大肠杆菌耐药性的 消治疗小儿支原体肺炎 的疗效观察 ［Ｊ］ ． 现代中西医结合杂志 ，
除作用 ［Ｊ］ ．中 国兽医学报 ， ２０ １２ ， ３２⑴ ： １０８－ １ １０．２０ １０ ， １ ９ （ ２０ ） ：２４７９－２４８０ ， ２４８３ ．
［ １６］ 周琰冰 ， 赵鑫荟 ， 艾启 俊 ． 三种 中草药对大肠杆菌的抑 制作
用及机理初探 ［Ｊ］ ． 中国农学通报 ， ２０ １４ ， ３０ （ ２１ ） ： ２９４－ ３００ ．［ １９］ 黄聪 ．肺 核 ［】】屬康生活 ， ２００ ３ ， ３ ： ４１ ．
［
１７
］ 赵鑫莶 ，艾启 俊 ． １８ 种中 草药对大肠杆菌抑菌效果的研究［２０］ 曾祥英 ，劳邦盛 ，董熙 昌 ，等 ． 阔 叶十大功劳根中生物碱组分
［Ｊ］ ．安徽农业科学 ， ２０ １ ３ ， ４ １ （２ ） ：５９９－６００ ．体外抗流感病毒试验研究 ［Ｊ］ ． 中药材 ， ２００３ ， ２６ （１ ） ：２９－ ３０ ．
４ 讨论
？Ａ 如 斗 連 曹 赫４ ． １＃＿＿絲舱賴 、絲、鏡＃？Ｖ＾＾＾ 含碳水化合物词料的病史 ， 在瘤 胃 内发酵后乳酸
＾＾＾ 浓度迅速±升 ，纤毛虫大量死亡 ， 消化机能紊乱 ，瘤 胃壁 出现炎症病变 ， 迅速脱水 、酸中毒 ， 出现神
李金岭经症状 。
（黑龙江职业学院 龙ｉＰ尔滨 漬⑴４． ２ 輔的诊断要Ｍ急性 后 ３？５ ｈ’ 黑 江 口 １５０ １ １ １ ） 内无特殊症状而突然死亡 ；多数病牛呈亚急性经过 ，
奶牛瘤 胃酸中毒又称奶牛急性碳水化合物过 表现为精神沉郁 ， 视力障碍 ， 盲 目运动 ， 角弓 反张 ，
食症 、 中毒性消化不 良等 。 是奶牛采食大量精料 眼球震颤 ，肌肉颤抖 ，最后呈昏迷状态 。 因脱水严
或长期饲喂酸度过高 的青贮饲料或富含碳水化
合物的饲料 ， 在瘤 胃 内 产生大量的乳酸等有机酸 结膜发绀 ，少尿或无尿 ，瘤胃 ｐＨ值；Ｓ ＩＥ常的 ６ ．０？７ ．０
而引起 的一种代谢性酸 中毒 。 病后 以呈现前 胃 降低 到 ５ ．５？ ６ ．０ ， 血液中碱贮下降 ， 体温偏低为
机能障碍 、消化紊乱 、 中枢神经兴奋性先增高后 ３６． ５ｔ？ ３８ ．５呼吸 、脉搏加快 。
抑制 、 脱水 、卧地不起 、休克 、毒血症和高死亡率４． ３ 本病治疗原则是制止产酸与纠酸 ，扩充血容
为特征 。 本病多发于产前 、产后的高产奶牛 。 笔 量 ，促进瘤 胃蠕动 ， 增强消化机能 。 对急性瘤 胃
者曾诊治 １ 例瘤 胃酸中毒的奶牛 ，报告如下 。酸中 毒的病例 ， 应慎重使用导 胃洗 胃法 ， 因为有
１ 发病情况时可 在导 胃洗 胃过程 中 ；ｉ ；接导致病牛死 ｔ： 。 ｆｉ
２０ １４年春天 ， 哈尔滨市双城区青岭乡徐某家 对亚急性病牛可先施行导 胃洗 胃 ， 用 １％温盐水
１ 头黑 白花奶牛 ， 头天晚上偷吃 了 自家院 内存放 反复 冲洗瘤 胃 ， 禁用碳酸氢钠溶液洗胃 ， 因其在
的玉米 ， 于第 ２ 天早上发病 。 经检查 ： 该牛体温 瘤 胃 内能与乳酸相结合而形成乳酸钠 ，吸收后易
３７Ｔ ，呼吸及脉搏明显增数 ，反刍停止 ， 口 腔及耳引起碱中毒 。
朵发凉 ， 眼球 凹陷 ， 脱水严重 ，结膜发绀 ， 血液呈４ ．４ 瘤 胃酸中毒时瘤 胃 积液 ，其渴欲增加 ，应限
暗紫色 ， 视力减弱 ， 肌肉 颤抖 ，瘤 胃 内 容物较坚制饮水 ，否则饮水过量易促进病牛死亡 。 治疗时
实 ，穿刺采集瘤胃 内容物 ＰＨ 值为 ５ ． ８ 。待瘤 胃酸中毒症状缓解后 ，再 内服“促反刍散”加
２ 诊断减 ， 每天 １ 付 ，连用 ４？ ５付 ， 以恢复前胃机能和促
经病史调查 、临床检查及瘤 胃 内容物 ｐＨ值测进 胃肠内容物的后送 。
定 ，诊断为瘤 胃酸中毒 。４ ．５ 若出 现神经症状时 ， 为降低颅内压 ， 可同时
３ 治疗 配合 ２０％甘露醇注射液 ５００？ １０００ｍＬ ， 静脉注
先禁食 １？ ２ ｄ ， 并限制饮水 。 同时应用 ５％葡射 。 急性瘤 胃酸 中毒的病牛在恢复期易继发皱
萄糖氯化钠注射液 ２０００ｍＬ ，５％碳酸氢钠注射液胃炎 、皱胃溃瘍 、 瓣胃阻塞或蹄叶炎等 ，应及时采
１０００ ｍＬ ， ｌ次静脉注射 ， 每天 １ 次 ，连用 ４ ｄ ；症状取预防和对症治疗措施。
缓解后应用 中兽药 “促反刍散” ，每天灌服 １ 付 ， 连４ ．６ 用保守疗法效果不佳时 ，应及时进行瘤 胃切开
用 ５付后病情痊愈 。术 ，取出瘤 胃 内容物 ，并加以冲洗 ，冲洗后接种适量
“促反刍散 ”的 组成及用量 ： 榔片 ５０ ｇ ， 枳实的健康牛瘤 胃液 ， 对治疗本病有较好的效果 。
３０ ｇ ，党参 ４０ｇ ， 白术 ５ ０ｇ ，香附 ３０ｇ ，川朴 ４０ｇ ，青４ ．７ 本病预防的关键在于饲养管理 。 此病例就是
皮 ３０ｇ ， 神 曲 ５０ｇ ， 甘草 ２０ｇ 。 共为细末 ， 开水冲由于管理不当 ，奶牛偷食了过量的玉米引起的 。 同
调 ，候温灌服 。 轻者每天 １付 ，重者每 日 分早晚各时注意在伺喂高碳水化合物时 ，要有一个适应的过
１付 ，连用 ３？ ５ｄ 。程 ，不能随意增加碳水化合物精料的用量。