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桃仁和山桃仁中的氨基酸分析



全 文 :桃仁和山桃仁中的氨基酸分析
颜永刚1 , 裴 瑾2 , 万德光2
(1.陕西中医学院药学院 , 陕西 咸阳 712046;2.成都中医药大学药学院 , 四川 成都 610075)
  摘 要:目的:通过对桃仁蛋白质氨基酸分析 , 明确氨基
酸的种类 、质量分数。方法 采用 835 ~ 50 型氨基酸自动分析
仪测定 ,离子交换柱:柱长 2.5×150 mm;树脂 2619 #;柱温
53 ℃;缓冲液:流速 0.25 mL ·min -1 ;柱压 80~ 120 kg/cm2 ;
茚三酮:流速 0.3 mL·min-1;柱压 20~ 35 kg/ cm2。结果:所
测定的《中国药典》 2005 年版中药桃仁项下收载的桃 Prunus
per sica(L)Batsch.和山桃 Prunus daridiana(Car r.)F ranch.2
个品种的样品中均含 17 种氨基酸 , 质量分数和氨基酸总量均
有差异。结论:本方法重现性高 , 操作简单;山桃仁和桃仁的
氨基酸种类相同 ,质量分数和氨基酸总量比较 , 山桃仁均大于
桃仁。
关键词:桃仁;山桃仁;氨基酸;蛋白质
中图分类号:R284.1 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2010)06-0063-02
桃仁来源于蔷薇科(Rosaceae)植物桃 Prunus pe rsica(L)
Batsch.或山桃 P runus daridiana(Carr.)F ranch.的干燥成熟
种子[ 1] 。性味苦 、甘 , 平 ,具有活血化瘀 、润肠通便的功效。用
于经闭 ,痛经 , 癥瘕痞块 ,跌扑损伤 ,肠燥便秘[ 2] 。在血府逐瘀
汤(《医林改错》)、生化汤(《傅青主女科》)、桂枝茯苓丸(《金匮
要略》)、桃核承气汤(《伤寒论》)等医家名方中均重用桃仁 , 现
代研究亦表明桃仁对心脑血管疾病疗效显著 , 近年来受到广
泛关注。
桃仁药材中主要含油脂和蛋白质[ 3] 。氨基酸的种类和质
量分数 ,决定着蛋白质品质的高低[ 4] ,而且植物蛋白具有一定
的生理活性[ 5 ~ 6] 。为了进一步研究桃仁的化学成分 , 进行了
桃仁蛋白质氨基酸分析 ,明确氨基酸的种类 、质量分数。为桃
仁的进一步开发研究提供思路和依据。
1 实验材料
1.1 供试材料 桃仁 , 2007 年 8 月自采于陕西南泥湾和陕西
咸阳 ,经万德光教授鉴定 , 分别为蔷薇科(Rosaceae)植物桃
Prunus persica(L.)Batsch 、山桃 Prunus davidiana(Ca rr.)
Franch.的干燥成熟种子。
1.2 试剂 酸解剂:盐酸溶液 , C(HCl)=6.0mo l/ L , 优级纯
盐酸与去离子水等体积混合;稀释上机用盐酸缓冲液 ,
C(HCl)=0.02 mol/ L;不同 pH 值和离子强度的洗脱用缓冲
溶液 ,按仪器说明书配制。茚三酮溶液:按仪器说明书配制;
NaOH 溶液:C(NaOH)=6.0 mo l/ L。 17种氨基酸标准品:除
脯氨酸为 200 μmo l/ L 外 ,其余均为 100 μmol/ L 。
1.3 仪器及设备 实验室用样品粉碎机;分析天平;酒精喷
灯;恒温箱;仪器和设备:日立 835-50 型氨基酸自动分析仪。
真空泵。
2 实验方法
2.1 仪器测试条件 离子交换柱:柱长 2.5×150 mm;树脂
2619#;柱温 53 ℃;缓冲液:流速 0.25 m L·min -1 ;柱压 80 ~
120 kg/ cm2 ;茚三酮:流速 0.3 m L · min-1 ;柱压 20 ~ 35
kg/ cm2 。
2.2 样品的制备 称样:准确称取一定量的样品 , 精确到
0.0001 g , 称样量在 10 ~ 20 mg 之内 , 称好的样品放于水解管
