全 文 ：Central South Pharmacy. August 2014, Vol. 12 No. 8　中南药学 2014 年 8 月 第 12 卷 第 8 期
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磷酸溶液为流动相梯度洗脱。同时也考察了不同柱温（25、
30、35 ℃）对保留时间、柱效、分离系数影响，最终选
定柱温为 30 ℃。
4.2　所测成分选定依据
　　（－）-丁香树脂酚 -4-O-β-D-呋喃芹糖基 -（1→2）-β-D-
吡喃葡萄糖苷和槲皮苷为合欢皮的主要成分，女贞苷和
特女贞苷为女贞子的专属性成分，本文对该 4个组分进
行含量测定研究，能有效的控制夜宁合剂的质量。
参考文献
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（收稿日期：2014-05-19；修回日期：2014-06-20）
表 2　含量测定结果 (x±s，n＝ 3)
Tab 2 Content determination (x±s，n＝ 3)
批 号
（batch No.）
（－）-丁香树脂酚 -4-O-β-D-呋喃芹糖基 -（1→ 2）-
β-D-吡喃葡萄糖苷 [（－）-syringaresnol -4-O-β-D-
apiofuranosyl-（1→ 2）-β-D-glucopyranoside]/mg·mL－１
女贞苷
（ligustrofl avone）
/mg·mL－１
特女贞苷
（specnuezhenide）
/mg·mL－１
槲皮苷
（quercetin-3-rhamnoside）
/mg·mL－１
131204 0.053±0.001 0.133±0.001 0.169±0.002 0.674±0.004
131206 0.049±0.001 0.142±0.001 0.181±0.001 0.652±0.007
131207 0.061±0.001 0.145±0.001 0.175±0.002 0.679±0.005
高效液相色谱法同时测定珠子参中 4种化学成分的含量
许苗苗 1，宋蓓 1，杨新杰 1，王薇 1，崔九成 1，黄荣华 2，宋小妹 1*（1. 陕西中医学院，陕西 咸阳 712046；2.
铜川市食品药品检验所，陕西 铜川 727000）
摘要：目的　建立不同产地加工珠子参中人参皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状三七苷 R1和去葡萄糖竹节参
皂苷Ⅳ a 4种化学成分的含量测定方法。方法　采用 Kromasil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱；以 0.2%
的磷酸溶液和乙腈进行梯度洗脱；柱温 25 ℃；流速 1 mL·min－１；检测波长 203 nm。结果　在 HPLC法中，
人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a的线性范围分别是：0.81～ 16.20 μg（r
＝ 0.999 9）、0.46～ 9.20 μg（r＝ 1.000 0）、0.38～ 7.60 μg（r＝ 0.999 9）、0.16～ 3.20 μg （r＝ 0.999 9）；
平均回收率分别为 100.3%、99.1%、100.1%、95.8%，RSD分别为 2.6%、2.3%、2.5%、0.7%。结论　该方法
专属性强，重复性好，可用于不同加工方法珠子参的质量控制。
关键词：珠子参；高效液相色谱法；人参皂苷 Ro；竹节参皂苷Ⅳ a；姜状三七苷 R1；去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2014)08-0796-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2014.08.021
HPLC simultaneous determination of 4 chemical components in
Panacis Majoris Rhizoma
基金项目 :陕西省科技统筹创新工程项目（No.2011KTCQ03-02）；国家自然科学基金项目（No.81102805/H2804）；陕西省教育厅专
项科研计划项目（No.2010JK490）。
作者简介： 许苗苗，女，在读研究生，主要从事中草药有效成分的研究，Tel：18700016521，E-mail：459750487@qq.com　＊通讯作者：
宋小妹，女，博士，教授，主要从事中药药效物质基础及中药炮制研究，Tel：（029）38185165，E-mail：songxiaom@126.com
中南药学 2014 年 8 月 第 12 卷 第 8 期　Central South Pharmacy. August 2014, Vol. 12 No. 8
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XU Miao-miao1, SONG Bei1, YANG Xin-jie1, WANG Wei1, CUI Jiu-cheng1, HUANG Rong-hua2, SONG Xiao-mei1*
(1. Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine, Xianyang Shaanxi 712046; 2. Tongchuan City Food and
Drug Inspection, Tongchuan Shaanxi 727000)
Abstract: Objective To establish an HPLC method to simultaneously determinate 4 chemical components of
ginsenoside Ro, chikusetsusaponin Ⅳ a, zingibroside R1 and deglucose chikusetsusaponin Ⅳ a in Panacis Majoris
Rhizoma. Methods The chromatograhic separation was Kromasil C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm); the column
temperature was maintained at 25 ℃ ; A linear elution of 0.2% phosphoric acid aqueous solution-acetonitrile was adopted
at 1 mL·min － 1. The. UV detection wavelength was 203 nm. Results Ginsenoside Ro, chikusetsusaponin Ⅳ a,
zingibroside R1 and deglucose chikusetsusaponinⅣ a had good linearity at 0.81－ 16.20 μg (r＝ 0.999 9), 0.46－
9.20 μg (r＝ 1.000 0), 0.38－ 7.60 μg (r＝ 0.999 9) and 0.16－ 3.20 μg (r＝ 0.999 9), respectively. The average
recoveries were 100.3% (2.6%), 99.1% (2.3%), 100.1% (2.5%) and 95.8% (0.7%), respectively. Conclusion This
method is simple, accurate and reproduceable, which can be used for the quality control of Panacis Majoris Rhizoma.
