全 文 ：第４７卷第４期 华中师范大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４７ Ｎｏ．４
２０１３年８月 ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＨＵＡＺＨＯＮＧ　ＮＯＲＭＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（Ｎａｔ．Ｓｃｉ．） Ａｕｇ．２０１３
收稿日期：２０１３－０３－０６．
基金项目：国家自然科学基金项目（３１２００２６４）；武汉市科技攻关项目（２０１２６０５２３１８９）．
＊Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｎｇｍｅｉｘｉａｎ９９＠１６３．ｃｏｍ．
文章编号：１０００－１１９０（２０１３）０４－０５０５－０４
血三七叶中挥发油提取及包合工艺优选
向梅先１＊，苏汉文２
（１．中南民族大学 药学院，武汉４３００７４；２．武汉大学人民医院，武汉４３００６１）
摘　要：采用水蒸气蒸馏法对血三七叶中挥发油进行提取和饱和水溶液进行包合，以挥发油提取
量和挥发油的包合率作为考察指标，采用Ｌ９（３４）正交表进行筛选，考察了药材的加水量，浸泡时
间，提取时间对挥发油提取率的影响；同时考察了挥发油和β－环糊精β－ＣＹＤ比例，包合温度，搅拌
时间，环糊精和水的比例对挥发油包合效果的影响．优选出了血三七胶囊中血三七叶中挥发油最
佳的提取和包合工艺．优选的提取工艺为：将药材粉碎成粗粉，加６倍量的水，浸泡１ｈ后，再提取
６ｈ为最佳提取工艺；优选的包合工艺为挥发油与β－环糊精比例为１∶５（ｍＬ∶ｇ），β－环糊精与水的
比例为１∶１２（ｇ∶ｍＬ）；在４０℃下，包合２ｈ．优选的提取工艺提油率高；包合工艺可制得稳定的分
子间包合物，且挥发油包合率高．
关键词：血三七叶；挥发油；提取和包合；工艺优选
中图分类号：Ｒ２８ 文献标识码：Ａ
　　血三七为蓼科植物中华抱茎蓼的根茎［１］．中华
抱茎蓼为多年生草本，生长于１　０００～２　５００ｍ的沟
边或林下潮湿处草丛中，其根茎粗壮，外皮紫褐色，
断面紫红色．茎直立或倾斜，上部有分枝．在湖北、陕
西等省民间广泛药用，亦为土家族、苗族、傈僳族常
用的民族药［２］．秋季采挖，洗净，去粗皮，鲜用或晒
干．其味涩微苦、性平小毒，有活血舒筋，行气止痛，
抗菌消炎，止血生肌，收敛止泻之功效．用于跌打损
伤，外伤出血，劳伤菌痢，胃肠炎等病［３］．民间常以其
水煎服或泡酒服，用于胃肠炎、痢疾、跌打损伤、骨折
等．土家族以其研末吞服，又用于崩漏、痛经、胃痛外
用治外伤出血．傈僳族还用于风湿疼痛［４－５］．笔者前
期对血三七的化学成分和促骨折愈合的药理机制进
行了相关研究，从该植物叶的挥发油中分离得到四
十多个化合物，发现一些化合物能促进成骨细胞的
增殖和分化．本研究拟在前期基础上，采用正交实验
优选法对其叶中挥发油的提取及对挥发油的包合进
行了研究，为药材的开发利用提供科学依据．
１ 实验材料
血三七叶，购于湖北恩施利川中药材公司，经
中南民族大学万定荣教授鉴定为蓼科植物中华抱
茎蓼 Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　Ａｍｐｌｅｘｉｃａｕｌｅ　Ｄ．Ｄｏｎ　ｖａｒ．的
叶．挥发油提取器（泰新市龙岗玻璃仪器厂）；无水
硫 酸 钠 （国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司
２０１００７２４１８）；甲醇、乙醇（分析纯，国药集团化学试
剂有限公司２０１１１２１）．
２ 方法与结果
２．１ 挥发油提取工艺条件Ｌ９（３４）正交试验设计
血三七叶粉碎成粗粉，以挥发油的提取量［４］为
考察指标，选择加水量倍数、浸泡时间、粒径、提取
时间４个因素，每个因素３个水平，设计方案见
表１．
表１　挥发油提取工艺因素水平表
Ｔａｂ．１　Ｌｅｖｅｌｓ　ａｎｄ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
ａｂｏｕｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ
水平 　　　　　因　素
Ａ（加水量倍数）Ｂ（浸泡时间／ｈ） Ｃ（粒径）Ｄ（提取时间／ｈ）
１　 ４　 ０ 粗粉 ２
２　 ６　 １ 中粗粉 ４
３　 ８　 ２ 细粉 ６
２．２ 正交试验结果与统计分析
称取血三七药材粗粉２００ｇ，共９份，按正交试
验设计案提取，读取所得挥发油体积，结果见表２
和表３．
５０６　 华中师范大学学报（自然科学版） 　　第４７卷
