全 文 ：沈阳农业大学学报 , 1 9 9 4 一 0 9 , 2 5 (3 ) : 30 3一 3 0 7
Jo帅a l o f S h en y a n g A g ir e u l tU ar l U n iv e sr i t y
蛹草菌菌丝体培养条件的选择
华秀英 曹 杰
(沈阳农业大学 土化系 ,沈阳 1 10 161 )
摘要 不同培养基 、 环境因素 (温度 、 p H 、光照 ) 、 营养条件 (碳源 、 氮源 )对蛹草菌菌丝体生长影 响的 研究结
果表明 : 蛹草菌菌丝体在 P D A 综合培养荃和沈农 5号培养基上生长状况最好 , 在 PD A 培养基 、 P D A 鼓
皮培养基生长最差 . 菌丝体在 巧 ~ 25 ℃ 范围内均能生长 ,其中在 25 ℃ 条件下生长状况最好 , 而且随着温
度的升高 , 生长状况 明显增强 , 30 ℃ 条件下生 长减慢 , 35 ℃ 停止生长 . 菌丝体对酸碱度要 求不严 , 在 p H
.50 闷 范围内均能生长 ,其中在 pH .6 5喊 0 生长最好 . 菌丝体在非光照条件下比在光照条件下生长旺盛 .
对不同碳源 、氮源吸收各异 ,其 中 以甘露醉为 碳 派 , 以牛肉膏为氮源生长状况最佳 。
关键词 外界因子 ; 固体培养基 ; 蛹 草菌 ;菌丝体
中图分类号 S夕刀 . 35
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蛹草菌 C[ 口 dr 夕c ep s o il at 南 压.) iL n k] 又名北冬虫夏草的生物学特性 和栽培技术 , 尤其
是对蛹草菌菌 丝体的固体培养 的报道较少 , 所以本文对蛹草菌菌丝体的固体培养所需的
必要的外界因子进行 了研究 , 为固体培养蛹草菌提供依据 。
1 材料与方法
菌种用辽大虫草 60 号 。
收稿 日期 : 19 93 一的 一 03 第一作者 : 女 , 53 , 副教授 , 现从事土壤微生物 和食用茵研究 .
0 34 沈阳农业大学学报 第 5 2卷
L l 供试培养基
① P D A培养基 。 ② 沈农 5号培养基 : 棉籽壳 加鲍 、 玉米芯 10摊 、 马铃薯 ( 去勿 10鲍 ,
放人锅中煮 2 0 一 30 而 n , 取汁液 l o 0 mL , 再加 人蔗糖 209 、 琼脂 2飞 。 ③ P D A 数皮培养
基 : 将 P D A 中 2% 葡萄糖减为 1% , 另加 1% 数皮与马铃薯 的共煮汁制作 间 。 ④ P D A 综
合培养基 : P D A 中加磷酸二氢钾 3 9 、 硫酸镁 lg 、 维生素 B ,50 心司. ⑤ 蛋 白陈 1鲍 、 葡萄糖
59
、 琼脂 2 0 9 、 水 1 o o o n 1L f习。 ⑥ 蔗糖 2 09 、 铃酸二氢钾 39 、 硫酸镁 1 . 59 、 维生素 B , 10 0 9 、 蛋白
陈 g5 、 琼脂 209 、 水 100 mL
。 ⑦ P D A 加 6 号培养基 。 ( 以上各 培养基 p H 取 自然 ,培养温
度 2 5 ,C ) 。
1.2 环境因素
1
.
2
.
1 温度试验 采用 巧 ℃ 、 加 ℃ 、 25 ℃ 、 30 ℃ 、 35 ℃ 5个温度梯度进行试 验 。 以 6
号培养基作为基础培养基 , p H 自然 。
1
.
.2 2 p H 试验 采用 .5 0 , .6 0 , .6 5 , .7 0 , .7 5 , .8 0 6 个 p H 梯度进行试验 , 用 25 型酸度计
进行测定 , 基础培养基为 6号 , 培养温度 25 ℃ , p H 用 10 % 盐酸调节 。
1
.
