全 文 ：［收稿日期］ 20100730(002)
［第一作者］ 陈剑锋，主管中药师，主要从事中药质量标准研
究，E-mail:648848820@ qq. com
［通讯作者］ * 袁子民，主要从事新药研究与开发工作，E-mail:
yuanzmin@ 163. com
HPLC测定豨莶风湿片中粉防己碱含量
陈剑锋，王静2，袁子民2*
(1. 辽宁成大方圆医药有限公司，沈阳 110005;2. 辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600)
［摘要］ 目的:建立 HPLC 测定豨莶风湿片中粉防己碱含量。方法:采用 Diamonsil C18色谱柱，以甲醇-0. 3%二乙胺(75 ∶
25)为流动相，检测波长 280nm。结果:粉防己碱在 0. 191 25 ～ 1. 53 μg 线性关系良好，r = 0. 999 8，平均回收率为 97. 4% (n =
5)，RSD 1. 3%。结论:本法简便、准确、重复性好，可用于豨莶风湿片中粉防己碱的含量测定。
［关键词］ 豨莶风湿片;粉防己碱;反相高效液相色谱法;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)02-0093-02
Determination of Tetrandrine in Xixian Fengshi Tablet by RP-HPLC
CHEN Jian-feng1，WANG Jing2，YUAN Zi-min2*
(1 . Liaoning Chengda Fangyuan Medicine Chained Limited Company，Shenyang 110005，China;
2 . Liaoning university of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600，China)
［Abstract］ Objective:To establish HPLC for determining the content of tetrandrine in Xixian Fengshi
tablet. Method:An HPLC method was developed. The chromatographic conditions were as follow:Diamonsil C18
column and methanol-0. 3% diethylamine (75 ∶ 25)as mobile phase，detection wavelength at 280 nm. Result:The
recovery range of tetrandrine was 0. 191 25-1. 53 μg，r = 0. 999 8. The average recovery rate was 97. 4% and RSD
was 1. 3% . Conclusion:The method is simple and accurate，with good repeatability，and can be used for
determination of tetrandrine in Xixian Fengshi tablet.
［Key words］ Xixian Fengshi tablet;tetrandrine;HPLC;Determination
豨莶风湿片是由豨莶草、桑寄生、防己等 6 味药
组成的中药复方制剂，收载于《中华人民共和国卫生
部药品标准》第 6 册，标准号为 WS3-B-1262-92。具
有祛风除湿，通络止痛之功，用于四肢麻痹，腰膝无
力，骨节疼痛及风湿性关节炎。目前无含量测定指
标，为提高其质量标准，本文采用反相高效液相色谱
法，测定了防己中粉防己碱含量［1-3］，为进一步完善
质量标准提供依据。
1 仪器与试药
岛津 LC-10AT 高效液相色谱仪，SPD-10AV 检
测器;浙大 N2000 色谱工作站;粉防己碱对照品(中
国药品生物制品检定所，0711-200005);甲醇为色谱
纯，二乙胺为分析纯，水为重蒸馏水;豨莶风湿片(市
售)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C18(4. 6 mm ×
200 mm，5 μm)，流动相甲醇-0. 3%二乙胺(75 ∶ 25)，
柱 温 30 ℃，检 测 波 长 为 280 nm，流 速
1. 0 mL·min － 1。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取五氧化二磷减
压(50 ℃)干燥至恒重的粉防己碱对照品适量，加流
动相使溶解制成 76. 5 mg·L － 1的溶液，即得。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品 20 片，除去包衣，
精密称定，研细，取约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形
瓶中，精密加入流动相甲醇-0. 3% 二乙胺(75 ∶ 25)
25 mL，密塞，称定质量，超声处理(功率 250 W，频率
