全 文 ：黄海葵附生真菌 Penicillium thomii的化学成分
蒋　亭1 , 田　黎2 , 郭爱华1 , 付宏征1 , 裴月湖3 , 林文翰1＊
(1.北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室 , 北京 100083;2.国家海洋局第一海洋研究所生物活性物质
重点实验室 , 山东 青岛 266003;3.沈阳药科大学天然药物化学教研室 , 辽宁 沈阳 110015)
摘要:目的　研究黄海葵(anemone)附生真菌 Penicillium thomii的化学成分。方法　用各种色谱技术进行分离纯
化 ,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果　从黄海葵附生真菌 Penicillium thomii 菌丝体中分离得到 5 个化
合物 ,分别为青霉 酮 A(I), 对甲基苯甲酸(II), 1-O-十六碳烷酰-2-O-(9-十八碳烯酰)-3-O-(9 , 12-十八碳二烯酰)甘
油酯(III), 5α, 8α-环二氧-24ζ-甲基胆甾-6 , 22-二烯-3β-醇(IV)和大黄素(V)。结论　青霉 酮 A(I)为新化合物 , 化合
物 II , III , IV和 V系首次从该属中分离得到。
关键词:真菌;青霉属;青霉 酮 A
中图分类号:R284.1;R284.2　　　文献标识码:A　　　文章编号:0513-4870(2002)04-0271-04
　　从黄海葵(Anthopleura xanthogrammica)附体中分
离纯化得到一株真菌 ,鉴定为 Penicillium thomii 。前
文[ 1] 已报道了从其上清液中分离并已鉴定 4个已知
化合物 。我们以抗真菌活性筛选为导向 ,从菌丝体
中又分离得到 5 个有机化合物:青霉 酮 A(I),对
甲基苯甲酸(II),1-O-十六碳烷酰-2-O-(9-十八碳烯
酰)-3-O-(9 ,12-十八碳二烯酰)甘油酯(III),5α, 8α-
环二氧-24ζ-甲基胆甾-6 , 22-二烯-3β-醇(IV)和大黄
素(V)。本文报道其中的新化合物青霉 酮A(I)的
分离和结构解析 。
化合物 I 　黄色固体 , mp 235 ～ 237℃, [ α] 25D
-2.201(c 0.25 ,Me2CO), FeCl3 反应阳性 ,提示分子
中含有酚羟基 。由 HRESI-MS 确定分子式为 C32H30
O14[m z:639.1711 ,(M ++1),计算值:639.1708] ,不
饱和度为 18。1H和13CNMR谱中出现的信号峰皆为
积分值和丰度相近的对峰 ,推断该化合物为两结构
相近片断的偶联 。1HNMR谱中存在两对活泼氢信
号δ:13.76(s , 1H), 13.71(s , 1H), 11.65(s , 1H)和
11.39(s ,1H);两对 AB 偶合芳环质子δ:7.81(d , J=
8.7 Hz ,1H), 6.63(d , J=8.7 Hz , 1H)和δ:7.50 (d , J
=8.7 Hz ,1H),6.61(d , J=8.7 Hz , 1H);1 对甲氧基
信号δ:3.73(s ,3H)和 3.68(s ,3H);1对甲基信号δ:
收稿日期:2001-09-17.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(40176038 , 29932030).
作者简介:蒋　亭(1974-),男 ,博士生;
林文翰(1960-),男 ,博士 ,教授 ,博士生导师.
