全 文 ：CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2010 年 8月第 17卷第 22期 专家论坛
蓝菊抗病毒口服液是本院生产的纯中药制剂，处方由板
蓝根、大青叶、野菊花等组成。 其具有清热解毒、凉血利咽的
功效，临床用于防治病毒或细菌引起的上呼吸道感染、扁桃
体炎、肺炎等炎症。目前尚未见有其相关文献报道，为了进一
步提高医院制剂质量的可控性，现探讨以板蓝根、大青叶均
含有的水溶性成分腺苷作为质控指标，参考有关文献 [1-4]，采
用高效液相色谱测定法，建立了腺苷的含量测定方法，用于
蓝菊抗病毒口服液的质量控制，并对测定方法进行了方法学
考察，取得了满意的结果。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100 series 高效液相色谱仪（Agilent G1314A 紫
外检测器）；Sartorius BP211D 电子分析天平（德国）；电热恒
温水浴锅（北京医疗设备厂）；超声清洗器（北京医疗设备二
厂）。
1.2 试药
腺苷对照品 （中国药品生物制品检定所 ，编号 ：879-
200001），乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析
纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Agilent Hypersil ODS 柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；
流动相：乙腈-水（5∶95）；流速：1.0 ml/min；柱温：25℃；检测波
长：260 nm；进样量 10 μl。 理论塔板数以腺苷峰计应不低于
2 000。 在该色谱条件下腺苷与其他成分可达基线分离，方中
其他成分对测定无干扰，结果见图 1~3。
2.2 试验溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备 取腺苷对照品适量，精密称定，加 10%
甲醇水溶液制成每 1毫升含 8.3 μg 的对照品溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取样品 2 ml，置 25 ml 的量
瓶中，加甲醇 2.5 ml，摇匀，再加水至刻度，摇匀，静置过夜，
滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 阴性样品溶液的制备 除板蓝根、大青叶外将其他药材
按处方以相同工艺、相同制法制成缺板蓝根、大青叶的阴性
样品溶液，即得。
2.3 线性范围的考察
分别精密吸取腺苷对照品溶液 1、2、4、8、10 μl 进行色
谱测定，按上述色谱条件分别测定峰面积，以进样量 X（μg）
为横坐标，峰面积 Y 为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：
Y＝2 410.2X-0.667 9，腺苷在 0.008 3~0.083 0 μg 范围内具有
良好的线性关性（r=0.999 7）。
2.4 精密度试验
精密吸取腺苷对照品溶液 10 μl，在相同色谱条件下重
复进样 6次，测得腺苷峰面积的积分值，计算精密度RSD%为
HPLC 测定蓝菊抗病毒口服液中腺苷的含量
郑艳平 1，袁旭江 2，林壮民 1
（1.广东省第二人民医院，广东广州 510317；2.广东药学院中药开发研究所，广东广州 510240）
[摘要] 目的：建立蓝菊抗病毒口服液中腺苷的含量测定方法。 方法：采用 HPLC 法，色谱柱 Agilent Hypersil ODS 柱
（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水（5∶95）；流速为 1.0 ml/min；检测波长为 260 nm；柱温：25℃。结果：腺苷在
0.008 3~0.083 0 μg范围内具有良好的线性关性（r=0.999 7），平均加样回收率为 96.72%，RSD%为 1.6%。 结论：该方
法简便、准确，能排除其他成分的干扰，可用于蓝菊抗病毒口服液的质量控制和评价。
[关键词] HPLC；蓝菊抗病毒口服液；腺苷；含量测定
[中图分类号]R943.1 [文献标识码] C [文章编号] 1674-4721（2010）08（a）-007-02
Determination of adenosine in Lanju Kangbingdu oralliquid by HPLC
ZHENG Yanping1, YUAN Xujiang2, LIN Zhuangmin1
（1.The Second Peoples Hospital of Guangdong Province,Guangzhou 510317, China；2.Research and Development Insti-
tute of Chinese materia, Guangdong College of pharmacy, Guangzhou 510240, China）
[Abstract] Objective: To establish a method for the content determination of adenosine in Lanju Kangbingdu oralliquid by
HPLC. Methods: The content of adenosine was determined by HPLC and the chromatographic conditions were:Agilent
Hypersil ODS column(4.6 mm×150 mm,5 μm), the mobile phase consisting of acetonitrile-water（5∶95）, flow rate 1.0 ml/min,
detection wavelength being 260 nm, column temperature at 25℃. Results: A good linearity of adenosine was in the range of
0.008 3-0.083 0 μg/ml (r=0.9997), The average recovery rate was 96.72%, RSD=1.6%. Conclusion: The method is simple
and accurate and with a good reproducibility and can be used for the quality control of Lanju Kangbingdu oralliquid.
