全 文 ：2014年 云南中医学院学报 第37卷
三七叶与茎 HPLC的比较分析及 Rb3含量的测定
郑立雄 1，2，陈金东 1，2△，任杨帆 1，2，杨崇仁 1，2，3
（1.云南维和药业股份有限公司，云南玉溪 653100；2.云南省植物提取物工程研究中心，云南玉溪 653100；
3.中国科学院昆明植物研究所，云南昆明 650201）
摘要：目的 比较三七叶和三七茎的皂苷成分，为叶苷相关产品的质量提供技术保障。方法 采用 HPLC，对
三七叶和三七茎的皂苷成分进行比较，其中主要以人参皂苷 Rb3、Rb1的含量为考察指标。结果 三七叶中主要成分
为 Rb3，其中三个产地的三七叶中 Rb3平均含量为 1.025%. 三七茎秆中以 Rb1为主，Rb3微量。结论 三七叶和三七
茎中主要皂苷成分有显著的差异，为保证叶苷产品的质量稳定，应重视生产原料的选择，控制三七叶和茎的比例。
关键词：三七茎叶；HPLC；Rb3含量
中图分类号：R284.2文献标志码：A 文章编号：1000-2723（2014）05-0032-04
收稿日期：2014-05-15
作者简介：郑立雄（1983-），男，云南陆良人，工程师，执业药师，从事中药化学及中药质量控制研究工作。
△通信作者：陈金东，E-mail：94153761@qq.com.
JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine
云南中医学院学报第37卷第5期
2014年10月
Vol. 37 No. 5
10. 2014
三七（Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen）为著
名中药，通常以根入药。三七叶性温，味辛，民间常
为茶饮。《本草纲目》称三七茎叶“治折伤、跌扑出
血，敷之即止，青肿经夜即散，余功同根”。现代药理
研究表明：三七叶总皂苷具有抑制血小板聚集、降
低血脂、抗心律失常、抗脑缺血、抗炎、镇静安神以
及抗抑郁功能等作用，尤其在临床上被用于改善神
精功能，治疗失眠以及缓和焦虑等[1-5]。
三七叶主要的活性成分为三萜皂苷以及黄酮
类化合物，迄今为止，已从三七茎叶中分离到了 24
个皂苷类化合物，但多为原人参二醇型皂苷，包括：
人参皂苷 Rb1、Rb2、Rb3、Rg3、Rc、20（R）-Rh2、20（R）-
Rg3、Mc、F1、Rh1、Rh2、C-K、Re、F2、Rg1、Rd，三七皂苷
Fa、Fc、Fe、R1，七叶胆皂苷 IX、七叶胆皂苷 XIII、
XVII、O-β -D -glucopyranoside -3β，l2β，23β -triol -
20-ene-damma[6-12]。
上世纪 80年代以三七叶总皂苷为原料开发的
天然药物“七叶神安片”，有显著的临床疗效，受到
患者的欢迎，现该品种收载于《中国药典》（2010年
版）[13]。本文在优化三七叶总皂苷提取工艺技术的基
础上，应用 HPLC分析技术，对三七叶和茎的主要
皂苷成分进行分析比较，对不同产地的三七叶皂苷
成分进行比较，为提升三七叶质量分析技术，对三
七叶及其产品的品质评价提供技术基础，为叶苷相
关产品的生产提供技术及质量控制依据。
1 材料与仪器
1.1 材料
分析用三七茎叶收购自云南 3个产地，经昆明
植物研究所杨崇仁研究员鉴定为五加科植物 Panax
notoginseng（Burk.）F.H.Chen的茎叶，经拣选将三七
叶和茎分开，共 18批样品（见表 1）。
1.2 仪器
Agilent 1200液相色谱仪，二极管阵列检测器，
Zorbox SB-C18 色谱柱（5μm，4.6×250mm）；流动相
溶剂：甲醇（色谱纯，Merck），磷酸（分析纯，上海试
剂一厂），反渗滤纯化水；SK3300LH超声清洗器（上
海科导），TB-215D电子天平（德国赛多利斯）；人参
表 1 三七茎叶样品
编号 产地 批号 编号 产地 批号
三
七
叶
文山 WY20110921
三
七
茎
文山 WJ20110921
大理南涧 DY 20121025 大理南涧 DJ20121025
文山 WY 20111009 文山 WJ 20111009
文山 WY 20121013 文山 WJ20121013
玉溪黄草坝 XY20120918 玉溪黄草坝 XJ20120918
玉溪黄草坝 XY 20120927 玉溪黄草坝 XJ20120927
玉溪黄草坝 XY 20121016 玉溪黄草坝 XJ20121016
大理南涧 DY20120924 大理南涧 DJ20120924
大理南涧 DY 20121022 大理南涧 DJ20121022
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第5期
皂苷 Rb3和 Rb1，三七叶皂苷 Fa和 Fc（中科院昆明
植物研究所，纯度 98%以上）。
2 实验方法
2.1 供试品溶液的制备
分别精密称取三七叶和茎样品各 1g，加 50mL
甲醇，超声 30min，回收甲醇，残渣定容至 10mL，微
孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取人参皂苷 Rb3和 Rb1，以及三七
叶皂苷 Fa和 Fc各 5mg，置于 10mL容量瓶中，甲醇
溶解，稀释至刻度，使浓度为 0.5mg/mL，微孔滤膜
（0.45μm）滤过，即得。
2.3 Rb3、Rb1的含量测定
精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μL，
注入液相色谱仪，参照 2010版中国药典“七叶神安
片”项下方法进行含量测定[13]。
2.4 三七叶与茎的 HPLC指纹图谱比较
2.4.1 HPLC方法
Agilent 1200液相色谱仪，二极管阵列检测器，
Zorbox SB-C18色谱柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：
乙腈（A）-0.3%磷酸水（B），梯度洗脱：0min 20%A，
5min 30%A，20min 45%A；流速：1.0mL/min；柱温：
25℃；检测波长：203nm。
2.4.2 重复性、稳定性、精密度考察
① 精密度考察：取同一份供试品溶液
（WY20110921）连续进样 6次，每次 10μL。计算其
主要峰的相对保留时间和相对峰面积 RSD，结果表
明主要峰的相对保留时间 RSD值在 0.32%~0.69%
之间，相对峰面积的 RSD值在 1.47%～2.93%之间。
② 重 复 性 考 察 ： 取 同 一 批 号 三 七 叶
（WY20110921）同时称取 6 份，按供试液制备方法
平行处理，制备供试品，进样，每次 10μL计算其主
要峰的相对保留时间和相对峰面积 RSD，主要峰的
相对保留时间 RSD值在 0.19%～0.67%之间，相对峰
面积的 RSD值在 2.21%～2.85%之间。
③ 稳 定 性 考 察 ： 取 一 份 供 试 品 溶 液
（WY20110921）分别在 0，2 ，4，6，8，12 h进样，每次
10μL。计算其主要峰的相对保留时间和相对峰面积
的 RSD，主要峰的相对保留时间 RSD值在 0.30%～
1.25%之间，相对峰面积的 RSD值在 1.57%～2.16%
之间，结果表明供试品溶液在 12 h内稳定。
根据 3个产地一共 18个批次的样品的导出数
据，运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2004
A版》（研究版）软件，时间漂移在 0.3～0.8范围内变
化其结果稳定，各产地三七叶相互之间的相似度
均＞0.85，各产地三七茎相互之间的相似度均＞0.65
（大理南涧产三七茎与另外 2产地差异较大）。
3 实验结果
3.1 三七茎与叶中 Rb3、Rb1的含量测定
分析结果：三七叶以人参皂苷 Rb3为主，除此
之外，文献报道三七叶中还主要含有人参皂苷 Rc、
三七皂苷 Fc[5]。从本次测定的结果来看南涧产三七
叶人参皂苷 Rb3平均含量为 1.146%. 文山产三七叶
的 Rb3平均含量为 1.117%. 玉溪黄草坝产三七叶的
Rb3平均含量为 0.813%. 显然，产地对主要皂苷的
含量有一定的影响，而个体差异也不容忽视。三七
茎以人参皂苷 Rb3为主。其中南涧产三七茎人参皂
苷 Rb1平均含量为 1.043%. 文山产三七茎的 Rb1平
均含量为 0.819%. 玉溪黄草坝产三七茎的 Rb1平均
含量为 0.628%. 见表 2。
编号 批号 Rb3 /% Rb1 /% 编号 批号 Rb3 /% Rb1 /%
三七叶
WY20110921 0.959 0.054
三七茎
WJ20110921 0.152 0.800
DY 20121025 1.274 0.069 DJ20121025 0.430 1.000
WY 20111009 1.172 0.060 WJ 20111009 0.148 0.792
WY 20121013 1.220 0.063 WJ20121013 0.160 0.865
XY20120918 0.836 0.048 XJ20120918 0.034 0.613
XY 20120927 0.793 0.043 XJ20120927 0.036 0.650
XY 20121016 0.811 0.045 XJ20121016 0.035 0.622
DY 20120924 1.055 0.057 DJ20120924 0.431 1.020
DY 20121022 1.108 0.059 DJ20121022 0.467 1.110
表 2 三七茎与叶中 Rb3、Rb1的含量测定结果
郑立雄等：三七叶与茎HPLC的比较分析及Rb3含量的测定
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2014年 云南中医学院学报 第37卷
3.2 三七茎与叶的指纹图谱比较（见图 1~图 4） 4 讨论