＊通讯作者　Tel:(010)62062210 , Fax:(010)62092724 ,
E-mail:whlin@mai l.bjmu.edu.cn
1.19(d , J=6.6 Hz ,3H)和δ:1.12(d , J=6.0 Hz ,3H);
1对羟次甲基信号δ:3.94(d , J=10.8 Hz ,1H)和3.84
(d , J=10.8 Hz ,1H)。此外 ,高场区含 6个脂肪质子
信号δ:2.28 ～ 2.75(m , 6H)。13CNMR和 DEPT 谱提
示该化合物有 18个季碳信号 ,分别为δ:187.18(s),
187.11(s), 177.66(s),177.29(s), 170.30(s),170.12
(s), 161.71(s), 159.33(s), 158.26(s), 155.25(s),
115.42(s), 118.01(s),107.47(s), 106.95(s),101.65
(s), 101.47(s),84.90(s),84.83(s);8个叔碳信号δ:
140.69(d), 140.65(d), 110.41(d),107.37(d), 76.81
(d),76.61(d), 29.28(d)和 29.06(d);2个仲碳信号
δ:36.24(t)和 36.20(t);4个甲基信号 δ:53.29(q),
53.21(q),18.01(q)和 17.92(q)。HMQC谱进一步归
属了上述质子和与质子相连接碳信号的化学位移
(表 1)。
HMQC谱归属芳香质子δ:7.81(d , J=8.7 Hz ,3-
H)与δ:6.63(d , J=8.7 Hz , 4-H)对应碳的化学位移
信号为 δ:140.69(d , C-3)和 107.37(d , C-4)。HMBC
谱表明 ,3-H 分别与季碳δ:158.26(s ,C-4a)和 159.33
(s ,C-1)远程相关;4-H 与δ:158.26(s , C-4a),106.95
(s , C-9a), 118.01(s , C-2)以及与不饱和酮羰基 δ:
187.18(s ,C-9)信号偶合相关 ,推定芳环的 C-1 ,C-2 ,
C-4a ,C-9a位被基团取代;活泼质子δ:11.65(s , 1H)
与δ:159.33(s ,C-1), 106.95(s ,C-9a),118.01(s ,C-2)
碳信号相关 ,表明一酚羟基取代在该芳环的C-1位。
1
H-1H COSY谱中 ,质子δ:2.43(m ,6-H)分别与
质子 δ:3.94(d , J =10 Hz , 5-H),偕二质子δ:2.28
(dd , J=18.6 , 6.0 Hz , 7a-H)和 2.75(dd , 18.6 , 10.2 ,
·271·药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2002 , 37(4):271-274
DOI :10.16438/j.0513-4870.2002.04.008
7b-H)以及仲甲基δ:1.19(d , J=6.6Hz ,11-H)偶合相
关;HMQC 谱归属了该结构片断的对应碳信号分别
为δ:76.61(d ,C-5), 29.28(d , C-6), 36.24(t , C-7)和
18.01(q ,C-11)。HMBC 谱中 ,活泼质子δ:13.76(s ,
8-OH)与烯碳δ:177.66(s ,C-8)和101.65(s ,C-8a),并
与δ:36.24(t ,C-7)远程相关 ,与δ:187.18(s ,9-C=O)
有很弱的相关信号;5-H 分别与δ:84.90(s , C-10a),
170.30(s ,12-C=O),C-6 ,C-7 , C-11 偶合相关 。甲氧
基δ:3.73(s ,13-OCH3)与δ:170.30(s , 12-C=O)相关
表明结构中含羧甲酯基团 。根据上述波谱分析推断
I含结构片断 A(图 1)。该结构片断与已知化合物
terahydroxanthoneA-A[ 2] 中的结构片断及其波谱数据
相似。综合1H-1H COSY , HMQC 和 HMBC 谱的分析
推断 , I的另一结构片断 B与 A 类同 。HMBC 谱提
示 ,片断 B的芳香质子δ:7.50(d , J=8.7 Hz ,3′-H)与
δ:161.71(s , C-1′),δ:118.01(s , C-2)和δ:155.25(s ,
C-4a′)偶合相关 ,但酚羟基δ:11.39(s ,OH-1′)与 δ:
110.41(d , C-2′), 161.71(s , C-1′)和 δ:107.47(s , C-
9a′)偶合相关 ,提示该酚羟基取代于 C-1′位 。故推
断结构 B如图 1所示。进一步分析 HMBC 谱发现 ,
3-H 与C-4′,3′-H 与C-2间存在偶合相关点 ,表明片
