全 文 ：小复方(生晒参 、三七 、麝香)普通粉与微粉的溶出度比较
周　昕 1 , 　谢瑞芳 1 , 　周　端2 , 　楼丹飞 2 , 　李智成 3
(1.上海中医药大学附属龙华医院药剂科 , 上海 200023;2.上海中医药大学附属龙华医院高血压病研究
室 , 上海 200023;3.南汇中心医院 , 上海 200000)
收稿日期:2008-11-16
基金项目:上海市引进技术的吸收与创新计划项目 (生物技术与医药专项)超微细粉(人参 、三七 、麝香)药物性状及干预冠心病心绞痛的
比较研究资助 (2006.1-2008.12)
作者简介:周　昕(1974-),女 , 博士 ,副主任药师。研究方向:中药制剂工艺与质量标准。 Tel:(021)64385700-7308 E-mail:zhouxinren@
yahoo.com.cn
关键词:生晒参;三七;麝香;溶出度;超微粉碎
中图分类号:R9　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2010)01-0141-03
　　小复方(生晒参 、三七 、麝香)对于冠心病疗效确切 , 应
用广泛。但传统制剂价格昂贵 ,临床应用有一定限制 ,随着
超微粉碎技术的兴起 ,为临床工作者提供了新思路。
本实验通过君药生晒参中的皂苷类成分 Rg1和臣药三
七中的皂苷类成分 Rg1、R1的测定 , 观察三七 , 生晒参微粉
的溶出速度 、累计溶出量等方面的内容 , 并与不同目数的普
通粉对照 , 探讨超微粉碎技术对中药复方在体外溶出方面的
影响 , 探索中药(三七 、生晒参)微粉与普通粉中皂苷类成分
的溶出特性 , 为三七 、人参饮片及其它中药材适度粉碎提供
理论依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Agilent1100高效液相色谱仪(美国惠普公司),
TGL-16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂), SB2200
超声仪(上海必能超声仪器公司),溶出控制箱(上海黄海药
检仪器有限公司)。
1.2　试药　生晒参(上海万仕诚国药制品有限公司 , 吉林 ,
070115), 三七 (上海万仕诚国药制品有限公司 , 云南 ,
070104), 麝香 (中 国 阿坝 洲 医 药公 司 总 经销 四 川
20070628),人参皂苷 Rg1对照品(中国药品生物制品检定
所 , 703-9206),三七皂苷 R1对照品(中国药品生物制品检定
所 , 110745-200415)。
2　实验方法
2.1　色谱条件　色谱柱:AgilentC18反相柱(250 mm×4.6
mm, 5 μm);流动相:乙腈-水(23.5 ∶76.5);检测波长:203
nm;流速:0.8mL/min;柱温:25 ℃;进样量为 100 μL。
2.2　对照品溶液的配制　精密称取三七皂苷 R1适量 , 置于
5 mL量瓶中 , 用甲醇溶解并定容至刻度 , 摇匀 , 配制成含三
七皂苷 R1为 0.205 mg/mL的对照品溶液。
精密称取人参皂苷 Rg1适量 , 置于 5 mL量瓶中 , 用甲醇
溶解并定容至刻度 , 摇匀 , 配制成含人参皂苷 Rg1为 0.28
mg/mL的对照品溶液。
2.3　标准曲线的绘制　分别吸取稀释成不同浓度的三七皂
苷 R1和人参皂苷 Rg1对照品溶液注入高效液相色谱仪 ,进
样量为 100μL, 以进样浓度(μg/mL)为横坐标(X), 峰面积
为纵坐标(Y),得到回归方程。
2.4　粉末的制备及溶出度测定　将三七和生晒参用机械粉
碎机粉碎 ,并分别通过不同目数筛网 ,得到不同粗细的粉末。
另外用气流粉碎机 [ 1] , 得到三七 、生晒参微粉。包括粗粉
(24 ～ 65目)、中粉(65 ～ 100目)、细粉(100 ～ 200目)、极细
粉(<200目)、微粉(20±0.73)μm。精密称取上述不同目
数的三七粉末 、生晒参粉末和麝香 ,按处方比例混合 , 分别投
入溶出仪中 ,按照中国药典(2005年版附录)溶出度测定法 ,
以 500 mL蒸馏水为溶剂 ,桨法 , 转速为 50 r/min,温度为(37
±0.5)℃ , 分别于 0, 2, 5, 8, 10, 15, 20, 30, 45, 60, 90, 120
(min)时间点取样 1mL,同时向溶出杯中补充相同温度和体
积的水 , 取出的溶液用 0.45 μm的微孔滤膜滤过 , 离心
(10 000 r/min)10 min, 再用 0.45 μm的微孔滤膜滤过 , 取
续滤液注入高效液相色谱仪 , 测定体外溶出曲线。
2.5　统计方法　本试验统计采用 DAS2.0(孙瑞元 、郑青
山)统计软件药动学批处理模块计算体外溶出参数。
3　结　果
3.1　在现有色谱条件下 , 三七皂苷 R1和人参皂苷 Rg1出
峰时间分别在 8.611 min(图 1)和 11.683 min(图 2),混合对
照品不相互干扰(图 3), 样品溶液中两者能达到基线分离
(图 4)。
图 1　三七皂苷 R1对照品色谱图
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第 32卷　第 1期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
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Vol.32　No.1
图 2　人参皂苷 Rg1对照品色谱图
图 3　R1、Rg1混合对照品色谱图
图 4　复方样品色谱图
3.2　三七皂苷 R1和人参皂苷 Rg1的回归方程分别为 Y=
34.196X+18.813(r=0.998 6)(表 1)和 Y=38.201X+
0.219(r=0.999 9)(表 2),表明三七皂苷 R1在 4.1 ～ 24.6
μg/mL,人参皂苷 Rg1在 5.6 ～ 33.6μg/mL范围内线性关系
良好。
3.3　不同粗细粉末的溶出度试验表明(表 1、 2、 3, 图 5、6),
中粉中三七皂苷 R1和人参皂苷 Rg1的溶出速度最快;曲线
下面积亦为中粉最高 ,其次为粗粉 、细粉 、极细粉和微粉(20
