全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2011 年
收稿日期：2010－07－12
基金项目：河北省科技攻关项目（06220159）；河北省衡水市科技攻关项目（08069Z）
作者简介：芦站根（1971－），女，河北武邑人，副教授，硕士，主要从事植物学教学与研究，（电话）15075869529（电子信箱）luzhangen＠126．com。
第 50 卷第 7 期
2011年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 50 No.7
Apr．，2011
黄顶菊（Flaveria bidentis）是菊科黄菊属 ［1］一年
生外来入侵植物。 目前对其研究主要集中在如何防
除上，但黄顶菊具有很好的抗虫、抗菌活性［2］。 黄菊
属的近缘属植物万寿菊已被列入杀虫性植物，其主
要杀虫成分 α－三连噻吩是一种典型的光活化毒素，
且杀虫活性和 α－三连噻吩的含量成正相关 ［3］，对植
物病原菌具有光活化毒杀增效作用。而 α－三连噻吩
在黄顶菊中分布广泛，含量很高［4］，黄菊属植物还能
合成酚类化合物中的硫酸盐类黄酮物质，也具有强
的抑菌效果［5］。因此，黄顶菊有望成为一种新的天然
农药提取植物。
笔者研究了黄顶菊叶片提取物对 3 种细菌的
抑制作用，以期为植物源抑菌剂开发提供理论基础。
1 材料和方法
1．1 材料与设备
1．1．1 实验材料 黄顶菊叶片，2008 年 10 月采于
衡水湖边。
1．1．2 实验菌种 大肠杆菌 （Escherichia coli）、枯
草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、产气杆菌（Clostridi-
um perfringens）菌种由衡水学院生命科学系微生物
实验室提供。
1．1．3 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏 5．0 g、
蛋白胨 10．0 g、 琼脂 20．0 g、NaCl 5．0 g、 水 1 000
mL，pH值 7．0。
1．1．4 主要仪器设备及试剂 SB－JS－1 超净工作台
（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）、CX－250 超
声波清洗仪（北京医疗设备二厂）、ZD－85 气浴恒温
振荡器 （江苏金坛市医疗仪器厂）、YXQ－LS－SH 全
自动立式电热压力蒸汽灭菌锅（上海博迅实业有限
公司医疗设备厂）、FA1004N 电子天平（上海）、微调
移液器（法国吉尔森），HH－6 数显水浴锅、烘干箱、
500 mL 蒸馏瓶（天津产）、研钵；蒸馏水、50％乙醇、
80％乙醇、95％乙醇（国产试剂）、6 mm 滤纸片等。
黄顶菊叶片抑菌作用初步研究
芦站根
（衡水学院生命科学系，河北 衡水 053000）
摘要：用水、50％乙醇、80％乙醇和 95％乙醇从黄顶菊叶片中提取活性成分，初步探讨了其抑菌作用，结果
表明，黄顶菊提取物对大肠杆菌、产气杆菌和枯草芽孢杆菌均有不同程度的抑菌作用，其中乙醇提取液
抑菌效果强于水提取液，且 80％乙醇提取物抑菌作用最强；4 种溶剂提取物对大肠杆菌的抑制效果最强。
关键词：黄顶菊；提取物；细菌；抑菌活性
中图分类号：S482．2＋92 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2011）07－1386-02
Preliminary Study on Bacteriostasis of Flaveria bidentis Leaves
LU Zhan－gen
（Department of Biology，Hengshui University，Hengshui 053000，Hebei，China）
Abstract： The active ingredients extracted from leaves of Flaveria bidentis with water（PWE） and alcohol（PAE，50％、80％and
95％ ethanol）in Hengshui Lake were invesitigated for the antibacterial activity． The result indicated that extracts from Flaveria
bidentis had distinct inhibited effects on Escherichia coli， Bacillus subtilis and Clostridium perfringens． The 80％ alcohol
