全 文 ：围充血程度的工作由不知道动物分组情况的其他实验者完
成。
2.3　评定标准　溃疡周围充血程度:Ⅰ °:充血直径 <1
mm;Ⅱ°:充血直径 1 ～ 2 mm;Ⅲ°:充血直径 2 ～ 4mm;Ⅳ°:充
血直径 >4 mm。
2.4　统计学处理　将溃疡面积和愈合天数用 t检验 , 等级
资料用秩和检验进行分析。
3　结果
3.1　云南白药对醋酸所致豚鼠口腔溃疡的治疗作用　结果
见表 1及表 2。云南白药显著缩小了醋酸黏膜下注射致豚
鼠口腔溃疡的面积并明显缩短愈合时间。经 t检验 ,药后 5
d云南白药组和生理盐水组溃疡面积有显著性差异(P<
0.01);两组的溃疡愈合时间也有显著性差异(P<0.01)。经
秩和检验 , 云南白药组溃疡周围充血程度与生理盐水组比较
有显著性差异(P<0.01)。
表 1　 云南白药对豚鼠口腔溃疡面积及
愈合时间的影响( x±s)
组别 动物数/只
药前面积
/mm2
药后 5d
面积 /mm2
愈合时间
/d
生理盐水 6 21.7±15.4 12.8±5.1 8.5±0.6
云南白药 6 21.8±9.3 4.5±1.0＊＊ 6.3±0.5＊＊
　　与生理盐水组比较 , ＊＊P<0.01
表 2　云南白药对豚鼠口腔溃疡周围充血的影响( x±s)
组别 动物数/只
给药前充
血程度 /例
Ⅳ°
药后 5 d充血程度 /例
Ⅰ ° Ⅱ° Ⅲ° Ⅳ°
生理盐水 6 6 0 0 1 5
云南白药 6 6 4 2 0 0
3.2　云南白药对大耳白兔口腔溃疡的治疗作用　结果见表
3及表 4。云南白药显著缩小了苯酚烧灼致大耳白兔口腔溃
疡的面积并明显缩短愈合时间。经 t检验 , 药后 5 d云南白
药组溃疡面积与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05);
两组的溃疡愈合时间也有显著性差异(P<0.01)。经秩和
检验 , 云南白药组溃疡周围充血程度与生理盐水组比较有显
著性差异(P<0.01)。
表 3　 云南白药对大耳白兔口腔溃疡面积及
愈合时间的影响( x±s)
组别 动物数/只
药前面积
/mm2
药后 5d
面积 /mm2
愈合时间
/d
生理盐水 6 88.67±45.40 15.67±6.12 7.00±0.63
云南白药 6 81.67±27.75 7.00±5.59＊ 6.00±0.63＊＊
　　与生理盐水组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
表 4　 云南白药对大耳白兔口腔溃疡周围
充血的影响( x±s)
组别 动物数/只
给药前充
血程度 /例
Ⅳ°
药后 5d充血程度 /例
Ⅰ ° Ⅱ° Ⅲ° Ⅳ°
生理盐水 6 6 1 0 1 4
云南白药 6 6 6 0 0 0
4　讨论
实验应用两种溃疡模型评价了云南白药的抗溃疡作用。
实验表明 ,云南白药有显著的缩小溃疡面积和减轻溃疡周围
充血程度的作用 , 这可能与其活血化瘀 , 消肿止痛 , 舒张血
管 ,改善溃疡局部的血液循环的作用有关。本文的结果与先
前的报道一致 [ 4 , 5] , 为临床的广泛使用提供依据 , 但其确切
的抗溃疡机制还有待进一步研究。
参考文献:
[ 1] 　施顺清 ,陈金平 ,张林碧 , 等.7702止血药的实验研究.中药通
报 , 1983, 8(2):35-37.
[ 2] 　李健民 ,张玉先 ,张洪英 ,等.云南白药治疗新生儿脐炎 75例.
中国中西医结合杂志 , 1993, 13(2):118.
[ 3] 　俞豪民.云南白药对溃疡性结肠炎的临床疗效观察报告 [ J].
中医杂志 , 1959, (6):59-61.
[ 4] 　向增新 ,李冬云.云南白药糊剂治疗复发性口疮疗效观察 [ J].
华西口腔医学杂志 , 1998, 16(4):351.
