全 文 ：动物医学进展 ,2006 ,27(7):97-99
Progress in Veterinary Medicine
醉马草化学成分预试及毒性部位筛选*
张　伟1 ,2 ,李　冠2
(1.新疆农业科学院微生物研究所 ,新疆乌鲁木齐 830000;2. 新疆大学生命科学院 , 新疆乌鲁木齐 830046)
中图分类号:S859. 81 文献标识码:A 文章编号:1007-5038(2006)07-0097-03
摘　要:以春秋两季醉马草样品作为试验材
料 ,粉剂样品分别做系统预试验比较所含主
要成分种类和数量上的差异 ,并通过分光光
度法测定了 2 种材料的生物碱和黄酮含量;
分别用不同极性溶剂制作的悬浮液 ,做毒性
筛选试验。结果表明 ,春季材料含的生物碱
类成分远远超过秋季材料 ,而秋季材料所含
的黄酮类成分远远超过春季材料;毒理试验
表明 , 毒性成分主要集中在春季材料的
950 mL /L乙醇提取部分。
关键词:醉马草;生物碱;黄酮
醉马 草 [ Achnatherum inebrians (Hance )
Keng] 别名 为醉马 芨芨 、毒草 等 , 为芨 草属
(Achnatherum )禾本科多年生草本植物。醉马草原
产于欧亚 ,广泛分布于我国西北部地区 ,河北 、山东
和浙江也有分布。醉马草多生于高山及亚高山草
原 、山坡草地 、田边 、路旁和河滩 , 海拔1 700 m ～
4 200 m[ 1] 。它是哈萨克医常用的药材 ,具有消肿止
痛 、清热解毒等功效 ,对于腮腺炎和关节炎的治疗有
很好的效果。但由于其具有抗高寒 、耐干旱等优势 ,
因而分布广 ,适应性强 ,尤其是近些年来由于过度放
牧造成草场退化 ,而醉马草乘机蔓延 ,成为畜牧业一
大危害。据调查 ,在新疆维吾尔自治区 ,醉马草广泛
分布于天山南北 ,覆盖度最高可达 85%[ 2] 。醉马草
是我国北方尤其是西北草原上主要毒草之一 ,其毒
性可能是由于内生真菌引起的[ 3] 。醉马草主要危害
马属动物(马 、驴 、骡),一般采食鲜草量达体重的
1%时 ,即可出现明显的中毒症状[ 1] 。在食后30 min
～ 60 min内即可出现明显的中毒症状 ,表现为口吐
白沫 ,精神沉郁 ,食欲减退 ,甚至废绝。中毒较重的
病马 ,头低耳耷 ,站立不稳 ,行走摇晃 ,蹒跚如醉[ 1] 。
虽然醉马草中毒已有近百年的历史 ,但有关它的有
毒成分仍不十分清楚 。有资料表明醉马草有毒物质
是体内共生有内生真菌引起麦角生物碱积累所产
生 ,但具体的有毒物质并没被分离和证实。长期以
来 ,畜牧业对草场超载放牧 ,造成草场退化 ,优质牧
草减少 ,毒草杂草大量孳生 ,严重影响了牧区的发
展。目前醉马草仍在蔓延 ,它对草场退化造成的危
害比以前更严重。本试验的目的在于找到醉马草的
有毒部位及有毒物质 ,为治理或开发醉马草这一资
源提供依据[ 4] 。
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　植物样品　春季醉马草和秋季醉马草采自
乌鲁木齐县 ,样品阴干 ,粉碎 ,过 20目筛 ,制成粉剂 。
1. 1. 2　实验动物　昆明种小鼠购自新疆医科大学
实验动物中心 ,颗粒饲料喂养 ,自由饮水 ,雌雄各半 ,
体重 20 g ±1 g 。
1. 1. 3　试剂及器械　除 950 mL /L 食用乙醇以外 ,
石油醚(沸程 30 ℃～ 60 ℃)、苯 、氯仿 、盐酸 、氨水 、
乙酸乙脂 、正丁醇等均为国产试剂纯。常规解剖器
械。
1. 2　方法
1. 2. 1　系统预试验　2种样品分别制备水浸液 、乙
醇提取液 、酸性醇提取液[ 5] 。用各种显色试剂及沉
淀试剂分别检测生物碱 、黄酮 、酚类化合物 、鞣质等 。
1. 2. 2　部位分离　样品粉剂分别采用 65 ℃回流煮
沸 3 h的方法处理。干粉 100. 0 g ,溶剂 10倍重量
于样品。前一种溶剂处理完后 ,用滤纸过滤出浸提
液并挥去溶剂 ,换下一种溶剂 。过滤的溶剂减压回
收 ,制得的浸膏用精炼油 、乙醇或水等混合液溶解。
最后混悬液体积统一调至 10 mL 并编号 。具体流
程如下。
* 收稿日期:2006-03-15
作者简介:张　伟(1973 -), 男 ,湖北人 , 硕士研究生 , 主要从事分子生物学与植物化学研究。
DOI牶牨牥牣牨牰牬牫牱牤j牣cnki牣牨牥牥牱牠牭牥牫牳牣牪牥牥牰牣牥牱牣牥牪牭
1. 2. 3　毒理试验　参照文献[ 6]进行 。小鼠饲喂 2