.23 光照条件 采用光照和非光照条件进行试验 , 培养温度 30 ℃ , p H 自然 , 基础培养
基为 6 号培养基 。
1.3 营养条件
基础 营养物质为铃酸二氢钾 39 , 硫酸镁 1 . 5 9 、 维生素 B , 1 0 、 g 、 琼脂 加g 、 水 1 000m L , p H
自然 ,培养温度 25 ℃ 。
1
.
3
.
1 碳 源试验 以 .0 5% 蛋白陈为氮源 ;碳源分别为蔗糖 、 葡萄糖 、 甘露醇 、 木糖 、 乳糖 、 半
乳糖 、 狡 甲基纤维素 、 淀粉 、 麦芽糖 , 各用量为 2 % 。
1
.
.3 2 氮源 试验 以 2% 蔗糖为碳源 , 氮源有牛肉膏 、 蛋白陈 、 硫酸铁 、 硝酸钾 、 硝酸铁 、 尿
素 ,用量各为 .0 5% 。
1
.
4 测定方法
将蛹草菌菌种活化 3次 ,然后将每个斜面 ( 已经长满菌丝 )分成大小均等的块 , 接种到
已经处理好的平板上进行培养 ,培养时间为 2d5 , 以此作为试验用菌种 。 试验一律采 用直
径 9 . oc m 的无菌培养皿 , 在每个培养皿 中准确注人 巧 .0 1l l L培养基 , 凝固 。 用灭过菌的直径
为 or .o m m 的干净试管在试验菌种上取大小相等的 10 .o l r 『n 圆菌块 ,用消过毒的解剖刀 挑
取出来 , 放人 已经凝 固好的平板中央 ,进行培养 , 各处理重复 10 次 , 定期 ( 12 d) 测定蛹草菌
菌丝体生长范围的平 均直径作为衡量生长速度的指标 ; 以肉眼观察菌丝生长粗壮 、 厚薄等
情况衡量其长势 ,进行记录 。
2 试验结果
.2 1 不同培养基对蛹草菌菌丝体生长的影响
培养基是微生物生长的基础 , 它的好坏直接影响微生物生长发育 。 从表 1看 出 , 菌丝
体在 7 种培养基上的生长速度 ,除 3 号培养基的菌丝生长很差外 , 其它培养基的菌丝体生
长均好 , 尤以 l 号培养基最好 , 生 长速度的趋势为 1号 > 4 号 > 2 号 > 7 号 > 5号 > 6 号
、 1号 。 在生长势方 面 , 3号培养基的 菌丝体生长弱而且薄 , 表现最差 , 2号和 4号培养
第 3期 华秀英等 蛹草 菌菌丝体培养条件的选择 3 05
基的菌丝体生 长最壮而且厚 , 总的趋 势 是 2 号 > 4 号 > 7 号 > l 号 > 6 号 > 5 号 > 3
号 。 从两个方面总的来看 4 号和 2 号培养基上菌丝 体生长状况最 佳 , 3 号培养基上 的生
长状况最差 。
表 1 不同培养基对蛹草菌菌丝体生长状况影响
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培养基
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注 : + 十 十 十 蛹草菌菌丝体长势较壮并很厚 , 十 十 + 长势壮且厚 , + 十 长势壮但较薄 , 十 长势弱且薄 . 表 2 、 3 、 4 同 .
2 .2 环境因素对蛹草菌菌丝体生长的影响
.2 2
.
