全 文 ：第 42 卷第 7 期 中南大学学报(自然科学版) Vol.42 No.7
2011 年 7 月 Journal of Central South University (Science and Technology) July 2011

细柱五加叶中抗 HMGB1 总三萜活性物质的闪式提取工艺

刘向前 1, 2，郑礼胜 1，翁柳娜 1，邹方卉 1，李丽丽 1

(1. 中南大学 化学化工学院，湖南 长沙，410083；
2. 湖南中医药大学 药学院，湖南 长沙，410208)

摘要：采用闪式提取，通过二次通用旋转实验设计优化细柱五加叶中三萜类物质的提取工艺，以综合评分为指标，
考察乙醇浓度、提取时间、溶剂用量 3 个主要因素对工艺的影响；确定出最佳提取工艺，用 UV 法检测提取物中
的总三萜成分含量。实验结果表明最佳提取工艺为：53%(体积分数)乙醇为溶剂，闪式提取 175 s；该工艺稳定，
重现性好(相对标准偏差为 0.77%)，操作简单、省时，以五加皂苷为对照品，饱和 NaHCO3 溶液为溶剂，以 218 nm
为最适波长时，线性范围为 0.01~0.07 g/L(相关系数为 0.999 6)，加样回收率为 98.2%(相对标准偏差为 1.23%)。
关键词：细柱五加；五加皂苷；二次通用旋转实验设计；三萜成分；闪式提取法；紫外光谱
中图分类号：R284.2；R286.02 文献标志码：A 文章编号：1672−7207(2011)07−1890−09

Smashing tissue extraction of active triterpenoids of anti-HMGB1
from leaves of Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith

LIU Xiang-qian1, 2, ZHENG Li-sheng1, WENG Liu-na1, ZOU Fang-hui1, LI Li-li1

(1. School of Chemistry and Chemical Engineering, Central South University, Changsha 410083, China;
2. School of Pharmacy, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China)

Abstract: Smashing tissue extraction was used to distill the active triterpenoids of anti-HMGB1 from AGS, and the
quadratic general rotary unitized design was used to optimize the extraction process. Taking the overall score as the target,
the influences of ethyl alcohol concentration, the extraction time and the solvent amount on extraction process were
studied. Finally, the optimal extraction technological conditions were determined. The triterpenoids in extraction was
determined by UV. The results show that the optimal condition is taking 53% ethyl alcohol as the solvent and distilling
for 175 s. This craft is stable and the reproduction quality is good (the relative standard deviation (RSD) is 0.77%), also
the operation is simple and takes shorter time. Using acankoreanogenin A as comparison, saturation NaHCO3 as solvent
and the most suitable wavelength is 218 nm, the liner range is 0.01−0.07 g/L (R=0.999 6) and the recovery of
acankoreanogenin A is 98.2% (RSD is 1.23%).
Key words: Acanthopanax gracilistylus W.W. Smith; acankoreoside A; quadratic general rotary unitized design;
triterpenoids; smashing tissue extraction; ultraviolet


五加科五加属植物大都具有很强和广泛的药食用
价值，如滋补、抗风湿、抗应激、抗疲劳、抗肿瘤等
作用，中、日、韩三国都已把它列入各自国家的药典
中，临床用于治疗风湿痹痛、腰膝软弱等病症[1−6]。倪
娜等[6−7]对细柱五加叶中的三萜类成分进行了系统研
究，分离出了多个 lupane 型三萜成分，并对它们进行
了抗 HMGB1 活性筛选，结果显示，五加苷元
acankoreanogenin A 和五加皂苷 acankoreoside A 均有

