全 文 ：应用与环境生物学报　 2006, 12(5):605～ 608 　 　
Chin J A pp lEnviron B io l=ISSN 1006-687X 　 2006-10-25
　岩生植物金发草遗传多样性的 ISSR和 AFLP比较研究*
马丹炜　王胜华　罗 通　王文国　庄国庆　陈 放**
(四川大学生命科学学院　成都　 610064)
摘　要　禾本科岩生植物金发草〔Pogona therum paniceum (Lam. ) H ack. 〕具有开发为新型国产草坪草种的潜力. 用 IS-
SR与 AFLP分子标记 , 分析了四川 、重庆 、云南及广西等地 22个金发草种群的遗传多样性. 用 14个 ISSR引物 、10对
AFLP引物分别扩增出 239、 485条谱带 ,多态位点百分率分别为 94. 98%、 90. 93%. 两种标记均揭示出金发草种群具
有丰富的遗传多样水平.由于标记原理不同 , 两种标记的结果呈现出微小的差别.相对而言 , 基于 ISSR标记分析的遗
传多样性参数高于 AFLP标记得到的遗传多样性参数 ,这可能是由于金发草种群间存在着大量的微卫星变异所致. 两
种标记基于 Nei遗传距离的聚类分析结果存在着一定的差异 ,但用 M ante l测试对两种方法检测的遗传一致度进行相
关性分析表明 ,它们之间存在着显著的相关性(r=0. 314 6, P =0. 015 0), 用 SPSS11. 5软件进一步分析两种标记遗传
一致度的相关性 , Pea rson相关系数为 0. 315 (在 0. 01水平上),两种标记的聚类分析都揭示出金发草的遗传变异呈现
出一定的地域分布规律. ISSR标记与 AFLP标记均能应用于金发草种群的遗传多样性研究. 图 1表 2参 16
关键词　金发草;遗传多样性;ISSR;AFLP
CLC　Q943
Compar itive Study on Genetic D iversity of Rock PlantPogona therum paniceum
U sing ISSR and AFLPM arkers
*
MA D anwe i, WANG Shenghua, LUO Tong, WANG W enguo, ZHUANG Guoqing＆ CHEN Fang**
(Co llege o fLi fe S cien ces, S ichuan Un iversity , C hengdu 610064, Ch in a)
Abstract　A s a rock plant, Pogonatherum paniceum (Lam. ) H ack. is a prom ising new native turfgrass spec ie s for g ardens in
China. Its g enetic d ive rsity o f 22 popu la tions from Sichuan, Yunnan, Chongqing and Guangx iw as analyzed using in te r-simp le
sequence repeats( ISSR) m arkers and am plified fragm en t leng th po lymo rphism (AFLP). F ourteen ISSR prim ers and ten AFLP
p rim er comb ina tions amp lified 239 and 485 polym o rphic bands, o f wh ich the po lymo rphic loci w e re 227 (94. 98%) and 441
(90. 93%), respec tive ly. Sim ila r results o f ISSR and AFLP revealed tha tP. pan iceum possessed highe r gene tic diversity.