μm)最低。这说明适当的粉碎有利于增加三七皂苷 R1和人
参皂苷 Rg1的溶出速度和溶出量 , 但是粉碎过细 , 反而不利
于提高溶出速度和增加溶出量。
表 1　不同目数的小复方中三七皂苷 R1的体外溶出度比较
t/min 粒　度
24～ 65目 65～ 100目 100～ 200目 <200目(20±0.73)μm
0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0
2 3.108 2 6.085 9 3.941 4 0.878 8 0.970 7
5 4.541 2 5.833 2 5.218 1 2.357 6 1.905 0
8 5.084 1 5.559 9 5.398 3 2.899 8 2.684 3
12 5.049 0 5.356 5 5.292 5 3.426 0 3.533 3
16 4.884 6 5.350 6 5.241 2 4.335 8 4.463 4
20 5.718 4 5.419 8 5.188 5 4.487 0 4.812 7
30 5.720 0 5.668 4 5.288 2 4.638 3 5.014 7
45 5.624 1 5.813 5 5.315 1 4.518 3 5.032 4
60 6.110 6 5.584 2 5.552 6 4.567 6 4.972 7
90 5.593 5 5.661 6 5.394 3 4.604 6 5.118 0
120 5.758 3 5.743 5 5.298 0 4.756 4 5.074 2
表 2　 不同目数的小复方中人参皂苷 Rg1的
体外溶出度比较
t/min 粒　度
24～ 65目 65～ 100目 100～ 200目 <200目 (20±0.73)μm
0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0
2 15.118 6 27.320 7 18.791 9 4.309 9 5.069 9
5 20.829 1 28.475 9 24.428 1 11.780 5 9.367 0
8 23.261 2 27.310 1 25.129 0 13.962 8 12.705 4
12 23.404 0 26.345 1 25.335 8 17.522 2 15.988 5
16 23.849 0 26.360 0 25.299 7 21.233 6 19.172 9
20 27.010 9 26.703 5 25.316 5 21.939 1 21.501 5
30 27.692 7 27.953 9 25.173 0 21.923 6 22.834 7
45 26.906 0 27.393 5 25.451 3 22.351 4 22.319 4
60 29.491 2 26.300 2 25.221 1 22.414 2 23.165 7
90 25.868 1 27.806 7 25.265 7 23.073 0 23.282 8
120 26.043 8 28.544 4 25.384 0 23.018 0 23.328 0
表 3　 不同目数粉末中人参皂苷 Rg1和三七皂苷 R1的体外溶出度参数
粒　度
24 ～ 65目 65～ 100目 100 ～ 200目 <200目 20μm
ginsenosideRg1
AUC(0-t) 3 153.349 3 289.213 3 008.343 2 558.025 2 570.187
Tmax/min 60 5 45 90 120
Cmax 29.491 171 2 28.544 396 5 25.451 330 5 23.072 965 1 23.328 031 2
notoginsensideR1
AUC(0-t) 669.238 678.922 638.616 520.556 563.65
Tmax/min 60 2 60 120 90
Cmax 6.110 551 54 6.085 939 44 5.552 583 53 4.756 408 17 5.117 967 44
图 5　复方三七皂苷的体外溶出曲线 图 6　复方中人参皂苷的体外溶出曲线
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ChineseTraditionalPatentMedicine
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4　讨　论
本实验中 , 复方中的三七皂苷和人参皂苷的体外溶出量
和溶出速度中粉和细粉的溶解度和溶出速度比粗粉好 , 但是
粒径更小的微粉组却反而下降。其结果说明 ,微粉不比常规
机械粉碎的粉末有优势 , 溶出速度 、累计溶出量微粉组低于
普通粉 , 与预期结果有所不同。 有文献 [ 2]的实验结果也表
明 , 以人参皂苷 Rb1为指标 , 西洋参超微粉体外溶出效果并
不优于粗粉(100目)。分析其原因可能是:(1)粉末在溶出
过程中存在溶出与吸附平衡 ,微粉溶出虽然稍多 , 但其表面
吸附也将增加。微粉的粒径很小 , 比表面积很大 , 表面能高 ,
存在大量的表面缺陷和悬键 , 具有很强的吸附性和化学活
性。 (2)三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1都属于极性较大的小
分子物质 , 微粉化以后 , 药材表面积急剧增大而使其表面能
增加 , 药粉对极性成分的吸附力增大 , 从而不易溶出。有文
献 [ 3]表明:超细粉碎对丹参中低分子量水溶性有效成分的溶
出量不仅没有促进作用 , 反而使超细粉的溶出量低于粒径较
大的常规粉。但超细粉中提取出来的脂溶性成分的溶出量
却显著地高于常规粉及饮片。
因此 ,将超微粉碎技术应用于中药基础研究时 , 只有确
定具体品种的最适粒度 , 才能发挥其优势 , 对于全粉入药的
中药材 ,是否应进行超微粉碎 ,应以化学指标结合药效指标
予以说明。当然 ,这只是体外溶出实验的结果 , 最终的结果
有待于体内吸收和药效试验来进一步验证。
参考文献:
[ 1] 　张继平 , 杨海韵.超微粉碎技术是促进中药传统产业改造的
有效途径 [ J] .中药新药与临床药理 , 2003, 14(3):209.
