全 文 ：Ｊ．ＳＨＡＮＸＩ　ＡＧＲＩＣ．ＵＮＩＶ．（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
学报（自然科学版）２０１２，３２（３） ００２９０９
收稿日期：２０１２－０２－２５　　　修回日期：２０１２－０３－１８
作者简介：任石涛（１９６４－），男（汉），山西寿阳人，高级实验师，硕士，研究方向：食品营养与安全。
通讯作者：王晓闻，教授，博士，硕士生导师。Ｔｅｌ：０３５４－６２８９６７０；Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘ＠ｓｘａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
基金项目：山西省科技攻关项目（２０１００３１１０７３）
酸浆宿萼总皂苷对小鼠胃癌细胞（ＭＦＣ）生长的影响
任石涛，曹虎灵，王晓闻
（山西农业大学 食品科学与工程学院，山西 太谷０３０８０１）
摘　要：为了解酸浆宿萼总皂苷（ＴＰＳ）的抗肿瘤效果，研究了 ＴＰＳ对小鼠胃癌细胞（Ｍｕｒｉｎｅ　ｆｏｒｅｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ，
ＭＦＣ）的生长、增殖抑制和细胞凋亡的影响。结果表明，ＴＰＳ能使小鼠胃癌细胞 ＭＦＣ的细胞数量减少、细胞形状发生
改变、凋亡小体增加；ＴＰＳ在浓度为８０μｍｏｌ·Ｌ
－１，作用７２ｈ后，对 ＭＦＣ的增殖抑制率能达到５０％以上，同时 ＭＦＣ
的凋亡效果也最明显；ＴＰＳ对 ＭＦＣ的增殖抑制率和细胞凋亡率都随浓度增大而增大，呈剂量依赖性。
关键词：酸浆；宿萼；皂苷；小鼠胃癌细胞
中图分类号：ＴＳ２０１．４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１６７１－８１５１（２０１２）０３－０２６８－０５
Ａｎｔｉ－ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ｓａｐｏｎｉｎｓ（ＴＰＳ）ｆｒｏｍ　Ｆｒａｎｃｈｅｔ　Ｇｒｏｕｎｄｃｈｅｒｒｙ　Ｃａｌｙｘ　ａｇａｉｎｓｔ　ＭＦＣ　Ｃｅｌｓ
Ｒｅｎ　Ｓｈｉｔａｏ，Ｃａｏ　Ｈｕｌｉｎｇ，Ｗａｎｇ　Ｘｉａｏｗｅｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｇｕ　Ｓｈａｎｘｉ　０３０８０１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＰＳ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｆｒａｎｃｈｅｔ　Ｇｒｏｕｎｄｃｈｅｒｒｙ　Ｃａｌｙｘ　ｏｎ　ＭＦＣ　ｃｅｌｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｗａｓ　ｉｎ－
ｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ．ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｔｅｓｔ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ，ｄｉｒｅｃｔ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ
ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ＭＦＣ　ｃｅｌ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｋｉｔ　ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｃｅｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
ｅｆｆｅｃｔ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｕｐ　ｔｏ　５３．０６％ａｔ　８０μｍｏｌ·Ｌ