收稿日期：2010−08−20；修回日期：2010−11−02
基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(教外司留[2005]55 号)；湖南中医药大学科研启动基金(48010101-7)；中南大学研究生创新
项目(2009ssxt046)
通信作者：刘向前(1967−)，男，湖南长沙人，博士，教授，从事中药及天然药物活性成分研究、中药单复方制剂研究；电话：0731-88995848；E-mail:
lxq0001cn@163.com
第 7 期 刘向前，等：细柱五加叶中抗 HMGB1 总三萜活性物质的闪式提取工艺 1891
较强的抗 HMGB1 活性，有望成为一种抗 HMGB1 新
药。二次通用旋转试验设计是正交回归组合设计的一
种，它克服了二次回归预测值的方差强烈地依赖于实
验点在因子空间中的位置这个缺点，可由预测值直接
寻找最优区域；采用回归旋转设计实验方法，使在与
实验中心点距离相等的点上具有相同的方差，消除了
回归系数间的相关性，从而使实验次数大大缩减，计
算简便，易于得到多因素的较优组合及变化趋势。由
于其具有准确性高、综合性好、系统性强、信息量大
等优点，被广泛应用于生产试验和科学试验[8−10]。我
国有丰富的细柱五加资源，为新药开发提供了充足的
资源保障，但目前尚无其叶中三萜成分的提取工艺和
定量研究报道。本文作者采用闪式提取法，通过二次
通用旋转实验设计优化其工艺，并确定了 UV 法测定
提取物中总三萜成分含量的条件。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂与仪器
材料为细柱五加叶，2008 年 11 月采自湖南，经
鉴定为细柱五加 (Acanthopanax gracilistylus W. W.
Smith)叶，阴干。标本存于中南大学制药工程系标
本室。
试剂为五加皂苷、五加苷元对照品，由本研究室
自制，经 1D 和 2D-NMR 等光谱鉴定后，HPLC 测定
其含量＞99.0%，甲醇、乙醇、NaHCO3均为分析纯。
仪器为：JHBE−20A 型闪式提取器(北京金鼐科技
有限公司生产)，752 型紫外可见分光光度计(上海光谱
仪器有限公司生产)，TG328A 型物理天平(湘仪天平仪
器厂生产)，DZF−6020 型真空干燥箱(上海精密仪器实
验设备有限公司生产)，202−0 型电热恒温干燥箱。
1.2 实验方法
1.2.1 提取方法
取细柱五加叶 8.0 g，剪成小块(直径＜5.0 mm)，
加提取剂适量，闪式提取[11−12]，抽滤，回收溶剂，浓
缩，干燥，得干膏。对水分含量进行测定[1]，计算干
膏得率。
采用三因子五水平二次通用旋转实验设计[13−14]
安排实验，所选因素及水平见表 1。实验方案及结果
见表 2。
1.2.2 总三萜成分的测定
(1) 波长选择。取五加皂苷和五加苷元对照品各
10 mg，精密称定，分别置于 100 mL 容量瓶中，加适
量饱和 NaHCO3溶液[15]，超声溶解，定容，摇匀，得
表 1 因素水平表
Table 1 Factors and coded levels
水平编码 X1 X2 X3
+1.682 87 341 46.8
+1 80 300 40
0 70 240 30
−1 60 180 20
−1.682 53 139 13.2
∆j 10 60 10
注：X1 为乙醇浓度，%；X2 为提取时间，s；X3 为提取剂用
量与五加叶质量之比，mL/g。

