全 文 ：第 2卷第 1期
1 9 9 3年 3月
上 海 水 产 大 学 学 报
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e于一, 19 9 3
条斑紫菜自由丝状体无性繁殖系
快速培养及其养殖
王素娟
(土海水产大学水产养殖系 , 20 0 仑0)
沈怀舜
(江苏省海洋水产研究所 , 南通 2 2 600 7)
姗 共 本文报导了条斑紫菜 ( oP ,夕匆忆 夕心奋洲诫 . U de a) 自由丝状体快速培养并用固相化方法
采苗下海养殖的试验 . 结果表明自由丝状体可以在较短的时间内快速生长发育成熟 . 用固相化方法
采苗可以克服自由丝状体室内集中放散壳抱子困难的缺点 . 每网采 20 万枝壳饱子囊枝切段 ,其出
苗情况、紫菜生长均达到生产要求 .本试验为自由丝状体快速采苗应用于生产上提供了一条新途径 .
关. 润 自由丝状体 , 壳抱子囊枝 , 固相化
紫菜传统的育苗方法是培养贝壳丝状体 。 这种方法培养时间长达 尽` 6 个 月 , 占地面积
大 , 工序萦琐 , 操作笨重 , 使用劳动力多 , 劳动强度大 , 所以改革育苗方式方法就成为生产中急
待解决的同艇之一 。
利用自由丝状体育苗成为研究的对象。 它与贝壳丝状育苗相比 , 具有占地面积少 , 生长
快 、 易于纯种培养的优点 ; 其困难的是易受污染、 成熟度低 , 在室内难以集中大量放散壳抱子进
行人工采苗 。 陈国宜 ( 19 80 )曾利用坛紫菜自由丝状体的壳抱子进行一定规模的生产 性试验 ,
并取得成功 。 王素平等 (19 8 )对条斑紫菜自由丝状体的生态进行了详细的研究 。 但由于前述
所存在的困难 , 使利用自由丝状体放散壳抱子直接采苗到目前为止尚未取得更多的进展 。 较
多的利用自由丝状体作为选种育种的手段进行二次贝壳丝状体采苗用 。
本试验是利用自由丝状体培养到壳抱子衰枝时用固相化方法固定于网上 , 直接下海养殖 ,
节约室内直接采壳抱子的工序与困难以提高采苗效果 。 根据海上养殖的结果 , 所取得的效果
是令人满意的。
1 材料和方法
1
.
1 种璐来派
本试验所用的条斑紫菜采自江苏省连云港海区养殖架上的藻体 , 经阴千后用塑料袋封存
于 一 20 0 的冰箱中保存待用。
1
. 忿 自由此状体的准 .
将冷冻的种藻放入海水中复苏 , 用消毒海水洗刷 4 ~ 6 次以除去藻体表面杂藻 , 切去已明
显形成果抱子的藻体上半部分 , 取下半部分葬体切碎后用海蛛酶酶介 , 收集细胞并培养 , “ ,。 约
1 9 9 2一 12一 2 2收到 .
上 海 水 产 大 学 学 报 2卷
一个月后形成了大量丝状体 , 作为丝状体藻种待用。
1
.
3 自由姚状傅的培并及扩增
1
.
3
.
1 自由 丝状体的培养
采用充气悬浮堵养方法 , 容器为 8〕 :用L 左右柱形玻瑞瓶 , 培养前用 70呱 酒精消毒。 培养
条件按表 1 进行 。 前、 中、 后兰期时间宜根据采苗时间与丝状体本身生长状况决定 。 倘时间充
裕可尽量延长前期培养时间 ,使丝状体快速生长。
斑 1 自由胜状体绮井 . 件
T . b l. 1 C . It . r . e o . d l t泣o u o f f r二祖 l甲 i n g f l l一 e n t .
滋皮 (’ C ) 光强 ( 1: )
前 期
( 2 0~ 3 0天 )
中 期
( 2 0天左右 )
后 期
( 1 0夭右左 )
3 0 0 0~ 40 0 0
光时 ( h )
1 8 ~ 2 4
营养盐
2 3~ 2 6 1 0 0 0、 2 0 0 0 1 0 ~ 1 2
1 8~ 2 0 5 0 0叫 8 0 0 6 ,、 1 0
M E S 培养液
+ P 3 PP月工
M R 3 培养液
+ P 6 PF 了l
N : S PP〕n
P : 10 PPm
1
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3
.
