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香露兜叶挥发油的超临界萃取及气相色谱-质谱联用分析



全 文 :含量大大提高。
经初步测算 , 双菌株发酵使红景天原药材中红景天苷提高
86.29%, 已大大超过盈亏平衡点 ,具有很强的应用前景。后续需
要在菌种选育 、发酵机理 、药效和中试工艺条件进行研究。
参考文献:
[ 1]  龚晨睿 ,李宇红 ,马 良.红景天复合制剂抗疲劳作用研究 [ J] .卫
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[ 2]  包文芳 ,吴维春 ,李葆华 ,等.抗疲劳药用植物红景天 [ M] .北京:人
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收稿日期:2008-12-22; 修订日期:2009-07-21
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助
(No.IT;海南省自然科学基金项目(No.30827)
作者简介:尹桂豪(1975-),男(汉族),河南南阳人 ,现任中国热带农业科
学院测试中心分析工程师, 学士学位 ,主要从事食品安全 、标准及热带植
物天然产物研究工作.
香露兜叶挥发油的超临界萃取及
气相色谱 -质谱联用分析
尹桂豪1, 2 ,王明月 2 ,曾会才1
(1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所 ,海南 海口 571101; 
2.中国热带农业科学院分析测试中心 ,海南 海口 571101)
摘要:目的 分析香露兜叶超临界萃取挥发油的化学成分。方法 采用用超临界 CO2萃取 , 应用气相色谱 -质谱联用(GC-MS)分析。结果 鉴定出 15个化合物 ,鉴定率 100%。结论 挥发油中主要成分有:角鲨烯 、β -谷甾醇 、豆甾醇 、4, 4-
二甲基 -胆甾 -22, 24-二烯 -5β -醇 、亚麻酸 、维生素 E、ζ-谷甾醇 、植物醇等。
关键词:香露兜叶; 挥发油; 超临界二氧化碳萃取; 气相色谱 -质谱联用
中图分类号:R284.2  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)01-0159-01
  香露兜叶来源于露兜树科露兜属的香露兜 Pandanusamaryl-
lifoliusRoxb的新鲜叶片。 香露兜又称板兰香 , 民间也有称香兰
叶 、斑兰叶。它原产斯里兰卡 、马来半岛及菲律宾 ,我国海南万宁
兴隆地区亦有栽培。香露兜叶含有一种特殊香气 -粽香 ,也是露
兜树种中唯一叶片带有芳香气味的植物 ,东南亚不少国家的人们
用它的叶汁来作糕点 、饮料的香料 [ 1, 2] 。 香露兜叶挥发油的超临
界萃取及化学成分的研究国内未见有文献报道。为了研究其更
广的应用价值 , 本实验采用 GC-MS技术分析香露兜叶挥发油的
超临界萃取的化学成分。
1  仪器与材料
美国热电 TraceGC/MS联用仪 , 石英毛细管色谱柱 SLB-
5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm), 美国 ASI公司 SFE-2超临界
CO2萃取装置。香露兜叶采自兴隆热带植物园 ,为该园种植的植
物 , 拉丁名为 PandanusamarylifoliusRoxb。
2  方法
2.1 超临界 CO2提取 称取香露兜叶片粉碎物 30 g, 放入超临
界 CO2萃取釜中 ,添加 3%的无水乙醇做夹带剂 , 萃取条件:压力
45 MPa,萃取温度 50℃, 萃取时间 3.0 h后分出所得物 , 所得挥
发油为金黄色液体 , 收率为 0.85%, 挥发油用丙酮溶解 , 稀释后
作为供试溶液。
2.2  GC-MS条件
2.2.1 气相色谱条件 载气为氦(He)程序升温:柱温 50℃, 维
持 1 min, 以 20℃/min升温至 280℃, 维持 10 min, 进样口温度
240℃,不分流 , 进样量 1.00μl。
2.2.2 质谱条件 电离方式 EI, 电离能量 70 eV, 离子源温度
230℃,倍增电压 350V, 扫描质量范围 45 ~ 480 amu。
