全 文 ：束状带细胞呈立方形或多边形 ,胞核圆形 , 异染色质较少 ,胞质内
有大量管泡状脊的线粒体和精面内质网 ,发达的高尔基复合体 ,
有较多的脂滴。脂滴 、溶酶体 、线粒体和内质网与类固醇激素的
合成密切相关 [ 7] 。线粒体是细胞进行氧化磷酸化 、产生能量的
场所 , 胞浆中的脂滴是合成糖皮质酮类激素的基础物质。束状带
细胞胞体饱满 , 胞内线粒体丰富 ,脂滴形态匀称分布均匀 ,是细胞
正常合成 、分泌激素的基础。
本课题研究中 , 通过氢化可的松复制了肾阳虚模型 , 造模后
予以拆方肾气丸汤药灌胃。在透射电镜下 ,我们观察到与正常对
照组相比 , 模型组大鼠肾上腺束状带细胞萎缩 , 胞浆中的脂滴和
线粒体体积较细小 、含量不甚丰富。反映了束状带细胞合成激素
的功能不活跃 , 受到抑制。 同时 , 我们观察到:与模型组相比较 ,
以补阴为主的拆方肾气丸各组受损的肾上腺皮质束状带细胞超
微结构都有一定程度的改善。其中:补阴组 1、补阴组 2、阴阳双
补组 1、阴阳双补组 2对肾上腺皮质胞质内受损线粒体和脂滴改
善明显;补阴组 2优于补阴组 1;双补组优于补阴组;双补组 2优
于双补 1;补阳 1、补阳 2改善不显著。我们认为任何器官或组织
机能不足必然有其物质基础 , 这就是细胞的形态结构的改变。严
重时引起细胞的萎缩 、变性或坏死。肾上腺束状带严重萎缩 ,线
粒体肿胀变形 , 脂滴分布异常或消失。这些超微结构的损伤是导
致实验大鼠 HPA轴功能低下 , 产生肾阳虚的的重要原因之一。
对肾上腺皮质细胞内线粒体 、脂滴等超微结构的改善 , 可能是肾
气丸阴中求阳的配伍治疗肾阳虚的机理之一。 实验结果同时也
提示了以补阴为主的的阴阳双补法优于单纯的补阳法 、补阴法。
参考文献:
[ 1 ] 　陈　奇.中药药效研究思路与方法 ,第 1版 [ M] .北京:人民卫生出
版社 , 2005:677.
[ 2 ] 　蒋淑君 ,李宝玉.山茱萸提取物对肾阳虚大鼠下丘脑 -垂体 -肾上
腺皮质轴的影响 [ J] .滨州医学院学报 , 2008, 31(3):179.
[ 3 ] 　欧阳轶强 ,邹移海 ,张　薇 ,等.对大鼠他巴唑肾阳虚证动物模型下
丘脑 -垂体 -靶腺轴几项指标的考察 [ J] .中医药学刊 , 2006, 24
(9):1658.
[ 4 ] 　闽建新 ,伍庆华 ,王敏璋 ,等.肾阳虚大鼠垂体 -肾上腺皮质轴与垂
体 -性腺轴相关性研究 [ J].时珍国医国药 , 2008, 19(11):2576.
[ 5 ] 　陈　龙 ,赵子琴 ,沈忆文 ,等.雷公藤内酯醇药物血清对体外培养的
大鼠肾上腺皮质细胞分泌功能的影响 [ J] .中西医结合学报 , 2010,
8(6):562.
[ 6 ] 　龚张斌 ,姚建平 ,金国琴.补肾方药对老年大鼠下丘脑 -垂体 -肾
上腺皮质所属组织结构形态变化的影响 [ J] .辽宁中医杂志 , 2006,
33(1):103.
[ 7 ] 　叶世隽 ,游美梅 ,薛社普.醋酸棉酚对大鼠肾上腺皮质超微结构的
影响 [ J] .解剖学报 , 1982, 13(3):324.
收稿日期:2010-11-02;　修订日期:2011-03-01
基金项目:国家自然科学基金(No.30901970)
作者简介:颜永刚(1978-),男(汉族),陕西咸阳人 ,现任陕西中医学院药学
院讲师 ,博士学位,主要从事中药品种、品质 、资源的开发利用研究工作.