断A和 B通过 C-4′和C-2的碳-碳相连接。因此 ,确
定 I的化学结构如图 2所示 。
Figure 1　The key HMBC correlation of moieties A and B
　　化合物 I的立体构型通过 NOSEY谱以及与已
知化合物 terahydroxanthoneA-A[ 2] 进行碳谱数据比较
确定 。NOSEY 谱中 , 5-H(δ3.94)与甲基 11-H
(δ1.19)有NOE相关 ,但与甲氧基 13-H无 NOE 偶合
相关 ,提示 5-H和 6-CH3 为 β-构型 ,羧甲基基团为α-
构型。同样 ,NOESY谱出现 5′-H 与甲基 11′-H的偶
合相关峰 ,未出现 5′-H与羧甲基13′-H的相关峰 ,判
断5′-H 和 11′-H 为 β-构型 ,羧甲基基团为α-构型。
此外 , I的 C-10a ,C-10a′,C-5 ,C-5′和 C-6 ,C-6′位碳的
化学位移与化合物 terahydroxanthoneA-A对应结构片
断的波谱数据差距甚微 ,且 terahydroxanthone A-A的
构型经 X-ray 方法确定 ,进一步确证了 I的立体结构
如图2所示。1H和13CNMR数据归属见表 1。
Table 1　NMR spectral data of compound I(acetone-
d6)
No. 　C　δC
　H
　δH
H long range
correlated C
H correlated H
1 159.33(s) 1-OH ,3-H
2 118.01(s) 1-OH ,4-H , 3′-H
3 140.69(d) 7.81(d , 8.7) 4-H
4 107.37(d) 6.63(d , 8.7) 3-H
5 76.61(d) 3.94(d , 10.8)6-H , 7-H , 11-H 6-H
6 29.28(d) 2.43(m) 5-H , 7-H , 11-H 5-H , 7-H , 11-H
7a 36.24(t) 2.28(m) 8-OH ,11-H 6-H
7b 2.75(m)
8 177.66(s) 8-OH ,7-H , 11-H
9 187.18(s) 8-OH ,4-H
11 18.01(q) 1.19(d , 6.6) 5-H , 6-H 6-H
12 170.30(s) 5-H , 13-H
13 53.29(q) 3.73(s)
4a 158.26(s) 3-H , 4-H
8a 101.65(s) 8-OH ,7-H
9a 106.95(s) 1-OH ,4-H
10a 84.90(s) 5-H
1-OH 11.65(s)
8-OH 13.76(s)
1′ 161.71(s) 1′-OH , 2-H , 3-H 3′-H
2′ 110.41(d) 6.61(d , 8.7) 1′-OH 2′-H
3′ 140.65(d) 7.50(d , 8.7)
4′ 115.42(s) 3-H , 2′-H 6′-H
5′ 76.81(d) 3.84(d , 10.8)6′-H , 7′-H ,11′-H 5′-H , 7′-H , 11′-H
6′ 29.06(d) 2.42(m) 5′-H , 7′-H ,11′-H 6′-H
7a′ 36.20(t) 2.33(m) 8′-OH , 11′-H
7b′ 2.71(m)
8′ 177.29(s) 8′-OH , 7′-H , 11′-H
9′ 187.11(s) 8′-OH 6′-H
11′ 17.92(q) 1.12(d , 6.0) 5′-H , 6′-H
12′ 170.12(s) 5′-H , 13′-H
13′ 53.21(q) 3.68(s)
4′a 155.25(s) 3′-H
8′a 101.47(s) 8′-OH , 7′-H
9′a 107.47(s) 1′-OH , 2′-H
10′a 84.83(s) 5′-H
1′-OH 11.39(s)
8′-OH 13.71(s)
·272· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2002 , 37(4):271-274
Figure 2　Structure of the compound I
实 验 部 分
　　熔点用 XT4A 型显微熔点测定仪测定 ,温度未
校正;比旋光用WZZ-15自动旋光仪测定;质谱用
ZAB-HS型质谱仪测定;核磁共振用 Varian-500 MHz
及Varian-300MHz型核磁共振仪测定 ,TMS 为内标 ,
Acetone-d6 , DMSO-d6 及 CDCl3 为溶剂;红外光谱用
Perking-Elmer-559B型测定(KBr 压片)。色谱用硅胶
系青岛海洋化工厂产品 ,所用溶剂均为分析纯 ,由北
京化工厂生产。真菌菌株由国家海洋局第一海洋研
