作 者 :刘洁
期 刊 :北京林业大学 2014年 12期 页码:74
关键词:抗冻蛋白;脱水素;基因克隆;转基因;生理指标;
摘 要 :本研究从青杆(Picea wilsonii)中克隆到冷诱导基因PicW,序列全长669bp,不含内含子,编码的蛋白包含222个氨基酸,其中富含丙氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺、赖氨酸和谷氨酸,不含半胱氨酸和色氨酸。PicW蛋白可组合成5个与脱水素核心区K片段同源的重复片段,二级结构显示其由不同程度的α-螺旋(主要存在于与K片段同源的区域)和无规则卷曲组成,推论为脱水素蛋白。将PicW基因连接植物表达载体PEZR(K)-LC,并转化烟草。将烟草置于-5℃下处理3h,野生植株萎蔫严重,而阳性转基因植株无明显变化。通过生理指标检测发现,转基因植株在电导率、丙二醛、脯氨酸和可溶性糖含量等表现上均优于野生植株。...