全 文 :※农业科学 农业与技术 2015, Vol.35, No.20 27
草决明叶绿素荧光特性的秋季日变化
姚春娟,郭圣茂,陈兰兰,熊光康
(江西农业大学园林与艺术学院,江西 南昌 330045)
摘 要:采用 PAM-2500 型叶绿素荧光仪对秋季自然生长的草决明 1d 的叶绿素荧光参数进行测定。结果表明:秋
季时刻变化对草决明的荧光指标有显著性影响(p<0.05)。草决明的 Fo、Fm、Fv/Fm这 3项参数的变化趋势一致,
都呈现出先下降后上升的趋势,1d 中的不同时刻间存在显著性差异(p<0.05),其中在 12:00 这 3 个参数均达到
最小值。而 ETR的变化趋势与其他荧光指标的变化趋势相反,在 12:00 达到最大值。
关键词:草决明;秋季;叶绿素荧光;日变化
中图分类号:S567 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20151033024
1.3 数据处理
应用 SPSS17.0和 Excel2013进行数据处理和统计作
图分析。用 One-way ANOVA进行分析,以 P<0.05为显
著水平。
2 结果与分析
2.1 初始荧光 Fo的秋季日动态
初始荧光 Fo,表示的是 PSⅡ反应中心处于完全开放
状态时(充分暗适应以后)的荧光产量,是 PSⅡ光能辐射
中不参与光化学反应的部分。因此,可以根据 Fo的变化来
推测反 应中心可能发生的光保护机制的状况和天线色素被
激发后的电子密度 [7]。从图1可以看出,Fo的日变化趋势为:
先下降后上升,在 12:00达到最小值。8:00~ 12:00,
Fo值下降,说明该时段内发生了热耗散,有部分天线色
素吸收的能量流向了光化学部分,12:00以后随着光强
减弱,光化学反应减弱则导致了初始荧光参数的回升。
图 1 初始荧光 Fo的秋季日动态
对草决明各时刻 Fo值进行方差分析:1d中 10:
00、12:00、14:00、18:00存在显著性差异,其各余
时刻间不存在显著性差异(P<0.05);12:00时均值最小,
18:00时均值最大。
近年来,叶绿素荧光分析技术在植物生理信息采集
中得到广泛应用,在检测植物光合作用的过程中它能快
速、准确、无损伤的表达光能的吸收与转换、能量的传
递与分配、过剩光能及其耗散等一系列的生物信息,更
具反映光合作用“内在性”的特点 [1-4]。秋季作为植物生
长的第 2季,这一阶段的生长状况会对植物的整个形成
发育产生重要影响。因而,通过对植物在秋季的叶绿素
荧光特性进行研究,在一定程度上可以体现各种环境因
子变化对植物的影响,从而能够了解其在这个重要阶段
的生理调节过程。
草决明为豆科 1a生草本植物,分布于我国长江以南
的各省区。以干燥成熟的种子入药,味苦、微寒,入肝、肾、
大肠经;具有清肝明目、治疗便秘、润肠通便、防治高
血压和高血脂等多种功效,是国家卫生部第 1批公布的
69种药食同源的中药之一 [5-6]。目前,关于草决明的研究
主要集中在药理作用、化学成分、临床应用等几方面,
而对草决明的叶绿素荧光特性的研究却相对缺乏。因此,
通过对草决明的叶绿素荧光的秋季日变化进行研究,掌
握其荧光特性,为草决明的优质高产栽培提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验于江西农业大学中药园内进行,试验材料为自
然生长条件下,无遮阴处理,健康状况良好的1a生草决明。
1.2 测定方法
采用 PAM-2500便携式调制叶绿素荧光仪,于 2014
年 9月中旬,选晴天,现场随机选取健康的草决明盆栽 3
株,对每株外围的中上部叶片进行测定。测定前先对测
试叶片进行暗适应 20 min,用铅笔轻划 1条线,保证测
定时夹子每次都能夹在相同位置,同时确保测定时叶片
的自然生长角度不变,测定的时间为 8:00~ 18:00,2
h测定 1次,每株重复 3片叶。测定的荧光参数主要有:
初始荧光 Fo、最大荧光 Fm、光化学效率 Fv/Fm以及表
观光合电子传递速率 ETR。
表 1 时刻变化对草决明荧光的影响
指标 时刻
8:00 10:00 12:00 14:00 16:00 18:00
初始荧光 Fo 1.508bc 1.470d 1.455e 1.492c 1.510b 1.529a
最大荧光 Fm 5.988ab 4.784d 4.512e 5.229c 5.929b 6.224a
光化学效率 Fv/Fm 0.751b 0.710c 0.699c 0.718c 0.745b 0.773a
电子传递速率 ETR 22.083c 28.667a 28.639a 28.528a 25.583b 20.333d
注:同 1行不同小写字母表示时刻间在 0.05 水平上存在显著差异。
2.2 最大荧光 Fm的秋季日动态
最大荧光 Fm,表示的是 PSⅡ反应中心处于完全
关闭状态时(强光照射后)的荧光产量,用来反映通过
PSⅡ反应中心的电子传递情况 [8]。从图 2可以看出,Fm
的日变化趋势为:8:00~ 12:00呈下降趋势,在 12:
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00达到最小值,12:00以后持续上升,恢复到早晨时的
水平,变化幅度不大。