内。水解:在水解管内加 6.0 mo l· L-1盐酸 15.00 mL , 再加
入巯基乙 1.00 mL(起保护作用), 盖上胶塞 , 用真空泵抽至真
空 ,接进 0psi , 将此水解管封口并放在 110±1 ℃的恒温干燥
箱内保温 24 h 后 , 取出冷却。打开水解管 ,将水解液过滤并冲
洗定容 50.00 m L容量瓶。吸取滤液 1.00 mL 于 25 m L烧杯
内 ,在水浴上蒸干 , 残留物用 1 ~ 2 mL 水溶解再蒸干 , 反复蒸
干 3 次 ,最后残留物用 0.02 mol· L-1的盐酸 1.00 mL 溶解上
机测定。
2.3 测定 用相应的混合氨基酸标准工作液按仪器说明书 ,
调整仪器操作参数和洗脱用缓冲液的 pH 值 , 使各氨基酸分
辨率≥85%, 自动进样 20 μL 制备好的试样水解液分析测定
(氨基酸自动分析仪测定流速:缓冲溶液为 0.40 m L/ min , 茚
三酮溶液 0.35 mL/min)。
2.4 结果计算 以峰面积测定结果 , 用外标法计算各氨基酸
含量。
2.5 测定标准 氨基酸测定标准:GB/ T5009.124-2003。
表1 不同产品中氨基酸的平均质量分数(%)
名称 桃仁(水解)桃仁(游离)山桃仁(水解) 山桃仁(游离)
天门冬氨酸 2.68 未检出 3.21 未检出
苏氨酸★ 0.66 未检出 0.77 未检出
丝氨酸 0.90 未检出 1.06 未检出
谷氨酸 6.33 未检出 6.85 未检出
甘氨酸 1.37 未检出 1.45 未检出
丙氨酸 1.07 未检出 1.23 未检出
胱氨酸 0.30 0.18 0.30 0.17
缬氨酸★ 1.06 未检出 1.22 0.59
蛋氨酸★ 0.17 0.11 0.18 0.12
异亮氨酸★ 0.92 未检出 1.07 未检出
亮氨酸★ 1.75 未检出 2.02 未检出
酪氨酸 0.76 0.20 0.80 未检出
苯丙氨酸★ 1.19 1.15 1.38 0.91
赖氨酸★ 0.48 未检出 0.59 未检出
氨 0.80 0.42 0.93 0.21
组氨酸* 0.53 未检出 0.64 未检出
精氨酸 2.77 未检出 3.10 未检出
脯氨酸 0.83 未检出 0.98 未检出
T 23.77 1.64 26.85 1.79
E 6.76 1.26 7.87 1.62
  注:T-氨基酸总量;E-必需氨基酸总量;“★”为必需氨基酸
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3 结果与讨论
桃仁与山桃仁中均富含 17 种氨基酸。其中尤以谷氨酸
质量分数最高 , 天门冬氨酸 、精氨酸和亮氨酸质量分数也很
高;桃仁中各种氨基酸的总质量分数达到 23.77%, 其中必需
氨基酸质量分数为 6.76%, 山桃仁中氨基酸的总质量分数为
26.85%,高于桃仁中氨基酸的总质量分数;在必需氨基酸含
量上 ,山桃仁中的必需氨基酸质量分数为 7.87%, 高于桃仁中
的必需氨基酸。
对桃仁不同品种中氨基酸质量分数的测定表明:山桃仁中
氨基酸的总质量分数及必需氨基酸质量分数均很高 ,氨基酸的
种类和质量分数, 决定着蛋白质品质的高低 , 必需氨基酸更是
评价食品营养水平最根本的指标[ 7] ;所测定的桃仁中的必需氨
基酸质量分数较高 ,因此桃仁中蛋白质的质量分数也较高 ,所
以桃仁的营养价值相对也较好。同时 , 桃仁中的蛋白质在桃仁
中的含量也占相当大一部分[ 6~ 7] ,桃仁中的氨基酸研究分析为
以后进一步研究桃仁中的蛋白质提供科学的依据。
参考文献:
[ 1] 张廷模.中药学[ M ] .北京:高等教育出版社 , 2002:265.
[ 2] 中国药典委员会.中华人民共和国药典[ M] .北京:化学工业出版
社 , 2005:196.
[ 3] 江苏新医学院 , 中药大辞典[ M ] .上海:上海科技出版社 ,
1988:1787.