表２　Ｌ９（３４）正交试验结果直观分析表
Ｔａｂ．２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
试验号 Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ 挥发油／ｍＬ
１　 １　 １　 １　 １　 １．３０
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ２．０８
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ２．０９
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ２．１２
５　 ２　 ２　 ３　 １　 １．５９
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ２．０８
７　 ３　 １　 ３　 ２　 １．０７
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ２．６４
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ０．８４
均值Ⅰ １．８２　 １．５０　 ２．０１　 ２．２４
均值Ⅱ １．９３　 ２．１０　 １．６８　 １．７４
均值Ⅲ １．５２　 １．６７　 １．５８　 ２．２８
Ｒ　 ０．４１　 ０．６１　 ０．４２　 １．０４
表３　Ｌ９（３４）正交试验结果方差分析表
Ｔａｂ．３　Ｔｈｅ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ａｂｏｕｔ
Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
因素 偏差平方和 自由度 Ｆ比 Ｆ临界值 显著性
Ａ　 ０．２８　 ２　 １．００　 １９．００
Ｂ　 ０．５８　 ２　 ２．１２　 １９．００
Ｃ　 ０．３０　 ２　 １．０７　 １９．００
Ｄ　 １．６２　 ２　 ５．８８　 １９．００
误差 ０．２８　 ２
Ｆ０．０５（２，２）＝１９．
从表２结果可以看出：４个因素对挥发油的提
取率影响的大小顺序为Ｄ＞Ｂ＞Ｃ＞Ａ，在给定的水
平条件下，各因素对挥发油的影响顺序为Ａ２＞Ａ１
＞Ａ３；Ｂ２＞Ｂ３＞Ｂ１；Ｃ１＞Ｃ２＞Ｃ３；Ｄ３＞Ｄ１＞Ｄ２．统
计结果表明各因素对挥发油的提取率无显著性的
差异，通过直观分析，单从挥发油的提取情况考虑，
拟定最佳提取工艺为 Ａ２Ｂ２Ｃ１Ｄ３．即：将药物粉碎
成粗粉，加６倍量的水，浸泡１ｈ后，提取６ｈ为最
佳提取工艺．
２．３ 挥发油提取优选工艺验证
称取血三七叶药材粗粉２００ｇ，共３份，加入药
材量６倍量水，浸泡１ｈ，提取６ｈ，测定挥发油提取
量，结果见表４．
表４　挥发油提取优选工艺验证试验结果
Ｔａｂ．４　Ｔｈｅ　ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ａｂｏｕｔ
ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ
批号 投料量／ｇ 挥发油体积／ｍＬ 得油率／％
１　 ２００　 ４．７６　 ２．３８
２　 ２００　 ４．６２　 ２．３１
３　 ２００　 ４．６２　 ２．３１
平均 ２００　 ４．６６　 ２．３３
由表４可知，３次挥发油的平均提取率为
２．３３％，均高于正交试验提取率，且含量基本稳定，
说明优选工艺基本可行．
２．４ 挥发油β－ＣＹＤ包合工艺优选研究
２．４．１挥发油的制备　称取血三七叶粗粉７００ｇ，
水蒸气蒸馏法提取，得到挥发油１２ｍＬ，用无水硫
酸钠５ｇ脱水后得淡黄色液体，测得相对密度为
０．９６ｇ／ｍＬ，取挥发油２份加１份无水乙醇，制成
挥发油的乙醇溶液备用．
２．４．２挥发油空白回收试验　取上述挥发油的无
水乙醇液（油∶醇＝２∶１）２．０ｍＬ置２５０ｍＬ蒸馏
瓶中，加２００ｍＬ蒸馏水加热提取挥发油至油不再
增加为止．得油量平均值为０．９６ｍＬ（ｎ＝３），计
算空白回收率得９６％．
２．４．３挥发油β－ＣＹＤ包合工艺优选研究条件Ｌ９
（３４）正交试验设计　以挥发油利用率、挥发油收得
率、包合物含油率为考察指标，采用中国药典（２０１０
年版）一部附录中挥发油测定法测定挥发油的提
取量［６］，选择挥发油：β－ＣＹＤ、包合温度、搅拌时间
以及β－ＣＹＤ∶水为４个因素，每个因素３个水平进
行正交试验，设计方案见表５．
表５　挥发油β－ＣＹＤ包合工艺因素水平表
