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算盘子提取物抗炎镇痛作用的实验研究



全 文 :第 27卷第 4期(第 17页)
2010年
湖北民族学院学报·医学版JournalofHubeiUniversityforNationalities· MedicalEdition Vol.27No.4 P.172010
基金项目 恩施州科技局课题(2008R13)。
作者简介 黄爱军(1970-),男 , 湖北巴东人 ,主治医师 , 主要从事临床放射介入。
算盘子提取物抗炎镇痛作用的实验研究
黄爱军
恩施自治州中心医院(湖北 恩施 445000)
【摘要】目的 探讨算盘子提取物的抗炎镇痛作用及其可能机制。方法 建立角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀模型 ,观
察算盘子提取物对角叉菜所致炎性足肿胀程度和炎症局部组织中组胺含量的影响。 采用热板法进行疼痛实验 ,测
定各组小鼠对热刺激疼痛的痛阈值。结果 算盘子提取物高 、中两个剂量组能明显抑制角叉菜胶引起的大鼠足跖
致炎后 2、4、6h时的肿胀 ,低剂量组能明显抑制角叉菜胶引起的大鼠足跖致炎后 4、6h时的肿胀 ,且与模型组相比 ,
组胺含量均具有显著性差异;算盘子提取物高 、中两个剂量组能明显提高热刺激小鼠给药后 30、 60、90min的痛阈
值 , 低剂量组能明显提高热刺激小鼠给药后 60、 90min的痛阈值。结论 算盘子提取物具有明显的抗炎 、镇痛作
用。其作用可能与降低炎症部位组胺含量有关。
【关键词】算盘子提取物;消炎镇痛;药理实验
【中图分类号】R285.5  【文献标识码】A  【文章编号】1008-8164(2010)04-0017-03
AnExperimentalStudyonEliminatingInflammationandAnalgesic
EfectoftheExtractofGlochidionPuberum
HUANGAi-jun
(CentralHospitalofEnshiAutonomousPrefecture, Enshi445000 , China)
【Abstract】ObjectiveTostudythepharmacodynamicsoftheextractofGlochidionpuberumbyani-
malexperiment.MethodsToobservetheextractofGlochidionpuberum′seffectsonthestrutde-
greeofinflammatoryfeetcausedbycarageenanandhistaminecontentinlocaltissueinflam-
mation.Painexperimentswereconductedbythehot-platemethods, andthepainthresholds
ofratsweredetermined.ResultsThehighandmiddledosagegroupcouldinhibittheswelingof
voixpedisinratscausedbycarageenanafter2 , 4, 6 hours, sodidlowdosagegroupafter4, 6
hours.Comparedwiththemodelgroup, thehistaminecontentofalGlochidionpuberumgroups
haddistinctdiference.Inaddition, thehighandmiddledosagegroupcouldincreasethepain
thresholdofrats30, 60, 90 minutesafterbeingadministrated, sodidthelowdosagegroup60,
90 minutesafterbeingadministrated.ConclusionTheextractofGlochidionpuberumhasobvious
eliminatinginflammationandanalgesicefect.Itsmechanismisrelatedwiththecontentofhis-
tamineininflammation.
【Keywords】theextractofGlochidionpuberum;eliminatinginflammationandanalgesicefect;
pharmacologicalexperiment
  算盘子(Glochidionpuberum)是大戟科(Euphor-
biaceae)算盘子属(Glochidion)植物 ,俗名野南瓜 、柿
子椒 、小孩拳等 。全草可入药 ,味苦 、涩 ,性凉;有清
热利湿 、祛风活络的功能;用于治疗痢疾 、肠炎等疾