2 自由 丝状体的扩猎
为获得大童的丝状体 , 每隔一定时间进行一次扩增 。 利用自由丝状体切成小段仍能继续
再生成更大的丝状体特性用组织粉碎机切碎丝状体成小碎段 , 一般加入一定量丝状体切 4 分
钟 , 丝状体段长 400 ~ 6 00 微米 。 因切碎机开机后机器发热影响丝状体成活率 , 我们一般采用
添加温低的海水并每切 1 分钟就停一次的办法解决了这一矛盾 。 切好后的丝状体分 瓶培养 。
头 1~ 2 天先弱光 ,湃渐加强光照 。
1二 自由丝状体生长发 , 的浦定
1
.
4
.
1 生长童的浏定
用 4 0 0 目筛绢经漏斗真空抽滤 2分钟 , 称其重通表示其生长徽 。
1
.
4
.
2 壳艳子 t 枝教童 的浏定
将悬浮培养的丝状体搅匀 , 取出 10 0 徽升放入计数框内计数。 由于丝状体细长不易均匀 ,
所以采取数次计数 ,取其平均值作为抱子班枝数盈。
1
. ` 固相化方法琳 ,t : 1
伙季采苗季节来临 , 将成熟的丝状体用组织粉碎机切碎 1 分钟使成为碎段 , 均匀撒在网
L
, 略经阴干后 , 用藻胶固定 , 立即浸入 C a OI : 的海水中 , 再转入新鲜海水中浸泡 , 只要潮水合
适争取早下海养殖 。
2 结 果
匀. 1 自由丝状体的生长
在 2 a0 0 和 2 6℃ 两种不同温度下 , 丝状体的生长如图 1。 从图 1 可着出 , 在 2( ” C 条件下丝
状体的生长明显快于 26 ℃ ;经过 30 天培养 , 20 ℃ 下的丝状体是 26 ℃ 下的两倍 , 比最初增长了
14 倍 。
土期 王素娟 、 沈怀舜 :条斑紫菜自由丝状体无性繁殖系快速培养及其养殖
重 t (g)
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产餐天数
0 10 2 0 30
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值沮培养条件下壳抱子囊枝的数盆变化
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2 巩 r i a t i o n o f e皿 e h o即 o r a飞! a七 r a n e b i n
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图 1 不同温度下丝状体的生长情况
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2 充袍子班技的形成与生长
最早充作藻种的丝状体一直培养在 2 o0 C恒温室内 , 光时 12 h , 光强 5 0 l0 x, 营养盐 N : P为
14 : 3 p pm
, 壳抱子囊枝的数量变化如图 o2
从图 2 可看出自由丝状体最早在 30 余天就产生了壳抱子囊枝 , 直到 135 夭左右才达到数
量的最高峰 , 因为 20 0 又是适子壳抱子放散的温
度 , 所以在这个条件下培养的壳抱子囊枝一直是
边形成边成熟边放散的状况 , 数量亦增 长较慢 。
而采用表 1 所列的条件培养的自由丝状体切段其
壳抱子囊枝的数量变化如图 o3
从图 3 可 以看出 , 按照表 1 的培养条件培养
的丝状体形成的壳抱子囊枝数量增长速度快于图
2 所示的结果 , 而且在培养的中期壳抱子囊枝的
数量增加最快 , 在后期数量几乎变化不大 , 在这一
期适于壳抱子囊枝的成熟 (形成双分抱子 ) 。 试验
过程中还发现在 26 ℃ 条件下的壳抱子囊枝 分枝
多 , 细胞质浓颜色深 , 液胞小 ;而在 2 o0 C 条件下形
成的壳抱子囊枝分枝少 , 细胞颜色淡 , 液胞大 ,
长 。
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图 3 按表 1 培养条件下 壳抱子囊枝的数 t 变化
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这说明 26 ℃ 比 2护C 更适于壳抱子囊枝的生
幼. 8 自由丝状体的侄熟及固相化采苗
在培养的后期 , 采取降温 、 缩短光时 、 短 日照的方法促使壳抱子囊枝形成双分裂细胞或接
近双分时 , 可以进行固相化采苗。 采苗的密度以每网上投放抱子囊枝段数计算 。 进行采苗的
