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灯台叶树的组培快繁研究



全 文 :续上表
拉丁学名
(基源 ) 彝文药名彝文注音 (汉字音读 ) 汉文药名
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茨菇草
狼 毒
(收稿日期 : 2侧 ) l年 9月 26日 )
灯台叶树的组培快繁研究
李崇安 邓 泽
(思茅地区民族传统医药研究所 , 云南 思茅 肠引I 幻
摘 要 用灯台叶树茎尖为材料进行离体培养 , 在 5 种不同培养基上诱导愈伤组织发生和芽的分化过程 。
结果证明在 MS 培养基上附加 2 . 4 一 m n lg / L 、 N九犯侧扩L 、 6 一 B A3 111留产L 时 , 愈伤指数最高 ( 92 . 3% ) 。 在另 5 种不
同浓度培养基上诱导芽 的形成时 , 于 Ms 为基本培养基 , 添加 N AA o . 25 m吕/ L 、 n Z l n g / L 时 , 芽的分化率最高
(86
.
7 % )
。 当激动素的浓度提高或降低时 , 均引起芽的分化数目下降。
关键词 灯台叶树 愈伤组织诱导 苗的分化
碱(a醋醇
灯台叶树 (庙 to司巨刃h o lalr s )
为夹竹桃科鸡骨常山属的一种常
绿大乔木 , 是热带 、 亚热带地区
独特罕见的天然药用植物 , 药用
叶或树皮 。 主要成分为狄他树皮
中国民族民间医药杂志 入刃2 年总第 54 期
米定 , 狄他树皮碱 , 鸭脚树叶
, 氯化狄他碱 , a 一 香树脂醇
a 一 A切手T in ) , 。 一 香树脂醇己酸
旨 ( a 一 儿玛石 n a c e tat e ) , 月一 谷街
甲 一 is ost e ml ) 等 。 功能 : 止
咳祛痰 、 解热平喘 。 主治 : 百 日
咳 、 慢性气管炎 、 支气管哮喘 、
疟疾等 。
灯台叶树在我 国分布地域狭
小 , 生长环境特殊 , 资源甚少 ,
3 7
又因长期以来靠采集利用野生资
源 , 加之人为的乱采滥伐 , 造成
资源濒临灭绝的危险 , 它的需要
量也日益增加 , 依靠种子繁殖很
困难 , ` 而用其它方法繁殖 , 繁殖
系数又很低 , 由于不能获得大量
苗木 , 为此我们通过植物组织离
体培养来进行快速繁殖 , 解决灯
台叶树资源短缺的问题 。
1 材料与方法
1
.
1 材料 : 取灯台叶树嫩茎作
为供试材料 , 采自本所药园内引
种体 , 接种前将材料用清水冲洗
干净 , 先用 O7 % 的酒精浸数分
钟 , 再用无菌水冲洗 3 一 4 次 ,
在无菌条 件下将 嫩 茎切成 长
o
.
s cm 左右的小段 , 分别接种在
事先经高压灭菌过的培养基内。
1
.
2 方法 : 诱导培养基采用 M S
为基本培养基 , 根据试验要求附
加 固 定 浓 度 的 2 . 4 - DZ l l解 L 、
N凡犯 n娜 L , 再附加不同浓度的
6一 B AO . 5 一 4 11娜 L , 蔗糖浓度为
3%
, 琼 脂 0 . 8% , 声 值 5 . 8 ,
接种后培养在 25 一 28 ℃室温下 ,
每天光 照 10 小时 , 光强度 为
l 仪刃勒克司左右 。
2 实验结果与分析
2
.
1 激素对愈伤组织诱导率的
影响 : 在 M S 附加不同种类和浓
度配比激素的培养基上 。 经过 7
天后 出现愈伤组织 , 少部分外
植体开始膨大 , 3 周后大部分外
植体发生愈伤组织 , 其诱导愈
伤组织频率 、 愈伤组织形成及
增殖速度有差异 , 试验结果详
表 1 不同激素浓度对诱导愈伤组织的影晌
级别 MS 十 附加物 ( n唱几 ) + 蔗糖
2
.
4一】〕2 + N凡犯 + 吞一 B AO . 5
2
.