－１　ＴＰＳ　ａｆｔｅｒ　７２ｈｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ．Ａｐｏｐｔｏｔｉｃ
ｂｏｄｉｅｓ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＴＰＳ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｓ　ｗｅｌ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗａｓ　ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｆｒａｎｃｈｅｔ　Ｇｒｏｕｎｄｃｈｅｒｒｙ（Ｐｈｙｓａｌｉｓ　ａｌｋｅｋｅｎｇｉ　Ｌ．ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉｉ（Ｍａｓｔ．）Ｍａｋｉｎｏ）；Ｃａｌｙｘ；Ｓａｐｏｎｉｎｓ；ＭＦＣ
　　酸浆［Ｐｈｙｓａｌｉｓ　ａｌｋｅｋｅｎｇｉ　Ｌ．ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉｉ
（Ｍａｓｔ．）Ｍａｋｉｎｏ］又名红姑娘，为茄科植物酸浆带
宿萼的果实［１］，是一种独特的浆果。酸浆的药理作
用有：消炎、降血糖、降血脂、镇痛、抗氧化、抗菌和
抗癌等［２］。
皂苷（Ｓａｐｏｎｉｎｓ）又称皂素，是广泛存在于植物
界的一类特殊的甙类，它的水溶液振摇后可产生持
久的肥皂样的泡沫，因而得名［３，４］。皂苷的药理作
用有：双向调节免疫、抗缺氧、抗疲劳、，抗低温应
激、抗脂质氧化和抗致突变作用等［５］。
近年来，大量的临床和实验研究证明，中药在
肿瘤的防治和康复方面均具有重要的作用［６］。天
然产物是新药研发的可靠和较好来源［７］。据不完
全统计，来源于植物药的抗癌制剂，占总抗癌药物
的３２．２５％。常用抗癌药物秋水仙碱、长春碱、紫
杉醇等均来自天然产物的提取分离或合成［８］。近
年来，一些皂苷也被发现具有防癌治癌的效果：人
参皂苷 Ｒｈ２，Ｒｇ３，Ｒｓ４等可通过抑制肿瘤细胞的
生长和增殖，诱导肿瘤细胞分化和凋亡，抑制肿瘤
细胞的侵袭和转移等途径发挥抗肿瘤作用，且这些
皂苷对正常细胞的毒副作用均较小［９～１２］；杜德
极［１３］发现葛根总皂甙对Ｐ３８８白血病的３Ｈ－ＴｄＲ
掺入法均有不同程度的抑制作用；徐长福［１４］发现
绞股蓝总皂甙（ＧＰ）对Ｓ１８０肉瘤有明显抑制作用，
使肿瘤生长延缓，瘤周期中淋巴细胞、巨噬细胞浸
润明显增多。在对植物酸浆的研究中，分离出酸浆
总皂苷，并对肿瘤细胞的生长等方面的影响进行探
索性研究，以期扩展酸浆的应用。
１　材料与仪器
１．１　试验材料
　　酸浆宿萼：采自山西省大同市阳高县种植基地
DOI:10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2012.03.005
小鼠胃癌细胞（ＭＦＣ）：购于北京北纳创联生
物技术研究院
１．２　试验试剂
ＲＰＭＩ－１６４０培养基（美国 Ｇｉｂｉｃｏ公司）、胎牛
血清（杭州四季青公司）、胰蛋白酶，ＭＴＴ （Ｓｉｇｍａ
公司）、青，链霉素（华北制药）、ＤＮＡ　ｌａｄｄｅｒ　ｍａｋｅｒ
（生工生物工程）、细胞凋亡检测试剂盒（ＴａＫａＲａ
公司）、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）（北京试剂公司产品）
１．３　试验仪器
凝胶成像系统（捷达）、酶标仪（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｌａｂ－
ｓｙｓｔｅｍｓ）、医用型超净工作台（上海博讯实业有限
公司）、电泳仪／槽（北京市六一仪器厂）、倒置相差
显微镜 （ＯＬＹＭＰＵＳ 公司）、二氧化碳培养箱
（ＨＥＡＬ　ＦＯＲＣＥ）、可调式微量移液器（德国 Ｅｐ－
ｐｅｎｄｏｒｆ）、离心机（上海安婷科学仪器有限公司）
２　试验方法
