全 文 :长春七 Libanotis Buethorimensis (Fish) DC.系伞形科岩风属植物,又名长虫七、岩风,分布于新疆、
甘肃和陕西等省区。根状茎入药,主治感冒、咳嗽、关节肿痛、跌打损伤、风湿筋骨痛等病症[1]。国内外对
长春七化学成分和药理活性进行深入研究,王长岱等[2-3]从长春七中分离出新化合物长春七素甲;张宇
洁等[4]利用细胞膜色谱模型筛选长春七中具有抑制 HeLa细胞增殖的活性成分;陈光娟等[5]发现长春七
根茎的中性油和酚酸性部分都具有很好的退热、止痛、消炎等多种动物实验活性;石娟等[6]采用醋酸致
小鼠扭体反应及小鼠热板法研究表明长春七 70%乙醇提取物和乙醚提取物有较好的镇痛作用;Bo
Liang等[7]对太白山野生长春七的花和果实挥发油利用 GC-MS联用技术进行成分分析。但是对于长
春七挥发油的抗菌、杀菌活性在国内外均没有报道,对长春七不同部位挥发油的抗菌、杀菌活性研
究,有利于寻求活性高的部位和成分,促进其药理活性的开发和利用。本文采用微量二倍连续梯度稀
释法,采用 8种菌株:大肠杆菌 ATCC25922株 (Escherichia coli ATCC25922)、伤寒沙门菌 50127株
(Salmonella typhi 50127)、鼠伤寒沙门菌 50013株(Salmonella typhimurium 50013)、肠炎沙门菌 50040株
(Salmonella enteritidis 50040)、福氏志贺菌 51065 株 (Shigella flexneri 51065)、金黄色葡萄球菌
ATCC25925株(Staphylococcus aureus ATCC25925)、白色假丝酵母菌 85021株(Candida albicans 85021)、
肺炎球菌 32201株(Streptococcus pneumoniae 32201)设计实验,比较相应的 MIC和 MBC值,测定挥发
油的抗菌、杀菌活性。
1 材料与方法
1.1 材料
长春七(花期全株)于 2005年 7月 25日采集于陕西太白山兔溜子岭,经陕西师范大学生命科学
学院田先华教授鉴定,为伞形科岩风属植物长春七。
1.2 方法
1.2.1 挥发油的提取
收稿日期:2008-08-15
基金项目:陕西省自然科学基金研究计划项目(2004B06)
作者简介:梁 波(1978-),男,陕西户县人,硕士,甘肃合作民族师范高等专科学校教务处讲师
长春七花和果实挥发油的抗菌活性研究
梁 波 1,李宝林 2
(1.合作民族师范高等专科学校教务处,甘肃合作 747000;
2.陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西西安 710062)
摘 要:采用水蒸气蒸馏法提取长春七花和果实的挥发油,分别对其挥发油进行体外抗菌活
性实验,测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),比较相应的 MIC和 MBC值,确定挥
发油的抗菌活性。 实验结果显示两种挥发油对所选取的 8种菌株最小抑菌浓度和最小杀菌浓
度都比较高。 说明这两种挥发油的抗菌活性均很弱,其药理活性还有待于进一步的研究。
关键词:长春七;挥发油;最小抑菌浓度;最小杀菌浓度
中图分类号:S567.23 文献标识码:A 文章编号:1674-0033(2008)05-0047-03
第 22卷 第 5期
2008年 10月
商洛学院学报
Journal of Shangluo University
Vo1.22 No.5
Oct. 2008
DOI:10.13440/j.slxy.1674-0033.2008.05.010
取长春七新鲜的花和干燥的果实各 500g,粉碎,水蒸气蒸馏法提取挥发油,经食盐饱和,乙醚萃取
3次,合并有机相后用无水硫酸钠干燥,回收乙醚,分别得到具有特殊香味的黄色粘稠状液体 1.25g和
3.80g,收率为 0.25%(w/w)和 0.76%(w/w),密封储藏在-4℃的冰箱中备用。
1.2.2 长春七的花和果实挥发油抗菌、杀菌活性测定
1.2.2.1 试验菌株
菌株采用中国医学细菌保藏中心提供的标准菌株冻干品 8种,2004年 5月复苏,由西安交通大
学医学院免疫与病原生物学系代为保存。本试验采用 8种菌株为:大肠杆菌 ATCC25922株、伤寒沙门
菌 50127株、鼠伤寒沙门菌 50013株、肠炎沙门菌 50040株、福氏志贺菌 51065株、金黄色葡萄球菌
ATCC25925株、白色假丝酵母菌 85021株和肺炎球菌 32201株等。
1.2.2.2 菌液和培养基的配制
菌液的配制:将细菌接种于 MH(Mueller-Hinton Broth)肉汤,置普通培养箱 37°C、24h培养,比浊
法进行记数,用培养液调配成 106CFU·mL-1。
培养基:肉汤培养基以常规方法制备肉汤培养基,采用日本多价蛋白胨,肉膏量为 0.5%。
1.2.2.3 试验方法
MIC的测定:精确称取样品,将样品溶于含 5%Tween-80的肉汤,并进行二倍连续梯度稀释。将各
浓度的样品液分别加到 96孔培养板(0.15mL/孔),再依次加入浓度为 106CFU·mL-1的菌液 50μL/孔;同
时设立细菌对照组。置于湿盒内,在 4°C的冰箱内作用 8h,普通培养箱 37°C、24h培养,观察结果。无细
菌生长孔的最小药物浓度为最小抑菌浓度(MIC)[8]。
MBC的测定:依次将细菌未生长孔 (≥MIC) 的培养物用无菌生理盐水稀释 20倍,分别吸取
0.05mL点种于琼脂平板,置于普通培养箱 37°C、24h培养。无细菌生长接种区域所对应的最小药物浓
度为最小杀菌浓度(MBC)[8]。
长春七花和果实挥发油的体外抗菌、杀菌生理活性均采用本试验方法。
2 结果与讨论
长春七花和果实的挥发油体外抗菌、杀菌活性测定采用微量二倍连续梯度稀释法。抗菌、杀菌活
性测定的 MIC和 MBC值见表 1。从表中可以看出长春七花和果实的挥发油对大肠杆菌 ATCC25922
株、伤寒沙门菌 50127株、肠炎沙门菌 50040株、鼠伤寒沙门菌 50013株、福氏志贺菌 51065株、金黄