桃仁与山桃仁石油醚部位
气相色谱 -质谱联用分析比较
颜永刚 ,邓　翀 ,刘　静 ,刘贵洲
(陕西中医学院·药学院 ,陕西 咸阳　712046)
摘要:目的 分析比较山桃仁和桃仁石油醚提取部位中脂溶性化学成分种类及其含量的差异 ,为探寻中药桃仁的有效物
质基础提供科学依据。方法 采用加热回流法及溶剂萃取法相结合提取脂溶性化学成分 ,采用气相色谱-质谱联用(GC-
MS)技术分离鉴定化学成分 , 采用峰面积归一化法测定相对质量分数。结果 山桃仁中脂溶性化学成分鉴定出了 44个化
合物 , 脂肪酸占脂溶性总成分的 83.70%;桃仁中脂溶性化学成分鉴定出了 35个化合物 , 脂肪酸占脂溶性总成分的
82.70%。结论 该方法分离效果好 ,重现性高 , 操作简单 ,可用于桃仁的质量控制;山桃仁的脂肪酸含量较高 , 不同品种的
样品含量存在差异性。为合理使用中药桃仁提供一定的科学依据。
关键词:桃仁;　山桃仁;　气相色谱-质谱联用;　脂肪酸
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.08.005
中图分类号:R284.1　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2011)08-1812-02
　　桃仁来源于蔷薇科(Rosaceae)植物山桃 Prunusdaridiana
(Carr.)Franch.或桃 Prunuspersica(L)Batsch.的干燥成熟种子 ,
性味苦 、甘 ,平 , 具有活血化瘀 、润肠通便的功效 , 用于经闭 , 痛经 ,
癥瘕痞块 , 跌扑损伤 ,肠燥便秘 [ 1 , 2] 。现代研究亦表明桃仁对心
脑血管疾病疗效显著 , 近年来受到广泛关注。不饱和脂肪酸具有
抗氧化 、抗自由基 、抗肿瘤 、增强免疫 、降低高密度脂蛋白血清胆
固醇的作用 , 进而减少高血压病 、心脏病及中风等疾病的发病
率 [ 3] 。而桃仁课题组经过前期药理筛选实验 , 证明桃仁活血化
瘀有效部位为石油醚萃取部位 , 为了进一步研究其有效物质基
础 , 采用 GC-MS分析比较山桃仁和桃仁石油醚部位中的化学成
分 , 进而为探寻中药桃仁活血化瘀的有效物质基础及综合开发利
用这一药用资源提供参考依据。
1　材料与仪器
1.1　材料 桃仁药材, 2009-07自采于陕北延安南泥湾和陕西咸
阳市南岸村, 经陕西中医学院药学院生药教研室雷国莲教授鉴定,
分别为蔷薇科(Rosaceae)植物山桃 Prunusdaridiana(Carr.)
Franch和桃 Prunuspersica(L)Batsch.的干燥成熟种子两份样品。
1.2　仪器和试剂 美国 Finnigan公司 TRACE气相色谱 -质谱联
用仪 HP-6890/5973GC-MS;石油醚 、乙醇(95%)均为分析纯 ,
成都市科龙化工试剂厂生产。
2　方法
2.1　样品处理 分别将山桃仁和桃仁各 500 g捣碎 ,装入回流提
取装置中 ,加 6倍量 80%乙醇在 70℃下回流提取 2 h, 。共 3次
后 , 合并滤液 ,减压回收乙醇 ,至无醇味。然后用石油醚萃取 4 ～
5次 , 至石油醚萃取液无色 ,回收石油醚 , 即得。
2.2　GC-MS条件 色谱柱为(30 m×0.25 mm, 0.25 μm)石英
毛细管色谱柱;进样口温度为 260℃;程序升温 60℃(10 min)-
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120℃(4min)※ 200℃(30min)※ 260℃(维持 15 min), 速率为 20
℃/min;载气为高纯氮气 ,体积流量为 1 ml/min;分流比为 25:1;
进样量为 0.2 μl;溶剂延迟 3 min;气化室温度为 250℃, EI电离
源 70Ev;离子源温度为 200℃,扫描质量范围为 20 ～ 450 amu,全
扫描方式。
3　结果
3.1　石油醚部位化学成分分析 对离子流图中各峰经质谱扫描
后得到质谱图 , 通过 Xcalibur工作站 NIST标准质谱图库进行检
索 , 结合人工谱图解析 , 按各色谱峰的质谱裂片图与文献核对 ,
对基峰 、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较 , 确认各化学物;
经 Xcalibur工作站数据系统处理 , 按峰面积归一化法计算各化合
物在脂溶性成分中的相对含量 , 结果桃仁石油醚部位分离出 58
个色谱峰 ,共鉴定出 35个化学成分 , 占总离子峰的 60.30%。 山
桃仁石油醚部位分离出 68个色谱峰 ,共鉴定出 44个化学成分 ,
占总离子峰的 64.70%。结果见表 1。