[ 2] 　宁宏双 , 郝爱民.超微粉碎技术在中药生产中的应用 [ J] .天
津药学 , 2005, 17(5):65.
[ 3] 　刘雅敏 , 乔立平 , 王　东 , 等.超细粉碎对丹参中成分溶出的
影响 [ J] .中医研究 , 2006, 19(9):19.
阿胶低肽酶解工艺的实验研究
付英杰 , 　田景振＊
(山东中医药大学 , 山东 济南 250355)
收稿日期:2008-11-12
作者简介:付英杰(1983-),男 ,博士研究生。研究方向:中药制剂。 Tel:(0531)89628597E-mail:pilipili@163.com
＊通讯作者:田景振(1957-),教授 ,博士生导师。 Tel:(0531)89628080E-mail:tianjingzhen@163.com
关键词:阿胶;低肽;酶解工艺
中图分类号:R284.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2010)01-0143-04
　　阿胶为马科动物驴EquusasinusL.的干燥皮或鲜皮经煎
煮 、浓缩制成的固体胶。性味甘 、平 , 归肺肝肾经 , 功能补血 、
止血 、滋阴润燥 ,主治血虚证 , 另可作肿瘤的辅助治疗 [ 1 , 2] 。
阿胶主含胶原蛋白 , 但胶原蛋白的消化吸收需要蛋白酶
参与降解 , 而适应症人群则常见脾胃虚弱或胃肠道反应 , 服
用阿胶不仅会造成患者消化系统的负担 ,而且药效也不能得
到充分的发挥。目前市售阿胶类制剂均以阿胶药材为原料 ,
无法克服上述缺点。为使阿胶类制剂更好地发挥疗效 , 并使
其酶解工艺可控 , 笔者拟模仿消化道内的条件 , 以测定的有
效低肽含量的得率为指标 ,优化阿胶酶解的最佳工艺。
1　仪器与试剂
SYC-15超级恒温水浴(南京桑力电子设备厂);LD4-2A
低速离心机(北京医用离心机厂);PHS-3C精密型 pH计(上
海三信仪表厂);中空纤维超滤装置(北京市旭邦膜设备有
限责任公司);紫外分光光度计(日立 UV-3010)。
阿胶购自济南建联中药店;胃蛋白酶(Pepsin, BR;活力
1:300 0,批号:F20031224,购于中国医药集团上海化学试剂
公司 );胰 蛋 白 酶 (Trypsin, BR;活 力 1:250 0, 批 号:
F20041022,购于国药集团化学试剂有限公司);牛血清白蛋
白(Albumin, BovineBiotech, 批号:B67328, 购于上海生工生
物工程有限公司);考马斯亮蓝(CoomassieBriliantBlueG-
250 UltraPure,批号:0241B75, 购于上海生工生物工程有限
公司);其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　考马斯亮蓝法测定方法的建立 [ 3]
考马斯亮蓝 G-250的最大吸收波长为 488nm,当它与蛋
白质结合后形成蛋白质-色素结合物 ,在 595 nm波长下有最
大吸收。其吸光度与蛋白质含量成正比 , 因此可用于蛋白质
的定量测定。该染色过程原理是通过范德华力将染料分子
与蛋白质或肽分子结合 [ 4] ,分子量越小 ,结合力越小。通过
预实验得知 , 当分子量 MWt.<1kD(千道尔顿)时 , A595在可
允许误差以内。
标准曲线的制备:分别取六只试管 , 其中一只加入 1.0
mL蒸馏水做空白 , 5只分别加入不同体积的浓度为 100μg/
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第 32卷　第 1期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
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Vol.32　No.1