3  结果
从总离子流(图 1)可见 ,分离得到 15个谱峰 , 归一化法测得
各峰的相对含量。利用色谱软件及 NIST98 Libraries进行检索 ,
并结合图谱解析 , 香露兜叶挥发油 GC-MS分析 ,检测出 15个
成分峰 , 鉴定确证其中 15个 , 占总有效成分含量的 100%。用面
积归一化法确定了各组分的相对百分含量。结果见表 1。
在已鉴定出的组分主要为烯 、醇 、酸 、酯等化合物 ,其中含量
较高的成分有角鲨烯(21.03%)、β -谷甾醇(12.66%)、豆甾醇
(11.28%)、 4, 4 -二甲基 -胆甾 -22, 24 -二烯 -5β -醇
(11.20%)、亚麻酸(9.81%)、维生素 E(8.54%)、ζ-谷甾醇
(7.78%)、植物醇(6.15%)等。结果见图 1及表 1。
图 1 香露兜叶挥发油总离子流图
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.1 时珍国医国药 2010年第 21卷第 1期
表 1 香露兜叶挥发油化学成分
峰号 保留时间t/min 化学成分 匹配度
含量
(%)
1 3.77 Propanoicacid, ethenylester丙酸乙烯酯 87 0.19
2 4.28 3-hexanol, 2, 3-dimethyl2, 3-二甲基 -3-己醇 89 0.13
3 5.24 Nonanal天竺葵醛 86 0.07
4 11.45 Cylcopentadecanol环十五(烷)酰 93 2.22
5 11.76 9-octadecyne9-十八炔 89 0.56
6 12.30 n-hexadecanoicacid棕榈酸 94 3.16
7 13.29 Phytol植物醇 97 6.15
8 13.43 9, 12-octadecadienoicacid(Z, Z, )-亚油酸 91 5.22
9 13.46 Linolenicacid亚麻酸 96 9.81
10 16.18 VitaminE维生素 E 94 8.54
11 16.83 Stigmasterol豆甾醇 92 11.28
12 18.09 Squalene角鲨烯 99 21.03
13 18.60 β -stosterolβ -谷甾醇 97 12.66
14 19.24 cholesta-22, 24-dien-5-ol, 4 , 4-dimethyl- 95 11.2
4, 4-二甲基 -胆甾 -22, 24-二烯 -5β -醇
15 20.96 ζ-sitosterolζ-谷甾醇 97 7.78
4  讨论
从表 1中可以看出香露兜叶的挥发油中主要含有大量的角
鲨烯 、甾醇 、不饱和脂肪酸 、醛 、酯以及炔类等。角鲨烯具有较强
生物活性和特殊结构的天然直链三萜烯 ,在深海鱼类中 , 特别是
鲨鱼的肝脏中含量最为丰富 。角鲨烯同深海鱼油中的 EPA和
DHA一样 ,都是当今流行的保健药物 ,它具有渗透 、扩散 、杀菌作
用 , 有很强的输送氧的能力 , 可增强细胞的活力及免疫力 ,加强细
胞新陈代谢 , 消除疲劳。在医学上对心脏病 、肝炎及胃炎等均有
疗效 , 还有极好的养颜 、润肤等功效 ,在相应的医用产品及化妆品
方面有着极好的应用价值和发展前景 [ 3] , 所以香露兜的超临界
提取的挥发油具有一定的保健作用。
参考文献:
[ 1 ]  中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志 ,第 8卷 [ M] .北
京:科学出版社 , 1992:23.
[ 2 ]  胡宏友 ,陈琳琳.板兰香的引种及其资源开发评价 [ J] .香料香精化
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[ 3 ]  赵振东 ,孙 震.生物活性物质角鲨烯的资源及其应用研究进展
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收稿日期:2009-02-19; 修订日期:2009-07-22
基金项目:广西卫生厅计划课题(No.Z2003069)
作者简介:梁学政(1970-),男(汉族),广西柳州人 ,现任广西壮族自治区
柳州市中医医院副主任中药师 ,学士学位 ,主要从事中药制剂研究和药事
管理工作.