２．１　肿瘤细胞体外培养
　　小鼠胃癌细胞 ＭＦＣ以适量浓度接种于培养
瓶中，加入 ＲＭＰＩ－１６４０ 培养液（含１０％小牛血
清），置于３７℃，５％ＣＯ２，饱和湿度恒温培养箱中
培养。隔天换液一次，细胞呈单层贴壁生长，每３
～４天传代一次，传代时加１ｍＬ胰蛋白酶消化５
～１０ｓ，用培养液吹打制成细胞悬液，按照所需要
的浓度接种。
２．２　不同浓度ＴＰＳ对小鼠胃癌细胞 ＭＦＣ细胞
形态的影响
　　根据文献中细胞培养方法［１６～１８，２０］。用胰蛋白
酶消化 ＭＦＣ细胞，用含１０％ＦＢＳ　ＲＭＰＩ－１６４０培
养液制成细胞悬液，以适当的细胞密度将细胞悬液
加入９６孔板中，置于二氧化碳培养箱中，在３７℃、
５％ＣＯ２ 及饱和湿度条件下培养２４ｈ，然后加入不
同浓度的 ＴＰＳ，使 ＴＰＳ的终浓度分别为０、０．５、
１０、２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ
－１，继续培养２４ｈ后在显微
镜下观察、记录。
２．３　不同浓度ＴＰＳ对小鼠胃癌细胞 ＭＦＣ细胞
增殖抑制的影响
　　根据文献中细胞增殖抑制培养方法［１６～２０］。取
对数生长期 ＭＦＣ 细胞，用含１０％ ＦＢＳ　ＲＭＰＩ－
１６４０培养液制成一定浓度细胞悬液，接种于９６孔
培养板中，每孔体积１００μＬ。将培养板移入ＣＯ２
培养箱中，在３７℃、５％ ＣＯ２ 及饱和湿度条件下培
养２４ｈ，吸掉培养基然后加入含有不同浓度 ＴＰＳ
（０、０．５、１０、２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ
－１）的培养基１００
μＬ，继续培养２４ｈ，每孔加入 ＭＴＴ 溶液（５ｇ·
Ｌ－１）５０μＬ后，继续培养４ｈ，小心吸弃孔内培养上
清液，加入１５０μＬ　ＤＭＳＯ 轻轻振荡使之充分溶
解，选择４６０ｎｍ波长在酶联免疫检测仪上测定各
孔光吸收值，进行细胞增殖分析。同样的方法分别
在４８，７２ｈ进行培养。用酶联免疫检测仪在４６０
ｎｍ波长下测定各孔光吸收值（Ａ），进行细胞增殖
分析。
抑制率／％ ＝
对照孔Ａ值－实验孔Ａ值
实验孔Ａ值 ×１００％
２．４　不同浓度ＴＰＳ对小鼠胃癌细胞 ＭＦＣ细胞
凋亡的影响
　　根据细胞凋亡检测试剂盒步骤。把１０６～１０７
的细胞用 ＰＢＳ（－）Ｂｕｆｆｅｒ清洗后，悬浮于少量的
ＰＢＳ（－）Ｂｕｆｆｅｒ中，移入１．５ｍＬ　Ｍｉｃｒｏ　ｔｕｂｅ中，离
心５ｍｉｎ，除去上清。将 Ｍｉｃｒｏ　ｔｕｂｅ底部的细胞沉
淀加入１００μＬ的Ｌｙｓｉｓ　Ｂｕｆｆｅｒ，用振荡器激烈混合
１０ｓ后，离心５ｍｉｎ。把上清移入１．５ｍＬ　Ｍｉｃｒｏ
ｔｕｂｅ中。其沉淀再加入 Ｌｙｓｉｓ　Ｂｕｆｆｅｒ重复一次。
合并上清液，向其中加入１０％ ＳＤＳ　Ｓｏｌｕｔｉｏｎ　２０
μＬ，再加入Ｅｎｚｙｍｅ　Ａ　２０μＬ，５６℃反应１ｈ。反应
完成后加入Ｅｎｚｙｍｅ　Ｂ　２０μＬ，３７℃反应１ｈ。加
入Ｐｒｅｃｉｐｉｔａｎｔ　１３０μＬ、０．９５ｍＬ的乙醇，－２０℃放
置１ｈ以上。取出离心１５ｍｉｎ，弃上清，用８０％乙
醇清洗沉淀。同样离心１５ｍｉｎ后除去乙醇，干燥
沉淀。向沉淀中加入适量的 ＴＥ　Ｂｕｆｆｅｒ（１０～５０
μＬ左右）充分搅拌溶解，得到凋亡细胞的片断化
μＤＮＡ。得到的ＤＮＡ样品的一部分，按样品：６×
Ｌｏａｄｉｎｇ　ｂｕｆｆｅｒ＝５∶１的比例混合后（全量６～１５
μＬ），进行琼脂糖凝胶电泳。
３　结果与分析
３．１　不同浓度ＴＰＳ对 ＭＦＣ细胞形态的影响
　　由图１可以看出，ａ图为正常生长细胞，呈现
拉网状的生长。ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ为加入ＴＰＳ后ＭＦＣ细
胞的情况，细胞数不同程度的减少，细胞形态发生
改变，表现为胞浆皱缩，染色质浓聚，形成致密的染
色质，特别是图ｅ和图ｆ的细胞，细胞体积缩小、成
圆状，凋亡小体形成、细胞发生凋亡。随着浓度的
增大细胞形态改变的越明显。
９６２３２（３） 任石涛等：酸浆宿萼总皂苷对小鼠胃癌细胞（ＭＦＣ）生长的影响
图１　２４ｈ不同ＴＰＳ浓度下小鼠胃癌细胞的形态