1 温度对 菌丝体生长的影响 从表 2 可以看出不同的温度梯度对蛹草菌菌丝的影响
十分明显 ,在 巧 ~ 25 ℃ 之间菌丝体的生长速度与温度梯度成正 比 , 到 30 ℃ 生长 明显减
慢 , 35 ℃ 停止生长 ,菌丝体最适生长温度 25 ℃ 。
表 2 温度对蛹草菌菌丝体生长的影响
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.2 .2 2 pH 值对菌丝体生长的影响 菌丝体在 p H .S 0 一 .8 0之间均能生长 ,所 以它对酸碱度
的适应性较为广泛 ,其中在 p H 6 . 5一 7 . 0之间生长速度和长势都最好 ,尤以 p H .6 5最佳 (表 3) 。
.2么 3 光照条件对蛹草 菌菌丝体生长的影响 蛹草菌菌丝体的生长状况在非光照条 件下
比光照条件下好 ( 图 1 ) 。
306 沈阳农业大学学报 第 2 5卷
表 3 不同坦值对蛹草菌菌丝体生长的影响
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1d2 菌落平均直径 (~ )
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2 3 营养条件的影响
.2 3
.
1 碳素 营养时菌丝体生长状况 的影响
碳素营养是蛹草菌菌丝体生长所必需
的营养 , 是 菌 丝 体生 长 的 物质 和 能量基
础 。 蛹草菌菌丝体对单糖 、 双糖 和多糖均
能利用 , 但利用 程度不 同 , 其中 以甘 露醇
和麦芽搪利 用最好 , 生长速 度最 快 ; 在 以
半乳糖或甘露醇为碳源的培养基上的菌丝
体生长势最好 , 竣 甲基纤 维素培养基上生
长势最差 。 但从经 济学 角度 来 考虑 碳源
的选择 , 生产上 常采 用淀粉 作 为碳 源 , 菌
丝 体 不但 生 长好 , 而且 可 以 降低 生产 成
本 , 提高经济效益 (表 4 ) 。
O 光照 非光照 处理
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图 1 不同光照处理对蛹草菌菌丝体生长的影响
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表 4 不同碳源对蛹草菌菌丝体生长的影响
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第 3 期 华秀英等 蛹 草菌菌丝体培养条件 的选择 37 0
2.3 . 2氮素 营养对 菌丝体生长状况 的影响 氮素是细胞生长和生殖生长所必须的大量 的
营养物质 ,是细胞酶和核酸蛋 白质等的重要组成部分 , 所以氮素 营养的好坏 , 直 接影响菌
丝体的生长状况 。 从表 5 可以看出 ,蛹草菌在以蛋白陈或牛 肉膏为氮源 的培养基上 生长
速度最快 ,长势比较旺盛 , 比其它氮源 (硫按 、 硝 酸钾 、 硝酸按 、 尿素 ) 都好 , 且生物统计 后
差异为极显著 ,但从经济角度看 , 以牛 肉膏或蛋白陈为氮源制成的培养基 , 会提高生产 成
本 , 降低经济效益 ; 在硝酸钾的培养基上 , 菌丝体的生长速度和长势仅次于牛 肉膏或蛋 白
膝 , 而它的价格又较低 , 可明显提高经济效益 ,所 以生产上的氮源可采用硝酸钾 。
表 5 不同氮源对蛹草菌菌丝体生长的影响
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氮源
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3 结论
从上述研究结果表明 , 蛹草菌菌丝体对外界 因子的适应性较广 。 菌丝体 在多种培养
基上能生 长 ,其 中在 P D A 综合培养基和沈农 5号培养基上生长最好 , PD A 鼓皮培养基生
长最差 ; 最佳生长温度为 25 ℃ , 最佳酸碱度为 p H 6 . 5 一 .7 ;0 在非光照条件下生长较好 ; 对
不同碳 、 氮营养源的同化吸收相差很大 , 其 中菌丝体对麦芽糖或 甘露醇 利用 最好 , 对木
糖利用最差 ; 对牛肉膏或蛋 白膝利用最好 , 对硫酸按利用最差 。
参考文献
l 江 日仁等 . 某些外界因子对真姬菇菌丝体生长的影响 . 微生物学通报 , I卯 3, 刃 (1) : 4 一6
2 张长恺等 . 冬虫夏草菌丝生长的营养需求 . 微生物学通报 , l男几 19 ( :3) 129 一 13 3