Key words: Panacis Majoris Rhizoma; HPLC; ginsenoside Ro; chikusetsusaponin Ⅳ a; zingibroside R1; deglucose
chikusetsusaponinⅣ a
　　珠子参为五加科人参属植物珠子参 Panax japonicus
C.A. Mey. var. major（Burk.）C.Y. Wu et K. M. Feng 或羽叶
三七 Panax japonicus C.A. Mey. var. bipinnatifi dus（Seem.）
C. Y. Wu et K. M. Feng 的干燥根茎，具有补肺气、养阴、
活络、止血功效 [1]。珠子参的加工方法 [2-5]，《本草从新》
记载：“珠儿参，味厚体重，其性 大约与西洋人参相同，
不过清热之功；热去则火不刑金而肺脏受益，非真能补也。
出闽中，须多去皮，再用滚水泡，以其苦劣之味在外皮，
近中心则苦味减而稍甘”[6]。目前关于珠子参的产地加工
方法，主要有晒干，蒸制。
　　目前各地对于不同加工品的质量也只是按照 2010
年版中国药典一部中竹节参皂苷Ⅳ a单个指标来鉴定，
不够全面、科学。故为了进一步控制珠子参的质量，本
文拟在珠子参化学成分分离分析研究的基础上 [7-9]，采用
HPLC法首次对不同加工方法的珠子参药材中人参皂苷
Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状三七苷 R1和去葡萄糖竹节参
皂苷Ⅳ a 4个指标成分进行分析，结果表明本法简便、专
属性强、重复性好，可为更好地控制不同加工方法的珠
子参质量提供科学依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器
　　Waters2695 高效液相色谱仪（美国沃特斯）；
2996紫外检测器（美国沃特斯）；Empower色谱工作
站；GB204型电子天平（瑞士梅特勒 -托利多，精度：
0.1 mg）；SB-3200D型超声清洗机（宁波新芝生物科技
股份有限公司）。
1.2　试药
　　人参皂苷 Ro对照品、竹节参皂苷Ⅳ a对照品、
姜状三七苷 R1对照品、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a对照
品（均为本实验室自制，面积归一化法测定纯度均＞
98%）。珠子参药材（采自陕西眉县槐芽镇，批号：
20130821），经陕西中医学院药学院中药标本馆王继涛
高级实验师鉴定为珠子参 [Panax japonicus C.A.Mey.var.
major（Buck.）C.Y.Wu et K.M.Feng] 的根茎；色谱乙腈、
色谱甲醇（Fisher公司）；其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　供试品溶液的制备
　　取珠子参药材（批号：20130821）11份，自然干燥1份，
其余 10份置蒸锅中，分别蒸制 1、2、3、4、5、6、7、8、9、
10 h后低温烘干，粉碎，精密称取各药材粉末 0.1 g，加
60%乙醇 25 mL超声提取 40 min，0.45 μm微孔滤膜滤过，
取续滤液，即得。
2.2　混合对照品溶液的制备
　　取人参皂苷 Ro对照品 8.1 mg、竹节参皂苷Ⅳ a对照
品 4.6 mg、姜状三七苷 R1对照品 3.8 mg、去葡萄糖竹节
参皂苷Ⅳ a 对照品 1.6 mg，精密称定，加甲醇溶解并定
容至 10 mL量瓶，摇匀即得。
2.3　色谱条件
　　色谱柱为 Accurasil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；
柱温为 25 ℃；流动相为乙腈（A）-0.2% 磷酸溶液
（B），梯度洗脱 0 ～ 10 min（30%A）、10 ～ 20 min
（30% ～ 45%A）、20 ～ 30 min（45% ～ 65%A）、
30～ 35 min（65%～ 75%A）、35～ 40 min（75%A）；
流速为 1 mL·min－１；检测波长为 203 nm；进样量为
10 μL；混合对照品溶液、供试品溶液见图 1。
2.4　线性关系考察
　　精密吸取“2.2”项下混合对照品溶液 1、5、10、
15、20 μL，按“2.3”项下色谱条件测定峰面积，以进样
量为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），进行线性回归，
得回归方程。人参皂苷 Ro y＝ 2.59×105 x－ 1.37×105，
r＝ 0.999 9，在 0.81～ 16.20 μg与峰面积呈良好的线性
关系；竹节参皂苷Ⅳ a y＝ 3.24×105 x－ 9.50×104，r＝
1.000 0，在 0.46～ 9.20 μg与峰面积呈良好的线性关系；
姜状三七苷 R1 y＝ 2.94×105 x－ 7.16×104，r＝ 0.999 9，
在 0.38～ 7.60 μg与峰面积呈良好的线性关系；去葡萄糖
竹节参皂苷Ⅳ a y＝ 3.45×105 x－ 3.79×104，r＝ 0.999 9，
在 0.16～ 3.20 μg与峰面积呈良好的线性关系。