皂苷和苷元对照品的饱和 NaHCO3 溶液。以饱和
NaHCO3溶液为空白样，在 190~400 nm 波长下扫描，
皂苷和苷元最大吸收波长分别为 218 和 214 nm。但在
饱和 NaHCO3溶液中皂苷比苷元更易溶解，且溶液较
稳定，故选择五加皂苷为测定用的对照品，检测波长
为 218 nm。
(2) 对照品溶液的配制。取五加皂苷对照品 10
mg，精密称定，置于 100 mL 容量瓶中，饱和 NaHCO3
溶液溶解，定容，摇匀，即得五加皂苷对照品溶液，
并测得它的紫外光谱，见图 1。
(3) 供试品溶液的配制。取 1.2.1 项下的样品干膏
0.1 g 左右，精密称定，加适量饱和 NaHCO3溶液，超
声溶解，冷却，定容至 100 mL，并测得它的紫外光谱，
见图 2。
(4) 标准曲线的绘制。分别精密移取五加皂苷对
照品溶液 1，2，3，4，5，6，7 mL 于 7 只 10 mL 容
量瓶中，饱和 NaHCO3溶液定容，测定 218 nm 处吸
光度。五加皂苷对照品溶液的标准曲线如图 3 所示。
从图 3 可见：在 0.01~0.07 g/L 范围内，五加皂苷
浓度与吸光度成线性，拟合曲线 Y=12.275X+0.042 14，
相关系数为 R=0.999 6。
(5) 精密度实验。取五加皂苷对照品溶液，稀释
2.5 倍，以饱和 NaHCO3溶液做空白样，218 nm 下测
定其吸光度，重复 5 次；相对标准偏差 RSD 为 0.67%，
表明仪器精密度高。
(6) 重现性实验
取表 2 中 16 号样品 5 份，配制供试品溶液；以饱
和 NaHCO3溶液做空白样，在波长为 218 nm 下分别
测定其吸光度，RSD 为 1.22%，表明该方法可靠。
(7) 稳定性实验。取表 2 中 16 号样品配制供试品
溶液；以饱和NaHCO3溶液做空白样，在波长为218 nm
下每隔 1.5 h 测量 1 次吸光度，共 5 次，RSD 为 0.74%，
中南大学学报(自然科学版) 第 42 卷 1892

表 2 三因素二次通用旋转实验设计及结果
Table 2 Three-factor second order rotation combination experimental design and results
序号 X0 X1 X2 X3 X1X2 X1X3 X2X3 X12 X22 X32 干膏 得率/%
总三萜成分提
取率/(mg·g−1) Y
1 1 −1 −1 −1 1 1 1 1 1 1 24.19 14.438 19.314
2 1 −1 −1 1 1 −1 −1 1 1 1 24.37 14.538 19.454
3 1 −1 1 −1 −1 1 −1 1 1 1 22.74 12.476 17.608
4 1 −1 1 1 −1 −1 1 1 1 1 22.96 12.536 17.748
5 1 1 −1 −1 −1 −1 1 1 1 1 18.62 10.194 14.407
6 1 1 −1 1 −1 1 −1 1 1 1 20.52 10.495 15.508
7 1 1 1 −1 1 −1 −1 1 1 1 19.83 9.476 14.653
8 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 20.74 10.290 15.515
9 1 −1.682 0 0 0 0 0 2.828 0 0 26.72 16.207 21.464
10 1 1.682 0 0 0 0 0 2.828 0 0 19.98 11.140 15.560
11 1 0 −1.682 0 0 0 0 0 2.828 0 20.27 11.336 15.803
12 1 0 1.682 0 0 0 0 0 2.828 0 18.93 10.019 14.474
13 1 0 0 −1.682 0 0 0 0 0 2.828 21.12 11.250 16.185
14 1 0 0 1.682 0 0 0 0 0 2.828 22.14 11.915 17.028
15 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 21.21 11.391 16.300
16 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 20.74 11.659 16.200
17 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 21.07 11.202 16.136
18 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 20.99 11.676 16.333
19 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 21.86 12.037 16.948
20 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 21.04 11.774 16.407
注：Y 为综合评分。


图 1 五加皂苷对照品的紫外光谱
Fig.1 UV spectrum of standard acankoreoside A

表明样品在 6 h 内稳定，满足含量检测要求。
(8) 加样回收实验。取表 2 中 17 号样品 0.05 g 左
右 5 份，精密称定，分别加入一定量的五加皂苷标准
品，配制供试品溶液；以饱和 NaHCO3溶液做空白样，

图 2 样品中五加皂苷的紫外光谱
Fig.2 UV spectrum of acankoreoside A in sample

218 nm 下分别测定吸光度，计算总皂苷含量，并计算
出回收率为 98.2%，RSD 为 1.23%，表明该方法回收
率较高。
(9) 总三萜成分提取率的测定。制备供试品溶液；
第 7 期 刘向前，等：细柱五加叶中抗 HMGB1 总三萜活性物质的闪式提取工艺 1893