[ 5] 　李冬云.中医药治疗口腔黏膜溃疡 34例 [ J].实用中西医结合
杂志 , 1996, 9(2):104.
比色法测定三七花中总皂苷的含量
沈　岚 1 , 　冯　怡 1 , 　徐德生2 , 　苑素云 3 , 　周　端 3
(1.上海中医药大学 ,上海 201203;2.上海中医药大学附属曙光医院 ,上海 200021;3.上海中医药大学附属
龙华医院 ,上海 200230)
收稿日期:2006-07-19
作者简介:沈　岚(1975～ ),女 ,博士 ,副教授 ,研究方向:中药活性成分 、新剂型新技术 ,电话:021-51322211, E-mail:alansusu@sina.com。
关键词:三七花;总皂苷;比色法
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2007)09-1368-02
1368
2007年 9月
第 29卷　第 9期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
September2007
Vol.29　No.9
　　三七花是传统名贵中药五加科植物三七的花蕾 ,盛产于
我国西部云南 、广西 、西藏等地 ,作为高血压病人常用的保健
和治疗用药 , 历时已久 ,效果颇佳。三七花蕾中含有皂苷 、多
糖 、黄酮 、氨基酸 、挥发油 [ 1]等多种化学成分 , 经前期药效研
究表明 , 其抗高血压的有效部位为总皂苷。有报道显示 [ 2] ,
在三七花蕾中分得 10种化合物 , 经化学和光谱方法确定为
三七皂苷 、绞股蓝皂苷-Ⅸ 、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rc和人
参皂苷 Rb3等 。目前 , 关于三七的研究大都集中在其块根 ,
块根也是现阶段三七产业的基本原料药物。三七花作为民
间治疗高血压 、咽痛音哑 、津伤口渴等症的药材 ,由于使用区
域受限 , 使其药材资源的经济价值未被充分利用 , 因此研究
也较为薄弱。本研究采用比色法对三七花中总皂苷的含量
进行测定 , 以期为其质量标准的建立打下基础。
1　仪器与试药
无水乙醇 、氯仿 、石油醚(30℃ ～ 60℃)、甲醇 、冰醋酸 、
香兰素(中国医药集团上海化学试剂公司 , AR级);高氯酸
(桃浦化工厂 , AR级);人参皂苷 Rg1对照品 、槲皮素对照
品 、葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所);D101型大孔
吸附树脂(上海洋禾科贸发展有限公司 ,批号:040310);三七
花药材(云南文山 、广西靖西)
棱光 752N紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有
限公司)
2　三七花中总皂苷的含量测定
2.1　供试品溶液的制备　取三七花药材粉末(过 3号筛)
约 0.2 g,精密称定 , 置索氏提取器中 , 加氯仿 60 mL, 加热回
流 1 h。弃去氯仿液 ,药粉挥去氯仿 ,加甲醇 60 mL, 加热回流
3h。提取液挥干, 加水 10mL溶解 , 加石油醚(30℃ ～ 60℃)
提取 2次, 每次 10 mL。弃去醚液 , 水液通过 D101型大孔吸附
树脂柱(内径 1.5cm, 长 15cm), 以水 50 mL洗脱 , 弃去水液 ,
再用 20 乙醇 50 mL洗脱 ,弃去 20 乙醇洗脱液 ,继用 80
乙醇 80 mL洗脱 , 收集洗脱液 70 mL, 蒸干 , 残渣加甲醇溶解
并定量转移至 10 mL量瓶中 ,加甲醇至刻度 , 摇匀 ,即得。
2.2　吸收波长的确定　精密吸取人参皂苷 Rg1对照品溶
液 、槲皮素对照品溶液 、葡萄糖对照品溶液及供试品溶液适
量 ,置具塞磨口试管中 , 挥干甲醇后 , 加入新鲜配制的 5 香
兰素-冰醋酸试剂 0.2mL,高氯酸 0.8 mL, 于 60℃水浴加热
15 min,冰水浴冷却后 , 加冰醋酸 5 mL摇匀 ,于紫外分光光