病 [ 1] 。据文献报道 ,从该属植物中分离得到的化学
成分有生物碱类 、三萜类 、黄酮类 、甾体类 、环丁烯内
脂类 、木脂素类 、酚酸类等。药理研究该属植物具有
抗菌消炎 、抗氧化 、抗肿瘤 、抗病毒等作用[ 2] 。本实
验采用角叉菜胶引起的大鼠足跖致炎实验 ,观察算
盘子提取物的抗炎作用 ,并检测炎症局部组织中组
胺含量 ,以进一步了解算盘子抗炎机制;通过热刺激
小鼠疼痛实验观察算盘子提取物的镇痛作用 ,为临
床应用提供实验依据 。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 算盘子提取物 取干燥算盘子根适量 ,粉碎
后用 80%的乙醇加热回流提取三次 ,合并三次滤液
并浓缩至 2g/ml备用 。
1.1.2 试剂与仪器 阿司匹林片 ,批号:060807,舒
泰神 (北京 )药业有限公司;角叉菜胶 , 批号:
110H3367, Sigma公司生产 ,临用前以生理盐水配成
1%的浓度;磷酸组胺 , 临用前以生理盐水配制成
0.2μg/ml组胺标准液备;过氯酸 ,青岛正业试剂仪
器有限公司;GJ一 8402型热板测痛仪 ,深圳瑞沃德
生命科技公司。
1.1.3 实验动物 选取清洁级 SD大鼠 ,雄性 ,体
重 160 ~ 180g;清洁级昆明种小鼠 ,雌性 ,体重 18 ~
22g,均由湖北省实验动物中心提供 。
1.2 实验方法
1.2.1 角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀实验 按文
献 [ 3]将大鼠随机分为 6组 ,即对照组 ,算盘子提取物
大 、中 、小剂量组 ,模型组和阿司匹林组 ,每组 10只 。
算盘子提取物大 、中 、小剂量组分别灌服 4.8、2.4、
1.2g/kg浓度 (按体表面积计 ,分别相当于人用等
效剂量的 4倍 、2倍和 1倍)的算盘子提取物 ,阿司
匹林组灌服阿司匹林 0.2g/kg,对照组和模型组灌
胃等量生理盐水 ,每天 1次 ,连续灌胃 8d。于末次
灌胃前 ,先测量各组大鼠足跖周长 ,灌胃后 1h于大
鼠右后足跖皮下注入 1%角叉菜胶 0.1ml/只致炎 ,
致炎后的 2、4、6h分别测定大鼠右足跖周长 ,计算
肿胀度值(肿胀度值 =致炎后足跖周长 -致炎前足
跖周长)。
1.2.2 炎症组织中组胺含量的测定 待测完大鼠
足跖周长 6h后 ,将大鼠断颈椎处死 ,于踝关节上方
0.5cm处将致炎肿胀足剪下 ,蒸馏水洗净泥沙 ,拭
尽水液待测。对照组大鼠取相同侧关节按同样方法
取标本测定。将炎足剪碎称重 ,按重量体积加入 9
倍体积容量的 0.4mol/L的过氯酸中 ,用高倍匀浆
机匀浆 ,放置 1h后 ,离心。按文献 [ 4]方法测定足
组织浸泡液中 OD值并计算组胺含量。组胺含量
(μg/ml)=(T样本 -T样本空白)/(T标准 -T标
准空白)×0.2×1/组织重量(g)。
1.2.3 热刺激小鼠疼痛实验 筛选合格小鼠:热板
温度恒定在(55+0.5)℃10min后 ,取小鼠进行筛
选 ,凡舔后足时间小于 5s或大于 30s或跳跃者弃之
不用 。选合格小鼠 50只 ,随机分为算盘子提取物
大 、中 、小剂量组 ,对照组和阿司匹林组 。每组 10
只 ,测其正常痛阈值 ,作为该鼠给药前痛阈值 。算盘
子提取物大 、中 、小剂量组分别灌服 4.8、2.4、1.2g/
kg浓度的算盘子提取物 ,按小鼠体重 1ml/100g计
算灌胃药液量 ,阿司匹林组灌服阿司匹林 0.2g/kg,
对照组灌胃等量生理盐水 ,每天 1次 ,连续灌胃 8d。
末次给药后 30、60、90min分别测定小鼠痛阈值。
1.3 统计学方法 实验数据采用 SPSSFORWIN-
DOWS11.5软件分析 ,数据用(x±s)表示 ,组间差
异用 t检验。
2 结果
2.1 对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响 算盘
子提取物大 、中两个剂量组能明显抑制角叉菜胶引
起的大鼠足跖致炎后的 2、4、6h肿胀 ,小剂量组能
明显抑制角叉菜胶引起的大鼠足跖致炎后的 4、6h
肿胀 ,其肿胀率明显低于模型组;与阿司匹林组比
较 ,算盘子提取物各个剂量组均无差异性 (P>
0.05)。结果见表 1。
表 1 算盘子提取物对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响(x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg) 致炎前足跖周长(cm)
致炎后足肿胀度值(cm)
2h 4h 6h
模型组 - 2.72±0.10 0.35±0.11 0.46±0.14 0.27±0.15
对照组 - 2.73±0.11 - - -
阿司匹组 0.2 2.70±0.07 0.21±0.06△ 0.14±0.07△ 0.02±0.02△