究所生物活性物质重点实验室提供 ,菌种由国家海
洋局第一海洋研究所田黎教授鉴定 ,并保留在国家
海洋局第一海洋研究所生物活性物质重点实验室 。
其宿主为黄海葵(Anthopleura xanthogrammica),菌种
培养发酵采用人工海水 PDA 培养液 ,置转速 150
r·min-1震荡器 25℃培养 6 d。
1　提取与分离
菌种(Penicillium thomii)菌丝体(湿重 42 g)用
Me2CO 2.5 L 动态提取 3次(24 h 次),合并 Me2CO
萃取液减压回收 Me2CO得浸膏 13.6 g ,经VLC 硅胶
柱色谱(200 ～ 300目),CHCl3-MeOH 梯度洗脱得 Fr 1
～ 10 ,其中 Fr 1(5.66 g)经多次常压硅胶柱色谱(100
～ 200 目)得化合物 III(3.30 g), IV(14.5 g);Fr 9
(313 mg)经常压硅胶柱色谱(100 ～ 200 目), C6H14-
Me2CO(8∶1)洗脱得Fr 1 , Fr 2 ,Fr 1(30 mg)经常压硅
胶柱色谱(100 ～ 200目),石油醚-Me2CO(8∶1)洗脱最
后经石油迷-Me2CO 重结晶得化合物 V(6.7 mg);Fr
2(280 mg)经多次常压硅胶柱色谱(100 ～ 200目)得
化合物 I(5.5 mg)及 II(5.0 mg)。
2　结构鉴定
化合物 I　黄色固体 , mp 235 ～ 237℃, [ α] 25D
-2.201(c 0.25 , Me2CO), FeCl3 反应阳性 , FAB-MS
(positive):639(M+H)+ , 579 ,288 , 151;NMR数据见
表 1。
化合物 II　无色晶体 ,溴甲酚绿反应阳性 。mp
180 ～ 183℃, 1HNMR(DMSO-d6)δ:7.87(2H , d , J=8.7
Hz),7.67(2H ,d , J=8.7 Hz),2.08(3H , s),10.25(1H ,
br s), 13 CNMR(DMSO-d6)δ:143.25(s), 130.36(d),
128.01(s),18.00(d),168.85(s),24.00(q)。
化合物 III　白色固体 , 1HNMR(CDCl3)δ:4.14
(dd , J=11.4 , 5.4 Hz , 1b , 3b-H), 4.29(dd , J=11.4 ,
4.5 Hz , 1a , 3a-H), 5.30(m , 2-H), 2.78(m , 11 -H),
2.30(t , J=7.5 Hz , 2 , 2″,2 -H), 2.03(m , 8″, 11″, 8 ,
14 -H),1.61(m , 3′,3″, 3 -H), 0.89(m , 16′, 18″, 18 -
H);13 CNMR(CDCl3)δ:61.97(C-1 , 3), 68.82(C-2),
173.02(C-1′, 1″), 172.60 (C-2′), 130.04(C-9″),
129.85 (C-10″), 129.85 (C-9 ), 129.56 (C-10 ),
127.97(C-12 ), 127.82(C-13 ), 34.05(C-2′, 2″, 2 ),
31.83(C-14′, 16″, 16 ), 27.11(C-8″, 11″, 8 , 14 ),
22.57(C-15′, 17″, 17 ), 13.97(C-16′, 18″, 18 );EI-
MS:856(M +), 601 , 577 , 394 , 265 , 239 , 263 , 149 , 95 ,
81 ,69。以上理化性质与及波谱数据与文献[ 3] 基本
一致。
化合物 IV　白色固体 , Liebermann-burchard 反
应阳性 ,mp 177 ～ 180℃。1HNMR(CDCl3)δ:3.96(m ,
3-H),6.23(d , J=8.7 Hz ,6-H), 6.50(d , J=8.7 Hz ,7-
H), 0.80(3H , s , 18-H), 0.88(3H , s ,19-H), 1.00(d , J
=6.6 Hz , 21-H), 5.22(dd , J=15.3 , 8.4 Hz , 22-H),
5.14(dd , J=15.3 ,8.4 Hz ,23-H),0.83(6H , d , J=6.6
Hz ,26 ,27-H),0.90(3H , d , J=6.6 Hz , 28-H);13CNMR
(CDCl3)δ:135.39 , 135.17 , 132.29 , 130.67 , 82.11 ,
79.38 , 66.34 , 56.20 , 51.66 , 51.82 , 44.52 , 42.74 ,
39.63 , 39.32 , 36.91 , 34.69 , 33.01 , 31.39 , 30.06 ,