[ 4] 张宝香,金春爱 ,赵延平.鹿角盘的化学成分与开发利用[ J] .特种
经济动物 , 2005 ,(8)12:7.
[ 5] 刘英 ,王亚贤.炒桃仁总蛋白对 T NF-a 、IL-2 产生水平的影响[ J] .
中医药学报 , 2001 , 29(4):50~ 51.
[ 6] 许惠玉 ,运晨霞 ,王亚贤.桃仁总蛋白对荷瘤鼠 T 淋巴细胞亚群及
细胞 凋 亡 的 影 响 [ J ] .齐 齐 哈 尔 医 学 院 学 报 , 2004 ,
25(5):485~ 4871.
[ 7] 李泽鸿 ,姚玉霞 ,王全凯 ,等.二杠鹿茸和三杈鹿茸中营养元素含
量的差异[ J] .微量元素和健康研究 , 2003 , 20(4):30~ 31.
(收稿日期:2010-02-11)
 
·文献综述·
流苏石斛研究进展
王洪云
(保山中医药高等专科学校中医药系 , 云南 保山 678000)
  摘 要:简要介绍流苏石斛的种属分布 、原植物特征 、采
收加工 、鉴别 、功用等 , 全面总结流苏石斛的化学成分以及药
理作用的研究进展 , 以期为流苏石斛的种植及其品质评价等
相关研究提供参考。
关键词:流苏石斛;化学成分;药理活性
中图分类号:R284.1 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2010)06-00064-02
石斛为兰科植物金钗石斛 Dendrobium nobile Lindl.、铁
皮石斛 Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.或马鞭石斛
Dendrobium fimbriatum Hook.var.oculatum Hook.及其近似
种的新鲜或干燥茎[ 1] 。在我国传统医学中 ,石斛为常用珍贵
药材 ,始载于《神农本草经》 , 列为上品。
云南是药用石斛的主产地 ,约占全国产量的 60%,流苏石
斛是中药石斛的主要来源之一 , 多年来 ,因乱挖滥采 , 野生资
源日趋匮乏 ,其人工种植品品质评价有待深入研究 , 本文将简
要介绍流苏石斛概况 、全面总结其化学成分以及药理活性研
究进展情况。
1 流苏石斛概况[ 1 ~ 2]
流苏石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)系兰科石斛属
植物 ,《中国药典》称马鞭石斛 , 为多年生附生草本植物 , 生于
海拔 600~ 1700 m 的树干上或山谷阴湿岩石上 , 主产我国西
南部至西北部 ,分布于印度 、尼泊尔 、锡金 、不丹 、缅甸 、泰国 、
越南等地。
1.1 原植物 茎粗壮 ,斜立或下垂 ,质地硬 ,圆柱形或有时基
部上方稍呈纺锤形。叶二列 , 革质 , 长圆形或长圆状披针形。
总状花序长 5 ~ 15 cm , 疏生 6 ~ 12 朵花 ,唇瓣边缘流苏状 , 花
期 4 ~ 6月。
1.2 采收加工 全年均可采收 , 鲜用者洗净 , 切段。 干用者
除去残根 ,洗净 , 切段 ,干燥 。
1.3 鉴别 表皮细胞扁圆形 , 外壁及侧壁增厚 , 木化 , 有层
纹 ,基本组织细胞大小相近 ,有壁孔 , 维管束略排成 3~ 4 圈。
1.4 功用 益胃生津 , 生津止渴。用于阴伤津亏 , 口干烦渴 ,
食少干呕 ,病后虚热 ,目暗不明。
2 化学成分
自 1992 年来 , 李满飞等[ 3] 、 Talapa tra SK [4] 、毕志明
等[5 ~ 7]相继报道了从流苏石斛中分离得到的各种化学成分。
经统计 ,主要包括以下几类成分。
2.1 菲类 包括鼓槌菲(chry so tox ene)、毛兰菲(confusarin)、
流苏菲(fimbria-to ne), 其中 , 根据原文作者的化合物解析 , 流
苏菲的系统命名 2 , 7-二羟基-8-甲氧基-五氢菲[ 4 , 5-环] 吡喃-
5-酮应更名为 2 , 7-二羟基-1-甲氧基-五氢菲[ 4 , 5-环] 吡喃-5-
酮。结构式见图 1。
图 1 菲类成分结构式
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