对草决明各时刻最大荧光 Fm值进行方差分析:草
决明 Fm值在 10:00、12:00、14:00有显著性差异,
其它时刻不存在显著性差异(P<0.05)(见表 1)。
图 2 最大荧光 Fm的秋季日动态
2.3 光化学效率 Fv/Fm的秋季日动态
Fv/Fm表示的是PSⅡ反应中心的最大光能转换效率,
一般用公式:Fv/Fm=(Fm-Fo)/Fm来计算,反映 PSⅡ反
应中心内禀光能的转换效率,是植物发生光抑制的敏感
指标,用来反映植物发生光抑制的程度,其值越高说明
发生光抑制的程度越低,值越低光抑制程度越高。从图 3
可以看出 Fv/Fm在 8:00~ 12:00随着光强的增加快速
下降,出现光抑制,在 12:00达到 1d中的最小值,说
明此时草决明对光的抑制程度最强。12:00以后随着光
强减弱又在直线回升,到 18:00光化学速率恢复到超过
8:00时的水平达到最大值,说明草决明的光合机构在高
光强下并没有收到损伤,只是光合作用暂时受到抑制。
通过方差分析发现:草决明 Fv/Fm值 10:00、12:
00、14:00之间不存在显著性差异,8:00与 16:00不
存在显著性差异(P>0.05)(见表 1)。
图 3 光化学效率 Fv/Fm的秋季日动态
2.4 表观光合电子传递速率 ETR的秋季日动态
ETR即 PSⅡ非循环光合电子传递速率,用于反映
实际光强条件下表观光合电子的传递效率的指标。它是
光合作用机构在吸收光能后发生电荷分离产生的电子,
沿着电子传递链向下传递的速率。ETR值的高低,反映
PSⅡ反应中心的捕获电子的效率的高低。从图 4可以看
出,草决明 ETR的变化规律为:早上随着光强的增加,
ETR也逐渐增大,在 10:00~ 14:00这个阶段达到最
大值,说明其捕获电子的效率也达到最大,下午随着光
强的减弱,又逐渐降低。
同时,通过方差分析:8:00、16:00、18:00之间
存在显著性差异,10:00、12:00、14:00之间不存在
显著性差异(P<0.05)(见表 1)。
图 4 光合电子传递速率 ETR的秋季日动态
3 结论与讨论
非化学能量 PSⅡ反应中心天线色素的热耗散增加
易造成 Fo的降低,而光合机构 PSⅡ反应中心的可逆性
失活破坏又会使其升高。所以,Fo的变化趋势可以反
映 PSⅡ反应中心变化的内在机制。研究草决明 1d的 Fo
值呈现出先下降后上升的变化趋势,说明草决明叶片的
PSII天线色素吸收的能量会流向光化学的部分将减少,
而用以热耗散以及荧光形式耗散的能量会增加。PSⅡ光
化学效率 Fv/Fm会随着光照强度的升高而降低,表明在
强光下,PSII活性下调,草决明叶片所吸收的光能只有
极少量参与 CO2固定和光化学电子传递。可见,草决明
的叶片在经过高温和强光后,叶片的光合结构受到光抑
制。
通过对草决明在秋季的叶绿素荧光特性日动态变化
研究,发现草决明的叶绿素荧光参数 Fo、Fm与 Fv/Fm
的日变化趋势一致,都呈现出:先下降后上升的趋势,
在 12:00均达到最小值。由此可说明草决明能够适应较
大的光强幅度,对低光强和弱光强有一定程度的抗逆性。
从 1d中草决明各荧光参数的变化来看,黄昏时,各参数
都恢复到趋于早晨的水平,表明草决明的 PSⅡ反应中心
未发生光合机构的破坏。方差分析结果显示,草决明的
叶绿素荧光日变化存在显著性差异,所以利用和改良外
界环境是实现草决明优质高产栽培的一个重要条件。
参考文献
[1] H. K. Lichtenthaler,C. Buschmann,M. Knapp. How to correctly determine
the different chlorophyll fluorescence parameters and the chlorophyll
fluorescence decrease ratio R Fd of leaves with the PAM fluorometer[J].
Photosynthetica,2005,433.
[2] 李晓,冯伟,曾晓春 .叶绿素荧光分析技术及应用进展 [J].西北植
物学报,2006(10):2186-2196.
[3] R. A. Jefferies. Effects of drought on chlorophyll fluorescence in potato
( Solanum tuberosum L.). I. Plant water status and the kinetics of
chlorophyll fluorescence[J]. Potato Research,1992,351.
[4] 高悦,吴小芹 .6种外生菌根菌对 3种松苗叶绿素含量及叶绿素荧
光参数的影响 [J].南京林业大学学报 (自然科学版 ),2010(06):9-12.
[5] 林明添 .果园优质绿肥——草决明 [J].中国南方果树,1997(06):
31.
[6] 翁成国 .有毒中药的传统药性特征研究 [D].南京中医药大学,
2014.
[7] 张向前,刘芳,朱海涛等 .水稻 Ds插入淡绿叶突变体的鉴定和遗
传分析 [J].遗传,2009(09):947-952.
[8] 陈兰兰,郭圣茂,刘辉等 .薄荷叶片在春季的荧光特性研究 [J].北
方园艺,2015(02):22-25.