图 3 五加皂苷的标准曲线
Fig.3 Calibration curve of acankoreoside A

以饱和 NaHCO3溶液做空白样，测定 218 nm 下各样
品的吸光度，根据标准曲线计算总三萜成分浓度；再
根据干膏量，计算出总三萜成分提取率。

2 结果与分析

2.1 回归模型的建立及显著性检验
三因素二次通用旋转实验设计及结果见表 2。
以综合评分 Y 为因变量，3 因素 Xi的编码值为自
变量，对实验所得数据(见表 2)进行多元分析，得回归
方程：

Y=16.387 352−1.755 106X1−0.394 956X2+0.268 040X3+
0.458 125X1X2+0.210 375X1X3−0.029 875X2X3+
0.751 501X12−0.441 210X22+0.077 806X32
对上述方程及各因素的方差分析见表 3。
由表 3 可以看出：失拟检验 F1=−0.125 07＜
F0.05(5,5)=5.05，差异不显著，说明未控制因素对实验
结果干扰很小，拟合不足被否定；拟合检验 F2=
165.301 55＞F0.01(9,10)=4.95，达到极显著水平；复相
关系数 R2=0.993 3，校正复相关系数 Radj2=0.987 3，均
说明该方程与实际情况拟合良好，正确反映了综合评
分与乙醇浓度、提取时间和提取剂用量与五加叶质量
之比的关系。
各实验因子的偏回归系数的检验结果表明：X1，
X2，X3，X1X2，X12，X22，X32 的偏回归系数均达到极
显著水平，这些因素对综合评分的影响极显著，而且
不是简单的线性关系；交互项 X2X3未达到显著水平，
但由于各系数间具有相关性，微弱的交互项原则上不
能删除，因此，方程不能简化[16]。
2.2 主因子效应分析
由于回归模型本身已经过无量纲编码代换，其偏
回归系数已经标准化，故可直接从其绝对值来判断各
因子对目标函数的相对重要性，即一次项系数的绝对

表 3 试验结果方差分析表
Table 3 Analysis of mean square deviation for experiment data
变异来源 平方和 自由度 均方 F 值 显著性
X1 42.070 420 00 1 42.070 42 1 055.333 02 极显著
X2 2.130 430 00 1 2.130 43 53.441 77 极显著
X3 0.981 230 00 1 0.981 23 24.614 04 极显著
X1X2 1.679 030 00 1 1.679 03 42.118 28 极显著
X1X3 0.354 060 00 1 0.354 06 8.881 59 显著
X2X3 0.007 140 00 1 0.007 14 0.179 11 不显著
X12 179.553 740 00 1 179.553 74 4 504.090 88 极显著
X22 96.997 140 00 1 96.997 14 2 433.165 35 极显著
X32 17.751 190 00 1 17.751 19 445.287 15 极显著
回归平方和 59.307 110 00 9 6.589 68 F2=165.301 55 极显著
剩余平方和 0.398 650 00 10 0.039 86
失拟平方和 −0.024 930 00 5 −0.004 99 F1=−0.125 07 不显著
误差平方和 0.423 580 00 5 0.084 72
总偏差平方和 59.705 753 75 19
注：F0.05(1,10)=4.96，F0.01(1,10)=10.04，F0.05(9,10)=3.02，F0.01(9,10)=4.95，F0.05(5,5)=5.05。
中南大学学报(自然科学版) 第 42 卷 1894

值可反映 3 因素对综合评分的影响程度，由回归方程
可知 3 因素的影响程度从大到小依次为：乙醇浓度，
提取时间，提取剂用量与五加叶质量之比。
2.3 单因子效应及其边际效应分析
分别将回归方程中的 2 个变量固定在零水平，进
行降维分析，即可得到 3 个以其中 1 个因素为决策变
量的偏回归模型：

