全 文 ：第 9卷第 9期
2 0 1 3年 9月
亚太传统医药
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S
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蚕砂抗炎镇痛作用实验研究
施文君 ,杨 云帆 , 朱思然 , 冯极灵 ,姚嘉麟 , 沈云辉 “
(上 海 中医 药大 学 中药学院 , 上 海 2 0 1 2 0 3)
摘 要 : 目的 : 研究祛风湿类 中药蚕砂 的 抗炎镇 痛作用 , 为指 导临床合理 用 药和 开发新 药提供科学依据 。
方法 : 分别采用 醋酸扭体法 、 热板法研究蚕砂水提液对小 鼠的镇痛作 用 ,采 用二 甲苯致 小 鼠耳廓肿胀 、 角
又 菜胶致足拓肿胀模型考察蚕砂水提液的 抗炎作用 。 结果 : 蚕砂能抑制二 甲苯所致的 小 鼠耳廓肿胀和
角又 菜胶所致的足拓肿胀 , 还显著减轻由 醋酸引起的疼痛 ,提高热板实验 中小 鼠的 痛 阂值 。 结论 : 蚕砂
具有显著的 抗 炎镇痛作用 。
关键词 : 风湿 ; 蚕砂 ; 抗炎 ; 镇痛
中图分类号 : R 2 8 5 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 1 6 7 3一 2 1 9 7 ( 2 0 1 3 ) 0 9一0 0 44一 0 2
S t u d i e s o n A n t卜i n fl a m m a t o r y E f f e e t a n d A n a lg e s i e E f fe e t o f S i l k w o r m S h i t
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id e n e e s f o r g u id a n e e o f r a t io n a l
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C o n e l u s i o n : 5 11卜
w o r m s h i t h a s s ig n if ie a n t a n t卜in fl a m m a t o r y e f fe e t a n d a n a lg e s i e e f f e e t .
K e y W o r d s
: R h e u m a t i s m ; s il k w
o r m s h i t ; A n t卜in f la m m a t o r y ; A n a lg e s i e
蚕砂 , 别名蚕矢 , 始载于 《名医别录户 〕 , 为蚕蛾科 昆虫
家蚕幼虫的干燥粪便 , 以晚蚕之屎为佳 , 故又名晚蚕砂 、 原
蚕砂 , 属传统虫类 中药 。 蚕砂性味辛 、 温 , 归肝 、 脾经川 ,具
有祛风除湿 、 和胃化浊 、 活血通络等功效川 。 《本草纲 目 》记
载其可 “ 治消渴 ,瘾 结 , 及妇人血崩 ,头 风 , 风赤 眼 ,去风除
湿 ” 。 《本草再新 》提到其 “ 治风湿遏伏于脾家 ,筋骨疼痛 ,皮
肤发肿 ,腰腿疼痛 , 血痕血少 , 痘科 浆膺 不起 , 亦宜 用 之 ” 。
蚕砂含有多种化学成分 , 如叶绿素 、 果胶 、 叶酸 、 茄尼醇 、 生
物碱等仁叫 。
现代药理学研究表明 , 蚕砂具有抗肿瘤 、 降血糖 、 改善
贫血 、 抗氧化 、 消炎抑菌及治疗 口腔溃疡的作用 , 被广泛地
应用于药品 、保健品 和化妆品等领域 。 其临床上 主要用于
治疗创伤性滑膜炎 、 慢性滑膜炎 、 骨性关节炎性疾病叫 。 但
目前对蚕砂抗炎镇痛作用的临床前实验研究尚属空白 。 本
实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法 、 角叉菜胶致足踌肿胀
法 、 热板法 、醋酸扭体 法观察蚕砂水提液的抗炎镇痛作用 ,
现报道如 下 。
1 实验材料
1
.
1 仪器
A L ZO 4 J Y 4 0 0 1 电子天平 (上 海精密科学仪器有 限公
司 ) ; Y L导 6 B 智能热板仪 (山东省医学科学院设备站 ) ; Y L导
7 A 足趾容积测量仪 (山东省医学科学院设备站 ) 。
1
.