色葡萄球菌 ATCC25925株、白色假丝酵母菌 85021株、肺炎球菌 32201株等所选择的 8种菌株均有
抑制作用,长春七花的挥发油对伤寒沙门菌 50127株、肠炎沙门菌 50040株、福氏志贺菌 51065株、白
菌株
花的挥发油/(mg/mL) 果实的挥发油/(mg/mL)
MIC MBC MIC MBC
大肠杆菌 ATCC25922株
伤寒沙门菌 50127株
肠炎沙门菌 50040株
鼠伤寒沙门菌 50013株
福氏志贺菌 51065株
金黄色葡萄球菌 ATCC25925株
白色假丝酵母菌 85021株
肺炎球菌 32201株
46.87
23.48
46.87
46.87
23.48
46.87
46.87
23.48
NT
23.48
46.87
NT
23.48
NT
46.87
46.87
51.0
25.5
25.5
51.0
25.5
25.5
25.5
51.0
51.0
25.5
51.0
51.0
25.5
25.5
25.5
51.0
注:NT: not tested(未检测出)
2008年 10月商洛学院学报48
表 1 长春七花和果实的挥发油抗菌抑菌活性试验
参考文献:
[1] 中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志:1卷·种子植物:3册[M].北京:科学出版社,1981:408-412.
[2] 王长岱,郭建文,陈 驹,等.长春七化学成分的研究[J].植物学报,1983,25(2):153-156.
[3] 王长岱,陈 驹.长春七化学成分的研究再报[J].植物学报,1986,28(2):192-195.
[4] 张宇洁,贺浪冲.用细胞膜色谱模型筛选长春七抑制 HeLa细胞增殖的活性成分[J].中国药学杂志,2005,40(6):463-465.
[5] 陈光娟,沈亚琴,马树德.长春七中性油及酚酸性部分药理作用初步研究[J].陕西新医药,1985,14(12):46-49.
[6] 石 娟,王云霞,边 敏.长春七提取物镇痛作用的实验研究[J].中国现代应用药学杂志,2006,23(2):100-102.
[7] Bo Liang,Bao-Lin Li,Fu-Jun Ma,et al.Essential Oils Composition of Libanotis buchtormensis from Taibai Mountain in
China[J].Chemistry of Natural Compounds,2007,46(6):730-732.
[8] Xie X F,Cai X Q,Zhu S Y,et al.Chemical Composition and Antimicrobial Activity of Essential Oils of Chaenomeles
Speciosa from China[J].Food Chemistry,2007,100:1312-1315.
(责任编辑:张国春)
The Study of the Antimicrobial Activities
of Essential Oil in Flowers and Fruits of
Libanotis buchtormensis (Fish) DC.
LIANG Bo1, LI Bao-lin2
(1.Hezuo Minorities Teachers College, Hezuo,Gansu 747000;
2.School of Chemistry and Materials Science, Shaanxi Normal University, Xian, Shaanxi 710062)
Abstract:To study the antimicrobial activities of the essential oils in flowers and fruits from Libanotis
buchtormensis (Fish) DC,two essential oils in flowers and fruits from L. buchtormensis were extracted by
steam-stilling, and antimicrobial activities of the essential oils were evaluated against 8 microorganisms by
minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) methods. The
results showed that the MIC and MBC of 8 microorganisms were higher than expected. The essential oils
showed a weak antimicrobial activity to elected 8 microorganisms, and the other activities of two essential
oils should be researched in the future.Moreover,antimicrobial activities of the essential oil were evaluated
against 8 microorganisms by MIC and MBC methods.
Key words: Libanotis buchtormensis (Fish) DC; essential oil; the antimicrobial effect; MIC; MBC
第 5期 49梁 波,李宝林:长春七花和果实挥发油的抗菌活性研究
色假丝酵母菌 85021株、肺炎球菌 32201株等 5种菌株有灭活作用;从长春七花的挥发油的体外抑
菌、抗菌活性测定的 MIC和 MBC值可以发现,长春七果实的挥发油对所选取的 8种菌株有较弱的杀
菌活性。从长春七果实挥发油体外抑菌、抗菌活性实验的 MIC和 MBC值可以发现,长春七果实挥发油
具有较弱的抗菌和杀菌活性,其药理活性还有待于进一步的研究。