Ｔａｂ．５　Ｌｅｖｅｌｓ　ａｎｄ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
ａｂｏｕｔ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌβ－ＣＹＤ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ
水
平
因　　　　　　素
Ａ
挥发油∶β－
环糊精（ｍＬ∶ｇ）
Ｂ
包合温度／℃
Ｃ
搅拌时间／ｈ
Ｄ
β－环糊精∶
水（ｇ∶ｍＬ）
１　 １∶４　 ３５　 １．５　 １∶８
２　 １∶６　 ４０　 ２．０　 １∶１０
３　 １∶８　 ４５　 ２．５　 １∶１２
２．５β－ＣＤ包合正交试验结果
按正交试验设计方案，取一定量的β－环糊精
（β－ＣＹＤ）
［７－９］，加入一定量的蒸馏水，加热溶解制
成过饱和溶液后，置恒温搅拌器保温至规定温度
后，加入挥发油无水乙醇溶液１．５ｍＬ（油∶醇＝２
∶１）混合，边加边搅拌至规定时间，然后置４℃冰
箱中冷藏２４ｈ，取出抽滤至干，再置４０℃干燥箱中
干燥４ｈ，即得白色粉末状挥发油β－ＣＹＤ包合物，
共９份，精密称重，置装有沸石的２５０ｍＬ圆底烧
瓶中，加蒸馏水２００ｍＬ，按中国药典 （２０１０年版）
一部附录中挥发油测定法提取挥发油［６］，至油量不
再增加时停止加热，放置１ｈ，得回收挥发油体积．
再按下面公式计算包合物含油率、包合物收得率及
　第４期 向梅先等：血三七叶中挥发油提取及包合工艺优选 ５０７　
油利用率：挥发油利用率＝包合物中挥发油量
（ｍＬ）／投油量（ｍＬ）×空白回收率×１００％；包合物
收得率＝包合物的重量（ｇ）／β－ＣＹＤ（ｇ）＋投油量
（ｇ）×１００％；包合物含油率＝包合物中挥发油量
（ｇ）／包合物总量（ｇ）×１００％；综合指标＝（包合
率／包合率ｍａｘ）×０．６＋（收得率／收得率ｍａｘ）×０．２
＋（含油率／含油率ｍａｘ）×０．２；结果见表６．
表６　挥发油β－ＣＹＤ包合工艺正交试验直观分析结果
Ｔａｂ．６　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｉｎｔｕｉｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｂｏｕｔβ－ＣＹＤ
ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
试
验
号
Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ
包合率
／％
收得率
／％
含油率
／％
综合
指标／％
１　 １　 １　 １　 １　 ３５．６５　４８．５８　９．３８　５２．５３
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ５８．２８　５３．２２　１４．４６　７７．８２
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ５６．３０　５３．５６　１３．５０　７４．６５
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ６８．２０　５７．２９　１１．８９　８１．７８
５　 ２　 ２　 ３　 １　 ８１．９８　６５．２８　１２．３５　９５．９９
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ７２．１１　６１．９８　１１．４５　８４．６５
７　 ３　 １　 ３　 ２　 ５６．４０　６５．９８　７．０６　６７．９８
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ６８．２０　６７．９９　８．０５　７８．９３
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ７５．０２　７１．２０　８．５２　８５．１２
Ⅰ ６８．３３　６７．４３　７２．０４　７７．８４
Ⅱ ８７．４４　８４．２１　８１．５７　７６．８２
Ⅳ ７７．３４　８１．４７　７９．５０　７８．４５
Ｒ　 １９．１０　１６．７８　９．５４　 １．６４
表７　Ｌ９（３４）正交试验结果方差分析表
Ｔａｂ．７　Ｔｈｅ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ
ａｂｏｕｔ　Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
因素 偏差平方和 Ｆ比 Ｆ临界值 显著性