33 kHz)30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失
·39·
第 17 卷第 2 期
2011 年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 2
Jan.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.02.065
的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 4 阴性干扰试验 按处方量取除防己外的其他
药物，按制法制备阴性样品，再按供试品溶液制备方
法制成阴性对照溶液，精密吸取对照品溶液、供试品
溶液与阴性对照液各 10 μL，按上述色谱条件测定，
结果阴性对照品溶液在与粉防己碱相同保留时间处
无色谱峰干扰(图 1)。
图 1 豨莶风湿片色谱
A.对照品;B.供试品;C.阴性对照;1. 粉防己碱
2. 5 线性关系考察 分别精密吸取上述粉防己碱
对照品溶液 2. 5，5. 0，10. 0，15. 0，20. 0 μL，按上述色
谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，粉防
己碱对照品进样量为横坐标，绘制标准曲线。其回
归方程为 Y = 213 626X + 985. 84，r = 0. 999 8。结果
表明，粉防己碱进样量在 0. 191 25 ～ 1. 53 μg 与峰面
积呈良好的线性关系。
2. 6 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液 10
μL，注入高效液相色谱仪，连续进样 5 次，测定色谱
峰峰面积，结果表明，精密度良好，RSD 1. 3% (n =
5)。
2. 7 重复性试验 精密称取同一批样品各 5 份，分
别按供试品溶液制备方法操作，精密吸取各供试品
溶液 10 μL，分别注入高效液相色谱仪，测定，结果
样品平均含量为 0. 823 mg /片，RSD 1. 9%(n = 5)。
2. 8 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，按
0，2，4，6，8 h 间隔，分别进样，测定色谱峰峰面积，结
果表明，样品溶液在 8 h 内保持稳定，RSD 1. 5% (n
= 5)。
2. 9 回收率试验 取质量差异下已知含量的本品
(批号 090702，3. 288 mg·g － 1)20 片，研细，各取粉末
0. 25 g，共 5 份，分别精密称定，各置具塞锥形瓶中，
分别精密加入流动相配制的粉防己碱对照品溶液
(0. 164 g·L － 1)5. 0 mL，再加精密入流动相 20 mL，
按供试品溶液制备法制备，依法测定，结果见表 1。
回收率在 96. 3% ～ 99. 2%，RSD 1. 3%，符合有关规
定。
2. 10 样品含量测定 取 3 批样品，按供试品溶液
的制备方法制备，按上述色谱条件，依法测定，结果
3 批豨莶风湿片中粉防己碱含量为 0. 823，0. 659，
0. 751 mg /片。
表 1 回收率试验测定结果
No.
称样量
/ g
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 0. 250 2 0. 822 7 0. 82 1. 624 3 97. 8
2 0. 249 8 0. 821 3 0. 82 1. 634 8 99. 2
3 0. 249 3 0. 819 7 0. 82 1. 620 1 97. 6 97. 4 1. 3
4 0. 251 1 0. 825 6 0. 82 1. 612 3 95. 9
5 0. 252 2 0. 829 2 0. 82 1. 618 7 96. 3
3 讨论
实验中对所用溶剂(流动相、甲醇、2% 盐酸甲
醇)、超声时间、样品处理方法(回流、超声)加以考
察，结果以流动相超声 30 min 提取较为方便、完全。
流动相曾选用乙腈-甲醇-水-冰醋酸(40∶ 30 ∶ 30 ∶
1)(含十二烷基磺酸钠 15 mmol·L － 1)和甲醇-乙腈-
0. 3%二乙胺(60∶ 20 ∶ 20)为流动相，测定结果提示，
供试品中待测组分与相邻组分分离度不佳，后经多
次筛选，选用甲醇-0. 3%二乙胺(75 ∶ 25)为流动相，
经多次试验，供试品色谱中待测组分分离度良好。
［参考文献］
［1］ 中国药典 .一部［S］. 2010:139.
［2］ 尹明福，郑光浩，南极星 . 反相高效液相色谱法测定粉
防己碱的含量［J］. 延边大学医学学报，2004，27(3):
183.
［3］ 冯碧敏，叶云，张昊 . 高效液相色谱法测定防己中粉防
己碱含量［J］.中国药业，2005，14(11):35.
［责任编辑 顾雪竹］
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第 17 卷第 2 期
2011 年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 2
Jan.，2011