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甘肃道地药材甘草商品质量研究



全 文 :Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2012 Vol.25 No.3
中国科技 核心期刊
方 药·道地药材
甘草为豆科植物乌拉尔甘草 Glycyrrhiza
uralensis Fisch.、胀果甘草 Glycyrrhiza inflate Bat.、
或光果甘草 Glycyrrhiza glabra L.的根[1 ],甘肃是
我国西北地区乌拉尔甘草的主要产区。甘草具有
补脾益气、祛痰止咳、缓急止痛、清热解毒、调和诸
药之功效[2]。
近年来文献报道[3-7 ]多集中于甘草的质量控
制,即测定甘草酸的含量、药理作用、临床应用方
面,但对甘草道地产区商品等级划分、品质综合评
价研究较少,使甘肃道地药材甘草商品在等级划
分、质量评价方面缺乏统一标准,药材商品的附加
值较低,甘肃甘草资源和种植面积优势不能转化
为经济优势。笔者通过实地调查,对甘肃道地药材
甘草商品等级划分及质量进行相关研究,以甘草
苷、甘草酸含量为指标性成分,初步探讨商品等级
与药材质量的相关性,以期为规范药材市场,提高
道地药材品质,扩大药材商品出口份额,增加农民
收入,促进地方经济发展等提供参考。
1 仪器与试药
高效液相 Agilent 1200(安捷伦公司生产),
检测器 G131513 二极管阵列检测器 (美国生产);
BS 224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限
公司生产);KQ-250高频数控超声波清洗仪(昆山
市超声仪器有限公司生产);DJ-02型中药粉碎机
(上海淀久中药机械制造有限公司生产)。
本实验样品采收于甘肃金塔县、瓜州县、玉门
市、高台县、永昌县、漳县、临洮县 7 个甘草主产
区,经甘肃中医学院中药鉴定学教研室李成义教
授鉴定,为豆科植物甘草的干燥根和根茎。甘草不
同商品等级外观性状划分参考国家规定的《七十
六种药材商品规格标准》,见表 1。
甘肃道地药材甘草商品质量研究 *
李成义,马艳茹,魏学明,王明伟△
甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000
[摘 要]目的:采用高效液相色谱法测定甘草不同商品等级中甘草苷、甘草酸铵的含量,并对各等级甘草
药材质量做客观比较。方法:用高效液相色谱法,使用 ZORBAX Edipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱
柱;以乙腈为流动相 A,以 0.05%磷酸溶液为流动相 B进行梯度洗脱;检测波长为 237nm。结果:甘肃产甘草不同
商品等级中甘草苷、甘草酸铵含量有明显差异,其大草(A)、条草一(B)、二(C)、三(D)级中指标性成分含量均高于
药典规定,毛草(E)质量较次,指标性成分含量未达到药典规定要求。结论:甘草商品等级与指标性成分含量呈正
相关性,等级越好其质量越好,其中以甘肃道地产区金塔县药材质量较好。
[关键词]甘草;高效液相色谱法;甘草苷;甘草酸铵;商品等级;甘肃
[中图分类号]R282 [文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2012)03-0006-03
Q uality ofGanCao from Gansu
LI Cheng-yi, MA Yan-ru, WEI Xue-ming, WANG Ming-wei
Gansu University of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China
Abstract O bjective:To detectthe contents of liquiritin and am m onium glycyrrhetate in GanCao (Glycyrrhiza
uralensis Fisch) of different com m ercial grades by H PLC and m ake objective com parisons of GanCao of different
com m ercialgrades.M ethod:H PLC ,ZO R B A X Edipse X D B -C 18 colum n(250 m m ×4.6 m m ,5 μm)chrom atographic
colum n;m obile phase:acetonitrile(A )0.05% phosphoric acid solution(B )(G radientelution);The detection w avelength
w as 237 nm .R esult:The com parisons of contents of liquiritin and am m onium glycyrrhetate in GanCao of different
com m ercialgradesfrom G ansu show ed obviousdifferences.The contentsofindex com ponentsin GanCao ofA (apical
diam eters>2.5 cm ),B (1.5 cm<apicaldiam eters<2.5 cm ),C (1.0cm<apicaldiam eters<1.5 cm ),D (0.5 cm<apical
diam eters<1.0 cm )w ere higherthan the standards setin codex,w hile the contents ofindex com ponents in GanCao of
E (apical diam eters<0.5 cm ) w ere low er than the standards set in codex. C onclusion: the com m ercial grades of
GanCao w ere positively associated w ith index com ponents,the higher the grade w as,and the better the quality w as.