密度及网数以及检查出 `苗情况列入表 2 。 网上生长的紫菜午 12 月 5 日拍摄的照片见图版 。 12
月 8 日即开始第一次收割 。
:海 水 产 大 学 学 报 2卷
衰 2自由挂状体不周官度出菌情况
Ta b le 2 B re e d泣 n` de n一 i y t五 n fe e r一 I lv l.皿 i f l.m e n t一 , i t h d l f f e r e n t d e n o i t y
苗 密
(万段 /网 )
网数 (个 )
度 2 5 1 0 0 2 0 0 4 0 0 备
2 2
几分 6 3
2 2 7 6
7 9 较稀
1 1 8 2 2 8 较稀
苗密出度
(株 /阴 )
除 4 0 0万枝 /网为功月
7 日采苗 , 养于江苏连云
港外 , 其余为 」0 月 ] 日采
苗 , 养于江苏如东县环港
海区
从表 2 和图版可以看出 , 用固相法采自由丝状体于网上 , 只要季节合适和壳抱子囊枝具有
一定密度 , 均能在下海后达到出苗并符合生产的要求 。 从密度看 , 以 20 。万株 /网出苗及紫菜
生长的最密最好 , 而 2 5 万株与 6 0 万株 /网出苗与生长都比较差 。 表 2 中所列的 400 万株 /网 ,
虽然密度较大 , 但出苗反而较稀 , 这是因为壳抱子囊枝成熟后壳抱子在 10 月 1 日期间大部分
放散了 , 所以在 10 月 7 日再采苗时纵然密度再大也没有作用 , 表明采苗时间亦成为关键之
一 。 因此在利用丝状体固相化方法 , 首先要按时培养出量多质优的壳抱子囊枝 ;其次就是抓住
最适宜的采苗时间; 第三是投放合理的密度 , 三者配合得体才能达到生产的要求。
图版说明 T l le P la t o i l lu s t r a t io n
1
. 壳抱子囊枝固相化 养殖 网全景 ; 2召 · 密度为 20 万枝 /网 ; 4一 5 . 密度为 10 0 万枝 /网 ; 6 . 密度为 明 万枝 /网 .
3 讨 论
用固相化技术采条斑紫菜体细胞团苗已经得到应用`弓1, 但用于 自由丝状体采苗还是首次 。
这种方法正好弥补在室内用自由丝状体难以集中放散抱子的缺点。 由千下海正是对丝状体回
归自然给予促熟促放的处理 , 所以要求把握适宜的下海时间 , 密切注意海水温度 , 不能高于
20℃ 以上 , 否则效果不好 。 时间太晚也影响效果 , 如 1 9 9 2 年 10 月 7 日连 云港采苗稀的原因
就是明显例证。
我们共切碎两批自由丝状体 , 第 2 批从 8 月 n 日切碎扩大培养的 , 到 10 月 1 日采苗共
阳 天 , 而且取得成效 , 这比贝壳丝状体培养时间大大缩短 。 表明用悬浮充气培养法是培育丝
土期 工素娟 、 沈怀舜: 条斑紫菜白山丝状体无性繁殖系快速培养及其养殖
状体的一种好方法 , 它不但比贝壳丝状体快 , 而且更比平面静止培养的迅速得多。
另外 ,也应该注意两个间题 , 一是丝状体培养过程中要严格防止杂藻的污染 , 以免一旦遭
受污染将会有 “ 全军覆灭 ” 之危险。 硅藻可以用高密度丝状体培养得到抑制 , 它比兰藻的危险轻
一些 。 其次是提高壳抱子囊枝的数量和成熟度的人工控制 , 这对节约采苗所用的密度也是有
影响的 , 因此本试验中 20 万枝 /网的密度应属于高限。 如壳抱囊枝数盘多 , 成熟度近于同步 ,
则所用密度还可下降。
通过本试验我们认为用固相化方法进行自由丝状体直接采苗在生产上是可行的 , 它将会
在大规模生产中发挥作用的 。
今 考 文 做
〔门 王素平 、 姜红如 , ! 08 3 . 条斑紫菜 (P梦户刀勿 口咖邵雍 )游离丝状体生 态的研究 。 海洋水产研究 , (习 : 7 一卯 .
【2 〕 王素娟 、 何培民 , 」的2 . 条斑紫菜固定化细胞育苗技术应用试脸 . 水产学报 , 16( 3) :2 65 一 26 .8
【3 1 王素娟等 , 1 9 8 6 . 坛紫菜营养细胞和原生质体培养研究 1 . 海洋与湖沼 , 17 ( 3) : 2 17 一 2 2 j .
〔4 〕 陈国宜 , 1 0 80 . 关于坛紫菜自由丝 状体的培养和直接采苗的研究 . 水产学报 , 4 ( J ) 几 9一 2讯
T H E R A P ID C U L T U R E A N D B R E E D IN G O F F R E E
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