Ｆｉｇ．１　Ｃｅｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ＭＦＣ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＴＰＳ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
　　注：ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ　ＴＰＳ浓度分别为０、５、１０、２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ－１
Ｎｏｔｅ：ａ，ｂ，ｃ，ｄ，ｅ，ｆ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＰＳ　０，５，１０，２０，４０，８０μｍｏｌ·Ｌ－１　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
３．２　不同浓度ＴＰＳ对小鼠胃癌细胞ＭＦＣ的增殖
抑制
　　不同浓度ＴＰＳ作用于 ＭＦＣ，２４、４８、７２ｈ后用
ＭＴＴ法测定细胞生长，结果见表１、图２。
　　由表１可以看出，４０μｍｏｌ·Ｌ
－１和８０μｍｏｌ·
Ｌ－１在不同的时间段与对照组比较均差异极显著
（ｐ＜０．０１）；１０μｍｏｌ·Ｌ
－１和２０μｍｏｌ·Ｌ
－１在不同
的时间段与对照组相比均差异显著（ｐ＜０．０５）；５
μｍｏｌ·Ｌ
－１与对照组相比在各个时间段均差异不
显著（ｐ＞０．０５）。从２４ｈ开始，不同浓度 ＴＰＳ即
对 ＭＦＣ细胞的增殖表现出不同程度的抑制作用，
到７２ｈ最大抑制率达到５３．０６％。ＴＰＳ对 ＭＦＣ
的抑制作用呈浓度依赖关系。当ＴＰＳ浓度分别为
２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ
－１抑制率分别为２５．８５％～
３４．９６％，３５．３７％～４１．６７％，４２．００％～５３．０６％。
说明ＴＰＳ对癌细胞有一定的抑制作用，抑制的效
率随着ＴＰＳ的浓度增加而增强。
３．３　不同浓度ＴＰＳ对小鼠胃癌细胞ＭＦＣ细胞凋
亡ＤＮＡ片段分析
　　ＴＰＳ感染 ＭＦＣ细胞电泳图谱见图３。
表１　不同浓度ＴＰＳ对 ＭＦＣ细胞增殖抑制影响（Ｘ±ＳＤ）
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ＴＰＳ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ＭＦＣ（Ｘ±Ｓ）
ＴＰＳ浓度
／μｍｏｌ·Ｌ－１
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＰＳ
／μｍｏｌ·Ｌ－１
２４ｈ ４８ｈ ７２ｈ
吸光值
ＯＤ
Ｖａｌｕｅ
抑制率／％
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
吸光值
ＯＤ
Ｖａｌｕｅ
抑制率／％
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
吸光值
ＯＤ
Ｖａｌｕｅ
抑制率／％
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
０　 ３．２００±０．５２９　 ０　 ３．５７５±０．４０３　 ０　 ３．６７５±０．４３５　 ０
５　 ３．０３３±０．８３３　 ５．２０　 ３．２５０±０．３４２　 ９．０９　 ３．３００±０．２９４　 １０．２０
１０　 ２．３６７±０．３２１＊ ２６．００　 ２．９５０±０．３８７＊ １７．４８　 ２．８７５±０．１２６＊ ２１．７７
２０　 ２．２３３±０．３２１＊ ３０．２１　 ２．３２５±０．３３０＊ ３４．９６　 ２．７２５±０．４３５＊ ２５．８５
４０　 １．８６７±０．７５７＊＊ ４１．６７　 ２．１５０±０．２６５＊＊ ３９．８６　 ２．３７５±０．５６８＊＊ ３５．３７
