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三七及屏边三七花粉不同贮藏条件生活力测定



全 文 :文山学院学报 Vol. 25 No. 6
Dec. 2012
19
第 25 卷 第 6 期
2012 年 12 月 JOURNAL OF WENSHAN UNIVERSITY
花粉是种子植物的雄配子体,在有性繁殖中发
挥着重要作用。采集的花粉和贮存的花粉,在使用
之前必须作生活力的鉴定,以估价花粉是否有授精
能力。在农业和林业的常规育种工作中,为了进行
人工辅助授粉和杂交授粉,通常需要早期采集和储
藏花粉,尤其是在杂交育种工作中,为解决亲本花
期不一致和远距离杂交的问题,更需要保存生活的
花粉[1]。
三七[Panax notoginseng(Burk.)F. H. Chen]及
屏边三七(P.stipuleanatus)属五加科人参属植物,
三七由于长期的人工栽培,病虫害比较严重[2],屏
边三七为三七的近源野生种,具有较强的抗病性。
但人工栽培三七与屏边三七花期不遇,为探寻是
否可以利用杂交育种手段选育三七抗病新品种,为
三七的育种工作提供一条新途径,笔者对不同贮藏
条件下二者的花粉生活力进行测定,以便了解二者
的花粉贮藏寿命。
1 材料与方法
1.1 材料
试验材料采自文山学院三七研究院砚山试验场
内种植的二年生三七,三年生三七及种质资源圃内的
多年生屏边三七的花粉,采样后分别保存在普通冰
箱的 4 ℃保鲜层及 -20 ℃冰冻层中。
1.2 方法
1.2.1 染色液的配制
花粉测定采用噻唑蓝(MTT)染色法,称取
0.1 g MTT,溶解于10 mL配置好的5%的蔗糖溶液中,
摇匀置于冰箱中避光保存。
1.2.2 染色测定操作过程
(1)取少数花粉置于载玻片上,加 1~2 滴 MTT
溶液,盖上盖玻片
(2)将制片在室温下放置 15 min,然后在低倍
镜下观察。凡是染成红色的花粉,其生活力为强,
淡红的次之,无色的为不具活力的花粉或不育花粉。
(3)观察 3 个制片,每片取 5 个视野,统计 100
粒,然后计算花粉的活力百分率。
2 结果与分析
2.1 不同贮藏条件下三七花粉寿命比较
不同贮藏条件下二年生三七、三年生三七花
粉寿命比较情况见表 1。由表 1 可以看出,三年生
三七花粉贮藏寿命长于二年生三七花粉。三七花粉
在冰冻条件保存,花粉从有活力至活力完全丧失的
时间约 80 d,保鲜条件下,二年生三七花粉活力维
持时间约 45 d 左右,三年生三七花粉活力维持时间
约 60 d 左右。二年生花粉保鲜贮藏 23 d,花粉活力
降低了 49.42%,冰冻贮藏 30 d,花粉活力降低了
53.85%(见图 1),而三年生三七花粉保鲜贮藏 45 d,
花粉活力降低了 59.53%,冰冻贮藏 35 d,花粉活力
降低了 47.03%(见图 2)。
三七及屏边三七花粉不同贮藏条件生活力测定
孙玉琴1,2,黄天卫1,杨 莉1,韦美丽1,王朝梁1,2,陈中坚1
(1.文山学院 三七研究院,云南 文山 663000;2. 文山华信三七股份有限公司,云南 文山 663000)
摘要:采用MTT 染色法测定栽培三七及屏边三七在不同贮藏条件下花粉生活力维持时间,结果表明,
三七花粉在冰冻条件下,花粉从有活力至活力完全丧失约 80 d,保鲜条件下二年生三七花粉活力维持时间约
45 d,三年生三七花粉活力维持时间约 60 d。屏边三七花粉在保鲜条件下从有活力至活力完全丧失约 60 d,
而冰冻条件下仅为 35 d。
关键词:三七;屏边三七;花粉生活力
中图分类号:S567.236 文献标识码:A 文章编号:1674-9200(2012)06-0019-03
收稿日期:2012 - 08 - 29
基金项目:国家科技支撑计划项目“三七优良品种选育研究”(2006BAI06A12-13)。
作者简介:孙玉琴(1975 -),女,吉林临江人,文山学院三七研究院副研究员,硕士,主要从事三七栽培育种研究。
通信作者:陈中坚(1971 -),男,云南文山人,文山学院三七研究院副研究员,Email:Thisisczj@163.com。
第 25 卷 文山学院学报 2012年 第 6 期
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表 1 二年生、三年生三七花粉贮藏寿命表
保存时间
二年生三七花粉 三年生三七花粉
保鲜条件 冰冻条件 保鲜条件 冰冻条件
8月30日(基数) 55.56% 55.56% 52.58% 52.58%
9月8日 55.69% 69.92% 66.40% 36.78%
9月15日 56.05% 58.77% 64.49% 34.59%
9月22日 28.10% 35.95% 47.37% 29.58%
9月29日 25.30% 25.64% 40.16% 16.91%
10月4日 23.10% 19.02% 38.74% 27.85%
10月12日 16.23% 14.58% 18.06% 20.47%
10月13日 8.46% 14.46% 21.58% 18.02%
10月16日 2.25% 14.20% 14.49% 12.18%
10月19日 0 14.80% 5.90% 6.64%
10月22日 0 5.71% 5.59% 2.03%
10月27日 0 8.27% 1.40% 4.18%
11月5日 0 3.22% 0 2.51%
11月12日 0 2.32% 0 3.73%
11月19日 0 2.38% 0 3.71%
0.00%
10.00%
20.00%
30.00%
40.00%
50.00%
60.00%
70.00%
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保存时间