Y1=16.387 352−1.755 106X1+0.751 501X12

Y2=16.387 352−0.394 956X2−0.441 210X22

Y3=16.387 352+0.268 040X3+0.077 806X32

根据单因子效应方程作图，得到单因子效应曲线
(图 4)。经计算，当 X1=−1.682，X2=−0.4476，X3=1.682，
即乙醇浓度为 53%，提取时间为 213 s，提取剂用量与
五加叶质量之比为 46.8 时，各单因素对综合评分的影
响最大，最大值分别为 Y1max=21.465，Y2max=16.476，
Y3max=17.058。


1—X1; 2—X2; 3—X3
图 4 单因子效应曲线
Fig.4 Single factor utility curves

对单因子效应方程求一阶偏导数，得到单因子边
际效应方程。单因子边际效应方程反映了综合评分随
不同因子编码值的变化速率。单因子效应方程为：

dY1/X1=−1.755 1+1.503 16X1

dY2/X2=−0.394 95−0.882 62X2

dY3/X3=0.268 04+0.155 56X3

根据单因子边际效应方程可以得到单因子边际效
应曲线(图 5)。由图 5 可知，3 条曲线斜率的绝对值依
次为：X1＞X2＞X3，说明乙醇浓度的变化对综合评分
的影响最大，提取时间次之，提取剂用量与五加叶质


1—X1; 2—X2; 3—X3
图 5 单因子边际效应曲线
Fig.5 Marginal utility curves

量之比最小，与主因子效应分析结果一致。
2.4 因子的交互效应分析
为了观察 2 个因素同时对综合评分的影响，可以
进行降维分析。令其中 1 个因素的水平为 0，就可得
到另外 2 个因素对综合评分影响的二元二次方程：

Y12=16.387 352−1.755 106X1−0.394 956X2+
0.458 125X1X2+0.751 501X12−0.441 210X22

Y13=16.387 352−1.755 106X1+0.268 040X3+
0.210 375X1X3+0.751 501X12+0.077 806X32

Y23=16.387 352−0.394 956X2+0.268 040X3−
0.029 875X2X3−0.441 210X22+0.077 806X32

根据方程分别绘制响应面三维图和等高线图，结
果如图 6~11 所示。


图 6 乙醇浓度和提取时间响应面图
Fig.6 Response of surface of alcohol level and
extraction time
第 7 期 刘向前，等：细柱五加叶中抗 HMGB1 总三萜活性物质的闪式提取工艺 1895


图 7 乙醇浓度和提取时间等高线图
Fig.7 Contour line of alcohol level and extraction time


图 8 乙醇浓度和提取剂用量与五加叶质量之比响应面图
Fig.8 Response of surface of alcohol level and
extracting agent concentration


图 9 乙醇浓度和提取剂用量与五加叶质量之比等高线图
Fig.9 Contour line of alcohol level and
extracting agent concentration

图 6 和图 7 反映了乙醇浓度 X1和提取时间 X2之
间的交互作用。当 X2 处于编码值范围内时，Y 随 X1
的减小而显著增大；当 X1处于低编码值范围内时，Y


图 10 提取时间和提取剂用量与五加叶质量之比响应面图
Fig.10 Response of surface of extraction time and
extracting agent concentration


图 11 提取时间和提取剂用量与五加叶质量之比等高线图
Fig.11 Contour line of extraction time and
extracting agent concentration