表 1　桃仁和山桃仁脂溶性化学成分分析比较
序号 化合物名称 相对分子量 分子式 相对含量(%)桃仁 山桃仁
1 Glycerin(甘油) 94 C3H8O3 0.12 0.14
2 Heptanoicacid(庚酸) 130 C7H14O2 0.12 0.38
3 Benzoicacid(苯甲酸) 122 C7H6O2 0.32 0.33
4 Octanoicacid(亚羊脂酸) 144 C8H16O2 / 0.05
5 5-羟甲基 -2-糠醛 126 C6H6O3 0.08 0.15
6 2-Decenal, (E)-(2-癸醛) 154 C10H18O / 0.15
7 2-Acetylcyclopentanone(2-乙酰基环戊酮) 126 C7H10O2 0.04 0.08
8 Phenol, 3-4-dimethoxy-(3, 4-二甲氧基苯酚) 154 C8H10O2 0.16 0.31
9 反 -4-羟基 -3-甲基 -6-异丙基 -2-烯 -环己酮 168 C10H16O2 / 0.06
10 Zingiberene(姜烯) 204 C15H24 0.07 0.15
11 Santalene(檀香萜) 204 C15H24 0.05 0.15
12 Beta.-caryophyllene(β -石竹烯) 204 C15H24 0.18 0.72
13 Trans.-alpha.-bergamotene(反 -α-香柠檬烯) 204 C15H24 0.10 0.32
14 Trans.-beta.-farnesene(反 -β金合欢烯) 205 C15H25 0.40 0.47
15 Alpha-Humulene(α-律草烯) 204 C15H24 0.07 0.27
16 (-)Ar-curcumene(α-姜黄烯) 202 C15H24 0.90 1.90
17 Alpha-zingiberene(α-姜烯) 204 C15H24 0.60 1.02
18 Beta-Bisabolene(β -没药烯) 204 C15H24 0.86 0.86
19 Beta-sesquiphelandrene(β -倍水芹烯) 204 C15H24 0.82 3.32
20 Trans-gamma-bisabolene(反 -γ-没药烯) 204 C15H24 / 0.06
21 Caryophyleneoxide(石竹烯氧化物) 220 C15H24O 0.06 0.08
22 (+-)-α-Turmerone(+-)-α-姜黄酮 152 C10H16O 0.12 0.32
23 N-乙基 -N-甲基苯胺 135 C9H13N 0.09 0.11
24 4-羟基 -2-甲基环己基 -N-(4-羟基苯基)-脲 262 C14H18O3N2 0.15 0.18
25 1, 2-二苯甲酸二丁基酯 278 C16H22O4 0.11 0.14
26 肉豆蔻酸(十四酸) 208 C14H28O2 0.12 /
27 Hexadecanoicacid(十六碳酸) 256 C16H32O2 5.98 5.12
28 EthylTridecanoate(十三烷酸乙酯) 242 C15H30O2 / 0.30
29 Octadecanoicacid(十八碳酸) 284 C18H36O2 / 0.02
30 10, 13-十八碳二烯酸甲酯) 294 C19H34O2 / 0.10
31 9-十八碳烯酸甲酯 296 C19H36O2 0.19 0.21
32 9-Hexadecenoicacid(9-十六碳烯酸) 254 C16H30O2 0.27 0.27
33 9-Octadecenoicacid(Z)-(9-十八碳烯酸) 282 C18H32O2 24.65 23.57
34 9, 17-十八碳二烯酸 280 C18H32O2 4.43 5.14
35 9, 12-十八碳二烯酸 280 C18H34O2 12.6 14.52
36 二十烷酸 312 C20H40O2 0.42 /
37 Tricosane(二十三烷) 324 C23H48 / 0.12
38 1-Nonadecane(1-十九烯) 282 C20H42 / 0.09
39 十四酸苯甲酯 318 C21H34O2 0.10 0.13
40 Hexacosane(二十六烷) 366 C26H54 0.10 0.12
41 β -二氢岩藻甾醇 414 C29H50 / 0.59
42 2-羟基 -环十五酮 244 C15H28O2 / 0.18
43 9-十八烯酸 -2-羟基-1-羟基甲基乙酯 354 C21H38O4 0.82 1.47
44 2.6, 10, 15, 19, 23-六甲基 -廿四碳六烯 410 C30H50 0.43 0.41