保鲜条件
冰冻条件
图 1 二年生三七花粉寿命
0.00%
10.00%
20.00%
30.00%
40.00%
50.00%
60.00%
70.00%
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保存时间




保鲜条件
冰冻条件
图 2 三年生三七花粉寿命
2.2 不同贮藏条件下屏边三七花粉寿命
不同贮藏条件下屏边三七花粉生命情况见表 2。
由表 2 可以看出,屏边三七花粉在保鲜条件下
贮藏的时间较冰冻条件下要长,在保鲜条件下屏边
三七花粉从有活力至活力完全丧失的时间约 60 d 左
右,而冰冻条件下贮藏时间仅为 35 d 左右。屏边
三七花粉在冰冻条件下保存 3 d 左右时间,花粉活
力开始迅速下降,保存一个星期后,花粉活力降低
了 59.43%(见图 3)。
表 2 屏边三七贮藏寿命表
保存时间 保鲜条件 冰冻条件
4月18日(基数) 89.91% 89.91%
4月21日 83.72% 60.56%
4月25日 78.63% 36.48%
4月29日 73.57% 14.16%
5月10日 46.35% 13.57%
5月23日 30.58% 2.05%
6月3日 24.78% 0
6月6日 20.59% 0
6月9日 15.35% 0
6月12日 10.41% 0
6月15日 2.23% 0
0.00%
10.00%
20.00%
30.00%
40.00%
50.00%
60.00%
70.00%
80.00%
90.00%
100.00%
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05
03/
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06/
06
09/
06
12/
06
15/
06
保存时间
花粉
活力
保鲜条件
冰冻条件
图 3 屏边三七花粉寿命
21
孙玉琴,等:三七及屏边三七花粉不同贮藏条件生活力测定
3 结论与讨论
(1)栽培三七刚采获后的花粉活力基数比屏边
三七花粉活力基数低,这与每个花序上的小花数目
多少有关,栽培三七平均一个花序上的小花数目远
远多于屏边三七,其营养供应远不如屏边三七,致
使小花采获的花粉活力基数大大低于屏边三七。
(2)栽培三七一般人工种植三年即可收获,
三七从栽种的第二年就可以开花结果,故在三七的
一个生长周期内同时采收二年生三七花粉和三年生
三七花粉比较它们的贮藏时间。比较结果显示,在
保鲜条件下,三年生三七花粉较二年生三七花粉耐
贮藏时间稍长,在冰冻条件下,二者相差不大。
(3)屏边三七花粉的耐贮藏性比栽培三七时间
短,虽然花粉活力基数高但经过一段时间贮藏花粉
活力迅速降低,可能与栽培三七经过 400 多年的人
工驯化,对环境的适应性增强,而屏边三七是从原
始森林收集到三七研究所种质资源圃的,人工栽培
时间短,对环境的适应性弱有关,但其生机理制还
需进一步研究。
参考文献:
[1] 王钦丽,卢龙斗,吴小琴,等 . 花粉的保存及其生活力
测定[J]. 植物学通报,2002( 3):365-373.
[2] 陈昱君,王勇,冯光泉,等 . 三七病虫害防治[M]. 昆
明 :云南科技出版社,2006 :1-3.
Determination of Pollen Viability of Panax Notoginseng and Panax Stipuleanatus
on Different Store Conditions
SUN Yu-qin1,2, HUANG Tian-wei1, YANG Li1, WEI Mei-li1, WANG Chao-liang1,2, CHEN Zhong-jian1
(1. Panax notoginseng Research Institute, Wenshan University, Wenshan 663000, China;
2. Wenshan Huaxin Panax Notoginseng Co., Ltd, Wenshan 663000, China)
Abstract: The paper determines pollen viability of Panax notoginseng and Panax Stipuleanatus on Different
store conditions by MMT staining method and discovers that pollen viability lasts about 80 days under the freezing
condition, two-year-old pollen 45 days, and three-year-old pollen 60 days. Pollen viability of Panax Stipuleanatus
lasts 60 days under the fresh-keeping condition, but only 35 days under the freezing condition.
Key words: Panax notoginseng; panax stipuleanatus; pollen viability
(责任编辑 张 铁)