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三七及三七叶的对比研究



全 文 :三七及三七叶的对比研究
董政起
(黑龙江中医药大学 2001级 ,黑龙江 哈尔滨 150001)
  摘 要:目的:对三七及三七叶所含皂苷类成分进行对比研究 。方法:采用薄层色谱法和高效液相色
谱法对二者所含皂苷类有效成分的类型进行了综合比较 ,采用高效液相色谱法对二者人参皂苷 Rb1含量
亦进行了比较 。结果:三七叶所含皂苷类成分以人参二醇型为主 ,而三七所含皂苷类成分则是两种类型
(人参二醇型与人参三醇型)兼顾 ,且三七中人参皂苷 Rb1含量明显高于三七叶。结论:三七叶在某些方面
可作为三七的替代品应用于临床 。
  关键词:三七;三七叶;皂苷类成分;对比研究
  中图分类号:R282.5  文献标识码:B  文章编号:1007-4813(2005)03-0035-02
作者简介:董政起(1983~  ),男 , 本科在读。研究方向:中药学。
  三七为五加科植物三七 Panax notoginseng
(Burk.)F.H.chen.的干燥根 ,具有散瘀止血 、消肿定
痛 、补益气血等功效 ,是传统的名贵中药材 , 资源有
限。三七叶是三七的干燥茎叶 ,长期以来一直作为三
七的副产品被废弃 ,亦含有与三七根类似的皂苷类有
效成分。近年来为了充分利用三七资源 ,三七叶已作
为商品流通于医药市场。虽然对三七或三七叶所含
化学成分有很多单独研究报道 ,但还没有文献对其二
者进行详细比较 。本文运用薄层色谱和高效液相色
谱方法对三七和三七叶所含皂苷类有效成分的种类
及含量进行了综合比较 ,为临床上更有效的应用三七
和三七叶提供科学依据。
1 仪器与试药
仪器:AEL-200 电子天平;LC-2010A高效液相色
谱仪(岛津)。对照品:人参皂苷Rg1 、人参皂苷Rb1和
三七皂苷 R1 对照品均购自中国药品生物制品检定
所 ,系供含量测定用 ,批号分别为 0703-200117 ,0704-
200012 ,745-8902。试药:硅胶 G预制板(青岛海洋化
工厂),乙腈为色谱纯 ,其它试剂均为分析纯。药材:
三七及三七叶均购自云南省文山县 。
2 方法与结果
2.1 两种药材所含皂苷类有效成分类型的对比研究
2.1.1 薄层对比研究 取两种药材粗粉各 1g ,分别
加甲醇 30ml超声提取 20min ,滤过 ,滤液蒸干 ,残渣加
甲醇适量使溶解 ,并定量转移至 10ml量瓶中 ,加甲醇
稀释至刻度 , 摇匀 。取此溶液 1ml ,蒸干 , 残渣加水
10ml微热使溶解 ,滤过 ,滤液移置分液漏斗中 ,用水
饱和正丁醇振摇提取2次 ,每次10ml ,合并正丁醇液 ,
以正丁醇饱和的氨试液洗 2次 ,每次 10ml ,弃去氨试
液 ,正丁醇层再以正丁醇饱和的水 10ml洗 1次 ,合并
正丁醇液 ,蒸干 ,残渣加甲醇 1ml使溶解 ,作为供试品
溶液。另取人参皂苷 Rb1、Rg1 和三七皂苷 R1 对照
品 ,分别加甲醇制成每 1ml含 2mg 的溶液 ,作为对照
品溶液 。照薄层色谱法(参照中国药典 2005 年版有
关内容 ,下同)试验 ,吸取上述 5种溶液各 4μl ,分别点
于同一硅胶 G 预制薄层板上 ,以氯仿-甲醇-水(65:
35:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂 ,置冰箱冷
藏层内展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 10%硫酸乙醇溶液 ,热
风吹至斑点显色清晰 。结果图 1。
图1 两种药材皂苷类成分 TLC 对比研究图
从图1中可以看到 ,供试品色谱中 ,在与人参皂
苷 Rb1、人参皂苷 Rg1 ,三七皂苷 R1 色谱相应位置处 ,
三七有明显斑点对应 ,而三七叶仅在与人参皂苷 Rb1
相应位置处有明显斑点对应 ,在与三七皂苷 R1 相应
位置处显不明显的淡紫色斑点 ,在与人参皂苷 Rg1 相
应位置处无斑点对应 。此外 ,三七叶在人参皂苷 Rb1
相应位置下部尚有一明显斑点 ,这说明三七叶所含皂
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第21卷第3期
2005 年 9月
长 春 中 医 学 院 学 报
Academic Periodical of Changchun College of Traditional Chinese Medicine
Vo1.21
3 , 2005
DOI :10.13463/j.cnki.cczyy.2005.03.029