2.5　精密度试验
　　精密吸取混合对照品溶液 10 μL，重复进样 6次，测
定峰面积，计算得人参皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状
三七苷R1、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a的 RSD分别为 0.7%、
0.4%、0.3%、0.9%，RSD均＜ 3%，结果表明，精密度良好。
2.6　重复性试验
　　精密称取同一批样品（蒸制 0 h）6份，按“2.1”项
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表 1　回收试验结果 (n＝ 6)
Tab 1　Recovery (n＝ 6)
成分
（component）
取样量（sample
weight）/mg
含量（sample
content）/mg
加入量（added
amonut）/mg
测定量（detected
amount）/mg
回收率
（recovery)/%
平均回收率（average
recovery）/%
RSD
/%
人参皂苷 Ro 10.6 2.215 3.78 6.054 102.7 100.3 2.6
12.1 2.589 3.61 6.091 95.8
14.1 3.102 3.86 6.905 98.2
9.8 2.087 3.91 6.013 100.8
11.5 2.392 3.85 6.297 102.3
10.5 2.226 3.71 5.984 102.2
竹节参皂苷Ⅳ a 10.6 0.529 2.38 2.917 101.5 99.1 2.3
12.1 0.609 2.11 2.699 96.7
14.1 0.706 2.31 3.013 99.6
9.8 0.487 2.19 2.657 95.9
11.5 0.572 2.68 3.260 101.4
10.5 0.527 2.29 2.817 99.8
姜状三七苷 R1 10.6 0.052 0.74 0.792 101.9 100.1 2.5
12.1 0.063 0.71 0.773 98.4
14.1 0.067 0.65 0.715 97.0
9.8 0.049 0.79 0.839 97.9
11.5 0.058 0.76 0.820 103.4
10.5 0.051 0.72 0.772 101.9
去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a 10.6 0.020 0.58 0.599 95.0 95.8 0.7
12.1 0.026 0.68 0.706 96.2
14.1 0.032 0.52 0.550 96.9
9.8 0.027 0.56 0.587 96.3
11.5 0.024 0.62 0.643 95.8
10.5 0.021 0.57 0.590 95.2
下方法制备，吸取 10 μL进样，测定峰面积，计算得人
参皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状三七苷 R1、去葡萄糖
竹节参皂苷Ⅳ a的 RSD分别为 3.1%、2.2%、2.6%、3.1%。
2.7　稳定性试验
　　取供试品（蒸制 0 h）溶液，分别于配制后 0、2、4、
8、14、18、24 h进样 10 μL，测定峰面积，计算得人参
皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状三七苷 R1、去葡萄糖竹
节参皂苷Ⅳ a的 RSD分别为 0.6%、0.7%、0.7%、1.7%。
结果表明，供试品溶液在 24 h内稳定性良好。
2.8　回收试验
　　精密称取已知含量的样品（蒸制0 h）约0.01 g，共6份，
分别加适量对照品，按“2.1”项下方法制备供试品，按“2.3”
项下色谱条件进样分析，计算回收率。结果见表 1，表明
本方法回收率良好。
图 1　供试品及对照品溶液高效液相色谱图
Fig 1　Chromatogram of sample and control
A.混合对照品（mixed controls）；B.珠子参样品蒸制 0 h（sample drying without staming） ；C.珠子参样品蒸制 2 h（sample drying after
staming 2 h）；1.人参皂苷 Ro（ginsenoside Ro）；2.竹节参皂 苷Ⅳ a（chikusetsusaponin Ⅳ a）；3.姜状三七苷 R1（zingibroside R1）；4.去
葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a（deglucose chikusetsusaponin Ⅳ a）
A 1
2
3
4
1 1
2
3 4
2
B C
t/min t/min t/min
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40
2.9　不同样品中 4种化学成分的含量测定
　　精密称取不同蒸制时间珠子参药材粗粉 0.1 g，每组
重复 5次，按“2.1”项下方法制备供试品，按“2.3”项