4一 D Z + N凡犯 + 6一B A I
2
.
4一一 DZ + N凡犯 + 斤一 B冉2
2
.
4一 DZ 十 N凡仁 + 6一一 B A3
2
.
4- 】〕2 十 N为亡 + 6一B A4
接种数 成愈数 诱导率%
92
.
3
刀 加
愈伤形态 增殖速度
淡黄色 慢
淡黄色 较快
淡黄色 快
淡黄色透亮 快
淡黄色 较快
5672844
C八
25
l24256
见表 l 。
从表 l 可 以看出 , 在 MS 培
养基 上 附加 下 列 浓度 的激 素
2
.
4一DZ r甲 尸L 、 N凡心 U娜 L 、 6一 -
B A3 I卿沪L 或 Z n娜 口L , 愈伤指数最
高。 表明愈伤组织在这两种组合
条件下生长旺盛 , 相对生长量
大 , 愈伤化程度高 。
2
.
2 苗的分化 : 将愈伤组织转
移到分化培养基上继代培养 , 即
可分化出小植株 。 在分化培养基
中加人适量的激动素可提高每块
愈伤组织的出苗率 , 较适宜的分
化培养基配方为 MS 培养基 +
N人切 . 25 州扩L + 6 一 BA] 娜酬L 十
tKZ
l l娜L , 蔗糖 3% , 在这种培
养基上一块直径 0 . 5 一 0 . cs m 的
愈伤组织 。 经一个月的培养后平
均可分化出 20 株苗 , 两个月后
可分化出 50 株以上的小苗 。
以上实验结果可以看出 , 激
动素的浓度在 。 . 1 一 3 1 1娜 L 时 ,
表 2 不同浓度激动素对愈伤组织分化芽的影晌
试验
组号 分化培养基附加物 (叫酬L
接种愈伤
组织块数
分化出
苗块数 出苗率%
巧加解26130刃M S + NA AD . 25 + tK
M S + N凡叨 . 25 十 tK
M S + N凡切 . 25 + tK
M S + N A AD
.
25 + tK
M S 十 N凡铂 . 25 + KI
0
.
1
0
.
5

肠 . 7
so
86
.
7
O7
任何一种组合均 能分化出芽 ,
其中以第 4 试验组分化率最高 ,
第 3 试验组次之 , 当激动素的
浓度提高或降低时 , 均引起芽
的分化数 目下降 , 见表 2 。
3 讨论
灯台叶树外植体愈伤组织
诱导发生过程中培养物的生长
动态 , 从表 1 中可 以看出 , 几
种诱导培养基均可产生愈伤组
织 , 在 5 种诱导培养基中 , 以
第 4 试验组诱导效果最好 , 愈
伤组织为淡黄色 , 透亮 , 生长
较快 , 愈伤组织发生较早 , 生
长状态最好 。 第 3 试验组诱导
中国民族民间医药杂志 么 l左 年总第 54 期
效果次之 , 愈伤组织发生 和生
长均很好 。 将愈伤组织转移到
分化培养基上继代培养 , 即可
分化出小植株 。
试验结果表明 : tK 对灯 台
叶树愈伤组织再分化有着明显
的效应 。 不同浓度的激动素不
仅影 响其分化率 , 而且影 响形
成芽的数量 。 当将愈伤组织转
人 M S + N AAO . 2 5 n 笔 / L , Kt l -
2 n l合几 培养基上 , 一个月左右
在原较疏松的愈伤组织上出现
数个表面光滑的瘤状突起 , 数
天后分化出绿色叶尖 。 而且逐
渐发育成许多正常的绿芽 。 初
期小芽生长缓慢 , 后期生长较
快 , 30 天后就可长成 2 一 3 c m 高
的丛生小植株 。
参考文献
l 江苏新医学院 . 中药大辞典 , 下
册 .上海 , 上海人民出版社 , 19刀 , 刀14
2 赵剑等 . 中草药 , l望刃 . 30 ( 7 ) :
53 3
3 赵芳等 . 中草药 , l臾巡, . 30 ( 3 ) :
2 1 )
(收稿日期 : 2X() 1年 6 月 7 日 )
藏药久美 70 味松石丸对实验性大鼠肝硬化的影响
更 登
(青海久美藏药药业有限公司 , 青海 西宁 81 X( X) 7 )
摘 要 久美 70 味松石丸 (0 . 6 、 0 . 3 、 0 . 巧岁 k g , 19 ) 能明显降低肝硬化 sD 大鼠肝组织经脯氨酸 、 肝胶原
蛋白含量 ; 明显降低血清总胆固醇 、 血清甘油三醋 、 血清谷丙氨酸转氨酶 、 血清谷草氨酸转氨酶水平 ; 明显提
高血糖水平 。
关键词 藏药 久美 70 味松石丸 DS 大鼠 肝硬化
久美 70 味松石丸为纯藏药
复方制剂 , 由佐太 、 天然牛 黄 、
熊胆 、 察香 、 西红花等 70 味藏
药经传统制备工艺精细加工而
成 。 具有清热解毒 、 舒肝利胆 、
退黄化痕 、 消肿止痛之功效 , 用
于 “ 赤巴 ” 病 、 “ 木布” 病 . 经
过 20 余年的临床使用 , 久美 70
味松石丸对乙型肝炎及肝硬化有
特效 , 本文就久美 70 味松石丸
对实验性大鼠肝硬化影响进行了
研究 , 现报道如下 。
1 实验部分
1
.