双柏凝胶剂中大黄素体外透皮吸收的实验研究
梁学政1 ,奉建芳 2 ,陈惠红 1 ,吴昭璇1
(1.广西壮族自治区柳州市中医医院 545001;2.上海中医药大学 ,上海 201203)
摘要:目的 研究双柏凝胶剂中主要成分大黄素的透皮吸收特性 , 并考察了处方中其他成分对大黄素吸收的影响作用。
方法 采用改良的 Franz扩散装置 ,以离体鼠皮为屏障 、pH7.4磷酸盐缓冲液为接受介质 , 研究了大黄提取物凝胶及双柏
凝胶剂中大黄素透皮吸收性能。结果 在大黄提取物和双柏凝胶剂中 , 大黄素 12 h累积透皮释药为 10.03, 37.06 μg·
cm-1。结论 大黄提取物凝胶中大黄素具有一定的透皮吸收 , 但不太理想 ,而双柏凝胶剂由于其他组分的加入 , 促进了大
黄素的吸收 , 从一个方面佐证了该处方制成凝胶剂的可行性。
关键词:双柏凝胶剂; 大黄素; 透皮吸收
中图分类号:R283  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)01-0160-02
  双柏散由大黄 、黄柏 、泽兰 、侧柏叶 、薄荷组成 ,具有消肿止
痛 , 活血化瘀之功效 ,主要用于治疗跌打损伤早期及疮疡初起红
肿热痛等症 [ 1] 。传统的蜜调散剂使用时易污染衣物 , 且存在较
多的过敏反应。为方便使用 , 同时为提高药物的生物利用度 ,我
们将其制成双柏凝胶剂。本文以大黄提取物凝胶作对比 ,以大黄
素为指标 , 考察了双柏凝胶剂透皮吸收情况 , 从而对双柏凝胶剂
的体外吸收进行初步评价。
1 仪器与试药
1.1 仪器 高效液相色谱仪(日本岛津):LC-10ATvp双泵 , SLC
-10Avp控制器 , SPD-10Avp紫外检测器 , CTO-10ASvp柱温
箱。
1.2 试药 大黄素对照品由中国药品生物制品检定所提供(批
号为 0756-9908);甲醇为色谱纯;大黄 、黄柏 、泽兰 、侧柏叶 、薄
荷由柳州市神农中药饮片厂提供 ,经柳州市中医院药检室鉴定 ,
符合《中国药典》要求;其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 凝胶剂的制备 取处方量的大黄(A)和根据双柏散处方比
例称取药材粗粉(B),均加 95%乙醇浸泡 6 h, 以 5 ~ 7 ml/min的
速度渗漉提取 ,相应渗漉液浓缩至约 50 g, 加入 3 g卡波姆 940,
密闭放置过夜使其充分溶胀 ,加蒸馏水至 100 g,研匀即得。分装
于密闭避光的容器中 ,贮存于凉处。 A:大黄凝胶;B:双柏凝胶
2.2 建立测定方法
2.2.1 色谱条件 色谱柱为选 Kromasil-C18柱(5μm, 250 mm×
4.6 mm);流动相为甲醇 -水(6:4);流速 1.0 ml/min;检测波长
254 nm;柱温 30℃;进样量:10 μl。
2.2.2 对照品溶液制备 精密称取大黄素对照品 5 mg, 加甲醇
溶解定容至 25 ml, 制成 0.2mg/ml的溶液 , 即可。
2.2.3 供试品溶液制备 精密称取凝胶剂 1 g,水浴浓缩至近干 ,
加蒸馏水 10 ml, 浓盐酸 1 ml,沸水浴中水解 30 min, 再加氯仿 20
ml, 超声振荡 20 min, 置分液漏斗中分层 , 取氯仿层;水层用氯仿
洗 3次 , 每次 10 ml,合并氯仿液 , 挥干。加适量甲醇溶解 ,转移至
10 ml容量瓶中 , 超声振荡数分钟使溶解完全 , 加甲醇至刻度 , 摇
匀。针孔式微孔滤膜过滤 , 弃去初滤液 , 取续滤液作为供试品溶
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.1