2 药物与试剂
蚕砂 (购于 上海养和堂 ) ;阿 司匹林片 (山西临汾宝珠制
药厂 ,批号 : 20 0 9 0 7 0 6 ) ;二 甲苯 (分析纯 , 国药集团 上海化学
试剂 ,批号 : 20 0 902 1 8 ) ;冰醋酸 (分析纯 , 国药集团 上海化学
试剂 ,批号 : 2 0 0 8 0 3 1 8 ) ;角叉菜胶 ( S ig m a ,货号 C l o 1 3 ) 。
蚕砂水煎液制备方法 : 每次取蚕砂 8 9 ,加 10 倍蒸馏水
(即 s o m L )以及沸石 ,置于 圆底烧瓶中回流提取 Z h ,过滤后
改用 直火加热 ,浓缩成 0 . 2 9 生药 / m L 的溶液 ,置于 4℃ 下保
收稿日期 : 201 于 。伞 18
基金项 目 :上海中医药 大学第四批大学生创 新 活动计 划项 目 (S H U T C M C X H D (Z 2 0l 1 ) 8 4)
作者简介 :施文君 ( 1 9 9 1一 ) ,女 , 上海中 医药大学在读生 ,研究方 向为 中药药理学 。
通讯作者 :沈 云辉 ( 1 9 7 8一 ) ,女 , 上海中 医药大学中药学院副教授 , 硕士 生导师 ,研究方 向为 中药药理学 。
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存备用 。
1
.
3 实验动物
昆明种小白鼠 ,清洁级 ,体重 1 8一 2 9 ,由上海中医药大
学实验动物 中心提供 (批号 : S C X K (沪 ) 20 0 7一 0 0 5 ) 。 实验
室保持安静通风 ,室温 20 一 2 5℃ ,湿度 ( 7。士 1 5 ) % 。
2 方法
2
.
1 实验动物 分组
分 4 批购买 1 4 0 只 昆明小鼠 ,前 3 批每批 3 0 只 ,第 4 批
5 0 只 (用 于热板实验合格小鼠筛选 ,合格数为 3 0 只 ) 。 适应
性饲养 5 天后 ,称量并记录每只 小鼠体重 ,根据随机数字表
法按体重值将小鼠分为 3 组 (热板实验小 鼠筛选后称重分
组 ) :模型组 、 阿 司 匹林 3 o m g / k g 剂量组 、 蚕砂 2 0 Om g / k g
剂量组 ,给药容积均为 10 m L / k g , 模型组 19 给予蒸馏水 ,药
物干预组 19 给予相应剂量药物 , 1 天 1 次 ,连续给药 7 天 。
2
.
2 二甲苯致 小鼠耳廓肿胀实 验
选择雄性小鼠 3 0 只 ,按 “ 2 . 1 ” 项所述方法分组给药 ,末
次给药 3Om in 后 , 于 每只 小 鼠右耳 正反两 面涂 上 二 甲苯
5 0胖L 致炎 , hl 后脱颈椎处死动物 , 用直径 g m m 打孔器冲下
左耳和右耳同一部位的圆片 , 于分析天平 上称重 ,计算耳廓
肿胀度 (耳廓肿胀度 一右耳片重 一 左耳片重 ) ,并计算耳廓
肿胀率 ,其中耳廓肿胀率 一 (右耳片重 一左耳片重 ) /左耳片
重 又 1 0 % 。
2
.
3 角 叉菜胶 致小 鼠足踌肿胀 实验
选取雄性小 鼠 3 0 只 , 末次给药 3Om in 后 , 于每只 小鼠
右后肢足掌远端进针至踩关节附近后皮 下注射 1 %角叉菜
胶 0 . l m L ,分别于注射完成 l h 、 3 h 和 6 h 时 , 用 足趾肿胀仪
测量小鼠足踌肿胀体 积 , 计算肿胀率 , 其中肿胀 率 ( % ) 一
(致炎后足踌容积值一 致炎前足踌容积值 ) /致炎前足踌容
积值 又 10 % 。
2
.
4 热 板实验
调定热板仪温度使 之恒定于 ( 5 5 士 0 . 5 ) ℃ 。 取 雌性小
鼠数只 ,置于热板仪上 ,按 “ 开始 ” 键记 录时间 , 自放入热板
仪起至 出现舔后足现象所需的时间 ( 、 )作为该 鼠的痛 闭值 ,
凡逃避或在 3 0 、 内不舔足者弃置不用 。 筛选合格的雌性小
鼠 3 0 只 , 分组 与给 药方法 同 “ 2 . 1 ” 项 所述 , 于末 次给 药
3 o m in 后进行热板实验 ,测定小 鼠痛闭值及痛闭提高值 , 其
中痛闭提高值 一给药后痛闭值一给药前痛闭值 。
2
.
5 醋酸扭体实验
选取昆明小 鼠 3 0 只 , 雌雄各半 , 分 组与给药 同 “ 2 . 1 ”
项 , 于末次给药 3 Om in 后 ,给予每只小鼠腹腔注射 0 . Zm L 的
0
.
6%冰醋酸 ,记录 20 m in 内小鼠扭体次数 。
2
.