H owever, because o f the d iffe rentm echanism s o f ISSR and AFLP, m inor d iffe rence existed in the results ob ta ined. Genetic di-
ve rsity param e te rs based on ISSR m arke rw ere h igher than those ba sed on AFLP, w hich w as probab ly resulted from the abun-
dant varia tions o f m icro sate llites occurred in inter-popu la tions. A lthough some d iffe rences ex isted be tw een the ISSR and AFLP
UPGMA dendrogram s based on Ne i′s gene tic distance, M ante l test revea led significan t correla tion of gene tic iden titym a trix be-
tween ISSR and AFLP (r=0. 314 6, P =0. 015 0) in the 22 popu lations, wh ich was furthe r confirm ed by Pearson co rre la tion
coe fficient based on SPSS11. 5 softw a re(0. 315, above the leve l o f 0. 01). ISSR and AFLP m arkers revealed the gene tic varia-
tion o fP. paniceum pre sen ted a geog raph ica l d istribution patte rn. Bo th m arkers cou ld be used as too ls for analyzing the gene tic
d ive rsity o fP. pan iceum . F ig 1, Tab 2, Re f 16
Keywords　Pogonatherum pan iceum;gene tic diversity;ISSR;AFLP
CLC　Q943
　　分子标记技术已成为研究植物遗传多样性的主要手段之
一 , 不同分子标记具有不同的特点 , 选择合适的分子标记对能
否客观反映研究对象的状况具有重要的影响 [ 1] . 在众多的分
子标记中 , ISSR与 AFLP标记均具有无需预先知道受试基因
组 DNA序列 , DNA用量少 , 灵敏度高 , 对反应条件不敏感 , 重
复性好 , 共显性表达 ,能提供丰富的关于基因组的信息等优点 ,
已广泛应用于植物遗传多样性的研究 [ 2 ～ 8] . 相对而言 , ISSR分
收稿日期:2006-02-16　　接受日期:2006-04-04
*教育部 973预研项目 (104255)资助　 Supported by the Pro-research
Project(104255) of973 ofM in istry of Education of Ch ina
**通讯作者　C orrespond ing au thor(E-m ail:cfang@263. net)
子标记技术具有操作简单 、实验成本低的优点;AFLP具有更
高的灵敏度 , 能检测出更高的遗传多样性 , 但所需仪器和药品
价格昂贵 , 实验成本高 , 检测过程繁琐或对环境与人体具有一
定的危害 , 同时 ,技术要求较为全面 [ 9] .
岩生植物金发草〔Pogonatherum pan iceum (Lam. ) Hack. 〕
是禾本科金发草属的多年生草本植物 ,分布于我国华中 、华南 、
西南以及印度 、马来西亚 、澳大利亚等地 [ 10, 11]的低山岩壁缝
隙 、路旁 、草地等干旱向阳处 , 以风化岩石表面分布最为常见.
金发草形似小竹 , 自然形态美观;耐干旱瘠薄 , 生长迅速 , 根系
十分发达 , 茎枝对地面覆盖力较强等优点 , 在水土保持 、生态边
坡防护 、绿化等方面具有良好的应用前景 , 是一种优良的地被
植物和观赏植物 , 具有开发为新型国产草坪草种的潜力. 近年
来 , 国内主要从种群特征 [ 12, 13]及生理适应性 [ 14]等方面对金发
草进行了研究 , 有关金发草遗传多样性的研究迄今未见报道.
本研究以采自中国西南 、华南等地不同海拔生境的 22个金发
草种群为材料 , 以分析 ISSR和 AFLP两种分子标记技术在进
行金发草遗传多样性研究中的有效性.
1　材料与方法
1. 1　供试材料
供试材料采自我国四川资阳 (包括 XY、 BH 两个种群)、
峨眉山市(包括 DL、 QYG, 两个种群)、仁寿县 (包括 SX、 ZJ、
HH、 CJ、 YD 5个种群 )、宜宾市 (YB种群 )、双流县 (HY种
群)、彭州市(PZ种群)、盐边县(PYB种群);重庆市綦江县(QJ
种群)、金堂县( JT种群 )、缙云山 ( JYS种群 )、壁山县 (QG种
群);云南陆良县 (包括 YTZG、 DCB、 HZG、 YTG 4个种群 )以
及广西梧州市(WZ种群)等 22个样点. 供试种群分布海拔范
围为 50 ～ 1 936 m.
按照集群采样策略 ,采样时尽可能采集每株植物相同部位
的新鲜叶片 , 直接提取 DNA或放入 - 70 ℃冰箱中备用. 采集
时间为 2003年 7月至 2004年 5月.
