全 文 ：试品溶液 , 按上述色谱条件测定 ,代入标准曲线计算含量 , 结
果(见表 3)。
表 3　样品含量测定结果
批号 氯霉素(%) 水杨酸(%)
091211 1.02 1.99
090912 0.99 1.98
090615 0.98 2.02
3　讨论
根据复方氯霉素洗剂的标准 , 主药氯霉素含量按规范方
法 ,采用外指示剂法测定 , 测定复方氯霉素洗剂中氯霉素的含
量 ,需加入盐酸与锌粉水浴 15min , 滴定采用碘化钾淀粉试纸
化痕法确定终点。但由于水浴温度掌握不好 ,影响反应程度;
滴定速度及终点判断也因人而异 , 从而会造成结果偏低或偏
高〔3〕 ,且耗时 , 导致结果不准确。
高效液相色谱法专属性强 , 分辨率高 , 与紫外分光光度法
相比 , 方法简便 ,快速 , 结果准确 , 重现性好 , 可作为该制剂的
含量测定方法。
参考文献
〔1〕王增寿.高效液相色谱法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素与水杨酸
的含量〔J〕.温州医学院学报 , 2001 , 31(3):195-196.
〔2〕冯碧敏 ,陈丽娟 ,张昊.HPLC法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素和
水杨酸的含量〔J〕.泸州医学院学报 , 2005 , 28(4):363-364.
〔3〕杨新建 ,王雷 ,王世臣 ,张吉吉 ,徐永庆.一阶导数分光光度法测定
复方氯霉素洗剂中氯霉素的含量〔J〕.中国医院药学杂志 , 2004 ,
24(6):339-340.
HPLC-ELSD测定 莶草的含量
苏　璇 ,吴素香＊ ,吴盈盈 ,张　超(浙江中医药大学 杭州 310053)
摘要:目的　建立HPLC-ELSD测定 莶草中奇壬醇含量的分析方法。方法　色谱柱:Lichrospher C18(4.6×250mm , 5μm),柱温 40℃,蒸发光
散射检测器 ,流动相:乙腈-水(25∶75),流速 1.0ml·min-1 ,进样量 20μL 。检测器参数:漂移管温度:40℃,气体压力:3.5bar。结果　在本色谱条
件下 ,奇壬醇在 13.85～ 138.5μg·mL -1范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为 99.97%, RSD=2.63%。结论　本方法准确可靠 ,重现性
好 ,快速简便 ,可用于 莶草中奇壬醇的含量测定。
关键词:莶草;奇壬醇;HPLC-ELSD;含量测定
中图分类号:R969.4　文献标识码:B　文章编号:1006-3765(2010)-12-0089-02
作者简介:苏璇 , 女(1986.11-)。药剂学硕士在读 , 联系电话:
13616553879.
通讯作者:吴素香 ,女 ,研究员 ,研究方向:药物新剂型与新技术。联
系电话:(0571)86613524
基金项目:浙江省分析测试科技计划项目(2008F70039)
　　莶草为常用中药 , 2005 版《中国药典》〔1〕规定: 莶草是
菊科植物腺梗 莶 Siegesbeckia Pubescens Makino、 莶
Siegesbeckia orientalisL 及毛梗 莶 Siegesbeckia g labrescens
Makino的干燥地上部分 , 具有祛风除湿的作用 , 临床上用于
风湿痹痛 ,腰膝酸软 , 四肢麻木。研究表明奇壬醇是其主要的
抗风湿的活性成分〔2〕。本文以奇壬醇为对照品 ,采用 HPLC-
ELSD 测定了不同产地和不同入药部位 莶草中奇壬醇的含
量 ,为 莶草临床应用的科学 、有效提供参考。且此种测定方
法 ,未见报道。
1　仪器与试药
1100 型高效液相色谱(美国 Agilent公司);索氏提取器;
超声波清洗仪;电子天平。奇壬醇对。药材由浙江中医药大
学徐锡林教授鉴 定为菊科植物腺梗 莶 Siegesbeckia
Pubescens Makino或莶 Siegesbeckia orientalisL ,粉碎后均过 40
目筛。
2　含量测定
2.1　色谱条件〔3〕　色谱柱为 Lichro spher C18色谱柱(4.6×
250mm , 5μm), 柱温为 40℃, 流动相为乙腈-水(25∶75), 流速
为 1.0mL·min-1 ,进样量为 20μL。 ELSD 参数:漂移管温度:
40℃,气体压力:3.5bar。理论塔板数按奇任醇计算不低于
3000。
2.2　对照品溶液的制备和线性关系考察　精密称取对照品
5.55mg , 至 10mL 的容量瓶中 , 加甲醇定容 , 制成每 mL 含
0.555mg 的对照品贮备液。 分别精密吸取 0.25 , 0.5 , 1.0 ,
2.0 , 2.5m L分别置于 10m L容量瓶中 , 加甲醇稀释到刻度 , 摇
匀。分别精密吸取上述系列对照品工作液各 20μL 注入液相
色谱仪 , 各进样 2 次 ,按 2.1 项下色谱条件测定峰面积 ,以进
样质量浓度的常用对数值(X)为横坐标 , 峰面积常用对数值
(Y)为纵坐标 , 进行线性回归 , 得回归方程为 Y=1.7095X-
0.3362 , r=0.9994。结果表明 ,二者在 13.85-138.5μg·mL-1
呈现良好的线性关系。色谱图(见图 1)。
2.3　供试品溶液的制备　冷凝回流法:精密称取腺梗 莶粉