6 统计学处理
实验数据 以均数 士 标差 (二 士 、 ) 表示 , 实 验数据采 用
S P S S 1 5
.
o 软件分析 , 尸 < 0 . 0 5 为差异具有统计学意义 。
3 结果
3
.
1 蚕砂对二甲苯所致 小鼠耳廓肿胀 的影 响
与模型组相比 , 阿 司 匹林与蚕砂给药组可显著降低小
鼠耳廓肿胀率 (尸 < 0 . 0 1 ) , 结果见表 1 。
表 1 蚕砂对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 ` 士 : )
组别 剂量 ( m g / k g ) 例数 (动 耳廓肿胀度 ( m g )
模 型组 一 一 10 1 8 . 8士 。 . 7 5
阿司匹林组 30 10 7 . 4士 。 . 3 5 * *
蚕砂 水提液组 2 。。。 10 8 . 2士 。 . 4。 * *
注 : * 尸 < 0 . 0 5 , * * 尸 < 0 . O l vs 模 型组 。
3
.
2 蚕砂对角叉 菜胶所 致小 鼠足踌肿胀的影响
与模型组相比 ,造模 3 h 后 , 蚕砂给药组能显著降低小
鼠足踌肿胀率 (尸 < 0 . 0 5 ) 。 造模 6 h 后 ,与模型组相比 , 阿 司
匹林与蚕砂给药组均能显著降低小鼠足踌肿胀率 ( 尸 < 0 . 01
或 尸 < 0 . 0 5 ) ,结果见表 2 。
表 2 蚕砂对角叉菜胶致小鼠足踌肿胀的影响 (丈 士 s )
组别 剂量 ( m g / k g ) 例数 ( n ) 造模后不同时间肿胀率 (% )
l h 3 h 6 h
模型组
阿司匹林组
蚕砂水提液 组
2瓷。
1O
1O
1O
4 1
.
1 5 1士 6 . 5
4 1
.
6 1 6士 5 . 2
4 4
.
9 7士 1 0 . 6
5 5
.
1 7士 9 . 6
4 4
.
90 2士 2 0 . 9
4 4
.
64 1士 9 . 7 *
4 6
.
9 1 2士 12 . 8
3 2
.
4 1 7士 13 . 1 * *
2 3
.
8 0 3士 7 . 8 * *
注 : * 尸< 0 . 0 5 , * * 尸 < 0 . O l vs 模 型组 。
3
.
3 蚕砂对热 板法小 鼠痛闭值 的影响
与模型组相比 , 阿 司匹 林与蚕砂给药组小鼠的痛闭值
显著升高 (尸 < 0 . 0 5 ) ,结果见表 3 。
表 3 蚕砂对小鼠热板法痛闭值的影响 ` 士 : )
组别 剂量 ( m g / k g ) 例 数 ( n ) 3 o m l n 痛 l闺 ( : )
模型组 一 一 10 1 1 . 5 。士 3 . 4 1
阿司匹林组 3 0 10 1 5 . 6 。士 6 . 2 4
蚕砂 水提液组 2 。。。 10 1 9 . 3 。士 6 . 6 7 * *
注 : * 尸 < 0 . 0 5 , * * 尸< 0 . O l vs 模 型组 。
3
.
4 蚕砂对冰醋酸所致小鼠扭 体次数 的影响
与模型组相比 , 阿 司 匹林与蚕砂能显著抑制冰醋酸诱
导 的小鼠扭体反应 ,减少扭体次数 ( 尸< 0 . 0 5 ) ,结果见表 4 。
表 4 蚕砂对小鼠醋酸扭体次数的影响 ` 士 : )
组别 剂量 ( m g / k g ) 例数 (n ) 扭体次数
模 型组 一 一 10 2 8 . 6士 1 7 . 。
阿司匹林 组 3 0 9 1 6 . 8士 7 . 4
蚕砂水 提液组 2 。。。 8 17 . 5士 7 . 5
4 讨论
蚕砂具有祛风除湿的功效川 川台床上 用 于治疗创伤 性
滑膜 炎 、 慢性滑膜炎 、 骨性关节炎川 。 现代药理学 研究发
现 ,炎症因子过度表达可能是诱发风湿性 、 类风湿性疾病的
重要原 因之一圈 ,而抗炎镇痛作用 是否为蚕砂治疗风湿的
作用机制 ,仍尚不明确 。 本实验采用 热板法 、 扭体法观察蚕
砂的镇痛作用 ,采用 小鼠耳廓肿胀和足趾肿胀实验观察蚕
砂的抗炎作用 。 结果显示蚕砂可显著减少醋酸引起的小鼠