1. 2　方 法
1. 2. 1　基因组 DNA的提取　　将每个金发草种群 15个个体
的新鲜嫩叶等量混合后采用稍加改进的 CTAB法 [ 15]提取总 DNA.
1. 2. 2　 ISSR扩增及检测　　 ISSR引物 (UBC se tNo. 9)由加
拿大哥伦比亚大学提供. 从 100条引物筛选出扩增条带清晰 、
重复性较好的引物用于 PCR扩增. ISSR反应体系为 20 μL,包
括 2 μL DNA模板(25 ng /μL)、 0. 5 μL引物 (1 mm o l /L);5
μL dNTP (1 mm ol /L)、 2 μL 10×PCR buffe r、 0. 8 U rTaq DNA
聚合酶和 10. 34 μL ddH2O, dNTP、 rT aq DNA聚合酶均购自
TaKaRa公司;扩增反应在 PTC100TM (P rog ramm ab le Therm a l Con-
trolle r, M J Resea rch Inc ,美国)PCR扩增仪上进行;PCR反应
程序为:94℃预变性 5 m in;94℃变性 30 s、 48 ～ 52℃退火 45
s、 72 ℃延伸 2 m in, 共计 45个循环;72 ℃延伸 7 m in;4 ℃ 10
m in终止反应;扩增反应结束后 ,以 100 bp Ladderma rker(天为
时代)作参照 , 用 2%琼脂糖凝胶电泳 (0. 5 ×TBE), 电压 100
V, 电泳时间 4 h, 然后用 EB染色 , 凝胶成像系统照相 ,观察扩
增结果.
1. 2. 3　AFLP扩增及检测　　接头与引物按照文献 [ 15]提供
的序列 , 由北京赛百盛公司合成. 从选择性引物中筛选出条带
清晰 、反应稳定的引物组合进行 AFLP分析;AFLP反应参照
文献 [ 9]进行. 取 550 ng总 DNA用 EcoRⅠ (B iolabs)和 M seⅠ
(B iolabs)双酶切 , 酶切产物用 T4 -连接酶(TaKaRa)与接头连
接;然后用无选择性碱基的引物进行预扩增 , 预扩增程序为:
94 ℃变性 2 m in, 94 ℃变性 30 s, 56℃退火 30 s, 72 ℃延伸 1
m in, 30个循环后 , 72℃延伸 5 m in, PCR反应结束后 ,置 4℃
保存. 取 10 μL预扩增产物用 TE0. 1稀释 10倍 , 作为选择性扩
增反应工作液;选择性扩增采用 “ Touch down”策略. 反应程序
为:94℃变性 2 m in, 94 ℃变性 30 s, 65 ℃退火 30 s(每个循
环降低 0. 7 ℃), 72℃延伸 1 m in, 共 12个循环;94℃变性 30
s, 56 ℃退火 30 s, 72 ℃延伸 1 m in, 在进行 23个循环后 , 72
℃延伸 5 m in, PCR反应结束后 , 置 4 ℃保存;PCR扩增仪与
ISSR同;5 μL选择性扩增产物样品加入等体积甲酰胺染液在
90 ℃加热 3 m in后立即在冰浴中冷却.以 100 bp Ladde rma rke r
作参照 , 用 6%的变性聚丙烯酰胺胶(1×TBE), 1 300 V、 70W
电泳约 2 h;银染 , 照相 ,观察扩增结果.
1. 3　数据处理
1. 3. 1　种群遗传多样性及遗传结构分析　　按扩增产物在相
对迁移位置的有无 ,有赋以 “ 1” ,无赋以 “ 0”, 生成分子数据矩
阵 , 应用 POPGENE1. 31软件对 22个种群进行遗传参数分析 ,
计算多态位点百分率(PPB, pe rcen tage of po lymo rph ic bands)、
观测等位基因数 (N a , Obse rved num be r o f a lle le s)、有效等位基
因数 (N e , E ffec tive num be r o f a lle le s)、 Ne i基因多样性 (H ,
Ne i′s gene d ive rsity), Shannon信息指数(I, Shannon′s Info rm a-
tion index)、 Ne i遗传距离 (1972) (genetic distance)与遗传一
致度(gene tic iden tity)等参数.