随 X2的减小也呈增大趋势；因此，乙醇浓度和提取时
间两者具有显著协同作用。
图 8 和图 9 反映了乙醇浓度 X1和提取剂用量与五
加叶质量之比 X3 的交互作用。当 X3 处于编码值范围
内时，Y 随 X1的减小而显著增大；当 X1处于较低编码
值范围内时，Y 随 X3的减小只有微弱变化；因此，乙
醇浓度和提取剂用量与五加叶质量之比两者之间的协
同作用不明显。
图 10 和图 11 反映了提取时间 X2和提取剂用量与
五加叶质量之比 X3 的交互作用。由于交互项 X2X3 未
达到显著水平，故不进行具体讨论。
2.5 数学模型寻优
利用回归方程，在试验约束区域内 (−1.682≤
X1≤1.682，−1.682≤X2≤1.682，−1.682≤X3≤1.682)，
取步长为 0.116，通过 MATLAB 编程，进行计算机模
拟仿真选优(实验次数 N=30)，得到 27 000 套方案的模
拟结果，从中筛选出综合评分≥22.000的组合方案326
中南大学学报(自然科学版) 第 42 卷 1896
套，占 1.21%，Xi的频率分布解析见表 4。
由表 4 可以看出，当 X1为−1.682，X2=−1.278 3~
−0.927 1，X3=−0.558 4~0.408 2 时，综合评分有 95%
的可能性高于 22.000。此时，相应的解码值为：乙醇
浓度为 53%，提取时间为 163.3~184.4 s，提取剂用量
与五加叶质量之比为 24.4~34.1。

表 4 综合评分≥22.000 的优化提取方案中 Xi 取值频率分布
Table 4 Probability distribution of Xi in combined application
X1 X2 X3 水平因素
次数 频率 次数 频率 次数 频率
−1.682 326 100% 30 15/163 14 7/163
−1.566 0 0 30 15/163 13 13/326
−1.450 0 0 30 15/163 13 13/326
−1.334 0 0 30 15/163 13 13/326
−1.218 0 0 30 15/163 12 6/163
−1.102 0 0 30 15/163 12 6/163
−0.986 0 0 30 15/163 12 6/163
−0.870 0 0 30 15/163 11 11/326
−0.754 0 0 30 15/163 11 11/326
−0.638 0 0 30 15/163 11 11/326
−0.522 0 0 14 7/163 11 11/326
−0.406 0 0 7 7/326 10 5/163
−0.290 0 0 4 2/163 10 5/163
−0.174 0 0 1 1/326 10 5/163
−0.058 0 0 0 0 10 5/163
0.058 0 0 0 0 10 5/163
0.174 0 0 0 0 10 5/163
0.290 0 0 0 0 10 5/163
0.406 0 0 0 0 10 5/163
0.522 0 0 0 0 10 5/163
0.638 0 0 0 0 10 5/163
0.754 0 0 0 0 10 5/163
0.870 0 0 0 0 10 5/163
0.986 0 0 0 0 10 5/163
1.102 0 0 0 0 10 5/163
1.218 0 0 0 0 10 5/163
1.334 0 0 0 0 10 5/163
1.450 0 0 0 0 11 11/326
1.566 0 0 0 0 11 11/326
1.682 0 0 0 0 11 11/326
加权均数 −1.682 −1.10271 −0.07508
标准差 0 0.37528 1.03265
95%置信区间 — −1.27834~−0.92708 −0.55837~0.40821
解码值 53% 163.3~184.4s 24.4~34.1

第 7 期 刘向前，等：细柱五加叶中抗 HMGB1 总三萜活性物质的闪式提取工艺 1897

2.6 最佳工艺参数的确定与回归模型的验证
考虑到可操作性及贴近实际工业化生产，将最优
提取条件定为：乙醇浓度 53%，提取时间 175 s，提取
剂用量与五加叶质量之比为 30 mL/g。
为验证上述优选出来的工艺，按数据分析得出的
最优提取条件进行验证实验，结果如表 5 所示。

表 5 最佳工艺验证实验结果
Table 5 Confirmatory experiment result of the best technique
序号 干膏得率/
%
总三萜成分提取率/
(mg·g−1)
综合评分
1 26.99 17.158 22.074
2 27.27 17.352 22.311
3 27.40 17.585 22.492
平均值 27.22 17.365 22.292
相对标准
偏差/% 0.63 1.01 0.77

由表 5 可知：该工艺的综合评分为 22.292，RSD=
0.77%。与表 2 实验结果相比，该工艺的综合评分高
于优化实验中的任何一组，且该工艺稳定，重现性好，
操作简单、省时。