45 gamma.-Tocopherol(生育酚) 430 C29H50O2 1.05 1.15
46 VitaminE(维生素 E) 416 C28H48O2 0.06 0.09
　　表中 “ /”表示在样品中未检测到该化学成分
3.2　桃仁石油醚部位的组成 按照上述色谱条件对样品进行分
析 , 从桃仁样品中检出 58个色谱峰 , 鉴定了 35个化合物 , 占样品
总含量的 60.30%。在检出的脂溶性化学成分中脂肪酸占总含
量的 82.70%,如表 1所示。饱和脂肪酸以庚酸(0.12%)、肉豆
蔻酸(0.14%)、棕榈酸(5.98%)为主;不饱和脂肪酸以 9-十六
碳烯酸(0.27%)、9-十八碳烯酸(24.65%)、9, 12 -十八碳二烯
酸(12.06%)、9, 17-十八碳二烯酸(4.43%)为主要成分;桃仁
的脂溶性成分还包括酯类 、萜类化合物等。其中 , 以 α-姜黄酮
(0.12%)、 9 -十八烯酸 -2 -羟基 -1 -羟基甲基乙酯
(0.82%)、1, 2 -二苯甲酸二丁基酯(0.11%)、β -倍水芹烯
(0.82%)、α-姜黄烯(1.90%)、α-姜烯(1.02%)为主要成分。
3.3　山桃仁石油醚部位的组成 按照上述色谱条件对样品进行
分析 ,从山桃仁样品中检出 68个色谱峰 ,鉴定了 44个化合物 , 占
样品总含量的 64.70%。在检出的脂溶性化学成分中脂肪酸占
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.8 时珍国医国药 2011年第 22卷第 8期
总含量的 83.70%,如表 1所示。饱和脂肪酸以庚酸(0.38%)、
棕榈酸 (5.12%)为主;不饱和脂肪酸以 9 -十六碳烯酸
(0.27%)、9 -十八碳烯酸(23.57%)、 9, 12 -十八碳二烯酸
(14.52%)、9, 17-十八碳二烯酸(5.14%)为主要成分;桃仁的
脂溶性成分还包括酯类 、萜类化合物等。其中 , 以 α-姜黄酮
(0.32%)、 9 -十八烯酸 -2 -羟基 -1 -羟基甲基乙酯
(1.47%)、1, 2 -二苯甲酸二丁基酯 (0.14%)、 β -倍水芹烯
(3.32%)、α-姜黄烯 (1.98%)、α-姜烯(1.36%)、生育酚
(1.15%)、维生素 E(0.09%)为主要成分。
4　讨论
本次实验从桃仁和山桃仁样品中所鉴定出 46个化合物 , 其
中脂肪酸的含量最高 , 占总含量的 49.0%。其中不饱和脂肪酸
以 9-十六碳烯酸(0.27%)、9 -十八碳烯酸(23.57%)、 9, 12-
十八碳二烯酸(14.52%)、9, 17-十八碳二烯酸(5.14%)的总含
量高达 43.5%。 研究表明 , 不饱和脂肪酸具有抗氧化 、抗自由
基 、抗肿瘤 、增强免疫的作用 , 可以明显的降低高密度脂蛋白血清
胆固醇的作用 , 进而减少高血压 、心脏病及中风等疾病的发病
率 [ 4] 。 TakouKosuge从桃仁中分离的三油酸甘油酯经研究发现
具有优良的抗凝血活性 , 凝血时间延长率为 37% [ 5] 。本次实验
检测到甘油 、油酸 、亚油酸等。与报道基本相符合 ,对探索桃仁的
有效成分或者指标性成分有着积极意义。另外 , 脂溶性成分 α-
姜黄酮(0.20%)、α-姜黄烯(1.90%)、α-姜烯(1.02%)也有
降低血浆总胆固醇 、β -脂蛋白和甘油三酯的作用 [ 6] 。 研究表
明 , 桃仁的主要化学成分还有苷类如甲基 -α-呋喃果糖苷 , 甲
基 -β -D-吡喃葡萄糖苷 [ 7] 、氨基酸类 、甾醇类 、苦杏仁酶和蛋
白质 [ 8] 。
桃仁和山桃仁石油醚部位中共有 33个相同的成分 , 但各成
分的含量有差异。在共有成分中含量较多的为棕榈酸 、9-十六
碳烯酸 、9-十八碳烯酸 、9, 12-十八碳二烯酸 、9, 17 -碳二烯酸 ,
其特征性比较明显 , 属脂肪酸类。且在功效上均与桃仁活血化淤
的功效有一定内在的联系 , 可以考虑将以上几种化合物作为桃仁
特征性成分群。对此需要进行更加深入的研究 , 收集足够多 、有
代表性的样本 ,包括不同品种 、产地 、采收时节的样品 ,运用 GC-
MS方法 ,分析样本的共性 ,在此基础上 , 对不同品种或产地的个性
展开分析 ,以探求个性的差异。并且选择优化的色谱条件 , 确定适
宜的色谱柱 ,以特征指标成分群出峰相对保留时间以及相对含量
的稳定性作为参考 ,建立桃仁的 GC-MS指纹图谱 , 作为桃仁质量
控制的方法之一 ,从而有助于桃仁质量控制评价系统的建立。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2010:260.