1 材料
SD 小鼠 10 一 120 9 , 雌雄各
半 , 购自西安医科大学实验动物
中心 。 动物级别 : 一级 。 合格
证 : 医动字第 08 一咬刃5 号 ; 联苯
双醋滴丸 ( B PDM ) : 北京协合药
厂生 产 。 久 美 70 味 松 石 丸
( JS TP )
: 青海久美藏药药业有 限
公司生产 。
1
.
2 方法与结果
方法见文献〔’ 〕 。 sD 大 鼠按
体重 、 性别随机分为 6组 。 分组
给药剂 量见表 l , 灌 胃量 (咭 )
为 中) 司口吨 , 除正常对照组外 ,
各组动物均饲予特殊饲料及饮水
( 80 % 玉米面 , 20 % 豚脂与 0 . 5%
胆固醇 , 30 % 乙醇为饮料 ) , 实
验第 1 天每只动物 cH C从 ( 3 In 』/
k g
,
il
,
4o % 棉籽油溶液 ) 至第
6 周 , 未次给药 后 24 h , 空 腹
1h2
, 眼静脉丛取血测定谷丙氨
酸氯基转氨酶 ( A L I , ) 、 天 门冬
氨酸氨基转氨酸 ( AS T ) 、 总蛋
白 ( TP ) 、 球蛋白 ( GLB ) 、 血糖
( G l
u )
、 总胆固醇 ( cT h) 、 甘 油
三酷 (飞 ) 、 高 密 度 脂 蛋 白
(H D )L
。 并取肝脏左叶 , 常规石
蜡包埋 、 切片 , 作 .H E 及 v · G
染色 , 显微镜下观察肝纤维增生
程度及改善状况 , 其余肝组织按
文献方法川测定经脯氨酸含量 ,
并换算成肝胶原蛋白含量 。 公式
为 : 经脯氨酸 少唱 / mg 肝粉 二样品
管吸光度 /标准管吸光度 x 肝粉
重量 。 结果见表 1 , 表 2 , 表 o3
由表 l 、 2 、 3 可见 , 连续 cH -
成 6周 , 可造成 SD 大鼠实验性肝
硬化 , 表现为轻脯氨酸及胶原蛋
白含量明显增加 ( P < .0 0 1 ) , 血
脂水平明显高于正常对照组 , 转
氨酶增高 , 总蛋白及血糖水平降
低 。 经 J团田 治疗后 以上指标均有
明显改善 , 表明 J引T 对 H C石所
致实验性大鼠肝硬化有较好的治
疗作用 , 对肝硬化大鼠的各项指
标均有显著改善。
病理切片经显微镜检查 : 模
型对照组动物 8 只动物全为 中度
至重度肝硬化 。 经 J引T 治疗的
动物纤维化程度明显改善 , 表明
该药物具有舒肝化痕促进纤维重
吸收的作用 , 从而防止肝硬化的
发生 。
中国民族民间医药杂志 么I 〕2 年总第 54 期