下条件进样分析，测定峰面积，计算含量，结果见表 2。
3　讨论
3.1　测定指标选择
　　2010年版中国药典一部中珠子参规定为竹节参皂苷
Ⅳ a的含量应≥ 3%，本研究测得的不同加工时间珠子参
中竹节参皂苷Ⅳ a的含量均符合规定。然而从所得色谱
图可知人参皂苷Ro峰最高，再加上随着蒸制时间的延长，
珠子参药材中的皂苷成分发生变化，单纯选择竹节参皂
苷Ⅳ a作为珠子参的评价指标不够完善，故应该选择人
参皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a、姜状三七苷 R1、去葡萄糖
竹节参皂苷Ⅳ a 4个指标控制珠子参的质量。
中南药学 2014 年 8 月 第 12 卷 第 8 期　Central South Pharmacy. August 2014, Vol. 12 No. 8
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表 2　不同蒸制时间珠子参皂苷含量测定结果 (n＝ 5)
Tab 2　Content determination of Panacis Majoris Rhizoma at different steaming time (n＝ 5)
蒸制时间
（time）/h
取样量
（sample
weight）/g
含量（content）/%
人参皂苷 Ro
（ginsenoside Ro）
竹节参皂苷Ⅳ a
（chikusetsusaponinⅣa）
姜状三七苷 R1
（zingibroside R1）
去葡萄糖竹节参皂Ⅳ a（deglucose
chikusetsusaponinⅣ a）
总皂苷（total
saponins）
0 0.104 5 21.50 5.01 0.52 0.20 27.23
1 0.112 2 21.79 5.36 1.08 0.49 28.72
2 0.104 9 23.15 5.71 1.55 0.67 31.08
3 0.106 4 20.76 5.16 1.84 0.86 28.62
4 0.097 3 20.73 5.25 2.19 1.00 29.17
5 0.102 6 19.90 5.21 2.48 1.21 28.80
6 0.105 3 19.54 5.07 2.70 1.32 28.63
7 0.102 6 19.50 4.99 3.29 1.58 29.36
8 0.099 0 19.43 5.00 3.78 1.83 30.04
9 0.115 7 17.91 4.49 3.64 1.72 27.76
10 0.108 8 17.84 4.51 4.25 2.04 28.64
3.2　含量测定结果分析
　　随不同加工方法中皂苷成分变化规律可知，姜状
三七苷 R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳ a分别为人参皂苷 Ro
和竹节参皂苷Ⅳ a 28位脱糖的水解产物。又有前人研究
证明，齐墩果酸型皂苷糖链结构和连接位置的不同与其
药理活性有着密切联系，齐墩果酸型皂苷具有多种显著
的药理活性，如在抗肿瘤、降血糖、保肝活性和抗菌抗
炎等方面比游离的苷元更为明显 [10-11]。各对产地珠子参
产地加工方法统一规定有一定意义。
3.3　小结
　　采用HPLC法测定了珠子参中 4种化学成分的含量，
经方法学考察，该方法线性关系、精密度、重复性和稳
定性均良好，结果表明本法具重复性好，精密度高，样
品处理简便，专属性强的优点，为不同产地加工珠子参
的质量控制提供参考依据。
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HPLC-ELSD法测定香菊胶囊中黄芪甲苷含量
蓝献泉，刘旺培，陈华龙（韶关市食品药品检验所，广东 韶关 512028）
摘要：目的　建立 HPLC- ELSD 法测定香菊胶囊中黄芪甲苷的含量。方法　色谱柱：SUPELCO Discovery C18
（25 cm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈 -水（32∶ 68）；流速：1.0 mL·min－１；柱温：30 ℃；ELSD参
数：漂移管温度为 45 ℃；氮气吹扫流速为 490 kPa。采用外标二点法对数方程计算含量。结果　黄芪甲苷在
0.52～ 10.40 μg进样量对数值与峰面积对数值呈良好的线性关系，回归方程：logY＝ 1.622 logX＋ 4.503，r
＝ 0.999 4（n＝ 5）；低、中、高 3个浓度平均回收率均＞ 95%，RSD均＜ 1.6%（n＝ 3）。结论　本方法
的重复性好、稳定性强、可靠准确，为控制香菊胶囊的质量提供基础。
关键词：黄芪甲苷；香菊胶囊；HPLC-ELSD
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2014)08-0799-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2014.08.022
作者简介：蓝献泉，男，主管药师，主要从事药品检验工作，Tel：13922591856，E-mail：179089973@qq.com