度计上扫描。人参皂苷 Rg1对照品溶液 、供试品溶液于 560
nm处有一明显吸收峰 , 且槲皮素对照品溶液 、葡萄糖对照品
溶液在此波长下无干扰。 因此 , 选择 560 nm为三七花总皂
苷的吸收波长。
2.3　标准曲线的制备　精密称取人参皂苷 Rg1对照品一定
量 ,用甲醇配制成浓度为 0.994 mg/mL的对照品溶液。精密
吸取 20, 40, 60, 80, 100μL于具塞磨口试管中 ,挥干甲醇后 , 加
入新鲜配制的 5 香兰素-冰醋酸试剂 0.2 mL, 高氯酸 0.8
mL, 于 60℃水浴加热 15 min, 冰水浴冷却后 , 加冰醋酸 5 mL
摇匀, 于 560nm处测定吸收值。以吸光度 A为横轴 ,浓度 C
为纵轴 ,进行线性回归, 得标准曲线回归方程 C=29.444 7A-
2.426 8, r=0.999 9, 线性范围为 3.313 3～ 16.566 7μg/mL。
2.4　稳定性试验　取供试品溶液 , 每隔一定时间测定吸光
度 ,共测定 6次 , 计算 RSD为 0.33 ,结果表明 ,总皂苷在显
色 2h内吸收值基本稳定。
2.5　精密度试验　精密吸取同一浓度人参皂苷 Rg1对照品
溶液连续测定 5次 ,结果 RSD为 1.0 。
2.6　重复性试验　取相同制法制备的同一批次 5份样品进
行测定 ,结果 RSD为 3.30 , 表明重现性良好。
2.7　加样回收率试验　在已知含量的样品中加入一定量的
人参皂苷 Rg1对照品 ,按 2.1项操作制备供试品溶液 , 按标
准曲线制备项下操作测定吸收值 ,计算总皂苷含量 , 回收率
结果见表 1。
表 1　 加样回收率实验结果
样品号 样品中总皂苷量 /mg
加入标
品量 /mg
测得总皂
苷量 /mg
回收率
/
平均回收率
/
RSD
/
1 0.258 1 0.129 0 0.380 8 95.1
2 0.250 0 0.129 0 0.380 6 101.2
3 0.258 1 0.129 0 0.385 0 98.4
100.6 3.8
4 0.250 0 0.258 1 0.524 2 106.2
5 0.154 9 0.258 1 0.413 3 100.1
6 0.150 0 0.258 1 0.415 3 102.8
2.8　三七花药材含量测定　精密吸取供试品溶液适量 , 置
具塞试管中 , 按照标准曲线制备项下操作 ,测定不同产地三
七花总皂苷含量。结果见表 2。
表 2　 三七花药材含量测定结果
样品号 总皂苷含量 /mg/g生药 x±s
云南文山 1 131.564 2
云南文山 2 133.299 5 132.334 7±0.883 8
云南文山 3 132.140 3
广西靖西 1 115.121 4
广西靖西 2 110.865 9 110.983 7±4.080 1
广西靖西 3 106.963 7
3　讨论
3.1　以葡萄糖代表多糖 , 以槲皮素代表黄酮 , 与人参皂苷
Rg1、供试品溶液一起考察三七花总皂苷的测定波长 ,可进一
步排除糖 、黄酮等组分对总皂苷测定的干扰 , 更科学地建立
测定方法。
3.2　从研究结果看 , 云南文山的三七花总皂苷含量高于广
西靖西 ,表明不同产地的药材有一定差异 , 选材时必须加以
考虑。
3.3　由于三七花中所含组分较多 , 易对测定造成干扰 , 故在
供试品制备中选用 D
101
型大孔吸附树脂 , 先用水洗去多糖 ,
1369
2007年 9月
第 29卷　第 9期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
September2007
Vol.29　No.9
再用 20 乙醇洗去黄酮类物质 ,最后收集 80 乙醇洗脱液 ,
结果表明可起到较好的除杂作用。
参考文献:
[ 1] 　胥　聪 ,魏均娴.三七花挥发油的化学成分研究 [ J].华西药学
杂志 , 1992, 7(2):79-82.
[ 2] 　左国营 ,魏均娴 ,杜元冲 ,等.三七花蕾皂苷成分的研究 [ J] .天
然产物研究与开发 , 1991, 3(4):24-30.