1. 3. 2　聚类分析及相关性分析　　采用 UPGMA 法 (Un-
w eighted pair group m e thod using arithm e tic average, 非加权配对
算术平均法)对 22个金发草种群的 Nei′s遗传距离进行聚类
分析;用 TFPGA软件的 M antel检验和 SPSS11. 5软件进行相关
性分析.
2　结果与分析
2. 1　遗传多样性分析
从 100条 ISSR引物选择出 14条能产生清晰 、稳定谱带的
引物进行正式扩增 ,共扩增出 239条谱带 , 片段大小在 450 ～
2 000 bp之间 , 94. 98% (227)具有多态性;64对 AFLP引物
组合中 , 有 10对获得清晰 、稳定的谱带 , 共扩增出 485条清晰
的谱带 , 441条具有多态性(90. 93%),片段大小在 50 ～ 450 bp
之间(表 1).两种标记的扩增结果均表明 , 金发草具有丰富的
遗传多样性 (表 2). ISSR扩增得到的遗传多样性参数 PPB、
N a、 N e、H和 I高于 AFLP扩增得到的结果(表 2).
2. 2　金发草种群间的遗传差异
根据 ISSR分析表明 , Nei′s遗传距离介于 0. 198 3 ～
0. 601 3之间 ,所有种群的平均遗传距离为 0. 397 6, QJ种群与
YD种群之间的遗传距离最大(0. 601 3), DCB种群与 HZG种
群之间遗传距离最小 (0. 198 3). 遗传一致度的变化范围为
0. 548 1 ～ 0. 820 1,平均遗传一致度为 0. 673 5;AFLP分析得
到的 22个金发草种群的遗传距离在 0. 099 6 ～ 0. 695 2之间 ,
平均遗传距离为 0. 310 6,其中 HZG种群与 YTZG种群之间遗
传距离最小(0. 085), XY种群(XY)与 CJ种群之间的遗传距
离最大;遗传一致度在 0. 499 0 ～ 0. 905 2之间 , 平均遗传一致
度为 0. 738 7.两种标记的结果均说明 ,金发草种群间存在着相
当程度的遗传分化 ,但是二者揭示的结果有一定的差异.
UPGMA聚类结果(图 1)表明 , ISSR和 AFLP标记分别得
到了基本相近但不完全相同的聚类图 , 22个种群基本按照地
理分布格局聚类 ,如两类标记聚类结果均为:来自广西壮族自
治州的 WZ种群自成一类 ,重庆市的 JYS、 QG、 QJ种群聚在一
起 , 四川省的 BH、 PZ、 YB、 HY、 JT、 QYG、 DL、 SX、 ZJ、 HH、
CJ、 YD种群聚在一起 , 云南省陆良县的 YTZG、 DCB、 YTG、
HZG种群聚为一类 , 显示了遗传距离与地理距离之间的相关
性 , 进一步说明来自不同地理分布区的金发草种群之间存在着
606 　　　　　　　　应 用与 环 境生 物学 报　　Chin J App lEnviron B io l　　　　　　　　　　　　　　 　　　12卷
相当程度的遗传分化 .但是 , 两类标记所得到的聚类图存在着
一定的差异 , 如在 AFLP聚类图中 ,来自四川省资阳市的 XY种
群和盐边县的 PYB种群分别自成一类 , 未按 ISSR标记聚类图
的格局进行聚类 .