末约1g ,置于 100m L 的锥形瓶中 , 精密加入 50mL 的甲醇溶
液 , 称定重量 ,冷凝回流 2h ,放冷 , 称定重量 ,用甲醇补足减失
的重量 , 摇匀 ,滤过 , 滤液用 0.45μm 微孔滤膜滤过 ,即得。
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 22 No.12 2010
图 1　对照品和样品 HPLC-ELSD 图
A-对照品;B-样品;1-奇任醇峰
药典方法:精密称取腺梗 莶粉末约 1g , 置索氏提取器
中 ,加石油醚(30 ～ 60℃)150mL , 回流提取 3h , 取出滤纸桶 ,
挥干溶剂 ,置于 100mL 的容量瓶中 , 精密加入 50mL 的甲醇
溶液 ,称定重量 , 冷凝回流 2h , 放冷 ,称定重量 , 用甲醇补足重
量 ,摇匀 , 滤过 ,滤液用 0.45μm 微孔滤膜滤过 , 即得。
分别精密吸取两种供试品溶液 , 按照 2.1 项下的色谱条
件进行含量测定 ,结果(见表 1)。
表 1　不同提取方法 莶草中奇壬醇的含量测定结果
提取方法 奇壬醇的含量(%)
冷凝回流 0.1771
药典方法 0.1565
由表 1 可知 ,冷凝回流法不仅提取完全 , 而且可以节约样
品处理时间 ,方法简单 、方便。故供试溶液的制备采用冷凝回
流法。
2.4　精密度试验　精密吸取奇壬醇对照品溶液 , 进样20μL ,
连续进样 5 次 ,测定峰面积。奇壬醇峰面积积分值常用对数
值的 RSD为 0.11%,结果表明该仪器精密度良好。
2.5　稳定性试验　精密吸取同一供试品溶液 , 分别于0 , 2 , 4 ,
6 , 8h 各进样 20μL 进行分析 ,测定峰面积 , 计算奇壬醇峰面积
积分值的常用对数值 RSD=0.77%。结果表明 ,奇壬醇峰面
积在 8h 内无明显变化 , 供试品溶液稳定性良好。
2.6　重现性试验　精密称取腺梗 莶粉末约 1g , 共 6 份 , 照
上述冷凝回流法提取测定奇壬醇的含量 ,计算。结果平均含
量为 0.177%;RSD 为 2.44%,表明方法重现性良好 。
2.7　加样回收率　精密称取2.6项下腺梗 莶粉末适量 , 分
别精密添加一定量的奇壬醇对照品 , 按 2.3 项下冷凝回流法
制备供试品溶液 ,依法测定 , 计算加样回收率 ,结果(见表 2)。
表 2　加样回收率测定结果(n=6)
取样量/ g 样品含量/mg 加入对照品量/mg 测得值/mg 回收率/ % 平均值/ % RSD/%
0.5000 0.8850 0.9240 1.8059 99.66
0.5001 0.8850 0.9240 1.8054 99.61
0.4998 0.8850 0.9240 1.8213 101.33 99.97 2.63
0.5000 0.8850 0.9240 1.8099 100.10
0.5002 0.8850 0.9240 1.8420 103.57
0.5001 0.8850 0.9240 1.7678 95.54
2.8　样品的测定　取不同品种 、不同产地及不同入药部位的
供试品溶液20μL ,分别进样 , 测定(n=3),结果(见表 3、4)。
表 3　 莶草中奇壬醇的含量(n=3)
产地 样品 含量/ % RSD/ %
杭州 1 莶 0.1262 3.1
杭州 2 莶 0.5920 1.4
湖南 莶 - -
广西 莶 0.1540 2.3
杭州 3 腺梗 莶 0.2098 1.7
杭州 4 腺梗 莶 0.2102 1.9
温州 腺梗 莶 0.1653 2.5
湖北 腺梗 莶 - -
注:“ -”表示微量;杭州 1为买于药店 ,杭州 2 、杭州 3 、杭州 4为实验
室采集。
表 4　 莶草中根 、粗茎 、嫩茎叶中奇壬醇的含量测定结果
样品 取样量/ g 奇壬醇含量/ %
根 1.0002 -
粗茎 0.9998 -
嫩茎叶 1.0000 0.5907
注:样品为腺梗 莶 ,实验室采集。
由表 4 可知 , 莶草嫩茎叶中的厅壬醇含量明显高于粗
茎和根中的含量 , 根 、粗茎中几乎没有 , 故古人强调用嫩茎叶
入药是有科学道理的。
3　讨论
3.1　奇壬醇是二萜类成分 ,为紫外末端吸收 , 用紫外检测器
检测灵敏度较低 , 重现性较差 ,溶剂干扰大。本试验首次建立
了 HPLC-ELSD方法测定了 莶草中奇任醇 , 方法准确可靠 ,
重现性好。
3.2　本文对 莶草含量测定的样品处理方法进行了考察。
采用冷凝回流法 , 省去药典方法中的石油醚脱脂步骤 , 结果样
品杂质峰较少 , 对测定没有影响 , 且节省时间。
3.3　本文的含量测定结果表明 ,嫩茎叶中的奇壬醇含量远远
高于全草 、粗茎以及根中的含量 ,这与古人明确要求以 莶草
的嫩茎叶入药相一致。因此 , 为了保证 莶草的临床疗效 , 应
选择 莶草的嫩茎叶入药。
参考文献
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版社 , 2005:255-256.
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杂志 , 2005 , 30(4):257-259.
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海峡药学　2010年　第 22卷 第 12期