extracts had the most prominent effect on the three kinds of bacteria． The effectiveness of PWE and PAE extracts on Es-
cherichia coli was better than the others．
Key words： Flaveria bidentis； extract； bacteria； antibacterial activity
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.07.011
第 7 期
（责任编辑 王贵春）
表 1 黄顶菊叶提取物对 3 种细菌的抑制效果
提取剂
蒸馏水
50%乙醇
80%乙醇
95%乙醇
抑菌圈直径//mm
大肠杆菌
9.5 dB
13.8 aA
16.3 aA
11.3 cA
产气杆菌
7.3 cC
10.2 bB
16.4 aA
9.6 bB
枯草芽孢杆菌
9.6 bB
9.3 bB
11.9 aA
11.7 aA
注： 同列数据后的不同小写字母表示差异达 0.05 显著水平，大
写字母表示差异达 0.01 显著水平。
表 2 黄顶菊叶提取物对同种对象菌抑制作用的差
异显著性分析
对象菌
大肠杆菌
产气杆菌
枯草芽孢杆菌
最大抑菌环
直径//mm
20.0
18.0
15.0
最小抑菌环
直径//mm
9.0
6.5
8.0
显著性
**
*
*
s 值
2.96
3.88
1.36
μ 值
12.73
10.88
10.63
注：* 和 ** 分别表示差异达显著和极显著水平。
1．2 实验方法
1．2．1 黄顶菊叶片浸提液制备 将黄顶菊叶片洗
净、60℃烘箱烘干，将叶片称取 6 份，每份 10 g，在干
净的研钵内研碎， 分别于蒸馏水、50％乙醇、80％乙
醇、95％乙醇各 160 mL 中浸泡， 并置于超声波破碎
仪中振荡 20 min 后移至气浴恒温振荡器 28℃振荡
2 d， 残渣继续用以上 4 种不同浸提液 50 mL 浸泡，
于振荡器中振荡过夜， 次日将第一次与第二次的
提取液混和，水浴锅蒸馏，提取溶剂约有 25 mL 时
取出，25 mL容量瓶定容，置于 4℃冰箱冷藏待用。
1．2．2 培养基的制备 培养基分装到三角瓶，121℃
高压灭菌 20 min待用。
1．2．3 菌悬液的制备 把供试的各种菌种进行斜
面活化，然后用 10 mL 无菌生理盐水把已活化的供
试菌从试管中混匀，制成菌悬液，再用无菌吸管取
1 mL 充分混合的菌悬液于试管中， 加入 9 mL 无菌
生理盐水， 调制浓度为含菌体为 106～107个 ／ mL 的
菌悬液备用。
1．2．4 含菌平板的制备 将无菌培养基趁热倒于
平皿中， 凝固后， 将上述各菌悬液用移液枪取 100
μL滴到平皿，再用无菌的涂布棒迅速将菌液涂抹均
匀，制成含菌平板。
1．2．5 抗菌活性的测定 用直径为 6 mm 的灭菌滤
纸片分别在蒸馏水、50％乙醇、80％乙醇、95％乙醇 4
种不同的浸提液中浸泡 3 h，37℃温箱干燥后， 用紫
外灯照射灭菌 10～15 min， 用无菌镊子将浸透不同
浓度溶液的滤纸片放在含菌平板上 37℃培养 72 h，
测量抑菌环直径；小于或等于 7 mm 判为抑菌，同一
浓度所有滤纸片均有抑制作用判为合格。 根据抑菌
圈的大小判断不同提取液对供试菌的抑制效果 ［6，7］。
各提取液的每项抑菌实验均平行重复 3次。
2 结果与分析
从表 1 可以看出，50％、80％、95％乙醇和水提
取液对大肠杆菌、产气杆菌、枯草芽孢杆菌都有抑
制作用， 其中 80％乙醇提取液的抑菌作用最为明
显，蒸馏水提取液的抑菌作用最差。80％乙醇提取液
对 3 种细菌的抑菌效果均最好，而 95％乙醇提取液
对枯草芽孢杆菌的抑制效果与 80％乙醇提取液的
抑制效果差异不显著，；95%乙醇提取液对大肠杆菌
的抑制效果显著高于 80%乙醇提取液。
各提取物对同种对象菌抑制作用的差异显著
性分析如表 2 所示，4 种溶剂提取物对每种对象菌
的抑制作用均差异显著，且对大肠杆菌的抑制效果
最强，对产气杆菌与枯草芽孢杆菌的抑制效果差异
显著。 说明 4种溶剂获得的黄顶菊提取物可以实现
对其中具有抑菌作用成分的初步分离。
3 结论与讨论
黄顶菊水提取液和醇提取液都具有不同程度
的抑菌活性，其中醇提取液抑菌效果强，且 80％的
抑菌效力强于 50％和 95％，这说明 80％乙醇作溶剂
更容易使黄顶菊体内有效抑菌物质提取出来。 4 种
溶剂提取物对大肠杆菌的抑制效果最强，说明大肠
杆菌对黄顶菊的提取物较敏感。
本实验只是初步探讨了黄顶菊的抑菌作用，需
要进一步地测定其最小抑菌浓度和半致死浓度。 黄
顶菊的抑菌作用成分及其他溶剂提取液的抑菌效
果尚待进一步的研究。
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芦站根：黄顶菊叶片抑制作用初步研究 1387