表 1　用于金发草遗传多样性分析的 ISSR引物及 AFLP引物组合及其扩增结果
Tab le 1　 ISSR prim e r and AFLP p rim er comb ina tions used in ana lysis o f gene tic diversity ofP. paniceum and their am plifica tion re su lts
ISSR引物　 ISSR p rim er AFLP引物　AFLP p rimer comb ination s
引物
Prim er
引物序列
Sequ ence
of p rim er
扩增条带数
No. of band s
scored
多态性条带数
N o. of polym orph ic
band s
引物组合及序列
Sequen ce of
p rim er comb inat ion s
扩增条带数
N o. of band s
scored
多态性条带数
No. of polymorph ic
bands
801 (AG)8T 18 18 E -AAC M/ -CTA 53 46
808 (AG)8C 14 14 E -AAG M/ - CAA 53 47
809 (AG)8G 18 17 E -AAG M/ - CAG 39 32
810 (GA)8T 19 19 E -AAG M/ -CTC 54 49
816 (CA)8T 11 11 E -AAG M/ - CTT 41 36
817 (CA)8A 18 17 E -ACA M/ - CAA 63 62
835 (AG)8YC 21 20 E -ACA M/ - CAC 48 46
856 (AC)8YA 17 16 E - ACA M/ -CTC 46 44
860 (TG)8RA 16 15 E -AGC M/ - CAG 50 45
861 (ACC)6 16 13 E -AGG M/ - CAA 38 34
887 DVD(TC)7 19 17
888 BDB(CA)7 24 23
891 HVH(TG)7 13 12
900
ACT TCC
CCA CAG
GTT AAC
ACA
15 15
Average 17. 07 16. 21 48. 5 44. 1
Tota l 239 227 485 441
B, C /G /T;D , A /G /T;H , A /C /T;R, A /G;V, A /C /G;Y, C /T;E和M分别表示 E coRⅠ引物和M seⅠ引物共同序列 E:5′-GACT-
GCGTACCAATTC - 3′;M:5′-GATGAGTCCTGAGTAA - 3′
表 2　22个种群 ISSR和 AFLP扩增比较
Tab le 2　Comparison of gene tic diversity ofP. paniceum revea led by ISSR and AFLP
参数 Param eter ISSR AFLP
引物(引物对)数　N o. of p rimer(com b ination) 14 10
总条带数　No. of total bands 239 485
平均条带数　No. of average bands 17. 07 48. 5
多态位点百分率　Percen tage of po lym orph ic bands (PPB /%) 94. 98 90. 93
观测等位基因数　Observed number of alle les(N a) 1. 9498 1. 9093有效等位基因数　E ffective num ber of alleles(N e) 1. 5303 1. 4048
N ei′s基因多样性　Nei′s gene divers ity (H) 0. 3117 0. 2494
Shannon′s信息指数　 Shannon′s In form ation index (I) 0. 4709 0. 3903
2. 3　 ISSR与 AFLP之间的相关性分析
为了检测 ISSR与 AFLP分析的相关程度 , 利用 M an te l检
验对基于两种标记的遗传一致度矩阵进行相关性分析.结果表
明 , 两种标记分析的遗传一致度的相关性达到显著性水平( r=
0. 314 6, P =0. 015 0), 进一步用 SPSS11. 5软件分析两种标记
的遗传一致度 , 结果显示二者呈极显著的正相关 , Pearson相
关系数为 0. 315,显著性在 0. 01水平上.
3　讨 论
3. 1　遗传多样性评价
本研究的 ISSR和 AFLP标记都可以扩增出其各自的多态
性带谱 , 检测出金发草种群的遗传多样性. 对于 ISSR分析 ,
PPB为 94. 98%,每个位点的有效等位基因数(N
e
)是 1. 530 3,
Shannon信息指数( I)和 Ne i′s基因多样性(H)分别为 0. 311 7
和 0. 470 9;对于 AFLP分析 , PPB为 90. 93%,每个位点的有效
等位基因数(N e)是 1. 404 8, Shannon信息指数(I)和 Ne i′s基
因多样性(H)分别为 0. 249 4和 0. 390 3.表明两种标记系统都
能产生各自有效的多态性带 , 因此 , 两种标记均能够有效地应
用于金发草种群的遗传多样性分析 ,其分析得到的结果较为相
近 , 均揭示出金发草具有较高的遗传多样性水平. 相对而言 ,由
ISSR标记得到的遗传多样性参数略高于 AFLP标记得到的结
果. 这可能是由于 ISSR引物含有重复序列 , 与它结合的靶序列
在 DNA复制过程中存在滑动和不均等交换现象 , 使它们在不
同种群之间的重复次数差异较大 ,易引起引物结合位点和两结
合位点之间的片段长度差异 [ 22] .