28.56 , 23.36 , 20.82 , 20.57 , 19.87 , 19.59 , 18.13 ,
17.49 ,12.83;EI-MS:428(M +), 411 , 396(基峰), 379 ,
365 ,337 , 251 ,221 ,107 ,91 ,69 , 55 ,42。以上理化性质
与及波谱数据与文献[ 4]基本一致 。
化合物 V　橙黄色针状结晶 , FeCl3 反应阳性。
mp 253 ～ 256℃, 1HNMR(Acetone-d6)δ:7.50(1H , br
s ,5-H),7.08(1H ,br s ,7-H), 7.20(1H , d , J=2.1 Hz ,
4-H),6.6(1H , d , J=2.1 Hz , 2-H);13CNMR(Acetone-
d6)δ:165.91(C-1), 108.64(C-2), 165.91(C-3),
109.69(C-4), 121.42(C-5), 149.45(C-6), 124.80(C-
7),162.90(C-8),191.54(C-9), 182.25(C-10),134.12
(C-11),114.35(C-12),110.12(C-13), 136.45(C-14),
·273·药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2002 , 37(4):271-274
21.10(C-15)。以上理化性质与及波谱数据与文献
[ 5]基本一致 。
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Medical Publishing House.1986.384-385.
CHEMICAL CONSTITUENTS FROM MARINE
FUNGUS PENICILLIUM THOMII
JIANG Ting
1 , TIAN Li2 , GUO Ai-hua1 , FU Hong-zheng1 , PEI Yue-hu3 , LIN Wen-han1
(1 .National Research Laboratories of Natural and Biomimetic Drugs , Peking University , Beijing 100083 , China;
2 .First Institute of Oceanography , State Oceanic Administration ,Qingdao 266061 , China;
3 .Department of Phytochemistry , Shenyang Pharmaceutical Univerity , Shenyang 110015 , China)
ABSTRACT:AIM　To investigate the bioactive constituents from the mycelium of Penicillium thomii.Which
isolated from Anemone collected in Qingdao beach.METHODS 　The constituents were separated by using various
chromatography and the structures were identified on the basis of extensive spectral analysis.RESULTS 　Five
compounds , namely penicillixanthone A(I), p-methylbenzolic acid(II), 1-O-hexadecanoyl-2-O-(9-octadecenoyl)-3-
O-(9 , 12-octadecadienoyl)glycerol (III), 5α, 8α-epidioxy-24ζ-methylcholesta-6 , 22-dien-3β-ol (IV)and 1 , 6 , 8-
trihydroxyl-3-methyl-9 , 10-anthracenedione (V), were isolated from the mycelium of Penicillium thomii.
CONCLUSION　Penicillixanthone A is a new compound , while the others are isolated from Penicillium thomii for the
first time.
KEYWORDS:fungus;Penicillium thomii;penicillixanthone A
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