Ａ　 ５４７．９９　 １３３．４９　 １９．００ ＊
Ｂ　 ４８６．２７　 １１８．４６　 １９．００ ＊
Ｃ　 １５０．９８　 ３６．７８　 １９．００ ＊
Ｄ　 ４．１１　 １．００　 １９．００
误差 ４．１１
Ｆ０．０５（２，２）＝１９，Ｐ ＜０．０５，有显著性差异
（表７）．
根据正交实验的结果及直观分析可知：各因素
对各个因素对血三七叶挥发油的β－环糊精包合影
响顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｃ＞Ｄ，在给定的水平条件下，各
因素影响包合效果为 Ａ２＞Ａ３＞Ａ１；Ｂ２＞Ｂ３＞Ｂ１；
Ｃ２＞Ｃ３＞Ｃ１；Ｄ３＞Ｄ２＞Ｄ１．进一步方差分析可知，
因素Ａ、Ｂ、Ｃ对包合工艺有显著影响．因此，根据试
验结果确定最佳包合工艺：Ａ２Ｂ２Ｃ２Ｄ３，即挥发油
最佳的包合工艺为：挥发油与β－环糊精比例为１∶５
（ｍＬ∶ｇ），β－环糊精与水的比例为１∶１２（ｇ∶ｍＬ），
在４０℃下，包合２ｈ．
２．６ 挥发油包合优选工艺验证
按正交试验筛选的最佳工艺条件 Ａ２Ｂ２Ｃ２Ｄ３
进行验证，结果见表８．
表８　β－ＣＹＤ包合挥发油优选工艺验证试验结果
Ｔａｂ．８　Ｔｈｅ　ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ
β－ＣＹＤ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ
试验号 包合率／％ 收得率／％ 含油率／％ 综合指标／％
１　 ８４．９５　 ６１．８０　 １４．０５　 ９８．２０
２　 ８３．２３　 ６３．４７　 １３．２５　 ９６．０１
３　 ８１．２６　 ６１．２２　 １３．５６　 ９２．８８
平均 ８３．１５　 ６２．１６　 １３．６２　 ９５．７０
验证试验结果表明：正交试验所确定的β－环糊
精包裹挥发油工艺稳定．
３ 讨论
１）在挥发油提取预实验过程中，发现药材粉末
过细，较容易被冲至挥发油提取器刻度部位，与所
要收集的挥发油混合，影响提取的进行．所以本研
究选３个粒径进行试验，发现粗粉提取效果较好．
２）挥发油久置与挥发油测定管中会出现凝结
成半固体和沉降的现象，分析原因可能是因为挥发
油的密度与水接近，而且查文献［１０－１１］知血三七挥
发油中含乙酸龙脑脂、龙脑等成分，故挥发油提取
后应及时转移出挥发油提取器．
３）血三七挥发油β－ＣＹＤ包合工艺条件的正交
优选通过预试验表明，挥发油与β－ＣＹＤ的用量比
例、搅拌时间、温度及β－ＣＹＤ浓度是影响挥发油
β－ＣＹＤ包合率的因素，因此采用正交设计Ｌ９（３
４）
表进行正交实验，对挥发油β－ＣＹＤ包合工艺进行
优选．
４）由验证实验结果可知，按优选工艺进行挥
发油β－ＣＹＤ包合，含油率高于各次正交试验的结
果，工艺稳定，可靠．
５）查阅文献可知［１１］，目前人们仅对血三七叶
中挥发油进行了提取及分离，这些挥发油的活性及
挥发油的包合未见报道，因而该研究能为药材挥发
油的使用提供科学依据．
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Ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｉｎｃｌｕｓｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｌｅａｆ
ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　Ａｍｐｌｅｘｉｃａｕｌｅ　Ｄ．Ｄｏｎ　ｖａｒ．
ＸＩＡＮＧ　Ｍｅｉｘｉａｎ１，ＳＵ　Ｈａｎｗｅｎ２
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｏｕｔｈ－Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｗｕｈａｎ　４３００７４；
２．Ｗｕｈａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｒｅｎｍｉｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｈａｎ　４３００７５）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ
Ａｍｐｌｅｘｉｃａｕｌｅ　Ｄ．Ｄｏｎ　ｖａｒ．ｉｎ　Ｘｕｅｓａｎｑｉ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｔｈｅ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ
ｗａｙ　ｏｆ　ｓｔｅａｍ　ｄｉｓｔｉｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｂｙ　ｓａｔｕｒａｔｅｄ　ｗａｔｅｒ　ｓｏｌｕ－
ｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｂｙ　Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
ｄｅｓｉｇｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｃｏｎｓｉｄｅｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ，ｓｏａｋｉｎｇ　ｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ａｓ
ｍａｉｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｔｏ　ｃｈｏｏｓｅ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ａｂｏｕｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ
ｏｉｌ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ　ａｌｓｏ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ａｎｄβ－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ（β－ＣＹＤ），ｉｎｃｌｕｓ－
ｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｓｔｉｒｒｉｎｇ　ｔｉｍｅ，ｔｈｅ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ　ａｎｄ　ｗａｔｅｒ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ
ｅｆｆｅｃｔ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｗａｓ
ａｓ　ｆｏｌｏｗ：ｔｈｅ　ｄｒｕｇｓ　ｗｅｒｅ　ｃｒｕｓｈｅｄ　ｉｎｔｏ　ｃｏａｒｓｅ　ｐｏｗｄｅｒ，６ｔｉｍｅｓ　ｗａｔｅｒ　ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ａｎｄ
ｓｏａｋｅｄ　１ｈ，ｔｈｅｎ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　６ｈ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ａｓ
ｆｏｌｏｗｓ：ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｏｉｌ　ｔｏβ－ＣＹＤ　ｗａｓ　１∶５；ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｔｏβ－ＣＹＤ　ｗａｓ　１２∶１；ｔｈｅ
ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｗａｓ　１ｈａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　４０℃．Ｔｈｅ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ
ａｓ　ｈｉｇｈ　ａｓ　９８％．Ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｗｉｔｈ　ｇｏｏｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｙｉｅｌｄ
ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　Ａｍｐｌｅｘｉｃａｕｌｅ　Ｄ．Ｄｏｎ　ｖａｒ．；ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｏｉｌ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｃｌｕ－
ｓｉｏｎ；ｐｅｆｅｒｒｅｄ　ｐｒｏｃｅｓｓ