d熟悉环境后 ,饥饿 1 d备用。用导胃管将 0. 5 mL
不同编号的混悬液灌入 1 只小鼠胃中 ,每一混悬液
重复 10次 。并随后观察记录结果 。
1. 2. 4　总生物碱和总黄酮的测定
1. 2. 4. 1　总生物碱和总黄酮的提取　样品 10 g ,样
重和溶剂按 9∶1的质量体积比 ,用 950 mL /L 食用
乙醇分 3次于 65 ℃回流煮沸 3 h的方法处理 。合
并提取液旋转蒸发回收溶剂 ,残渣用 950 mL /L 食
用乙醇溶解定容至 50 mL ,作为待测液[ 7-8] 。
1. 2. 4. 2　生物碱标准曲线的制备　称取盐酸小檗
碱5. 0 mg ,于 25 mL 容量瓶中用甲醇溶解并定容至
刻度摇匀 ,准确吸取该液 5. 0 mL 于另一个 25 mL
容量瓶中加 950 mL /L 食用乙醇稀释到刻度 ,摇匀
作为对照品母液 。准确吸取对照品母液 1. 0 , 2. 0 ,
3. 0 , 4. 0 , 5. 0 mL和 6. 0 mL ,分别置于 10 mL 容量
瓶中 ,加入 0. 1 mo l /L 盐酸溶液稀释至刻度并摇匀 。
以 950 mL /L 食用乙醇为空白 ,在紫外 345 nm 波长
下测定吸收值 ,以吸收值 A 为纵坐标 ,浓度 C 为横
坐标 ,得出回归方程 A =6. 448C , r=0. 9899。
1. 2. 4. 3　黄酮标准曲线的制备　准确称取 120 ℃
干燥的恒重芦丁(作黄酮标准对照品)10 mg ,
950 mL /L食用乙醇定容 100 mL 容量瓶中并摇匀 ,
分别取芦丁对照液 0 , 0. 5 , 1. 0 , 1. 5 , 2. 0 mL 和
2. 5 mL置于 10 mL 容量瓶中 ,加 50 g /L 亚硝酸钠
溶液和100 g /L 硝酸铝溶液各0. 3 mL ,放置 6 min ,
加1 mo l /L NaOH 溶液4. 0 mL ,用950 mL /L 食用
乙醇溶液稀释至刻度并摇匀 。放置 15 min , 于
510 nm处测吸光度 。以浓度 C 吸光度 A 进行回归
方程C=85. 80A - 0. 370 , r=0. 000 19。样品在 510
nm 处测定吸光度 A 。总黄酮 =(黄酮类化合物克
数 /干物料克数)×100%。
2　结果
2. 1　化学成分试验结果
经系统预试 ,春季和秋季采集的样品当中都含
有生物碱 、黄酮 、酚类化合物 、鞣质 、氨基酸 、多肽 、蛋
白质 、有机酸 、还原糖或多糖 、甾体或三萜类化合物
等 ,都不含有皂甙 ,可能(反应不明显)含有内脂 、香
豆素 、强心甙 、蒽醌类和挥发油等 。
2. 2　由毒理试验结果
结果表明 ,急性中毒的小鼠主要集中在春季样
品的 950 mL /L 食用乙醇提取液中 ,中毒小鼠表现
为心跳呼吸加速 ,流泪和四肢无力 ,嗜睡等症状 。其
他提取液未见明显中毒反应 。
2. 3　春秋两季样品成分比较
由表 1可知 ,春季样品的生物碱含量比秋季样
品的高出 10倍以上 ,而秋季样品的黄酮含量比春季
样品的高出 5倍以上。
表 1　春秋两季醉马草总生物碱 、总黄酮含量(浸膏 /干样)
T able 1　The total alk aloid s and f lavone conten t f rom Achna therum
inebrians col lected at di ff erent seasons
种类
Type
春季样品
Spring sample
秋季样品
Au tum n sam ple
总生物碱
Content of total alkaloids
1. 77 0. 13
总黄酮
Conten t of total f lavone
0. 37 1. 61
98 动物医学进展　2006 年　第 27 卷　第 7 期(总第 153期)
3　讨论
3. 1　春季采集的醉马草样品与秋季采集的样品相
比 ,春季样品具有显著的生物碱沉淀反应和比较弱
的黄酮反应;而秋季采集的醉马草样品与春季草料
相比 ,秋季样品具有显著的黄酮反应和非常弱的生
物碱沉淀反应。由此看来 ,在醉马草生长旺盛时期 ,
内生菌的生长也比较旺盛 ,而生物碱的含量与内生
菌的活动一致;在醉马草衰老时期 ,黄酮的含量达到
高峰 。
3. 2　醉马草的有毒主要成分集中在春季样品的亲
水部分。该部分主要含有生物碱 、氨基酸和糖类等
物质 ,而秋季样品当中也含有氨基酸和糖类等物质 ,