The herbsfrom Jinta C ounty ofGansu Pronvince w ere the best.
Keywords GanCao(Glycyrrhiza uralensis Fisch);high perform ance liquid chrom atography (H PLC );liquiritin;
am m onium glycyrrhetate;com m ercialgrade;Gansu
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中国科技 核心期刊
2012 年第 25 卷第 3 期
A.甘草苷对照品色谱图 B.甘草酸铵对照品色谱图 C.样品色谱图
图 1 高效液相色谱图
2.5 精密度试验 取甘草(金塔县条草一级)供
试品溶液,连续进样 6次,以甘草苷和甘草酸铵峰
面积做统计。结果:甘草苷 RSD=0.31%,甘草酸铵
RSD=0.19%,相对峰面积的 RSD均小于 3%,表明仪
器精密度良好。
2.6 稳定性试验 取甘草 (金塔县条草一级)供
试品溶液,分别于 0、2、4、6、8、10、12、16、20、24 小
时进行测定,以甘草苷和甘草酸铵的峰面积做统
计。结果:甘草苷 RSD=1.73%,甘草酸铵 RSD=1.90%,
相对峰面积的 RSD均小于 3%,表明供试品溶液在
24 小时内基本稳定。
2.7 重复性试验 取甘草(金塔县条草一级)6
份,按照 2.3项进行制备,依次测定,以甘草苷和
甘草酸铵含量做统计。结果:甘草苷 RSD=2.05%,甘
草酸铵 RSD=2.68%,其甘草苷和甘草酸铵含量的
RSD均小于 3%,表明重复性良好。
2.8 加样回收率试验 取已知含量的同一批样
品(瓜州条草三级)6份,称定重量,分别加入甘草
苷、甘草酸铵对照品,按 2.3 项下制备供试品溶
液,按 2.1项下色谱条件进样,测定甘草苷、甘草
酸铵的含量,计算加样回收率,结果见表 3。
2.9 样品含量测定 按 2.3项下方法制备供试
品溶液,对采集不同产地不同商品等级甘草药材
进行甘草苷、甘草酸铵含量测定,结果见表 4。
3 结果
从上述实验结果可以看出,甘草不同产地商
品等级间差异较大,甘草苷、甘草酸铵含量随着等
级的降低而降低,等级越好,其指标性成分含量越
高。甘草不同商品等级中甘草苷、甘草酸铵含量高
于 2010版《中国药典》规定的限量,但各地区毛草
方 药·道地药材
表 1 甘草不同商品等级外观性状划分
等级 外观性状 芦头顶端直径
大草(A) 呈圆柱形,单枝顺直。表面红 2.5 cm以上
条草一级(B) 棕色、棕黄色或灰棕色,皮细紧, 1.5~2.5 cm
条草二级(C) 有纵纹,斩去头尾,口面整齐。 1.0~1.5 cm
条草三级(D) 质坚实、体质量。断面黄白色, 0.5~1.0 cm
粉性足。味甜。
呈圆柱形弯曲的小草,去净残
毛草(E) 茎,不分长短。表面红棕色、棕 0.5 cm以下
黄色或灰棕色。断面黄白色,味甜。
乙醇(分析纯,天津市光复精细化工研究所提
供);乙腈(色谱纯,天津市光复精细化工研究所提
供,产品批号:Q/12NK 4021-2003);磷酸为优级纯;
水为娃哈哈纯净水。甘草苷(中国药品生物制品检
定所提供,批号:111610-200401);甘草酸铵(中国
药品生物制品检定所提供,批号:110731-200615)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为ZORBAX Edipse XDB-C18
柱(4.60 mm×250 mm,5 μm);以乙腈(A)-0.05%磷酸
溶液(B)为流动相;按照下表进行梯度洗脱;流速
为 1.0 mL/min;进样量为 10 μL;柱温为 25℃;检
测波长为 237 nm。理论塔板数按甘草苷峰精算不
得低于 5 000,见表 2。
表 2 梯度洗脱条件
时间 /min 流动相 A/% 流动相 B/%
0~8 19 81
8~35 19→50 81→50
35~36 50→100 50→0
36~40 100→19 0→81
2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取甘草苷
对照品、甘草酸铵对照品适量,精密称定,加入 70%
乙醇分别制成每 1 mL 含甘草苷 24.6 μg、甘草酸
铵 0.273 mg的溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取甘草粉末(过三号