８０　 ２．１６７±０．１５３＊＊ ３２．２９　 １．８００±０．３３７＊＊ ４９．６５　 １．７２５±０．１５０＊＊ ５３．０６
　　注：＊表示与对照组相比较差异极显著（ｐ＜０．０５）。＊＊表示与对照组相比较差异极显著（ｐ＜０．０１）。
Ｎｏｔｅｓ：＊ａｎｄ＊＊ ｍｅａｎｓ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｅｘｉｓｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｖｅｌｓ（ｐ＜０．０５ａｎｄ　ｐ＜０．０１）ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ．
０７２ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１２
图２　不同浓ＴＰＳ对 ＭＦＣ细胞增殖抑制率
Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ＴＰＳ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ＭＦＣ
图３　ＴＰＳ感染 ＭＦＣ细胞２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ３个时间段的电泳图谱
Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ＴＰＳ　ｉｎｆｅｃｔ　ＭＦＣ　ｃｅｌｓ　ｉｎ　２４ｈ，４８ｈａｎｄ　７２ｈｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
　　注：Ｍ为 Ｍａｒｋｅｒ（１００ｂｐ）；０（对照组）、５、１０、２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ－１分别为不同浓度的ＴＰＳ
Ｎｏｔｅ：Ｍ　ｉｓ　Ｍａｒｋｅｒ（１００ｂｐ）；０，５，１０，２０，４０，８０μｍｏｌ·Ｌ－１　ｍｅａｎ　ｔｈｅ　ＴＰＳ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
　　由图３可以看出，２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ３个时间段
的对照组细胞无凋亡，不呈现ＤＮＡ条带；ＴＰＳ加
入２４ｈ后的电泳ＤＮＡ片段不明显，只在最大浓度
８０μｍｏｌ·Ｌ
－１处出现ＤＮＡ 片段；ＴＰＳ加入４８ｈ、
７２ｈ后的细胞ＤＮＡ均出现细胞凋亡的典型梯状
条带，且７２ｈ最明显。该电泳结果可初步说明
ＭＦＣ细胞凋亡受ＴＰＳ的作用剂量和作用时间影
响。作用的时间越长干预效果越强；在相同的时间
段里呈剂量依赖性。说明ＴＰＳ对癌细胞有一定的
致死效用，作用的时间的越长，效果越明显，且呈现
剂量依赖性。
４　结论与讨论
细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），即程序性细胞死亡
（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌ　ｄｅａｔｈ，ＰＣＤ），是指细胞在分化
和发育过程中由基因调控而发生的主动的、自发性
死亡方式，它与坏死有着本质的区别［１６，２０～２３］。尽
管凋亡是一种生理性细胞死亡，但它也能被各种病
理因素所触发，任何可直接破坏细胞、导致细胞坏
死的物质，均可诱发细胞的凋亡［１７，２０］。
通过对细胞形态的观察发现，加入不同浓度的
ＴＰＳ作用２４ｈ后细胞数量明显少于对照组，凋亡
发生率升高，细胞失去贴壁的能力，细胞由不规则
１７２３２（３） 任石涛等：酸浆宿萼总皂苷对小鼠胃癌细胞（ＭＦＣ）生长的影响
形逐渐变成圆形，胞浆皱缩，细胞体积缩小，凋亡小
体生成，且浓度越高作用效果越明显。实验结果显
示，当ＴＰＳ浓度分别为２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ
－１抑制