苷类成分以人参二醇型为主 ,而三七所含皂苷类成分
则是两种类型(人参二醇型与人参三醇型)兼顾。
2.1.2 高效液相色谱对比研究 照高效液相色谱法
测定 。
色谱条件与系统适用性试验  岛津 Shimpack
150mm柱 ,以乙腈为流动相 A ,以水为流动相 B ,按表
2条件进行梯度洗脱 ,检测波长为 203nm ,理论塔板数
按三七皂苷 R1峰计算不得低于 4000。
表1 梯度洗脱条件表
时间(min) 流动相A(%) 流动相 B(%)
0 ~ 12 19 81
12 ~ 60 19 ~ 36 81 ~ 64
  对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷 Rg1对照
品 、人参皂苷 Rb1 对照品和三七皂苷 R1 对照品适量 ,
加甲醇制成每 1ml含人参皂苷 Rg10.4mg 、人参皂苷
Rb10.4mg 、三七皂苷 R10.1mg 的混合溶液 ,作为对照
品溶液。
供试品溶液的制备:分别取三七和三七叶粉末
(过四号筛)各 0.6g ,精密称定 ,分别精密加入甲醇
50ml ,称定重量 ,放置过夜 ,超声提取 40ml ,再称定重
量 ,用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 。照柱色谱法
试验 ,精密吸取上述溶液 2ml ,加水 2ml ,混匀 ,加于已
装填好的中性氧化铝柱(100 ~ 120目 ,5g ,干法装柱),
用50%甲醇 100ml洗脱 ,收集洗脱液 ,蒸干 ,残渣加甲
醇溶液并定量转移至 2ml 量瓶中 ,以甲醇稀释至刻
度 ,摇匀 ,作为供试品溶液 。
测定法:分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液
各10μl ,注入液相色谱仪 ,测定 ,结果见图 2。
从图 2可以看到 ,供试品色谱中 ,在与人参皂苷
Rb1 、人参皂苷 Rg1 ,三七皂苷 R1色谱相应位置处 ,三
七有明显斑点对应 ,而三七叶仅在与人参皂苷 Rb1 相
应位置处有明显斑点对应 ,且在人参皂苷 Rb1 色谱保
留时间偏后的位置处 ,尚有数个明显的色谱峰出现 ,
这说明三七叶所含皂苷类成分以人参二醇型为主 ,而
三七所含皂苷类成分则是两种类型兼顾 。
2.2 两种药材人参皂苷 Rb1 含量的对比研究 照高
效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验:岛津 Shimpack
150mm柱 ,以乙腈-水 (29:71)为流动相 ,柱温 40℃,
检测波长 205nm ,理论板数按人参皂苷 Rb1 峰计算应
不低于5000。
对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷 Rb1 对照
图 2 两种药材 HPLC 对比研究图(1.对照液 2.三七
 3.三七叶)
品适量 ,加甲醇制成 1ml含人参皂苷 Rb10.4mg 的溶
液 ,作为对照品溶液。
供试品溶液的制备:同前。
测定法:分别精密吸取对照品溶液 2μl 、三七供试
品溶液 1μl及三七叶供试品溶液各 10μl ,注入液相色
谱仪 ,测定 ,计算 ,结果见表 2。
表2 两种药材 Rb1含量对比研究结果(%)
实验编号 Rb1含量(%)三七 三七叶
1 4.83 0.38
2 4.95 0.41
平均 4.89 0.395
  由表 2可知 ,三七中人参皂苷 Rb1含量明显高于
三七叶 。
3 讨论
3.1 通过对两种药材所含皂苷类成分的对比研究可
知 ,三七叶所含皂苷类成分以人参二醇型为主 ,而三
七所含皂苷类成分则是两种类型(人参二醇型与人参
三醇型)兼顾;三醇型皂苷具有溶血作用 ,而二醇型皂
苷具有抗溶血作用 ,所以三七叶更适于用作注射剂的
开发。
3.2 从三七叶的 HPLC图谱中我们可以看到 ,在人
参皂苷 Rb1色谱保留时间偏后的位置处 ,尚有数个明
显的色谱峰出现 ,这有待于在今后的研究中进一步分
离鉴定 。 (收稿日期:2005-06-06)
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第21卷第3期
2005 年 9月
长 春 中 医 学 院 学 报
Academic Periodical of Changchun College of Traditional Chinese Medicine
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