三七叶与茎中的成分是不相同的，本次 HPLC
测定分析结果表明三七叶中以 Rb3为主，有少量的
Rb1，此外有文献报道三七叶中还主要含有 Rc、Fc
等成分[5]；而三七茎中以 Rb1为主，其茎中几乎不含
Rb3成分。
① 从 3个产地的比较结果来看，三七叶 HPLC
图谱呈现显著的相似性，可以从定性上表明检测的
3 个产地三七叶主要成分的一致性。而三七茎的
HPLC图谱却有差异，主要表现在：大理南涧产三七
茎中除了主要成分 Rb1与另外两产地一致外，南涧
产三七茎中还平均含有 0.44%的 Rb3，其含量远高
于另外两产地。以上结果提示，南涧产三七茎叶质
量相对优于另外两产地，而且，HPLC指纹图谱分析
对三七叶的质量鉴定具有一定的实用价值。
② 三七叶在采收过程中一般会混有一定量的
茎秆，在干燥、储存和运输过程中叶子易脆碎脱落，
一般需拣选除去茎秆，若拣选不细致，在叶苷的实
际生产过程中原料就会因三七茎所占比例不同，导
致三七叶总皂苷的成分组成与含量均有差异，影响
其产品的质量稳定，显然，从原料上重视质量是三
七叶苷生产的重要环节，尤其是从原料上解决了茎
叶混合导致的叶苷产品质量不过关的问题。
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图 1 三七叶 HPLC匹配图
三七叶皂苷Fa（1），人参皂苷Rb1（3），Rc（4），Rb3（7）
图 2 三七叶共有模式图
图 3 三七茎 HPLC匹配图
三七叶皂苷Fa（1），人参皂苷Rb1（1），Rb3（3）
图 4 三七茎共有模式图
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第5期
（上接第 26页）
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（编辑：徐建平）
Comparative Analysis and Quantitative of Rb3 Leaves and Stems of Panax notoginseng by HPLC
ZHENG Li-xiong1，2，CHEN Jin-dong1，2，REN Yang-fan1，2，YANG Chong-ren1，2，3
（1. Yunnan Weihe Pharmaceuticals Co. ，Ltd，Yuxi 653100，China；
2. Yunnan Engineering Research Center of Plant Extracts，Yuxi 653100，China；
3. Kunming Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，Kunming 650201，China）
ABSTRACT：Objective Comparison of the Saponins content of Panax notoginseng stems and leaves，and to provide technical
support for the quality of related products. Methods Rb3 content was used as indicator to compare the difference between the leaves
and stems of Panax notoginseng by HPLC. Results The leaves’main components are Ginsenoside Rb3，Rc，Fc，et al. and the stems’
main component is Ginsenoside Rb1. Conclusion The main saponin components in leaves and stems have significant difference，in
order to ensure the stable quality of product we should pay attention to the selection of raw material，control the proportion of leaf
and stem of Panax notoginseng.
KEY WORDS：leaves and stems of Panax notoginseng；HPLC；quantitative of Ginsenoside Rb3
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（编辑：杨阳）
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郑立雄等：三七叶与茎HPLC的比较分析及Rb3含量的测定
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