3. 2　遗传距离及遗传一致度评价
ISSR和 AFLP分析的平均遗传距离分别为 0. 397 6和
0. 310 6,平均遗传一致度分别为 0. 673 5和 0. 738 7. 相对而
言 , ISSR标记在揭示不同地区种群间的遗传水平差异高于
AFLP标记 , 可能是由于金发草种群间产生了大量的微卫星变
异所致 [ 16] .利用 M an te l检测及 SPSS11. 5进行相关性分析 , 均
揭示出两种标记分析所得的遗传一致度具有显著的相关性 ,基
于 N ei遗传距离对供试种群的聚类分析 , 也支持了这一结论 ,
即基于 ISSR和 AFLP标记的聚类图形状较为相似. 从聚类分
析的结果看 , 22个供试种群具有明显的地域性分布规律.上述
607　 5期 马丹炜等:岩生植物金发草遗传多样性的 ISSR和 AFLP比较研究 　　
结果表明 , ISSR与 AFLP两种标记均能检测出金发草种群之 间的遗传变异 , 二者的分析结果可以相互印证.
图 1　金发草种群间基于 ISSR和 AFLP Nei遗传距离的 UPGMA聚类分析
F ig. 1　Dendrogram based Nei′s(1972) genetic d istan ce by ISSR andAFLP m ark ers
　　两种标记分析结果存在着一定的差异 , 在 AFLP聚类中 ,
来自四川省资阳市的 XY种群和盐边县的 PYB种群分别自成
一类 , 而没有按照 ISSR标记的聚类图所显示格局进行聚类.差
异的主要原因可能为:(1)两种标记原理不同 , 不同标记检测
的基因座位不同 , ISSR标记检测的是重复序列间片段 , AFLP
标记检测的是特异限制性片段 ,因此 , 两种标记得到的遗传距
离不同 , 由此产生的聚类图具有一定的差异;(2)所用的引物
不同 , AFLP采用的是与接头序列和限制性内切酶位点同源的
特异引物 , ISSR引物是 15 ～ 24个碱基的重复锚定引物 , 不同
的引物检测得到的多态性不一样 ,并且多态片段数随着引物数
的增加而增加 , 必然引起遗传距离的变异 [ 16] . 因此 , 推测增加
AFLP引物对数目 , PPB 将会与 ISSR分析结果一致. (4)
AFLP最初的几次循环中采用了较高的退火温度 , 可以抑制非
特异性扩增 [ 9] . 同时 , AFLP采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 , 能扩增
出更多的条带和获得更多多态条带 ,平均每对引物扩增出44. 1
条多态带 , 高于 ISSR获得平均每对引物扩增出 16. 21条多态
带的结果 , 为 ISSR扩增多态性条带数的 2. 7倍 , 故而较 ISSR
标记更为敏感 , 更能够检测出更为细微的遗传变异.
致 谢　本研究得到了四川大学生命科学学院贾勇炯教授 、唐
琳博士 、徐莺博士 、严钫副教授的大力帮助.