经毒理试验证明它们不是有毒物质 ,而生物碱才是
醉马草有毒物质 。这一结果与春季常报道的家畜醉
马草中毒事件相符。
3. 3　值得注意的是 ,目前尚未有醉马草有毒物质
结构的报道。通过本研究 ,摸索出了分离和验证醉
马草有毒物质的可靠方法 ,即采集春季苗期醉马草
作为样品 ,参照水溶性生物碱方法提取分离 ,并用小
鼠做毒理学试验进行验证。
参考文献:
[ 1] 　史志诚.中国草地重要有毒植物[ M] . 北京:中国农业出版社 ,
1987:166-176.
[ 2] 　于振田.醉马草的防治及开发利用[ J] .新疆畜牧业 , 1993 ,(4):
20-23.
[ 3] 　Bacon C W . Procedu re for isolat ing the end op hyte f rom tall f es-
cue and screening is olates for ergot alkaloid s[ J] . Applied and
Environmental M icrobiology , 1988 , 54:2615-2618.
[ 4] 　李云森 ,陈子君 ,王峥涛.从有毒植物中开发新药的探讨[ J] . 中
草药 , 2002 , 33(5):476-477.
[ 5] 　阚毓铭 ,黄泰康.中药化学实验操作技术[ M ] .北京:中国医药
科技出版社 , 1976.
[ 6] 　国家药典委员会.中国人民共和国药典[ M] .北京:化学工业出
版社 , 2000.
[ 7] 　李姿娇 ,杨　屹 ,丁明玉,等.麻黄非麻黄碱部分中黄酮 、生物碱
和有机酸的分析[ J] .分析实验室 , 2005 ,(4):67-69.
[ 8] 　单　宇 ,王　鸣 ,冯　煦,等.小麦麸皮中总黄酮的最佳提取工
艺[ J] .中药材 , 2005 , 28(3):223-225.
Toxic Components and Sections Screened out from
Fragments Extracted from Achnatherum inebr ians
ZHANG Wei
1 , 2 , LI Guan2
(1. Microbe Inst itute o f X in j iang Ag ricu ltural Aca demy o f S ciences , Urumqi , X in j ian g , 830000 , Ch ina;
2. Col leg e o f Li fe S ciences X inj iang Univer sity ,Urumqi , X in j ian g , 830046 , Ch ina)
Abstract:The tw o samples of Achnatherum inebrians were collected at spring and autumn. By sy stematic
pro testing and contrasting the main components and quantities of bo th samples. The results show ed that
the spring sample had more alkaloids than the autumn sample , and the autumn sample had more the f la-
vonoids. In addi tion , the pow ders of each sample w as ex t racted wi th dif fe rent solvents. A ll the ex tracts
were examined for to xicity to mice , when fed as suspended and the main poisonous components w ere pres-
ented in ext racted wi th 95%edible-ethanol. Besides the mice w ere made hear tbeat and breathing accelera-
ting , toddle , lachrymation , sleepy , disabi li ty etc.
Key words:Achnatherum inebrians ;alkaloids;f lavone
99张　伟等:醉马草化学成分预试及毒性部位筛选