[ 2 ] 　张廷模.中药学 [ M] .北京:高等教育出版社 , 2002:265.
[ 3 ] 　胡　锐 ,李宝莉.多不饱和脂肪酸对心血管系统的作用及机制 [ J] .
西北药学杂志, 2008, 23(2):118.
[ 4 ] 　DouglasG.Hayes.Efectoftemperatureprogrammingontheperfor-
manceofureainclusioncompound-basedfreefatyacidfractionation
[J].JournaloftheAmericanOilChemistsSociety, 2006, 83(3):253.
[ 5 ] 　 RobertW, JohnRS.Chainseparationofmonounsaturatedfatyacid
methylestembyargentationthinlayerchromatography[ J].Journalof
chromatographyA, 2001, 905(1):251.
[ 6 ] 　张　氽 ,阚建全 ,陈宗道.硝酸银-硅胶纯化 α-亚麻酸的研究 [ J] .
离子交换与吸附 , 2005, 21(1):47.
[ 7 ] 　RezankaT.Two-dimensionalseparationoffatyacidsbythin-layer
chromatographyonureaandsilvernitratesilicagelplates[ J] .Journalof
chromatographyA.1996, 727(1):147.
[ 8 ] 　袁　丹 ,胡　爽 ,毕开顺 ,等.桃仁药材质量评价法的研究 [ J].中国
药学杂志 , 2003, 38(1):53.
收稿日期:2010-11-01;　修订日期:2011-02-24
基金项目:国家自然科学基金(No.81060370;30760308);国家科技支撑计划资助项目(No.2007BAI30B03)
作者简介:谢　奇(1982-),男(汉族),广西来宾人 ,现为新疆石河子大学硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事药理学教研工作.
＊通讯作者简介:李治建(1982-),男(汉族),河南商丘人 ,现任新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所助理研究员 ,硕士学位 ,主要从事药理毒理学研究
工作.
地锦草提取物及其有效部位化学成分的初步研究
谢　奇 1 ,李治建2＊ ,斯拉甫·艾白 2, 3, 4 ,古力娜·达吾提4 ,周　露 1
(1.石河子大学药学院 ,新疆 石河子　832000;　
2.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所 ,新疆 乌鲁木齐　830049;　
3.新疆维吾尔医方剂学实验室 ,新疆 乌鲁木齐　830049;　
4.新疆维吾尔自治区维吾尔医医院 ,新疆 乌鲁木齐　830049)
摘要:目的 对地锦草提取物及其有效部位进行化学成分初步研究。方法 采用薄层色谱法 、沉淀反应或颜色反应对地锦
草水提液 、乙醇提取液 、石油醚提取液及地锦草有效部位进行化学成分系统预试 ,对其化学成分进行分析鉴别。结果 实
验表明 , 地锦草不同提取物和有效部位中黄酮及其苷 、糖及其苷类 、香豆素 、蒽醌类 、三萜 、甾体 、鞣质 、酚性成分 、有机酸
等反应均呈阳性结果。结论 该研究提示地锦草提取物和有效部位可能含有的化学成分的种类 , 为地锦草化学成分及其
开发利用提供了实验基础。
关键词:地锦草;　化学成分;　系统预试
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.08.006
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2011)08-1814-03
PreliminaryStudyontheChemicalCompositionsofExtractandEffectiveFractioninEu-
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