3 讨论

闪式提取法是中药提取领域的一项新技术，其原
理是在适当溶剂存在下，利用高速机械剪切力和搅拌
力，迅速破坏植物细胞组织，使组织细胞内部的化学
成分(或有效成分)与溶剂充分接触，使有效成分快速
溶解转移，在很短时间内达到内外溶解平衡，然后过
滤即可。其所用时间仅为常规回流提取的数十至数百
分之一，而且避免了不耐热成分的破坏，且收率高，
操作简便，节约溶剂和能源[11−12]。
在溶剂和波长的选择中，分别考察了甲醇法和
NaHCO3 饱和溶液法[15]。结果发现：甲醇法波长扫描
后得到的是倒峰，没有出现特定吸收峰，故不能选择
甲醇作为测定细柱五加叶中三萜类物质的溶剂；在
NaHCO3饱和溶液中，五加皂苷的最大吸收峰(218 nm)
与其苷元的(214 nm)非常接近，不能同时或分别测定
它们的含量，只能测定三萜成分的总含量。研究表明，
叶中皂苷含量远大于苷元含量[6]，皂苷在饱和NaHCO3
溶液中比苷元易溶，且溶液较稳定，故选择五加皂苷
为测定用的对照品，检测波长为 218 nm。

4 结论

(1) 采用闪式提取法提取细柱五加叶中三萜成
分，并用二次通用旋转实验设计优化其提取工艺，结
果得到最佳工艺如下：乙醇浓度为 53%，提取剂用量
与五加叶质量之比为 30 mL/g，提取时间为 175 s。验
证实验结果表明：该工艺稳定，重现性好，操作简单、
省时。
(2) 确定了 UV 法测定细柱五加叶及其提取物中
总三萜成分的方法为以五加皂苷为对照品，饱和
NaHCO3溶液为溶剂，218 nm 为最适波长。该方法稳
定可靠，易于操作，可用于细柱五加叶、五加皮以及
其同属植物中总三萜成分含量的测定。