筛)约 0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加
入 70%乙醇 100 mL,密塞,称定重量,超声处理 30
分钟,放冷,再称重,用 70%乙醇补足减失的重量,
摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.4 线性关系考察 精密量取甘草苷对照品溶液
1.0、2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0、25、30、40 μL;
甘草酸铵对照品溶液 1.0、2.5、5.0、7.5、10、15、20 μL,
以峰面积为(Y)对进样量(X,μg)进行线性回归计算,
分别得线形回归方程甘草苷为 y=999.68x+77.695
(r=0.9999);甘草酸铵为 y=486.42x+1.0199(r=0.9999)。
结果表明甘草苷进样量在 0.0246~0.9840 μg 与
峰面积呈良好线性关系;甘草酸铵 0.1365~5.4600μg
与峰面积呈良好的线性关系,见图 1。
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中甘草苷、甘草酸铵含量普遍较低,未达到药典规
定要求,质量较差。
4 讨论
甘草随着生长年限的增加,活性成分含量也
随之增加,与甘草商品等级与指标性成分含量呈
正相关性。甘肃不同产区甘草中,以河西走廊地区
所产甘草苷、甘草酸铵含量较高,其质量较好;笔
者在走访药材市场时发现,毛草由于质量原因现
已不做甘草在市场流通。由于采样时的局限性,部
分产地商品等级标识不全,其是否符合市场商品
等级标准的制定,需做进一步的研究。
参考文献
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收稿日期:2012-01-08
* 基金项目:甘肃省自然科学研究基金资助项目(编号
1010RJZA214),甘肃省中药材产业科技攻关项目(编号 GYC09-13)
作者简介:李成义(1964—),男,硕士研究生导师,教授。研究
方向:中药品种与质量研究。
△通讯作者:王明伟(1974—),男,讲师。研究方向:中药品种
与质量研究。
方 药·道地药材
表 3 甘草苷、甘草酸铵加样回收率试验
名称 称样量 /g 样品中含量 /mg 加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD/%
0.1013 0.3444 0.2460 0.5889 99.38
0.1029 0.3499 0.2460 0.5892 97.29
甘草苷 0.1007 0.3424 0.2460 0.5835 98.02 97.30 1.35
0.1004 0.3414 0.2460 0.5805 97.21
0.1038 0.3529 0.2460 0.5893 96.09
0.1031 0.3505 0.2498 0.5898 95.78
0.1013 2.0767 2.0012 4.0007 96.14
0.1012 2.0746 2.0012 4.0654 99.48
甘草酸 0.1023 2.0972 2.0012 4.0158 95.87 97.18 1.54
0.1009 2.0685 2.0012 4.0107 97.05
0.1005 2.0603 2.0012 4.0316 98.51
0.1045 2.1423 2.0012 4.0639 96.02
表 4 甘草不同商品等级中甘草苷、甘草酸铵含量测定
产地 商品等级 甘草苷百分含量 /% 甘草酸百分含量 /%
酒泉市(金塔) 大草 3.83 3.23
条草一级 2.38 2.76
条草二级 1.94 2.61
条草三级 1.86 2.65
毛草 1.53 2.14
瓜州 条草二级 1.03 3.11
条草三级 0.34 2.05
毛草 0.20 2.16
玉门市 条草二级 1.74 2.08
条草三级 0.80 1.75
毛草 0.76 1.41
张掖市(高台) 大草 1.10 2.75
毛草 0.73 2.43
毛草 0.54 2.17
金昌市(永昌) 条草一级 2.72 2.79
条草二级 1.98 2.48
条草三级 1.83 2.34
定西市(漳县) 条草二级 3.87 2.83
条草三级 2.35 2.25
毛草 1.44 2.11
定西市(临洮) 条草一级 2.43 2.36
条草二级 2.02 2.20
条草三级 1.73 1.79
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