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川乌煎煮时间与毒性相关性研究
倪 洁
(金陵药 业股份有限公 司技术中心 , 江 苏 南京 2 1 0 0 0 9)
摘 要 : 目的 : 揭 示 川 乌煎 煮 时 间 长短 、 给 药剂 量与 毒性 的 相 关 性 。 方 法 : 将 川乌分 别 煎 煮 15 m l n,
3 Onr
l n , l h
,
Z h
,
3 h
,
4 h
,
s h
, 给药剂 量依次为 临床 用 量的 5 、 2 0 、 4 0 、 6 4 、 9 6 、 1 10 倍 。 选择复制麻痹症 动物模
型按组分别 用 药 30 天 。 用 药的 同 时观 测模型 动物 的 生 长发育 、 脏 器 系数 、 血液生 化 学 、 病理组织 学 变化
以及停 药 30 天后 上述指标的 变 化 。 从结果中分析川乌煎煮时 间 的 长短 、 给药剂 量的 多少与毒性大 小的
相关 性 。 结果 : 川乌水煎液能够有效抑 制痹证动 物的足 拓肿胀程度 ; 明显影 响 了模 型 动物 的 生 长发育 ;
虽然对模型 动物造血 系统没有很明显的毒性 ,但是对模 型 动物 的肝脏 、 心脏 、 ’矛脏 能够产 生一定的毒性 。
川乌在煎 煮 30 m m 、 给药剂 量为 1 10 倍时其水 煎液 的毒性最大 。 结论 : 煎 煮 30 m m 或给药剂 量为 临 床常
用 量的 1 10 倍时 , 川乌的 水煎液对麻痹动物模型 产 生 的毒性 最大 , 川乌的 药效也为最佳状 态 。
关键词 : 川乌 ; 煎煮时 间 ;给药剂 量 ;毒性 ;相 关性
中图分类号 : R 2 8 5 文献标 识码 : A 文章编号 : 1 6 7 3一 2 19 7 ( 2 0 1 3 ) 0 9一 0 0 4 6一 0 2
川乌是毛食科植物乌头经过 干燥 处理后的母根 。 最
初载于 《神农本草经 》 , 被列为下 品 , 英文名 R a d ix A co n it ,
别名鹅儿花 、 铁花 、 五毒川 。 一 般在 灌丛 以及 山地草坡 中
生长 。 目前可以栽培于平地肥沃的砂质土壤 , 现主要在 四
川栽培 。 川乌始分布于长江中下 游一 带 ,向北延伸 至秦岭
和山东东部 , 向南 至广 西北部 。 药材性热 ,味辛 、 苦 ; 有大
毒 。 主治祛风除湿 、 温经止 痛 。 用 于风寒湿痹 、 关节疼痛 、
心腹冷痛 、 寒症作痛 。 另外 , 川乌有强心 以及毒性作用 , 川
乌水煎剂对离体蛙心有强心作用 。 但是川乌在煎煮过程
中其水煎液内产生的乌头碱具有很强 的毒性 , 乌头碱过量
造成中毒时 , 能够使心搏 增强 , 从而引起传导 阻滞而 至心
率不齐 ,最后心跳停止在舒张期 。 乌头碱类引起恒温动物
急性中毒的表现有 呼吸异 常兴奋川 、 运动神经麻痹 、 末稍
神经痉挛 、 流涎 、 呕 吐样开口运动 ,被称为乌头碱症状 。 本
研究探讨川乌的煎煮 时间以及 给药剂量与毒性之 间的关
系 ,现报告如 下 。
疼痛模型的扭体次数 ,提高热板实验中小鼠的痛闭值 , 抑制
二甲苯引起 的小 鼠耳肿胀 和角 叉菜胶导 致的小 鼠足趾肿
胀 ,提示蚕砂具有良好的抗炎镇痛作用 ,可能是蚕砂治疗风
湿性疾病的作用 机制之一 。 然而 , 本实验未能阐明蚕砂的
抗炎镇痛机制 ,其是否与阿 司 匹林的作用机制相同 ,抑或是
通过其他途径发挥药理学作用 ,则有待进一 步研究 。 此外 ,
蚕砂的活性成分主要包括香豆素内酷 、 黄酮类和酚类三大
类 ,其发挥抗炎镇痛作用的有效成分尚未确定 , 也有待进一
步实验发掘 。
[ 3习
[ 4习
参考文献 :
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1 0 9 7
一
1 0 9 8
.
(责任编辑 : 尹晨茄 )
ǐ |八67ē只ó厂|
[ 2习
收稿 日期 : 2 0 1 3一0 5一 0 6
作者简介 :倪洁 ( 1 9 8 0 一 ) ,金陵药业 股份有限公司技术 中心主管药师 ,研 究方向 为 中药学 。