Referrences
1　LiYX (李永祥), LiSS (李斯深), Li LH (李立会), Yang XM (杨
欣明), L i XQ (李秀全 ). C omparison of genetic diversity of tw elve
E lymu s species using ISSR and SSR markers. S ci Agri S in (中国农业
科学), 2005, 38 (8):1522～ 1527
2　Q iu YX, Hong DY , Fu CX, C am eron KM. Genetic variation in th e en-
dangered and endem ic sp eciesChang ium smyrn ioides (Ap iaceae). B io-
chem Syst＆Ecol, 2004, 32:583～ 596
3　Gem asV JV , A lm adan im MC, Ten reiro R, M artin sA , Fevereiro P. G e-
netic d iversity in the olive tree(O lea europaea L. subsp. europaea) cu l-
tivated in Portugal revealed by RAPD and ISSR m ark ers. Gen R esour＆
Crop Evol, 2004, 51:501～ 511
4　Nguyen TT, Tay lor PW J, Redden RJ, Ford R. G enetic d iversity es ti-
m ates inCicer usingAFLP analys is. P lan tB reed ing, 2004, 123:173～
179
5　W ang BR, LiWG, Wang JB. G enetic d iversity ofA lternanth era ph i loxe-
roides in C hina. Aquat Bo t, 2005, 81:277 ～ 283
6　W ang DL, Li ZC, H ao G , Ch iang TY, G eX J. Genet ic diversity ofCa l-
oced rusm acro lepis(Cup ressaceae) in sou thw es tern Ch ina. B ioch em Syst
＆E co l, 2004, 32:797 ～ 807
7　W u C J, C heng ZQ , H uang XQ , Yin SH , Cao KM , Sun CR. G enetic
d iversity am ong and w ith in popu lations ofO ryza granu la ta from Yunnan
of Ch ina revealed by RAPD and ISSR m arkers:im p lications for con ser-
vation of th e endangered species. P lan t S ci, 2004, 167:35～ 42
8　Zhang DP, Rosse G , K riegnerA , H ijm an s R. AFLP assessm ent of d i-
versity in sw eet potato f rom LatinAm erica and the Pacific region:its im-
p lications on the d ispersal of th e crop. GenetR esour＆CropEvo l, 2004,
51:115～ 120
9　郑成木. 植物分子标记原理与方法. 长沙:湖南科学技术出版社 ,
2003. 119
10　中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志(第十一卷二分
册). 北京:科学出版社 , 1997. 102～ 104
11　《四川植物志》编辑委员会. 四川植物志 (第 5卷第 2分册 ). 成
都:四川科学技术出版社 , 1988. 365～ 367
12　ChenH (陈红), Li SC (李绍才), Peng L (彭丽), Wang HY(王
海洋). The research of the pattern s on b ranch modu le and its differen-
t iation from vary sub strates for Pogonatherum pan iceum. Gu iha ia (广
西植物), 2005, 25 (1):18～ 21
13　W ang HY (王海洋), Peng L (彭丽), Li SC (李绍才), B ai BW
(白宝伟). Grow th characteristics of rock p lan tPogonath erum panice-
um. Ch in J ApplE co l(应用生态学报), 2005, 16 (8):1432 ～ 1436
14　B ai JW (白景文), Luo CD (罗承德), LiX (李西), Gong YB (宫
渊波). Th e research of d rough t resistance about tw o w i ld rock - p lan.t
J S ichuan AgriUn iv (四川农业大学学报), 2005, 23 (3):290 ～
294
15　邹喻苹 , 葛颂 , 王晓东. 系统与分子进化植物学中的分子标记.
北京:科学出版社 , 2001. 16 ～ 17
16　Zhou YQ (周延清), J ing JZ (景建洲), Li ZY (李振勇), Zhang
BH (张宝华), J ia JF (贾敬芬). A ssessm en t of genetic d iversity of
R ehmann ia g lutinosa germ p lasm detected by RAPDs and ISSRs. Here-
d ita s(遗传), 2004, 26 (6):922～ 928
608 　　　　　　　　应 用与 环 境生 物学 报　　Chin J App lEnviron B io l　　　　　　　　　　　　　　 　　　12卷