大剂量组 4.8 2.73±0.08 0.23±0.04△ 0.19±0.11△ 0.06±0.07△
中剂量组 2.4 2.71±0.12 0.25±0.09□ 0.21±0.06□ 0.09±0.04□
小剂量组 1.2 2.69±0.10 0.29±0.18 0.26±0.13□ 0.15±0.05□
  与模型组比较 , □P<0.05, △P<0.01。
2.2 对大鼠炎症组织液中组胺含量的影响 算盘
子提取物大 、中 、小三个剂量组均能明显降低大鼠炎
症组织液中组胺含量 ,与模型组比较差异显著(P<
0.05或 P<0.01);与阿司匹林组比较 ,算盘子提取
物各剂量组均无显著性差异 。结果见表 2。
2.3 对热刺激小鼠疼痛反应的影响 算盘子提取
18             湖北民族学院学报·医学版              第 4期
表 2 算盘子提取物对大鼠炎症组织液中
组胺含量的影响(x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg) 组胺含量(μg/ml)
模型组 - 6.27±0.13
对照组 - 3.05±0.92△
阿司匹组 0.2 3.89±1.02△
大剂量组 4.8 3.48±1.64△
中剂量组 2.4 4.62±1.39△
小剂量组 1.2 5.02±1.48▲
  与模型组比较 , △P<0.01, ▲P<0.05。
物大 、中两个剂量组能明显提高热刺激小鼠给药后
30、60、90min的痛阈值 ,小剂量组能明显提高热刺
激小鼠给药后 60、90min的痛阈值 ,与阿司匹林组
比较 ,算盘子提取物各剂量均无明显差异。结果见
表 3。
3 讨论
炎症是指具有血管系统的活体组织对损伤因子
所发生的防御反应 ,临床表现为红 、肿 、热 、痛[ 6] 。炎
表 3 算盘子提取物对热刺激小鼠疼痛反应的影响(x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg) 给药前痛阈值(s)
给药后痛阈值(s)
30h 60h 90h
对照组 - 21.4±7.3 23.6±6.4 23.1±11.4 26.5±3.9
阿司匹组 0.2 20.9±6.7 37.2±11.3 35.0±11.3 47.6±8.5
大剂量组 4.8 21.1±9.1 33.3±9.5## 34.8±9.1## 43.3±11.8##
中剂量组 2.4 23.1±6.4 30.3±4.9# 33.2±6.7## 39.0±9.2#
小剂量组 1.2 20.2±8.9 30.8±12.7 32.0±10.4# 38.0±8.4#
  与对照组比较 , #P<0.05, ##P<0.01。
症是机体常见而又重要的基本病理过程 ,在炎症早
期 ,血管受到刺激 ,血管内皮间隙扩大 ,血管壁通透
性增强 ,白细胞和蛋白质等渗出到组织间隙 ,造成组
织肿胀 。因此 ,肿胀是炎症早期的重要指标 。在炎
症晚期和慢性炎症期 ,由于内皮细胞 、纤维母细胞和
实质细胞等增生 ,形成肉芽组织增生。本文采用炎
症肿胀模型观察了算盘子提取物对角叉菜胶致大鼠
足趾肿胀的影响 ,在本实验剂量下 ,算盘子提取物能
对炎症早期的组织肿胀有显著的抑制作用 。
组胺是自体活性物质之一 , 在体内由组氨酸脱
羧基而成 ,以皮肤 、支气管黏膜 、肠黏膜和神经系统
中含量较多 [ 5] 。当机体受到理化刺激或发生过敏
反应时 ,可导致组胺释放 ,与组胺受体结合而产生生
物效应 ,成为机体在炎症状态下的致炎和致痛炎症
介质 ,并能导致疼痛的产生 ,加重炎症反应 。本实验
在检测大鼠炎症组织液中组胺含量时 ,发现算盘子
提取物大 、中 、小三个剂量组均能明显降低大鼠炎症
组织液中组胺水平 ,提示算盘子提取物的消炎作用
可能与降低炎症部位组胺含量有关。
疼痛是由于痛觉感受器受到刺激而产生兴奋 ,
冲动经传入神经纤维到达大脑某些神经细胞 , 或中
枢通路的某一水平受损时所产生的一种不舒适的感
觉 。引起疼痛的原因众多 ,本文采用热刺激致痛法
观察到 , 算盘子提取物对热刺激引起的疼痛可明显
地延长反应潜伏期。
本研究采用抗炎和镇痛模型证实了算盘子提取
物有很好的抗炎镇痛作用 ,并且发挥药效时间短 ,作
用持续时间长 ,存在一定的剂量效应 。本实验对算
盘子提取物仅采用 80%的乙醇加热回流三次的传
统方法 ,故在以后的工作中拟对算盘子提取物 、有效
部位和化学成分进行进一步分离 、纯化和鉴定 ,确定
算盘子抗炎 、镇痛的有效成分 , 进一步探讨其抗
炎 、镇痛机制及其在体内的代谢规律 ,为算盘子的
进一步开发和临床应用提供更多的实验依据 。
[参考文献 ]
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[收稿日期 2010-10-22]
19第 4期              湖北民族学院学报·医学版