率分别为２５．８５％～３４．９６％，３５．３７％～４１．６７％，
４２．００％～５３．０６％。所以ＴＰＳ能够抑制 ＭＦＣ细
胞增殖，且呈时间浓度依赖性；ＴＰＳ能引起肿瘤细
胞的凋亡，并且随着浓度的增加其凋亡作用就越明
显。在４８ｈ和７２ｈ１０、２０、４０、８０μｍｏｌ·Ｌ
－１的
ＴＰＳ与对照组相比能显著提高细胞凋亡效果。通
过本实验的研究结果还能看出，随着作用时间的延
长其凋亡效果也随之上升，表现出一定的浓度依赖
性。在以后的试验中，对其最大作用剂量和毒性进
行研究，可能将其作为新的抗肿瘤药物得以开发和
利用。
参　考　文　献
［１］帕提古丽·马合木提，高莉，史博，等．酸浆花萼色素的提取及理化性质研究［Ｊ］．食品科学，２００４，２５（９）：３５－３８．
［２］甄清，李静，李勇，等．锦灯笼宿萼提取物体外抗菌作用研究［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００６，１８（２）：２７３－２７４．
［３］吴方晖，李文亮，边鸣镝．大孔吸附树脂纯化大豆皂甙的研究［Ｊ］．河北农业科学，２００７，１２（６）：８７．
［４］王东冬，赵大云．大豆皂带的提取纯化与分离检测［Ｄ］．上海：上海交通大学硕士学位论文，２００７．
［５］李广，李浩波，刘璐，等．皂甙的生理活性及应用研究进展［Ｊ］．中国农学通报，２００３，９（６）：３－６．
［６］Ｇｒａｈａｍ　ＪＧ，Ｑｕｉｎｎ　ＭＬ，Ｆａｂｒｉｃａｎｔ　Ｓ．Ｐｌａｎｔｓ　ｕｓｅｄ　ａｇａｉｎｓｔ　ｃａｎｃｅｒ———ａｎ　ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｗｏｒｋ　ｏｆ　Ｊｏｎａｔｈａｎ　Ｈａｒｔｗｅｌ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｔｈ－
ｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０００，７３（３）：３４７－３７７．
［７］Ｎｅｗｍａｎ　ＤＪ，Ｃｒａｇｇ　ＧＭ，Ｓｎａｄｅｒ　ＫＭ．Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｕｐｏｎ　ｄｒｕｇ　ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　Ｒｅｐｏｒｔ，２０００，１７：
２１５－２３４．
［８］Ｐｅｚｚｕｔｏ　ＪＭ．Ｐｌａｎｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　ａｇｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９７，５３（２）：１２１－１３３．
［９］Ｙｕｎ　ＴＫ，Ｌｅｅ　ＹＳ，Ｌｅｅ　ＹＨ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｇｉｎｓｅｎｇ　Ｃ　Ａ　Ｍｅｙｅｒ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒ－
ｎａｌ　ｏｆ　Ｋｏｒｅａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００１，１６：１６－１８．
［１０］Ｌｉｕ　ＷＫ，Ｘｕ　ＳＸ，Ｃｈｅ　ＣＴ．Ａｎｔｉ－ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｇｉｎｓｅｎｇ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅ［Ｊ］．Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０００，６７
（１１）：１２９７－１３０６．