参考文献：

[1] 中华人民共和国药典委员会. 中华人民共和国药典: 一部[M].
北京: 化学工业出版社, 2010: 192−193.
Committee of Chinese Pharmacopeia. Chinese pharmacopeia: Ⅰ
[M]. Beijing: Chemical Industry Press, 2010: 192−193.
[2] Chau C F, Wu S H. The development of regulations of Chinese
herbal medicines for both medicinal and food uses[J]. Trends in
Food Science & Technology, 2006, 17(6): 313−323.
[3] 咸丽娜, 李振麟, 钱士辉. 细柱五加茎中的一个新的贝壳杉
烷型二萜苷[J]. 中草药, 2010, 41(11): 1761−1763.
XIAN Li-na, LI Zhen-lin, QIAN Shi-hui. One new ent-kaurane
glycoside from stems of Acanthopanax gracilistylus[J]. Chinese
Traditional and Herbal Drugs, 2010, 41(11): 1761−1763.
[4] 倪娜, 刘向前 . 五加科五加属植物的研究进展[J]. 中草药 ,
2006, 37(12): 1895−1900.
NI Na, LIU Xiang-qian. Advances in studies on plants of
Acanthopanax Miq. in Araliaceae[J]. Chinese Traditional and
Herbal Drugs, 2006, 37(12): 1895−1900.
[5] 李志峰, 杨金火, 张武岗, 等. 刺五加的化学成分研究[J]. 中
草药, 2011, 42(5): 852−855.
LI Zhi-feng, YANG Jin-huo, ZHANG Wu-gang, et al. Chemical
constituents from Acanthopanax senticosus[J]. Chinese
Traditional and Herbal Drugs, 2011, 42(5): 852−855.
[6] 倪娜. 细柱五加叶及其同属植物活性成分研究[D]. 长沙: 中
南大学化学与化工学院, 2008: 3−37.
NI Na. Studies on the active ingredient from the leaves of
Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith and Acanthopanax Miq.
中南大学学报(自然科学版) 第 42 卷 1898
Plants[D]. Changsha: Central South University. School of
Chemistry and Chemical Engineering, 2008: 3−37.
[7] LIU Xiang-qian, Chang S Y, Yook C S. Lupane-triterpenoids
from the leaves of Acanthopanax gracilistylus[J]. Journal of
Lanzhou University: Natural Sciences, 2006, 42(4): 86−91.
[8] 刘红波, 陆刚, 边宽江. 几种实验设计方法的比较[J]. 安徽农
业科学, 2007, 35(36): 11738−11739.
LIU Hong-bo, LU Gang, BIAN Kuan-jiang. Comparison among
several methods of experimental design[J]. Journal of Anhui
Agricultural Science, 2007, 35(36): 11738−11739.
[9] 郑礼胜. 京尼平苷的酶解工艺及其产物的降糖活性研究[D].
长沙: 中南大学化学与化工学院, 2010: 36−46.
ZHENG Li-sheng. Enzymatic hydrolysis of geniposide and
hypoglycemic activity of its product[D]. Changsha: Central
South University. School of Chemistry and Chemical
Engineering, 2010: 36−46.
[10] 李永强, 杨士花, 毕晓菲, 等. 二次通用旋转试验设计优化三
角梅红色素提取工艺的研究[J]. 中国食品添加剂, 2010(5):
68−72.
LI Yong-qiang, YANG Shi-hua, BI Xiao-fei, et al. Study on
optimizing the extraction of Bougainvillea Spectabilis willd red
pigment by the quadratic general rotary design[J]. China Food
Additives, 2010(5): 68−72.
[11] 刘延泽. 植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践[J].
中国天然药物, 2007, 5(6): 401−407.
LIU Yan-ze. Principle and practice of smashing tissue extraction
and herbal blitzkrieg extractor[J]. Chin J Nat Med, 2007, 5(6):
401−407.
[12] 贺石麟, 牛景霞, 倪艳. 淫羊藿中淫羊藿苷和总黄酮的闪式
提取工艺[J]. 中国实验方剂学杂志, 2011, 17(8): 38−40.
HE Shi-lin, NIU Jing-xia, NI Yan. Study on flash-type extraction
process for total flavonoids and leariin from Herba Epimedii[J].
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,
2011, 17(8): 38−40.
[13] 潘丽军, 陈锦权. 试验设计与数据处理[M]. 南京: 东南大学
出版社, 2008: 232−237.
PAN Li-yun, CHEN Jin-quan. Experiment design and data
processing[M]. Nanjing: Southeastern University Press, 2008:
232−237.
[14] Montgomery D C. 实验设计与分析[M]. 傅珏生, 张健, 王振
羽, 等译. 北京: 人民邮电出版社, 2009: 319−343.
Montgomery D C. Design and analysis of experiments[M]. FU
Jue-sheng, ZHANG Jian, WANG Zhen-yu, et al, trans. Beijing:
Posts & Telecom Press, 2009: 319−343.
[15] 黄书铭, 杨新林, 黄建, 等. 紫外分光光度法快速测定灵芝样
品中三萜类化合物的含量[J]. 北京理工大学学报, 2004, 24(6):
555−558.
HUANG Shu-ming, YANG Xin-lin, HUANG Jian, et al. Method
for the rapid quantification of triterpenoids in Ganoderma
Lucidum by ultraviolet spectrometry[J]. Transactions of Beijing
Institute of Technology, 2004, 24(6): 555−558.
[16] 卢恩双, 宋世德, 郭满才. 回归通用旋转设计的几个问题[J].
西北农林科技大学学报: 自然科学版, 2002, 30(5): 110−113,
120.
LU En-shuang, SONG Shi-de, GUO Man-cai. Problems in
second-order regression general rotation analysis[J]. Journal of
Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry:
Natural Science Edition, 2002, 30(5): 110−113, 120.
(编辑 赵俊)