[Key words] HPLC; Lanju Kangbingdu oralliquid; Adenosine; Content determination
[基金项目] 广东省中医药局科研课题（项目号：2009121 )。
[作者简介] 郑艳平(1976.8-)，女，主管中药师，主要从事医院制剂及质量
标准研究。 袁旭江（1976-），男（汉族），助理研究员，主要从事中药质量控
制与分析工作。 林壮民（1959-），男，副主任药师，研究方向：医院药学、药
物制剂。 主要研究成果：“十五”国家科技攻关重大项目课题“三类中药新
药抗 EB 病毒口服液的临床前研究”；2006 年度广东省中医药局建设中
医药强省科研课题“灵芝孢子粉抗肿瘤活性机制研究”；2009 年度广东省
中医药局建设中医药强省科研课题“蓝菊抗病毒口服液澄清工艺及质量
标准研究”。
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2010 年 8月第 17卷第 22期专家论坛
中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
本刊专家论坛栏目介绍
由两院院士，国家重点医药学科学术带头人，省级以上医药科研院所主要负责人，卫生部、国家药监局、国家中医药管理局、科技部等相关部委表
彰、命名的医药专家，中华医学会、中国药学会、中华中医药学会、中国中西医结合学会担任副主任委员以上的医药专家，中华预防医学会、中华护理
学会、中国药理学会、中国医院协会、中国医师协会、中国执业药师协会、中国卫生经济学会等医药卫生社团担任主任委员及以上职务的医药专家，国
内三甲医院的著名专家，国内重点院校重点医药学科博士生导师，国外及港澳台地区著名医药科研院所、医药院校专家、教授等独立撰写、署名的，具
有新思想、新观点、新方法，并对医药各领域的学术研究、教育改革、经营管理和学科发展等方面具有很高的参考价值和指导意义的论文。
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0.116 6
0.116 3
0.115 9
0.118 3
0.116 4
98.00
96.33
95.75
95.17
99.17
95.92
96.72±1.53 1.6
序号
样品中腺苷
含量（mg）
加入对照
品量（mg）
测得值
（mg）
回收率
（%）
平均回收
率（%）
RSD
（%）
080514
080703
080926
0.059 07
0.056 10
0.058 82
0.059 10
0.056 44
0.058 77
0.058 91
0.056 30
0.058 81
0.059 03
0.056 28
0.058 80
批号
腺苷平均含量
（mg/ml）
测定次数
1 2 3
图 1 腺苷标准品 HPLC 图谱
图 2 供试品溶液 HPLC 图谱
图 3 阴性样品 HPLC 图谱
表 2 3 批蓝菊抗病毒口服液腺苷含量测定结果（n=3）（mg/ml）
表 1 蓝菊抗病毒口服中腺苷回收率测定结果(x±s, n=6)
0.85%。
2.5 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别于 0、2、4、8、24 h 进样 10 μl，
测定峰面积，并计算含量，其结果显示 24 h 内，稳定性良好，
RSD %为 1.7 %。
2.6 重复性试验
取同一批号（080926）蓝菊抗病毒口服液，按供试品溶液
制备方法制备 ，重复平行测定 6 次 ，腺苷的平均含量为
（0.058 80 mg/ml），RSD%为 1.8%。
2.7 回收率试验
精密吸取已知含量的批号为 080926 的蓝菊抗病毒口服
液（腺苷含量为 0.058 80 mg/ml）样品 2 ml，分别精密加入
1 ml 腺苷对照品溶液（0.12 mg/ml），按供试品溶液制备项下
操作，制成加样供试品溶液。吸取加样供试品溶液 10 μl注入
液相色谱仪， 按上述方法测定加样供试品溶液中腺苷的含
量，平行打操作 6份，按拟色谱条件测定含量，分别计算回收
率，结果腺苷的平均回收率为 96.72%，RSD%为 1.6%。 计算
回收率见表 1。
2.8 样品测定
取 3批样品，按上述供试品溶液制备方法分别制成 3 份
供试品溶液， 精密吸取供试品溶液 10 μl 注入液相色谱仪，
按上述色谱条件进样测定，结果见表 2。
3 讨论
蓝菊抗病毒口服液主要含板蓝根、大青叶等，以前的研
究只是对靛蓝、靛玉红作定性鉴别，而靛蓝、靛玉红具有很强
的脂溶性，在水中溶解度很小，另外在浓缩过程中的损失也
很大，且特别易氧化。 有文献报道 [1]，根据抗内毒素等实验表
明，靛蓝、靛玉红不具有抗炎、抗内毒素活性等增强机体免疫
的作用，故对它们作定性鉴别意义不大，腺苷是板蓝根、大青
叶均含有的水溶性成分，有很强的抗病毒、抗菌、抗内毒素、
增加机体免疫的作用[3]。 故本实验方法参考相关文献 [2－4]选择
腺苷作为该制剂的质量控制指标， 建立了腺苷含量测定方
法，并测定了 3 批蓝菊抗病毒口服液中腺苷的含量，结果均
在 0.050 mg/ml 以上。
供试品溶液制备方面，比较了水稀释、乙醇和甲醇制成
不同浓度等方法，结果以 10%甲醇提取分离效果最佳，基线
平整，且腺苷峰踏板数较高。 流动相采用乙腈-水，以 5∶95的
比例能够达到分离效果，避免了加入酸、缓冲盐等物质对色
谱柱的伤害。
本方法简便、准确，稳定性、重现性好，可作为蓝菊抗病
毒口服液的质控标准。
[参考文献]
[1] 张汉明,张戈,乔传单.板蓝根和大青叶不同部位的靛蓝靛玉红含量测
定及部分成分的抗内毒素作用比较[J].药学实践杂志,2000,18(5):347.
[2] 郭力,梁恒兴 ,赵斌 ,等.板蓝根和大青叶类药材腺苷含量的测定 [J].中
成药,2006,28(7):1064-1066.
[3] 许润春,杨明,苏艳桃.HPLC 测定板蓝根中腺苷含量[J].中成药,2005,27
(6):742-743.
[4] 侯雅明,王雨林,胡意冰.高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中腺苷的含
量[J].湖南中医杂志,2005,21(3):112-114.
（收稿日期：2010-05-24）
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