［１１］Ｐｏｐｏｖｉｃｈ　ＤＧ，Ｋｉｔｔｓ　ＤＤ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ，Ｒｈ２，ａｎｄ　ｇｉｎｓｅｎｇ（Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｙｕｅｆｏｌｉｕｓ）ｅｘｔｒａｃｔ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｉｎ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　Ｃａｃｏ－２ｃｅｌｓ　ｔｒｉｔｅ　ｐｅｎｏｉｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｋｏｒｅａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００１，１６：２８－３７．
［１２］Ｋｉｍ　ＨＳ，Ｌｅｅ　ＥＨ，Ｋｏ　ＳＲ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ　Ｒｇ３ａｎｄ　Ｒｈ２ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ａｒｃｈｉｖｅｓ　Ｐｈａｒｍａ－
ｃｏｌｏｇｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００４，２７（４）：４２９－４３５．
［１３］杜德极，杨薇．葛根主要成分对体外癌细胞的毒活性［Ｊ］．癌症，１９９７，１６（３）：１６５－１６７．
［１４］徐长福，杨艳萍．绞股蓝总皂甙与阿霉素、５－氟尿嘧啶连用的抑瘤效果［Ｊ］．西安医科大学学报，１９９６，１７（２）：１７０－１７４．
［１５］梁朝晖．黄豆皂苷的提取和分离方法的初探［Ｊ］．中国公共卫生，１９９９，１５（１１）：１０４３－１０４４．
［１６］杨纯正，王树滨．肿瘤化疗和细胞凋亡［Ｊ］．中华血液学杂志，２０００，２１（６）：２８５－２８６．
［１７］赛燕，刘勇，朱明学，等．四肽ＡＣ－ＤＥＶＤ－ＣＨＯ对硫芥诱导淋巴细胞凋亡的干预作用［Ｊ］．第三军医大学学报，２００３，２５（１４）：１２２３－
１２２６．
［１８］朱永仁，刘志明．细胞凋亡的研究进展［Ｊ］．贵州畜牧兽医，２００８，３２（１）：２５－２７．
［１９］刘伍梅，汪铭书，程安春．细胞凋亡检测技术研究进展［Ｊ］．中国兽医科技，２００４，３４（１１）：４５－４９．
［２０］刘芳，李雪梅，张平英，等．ＤＮＡ　Ｌａｄｄｅｒ和ＥＬＬＳＡ合检测ＰＲＲＳＶ诱导 Ｍａｒｃ　１４５细胞凋亡动态变化规律的研究［Ｊ］．四川农业大学
学报，２００５，２３（１）：９５－９８．
［２１］Ｙｕ　Ｇ，Ｄｙａｎ　Ｙ，Ｆａｎｇ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　ｆｒｕｉｔ　ｃａｌｙｘ　ｏｆ　Ｐｈｙｓａｌｉｓ　ａｌｋｅｋｅｎｇｉ　Ｌ．ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉ：ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｃａｒｂｏｈｙｄ　Ｐｏｌｙｍ．２００９，７７（２）：１８８－１９３．
［２２］Ｌｉｎ　Ｌｉｕ，Ｙｕｅｓｈｅｎｇ　Ｄｏｎｇ，Ｚｈｉｌｏｎｇ　Ｘｉｕ．Ｔｈｒｅｅ－ｌｉｑｕｉｄ－ｐｈａｓｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　ａｎｄ　ｓｔｅｒｏｉｄａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ
ｚｉｎｇｉｂｅｒｎｓｉｓ　Ｃ．Ｈ．Ｗｒｉｇｈｔ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１０，４５（５）：７５２－７５６．
［２３］Ｌｉｕ　Ｗ　Ｍ，Ｗａｎｇ　Ｍ　Ｓ，Ｃｈｅｎｇ　Ａ　Ｃ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈ－
ｎｏｌｏｇｙ，２００４，３４（１１）：４５－４９．
（编辑：马荣博）
２７２ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１２