抗湿热片对热损伤大鼠下丘脑 α-MSH的影响
徐　刚 , 　张　冰＊
(广东省顺德职业技术学院医学系 ,广东 顺德 528333)
收稿日期:2006-10-15
基金项目:军队科研基金面上课题 98D024。
作者简介:徐　刚(1964～ ),男 ,医学博士 ,教授 ,硕士生导师。
＊北京中医药大学中药学院
关键词:抗湿热片;大鼠;热损伤;促黑色细胞刺激素
中图分类号:R285.6　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2007)09-1370-02
　　抗湿热片由人参 、石膏 、知母等药物组成 ,经药理研究证
明具有解热 、抗炎 、免疫调节等作用 ,而且对湿热性热损伤小
鼠死亡具有保护作用 [ 1] 。本实验我们采用人工气候箱造成
高温高湿(湿热)环境 , 制成湿热性热损伤动物模型 , 进一步
观察抗湿热片对湿热性热损伤大鼠体温调节的保护作用 , 并
从大鼠体温调节中枢神经介质促黑色细胞刺激素(α-mela-
nocytestimulatinghormone, α-MSH)方面探讨药物的作用机
制 , 为研制开发一种防治湿热性热损伤的中药制剂提供资
料。
1　实验材料
动物:Wistar大鼠 , 体重 150 ～ 160 g, ♀♂兼用 , 第一军
医大学实验动物中心提供 , 合格证号:粤检证字第 97A037
号;药物:抗湿热片 , 由广州军区药理药剂研究中心提供:阿
司匹林 , 湖南洞庭湖制药厂生产 , 批号:020411。仪器:LRH-
250-GS人工气候箱 , 广东省医疗器械厂生产;SN-682放射免
疫 γ计数器 , 中国科学院上海原子核研究所日环仪器厂生
产。药盒:125I-促黑色细胞刺激素放免药盒 , 第二军医大学
神经生物学教研室提供。
2　实验方法
购进动物后检疫 3 d,选取体温基本一致的大鼠 , 测肛温
2次 ,剔除 2次体温波动 >0.3℃者 , 取其平均值为正常体
温 , 按体重随机分为 4组 , 每组 10只 , 称重标记。 抗湿热片
组大鼠灌服 KSRP0.65 g/kg, 阿司匹林组大鼠 ig阿司匹林
0.1 g/kg, 模型组大鼠予等量饮用水 , 正常对照组大鼠不作
处理。给药或饮用水 90min后将大鼠置于人工气候箱内造
模 , 调节温度至 39℃,调节相对湿度至 83 (人工气候箱条
件:干温:39℃, 湿温 36℃,相对湿度 83 )。造模 10 min后
取出大鼠 ,测肛温 , 于安静状态下迅速断头 , 于 1 min内取出
全脑 ,立即将全脑置于沸生理盐水中煮 5 min。 取下丘脑组
织 30 mg左右 , 置入匀浆器中 , 加 1 molHCl溶液 0.5 mL,充
分匀浆 ,放置 100 min后再加入 1molNaOH溶液 0.5 mL中
和 ,离心 , 4 000 r/min10 min, 取上清液 ,测定大鼠下丘脑组
织中 α-MSH含量 ,具体操作步骤按药盒说明书进行 , α-MSH
含量以每 mg脑组织湿重表示。
3　实验结果
模型组大鼠体温显著升高 ,与正常对照组之间的差别有
非常显著意义。阿司匹林组大鼠体温及下丘脑组织中 α-
MSH含量与模型组比较无显著性差异。 KSRP组大鼠体温
明显低于模型组 , 其差别有非常显著意义。 KSRP组大鼠体
温调节中枢 α-MSH含量高于模型组 , 其差别有显著意义。
具体实验结果见表 1。
4　讨论
湿热(高温高湿)是我国南方夏季气候的主要特征 , 也
是某些高温高湿车间的环境特点 ,一般而言 , 机体对环境气
象条件的变化有一定的适应能力 ,但这种适应是有限的 , 不
同个体之间存在很大的差异。若湿热气象环境的变化超过
了机体的适应能力或个体适应能力下降 , 均可导致热损伤
(heatinjury)[ 2] 。在湿热条件下作业 、工作 、训练 、作战 , 高温
高湿就成为了一种重要的物理致病因素 , 湿热性热损伤即成
为一类常见病 、多发病 , 成为影响工作能力 、作战能力的一个
重要因素。因此 ,研制开发防治湿热性热损伤的药物 , 对于
有关劳动卫生学研究 , 对于热损伤疾病的防治 , 对于我国南
方和高温高湿车间的卫生保健工作 , 都具有十分重要的意
义。
1370
2007年 9月
第 29卷　第 9期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
September2007
Vol.29　No.9