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山绿茶不同炮制品中绿原酸的含量比较



全 文 :别加入 12.18mg的茴香脑对照品 ,用甲醇定容至 10
m l,称重 ,按样品处理法同法处理 ,测定。平均回收
率为 102.31%, RSD为 1.78%。
2.8  样品含量测定  取不同产地的八角茴香样
品 ,按供试品溶液制备方法制备 ,按线性关系测定条
件进样分析 ,其测定结果见表 1。
3  结论与讨论
3.1  不同产地八角茴香中茴香脑的含量均在
4.5%以上 ,其中以玉林六万林场的最高 (8.88%),
防城十万大山的为 8.22%,质量较优;金秀的仅为
4.58%,质量较次 。
3.2  药典 2000年版一部只对八角茴香中油的含
量进行了规定 ,没有对八角茴香中茴香脑的含量进
行规定 ,因而不能客观反映其中主要成分茴香脑的
含量 ,用气相色谱法测定八角中茴香脑含量的方法
稳定可控 ,可用于质量控制。
3.3 目前广西各产地八角茴香的加工方法不统
一 ,其中有部分地区用硫磺熏制 ,从我们收集的玉林
六万林场两个样品对比来看 ,用硫磺熏八角可能会
造成八角中茴香脑的含量下降。同时硫磺熏后残留
在八角药材中的硫磺会对人体的健康产生不良影
响 ,建议不要用硫磺熏制加工八角 。我们将继续对
此进行考察研究。
参 考 文 献
1 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 . 一部 . 北京:
化学工业出版社 .2000∶4
2 阴健 .中药现代研究与临床应用(2).北京:中医古籍出
版社 , 1995∶9
(2004 - 07 -02收稿)
Quantitative Determ ination of Anethole in the Fruit of Illicium
verum from Various P laces ofGuangxi Province
Zhou Jiem ing, Lü Gaorong, Zhong X iaoqing, WenH ui
(Guangx iGu ilin Sanjin Pha rm aceutia l Co. L td, Gu ilin 541004)
Abstrac t The quantitative dete rm ina tion o f ane tho le in the fruit of I llicium verum from various places o f Guangx i prov ince w ere
dete rm ined by GC. The average recovery rate and the RSD are 102. 31%, 1. 78% respective ly. The conten t of ane tho le in the fru it o f
I llicium verum in various place s we re a ll mo re than 4. 5%.
K ey words F ru it of I llicium verum;Anetho le;Quantita tive de te rm ina tion
山绿茶不同炮制品中绿原酸的含量比较
陈 勇 李耀华 谢 臻 刘 婧 辛 华 刘宝存 余延超
(广西中医学院药学院 ,南宁 530001)
  摘要 应用 H PLC法测定山绿茶(Ilex ha inanensisM err)不同炮制品中绿原酸含量。检测波长为 327 nm;线性
范围 0. 84 ~ 5.04 μg, r=0.9996;平均回收率为 100.46%, RSD=1.33%。
关键词 山绿茶;HPLC;绿原酸
  山绿茶为冬青科冬青属植物海南冬青 Ilex
hainanensisM err的干燥叶 ,含黄酮类 、三萜酸类 、绿
原酸 、鞣酸等成分 ,具有清热解毒 、平肝潜阳 、活血化
瘀的功效 ,民间用于治疗咽喉肿痛等呼吸系统炎症 ,
近年临床上用于治疗高血压病。据文献报道 ,山绿
茶降压片治疗原发性高血压的总有效率明显高于复
方罗布麻片 〔1〕。由于绿原酸是山绿茶主要抗菌成
分 ,山绿茶及其炮制品的绿原酸含量测定未见报道 。
为了控制山绿茶不同炮制品的质量 ,本文对其绿原
酸含量采用 HPLC法进行测定 。
1 仪器与试药
Ag ilent 1100高效液相色谱仪 (美国安捷伦公
司);ODSC18柱(4.6i.d×250mm , 5 μm ,大连依利特
分析仪器有限公司 )。水为超纯水 ,甲醇 、乙腈为色
谱纯 ,其它试剂均为分析纯 。绿原酸对照品 (中国
药品生物制品检定所提供 ,批号:753-200120,供含
量测定用 )。
山绿茶不同炮制品为:金秀药材 (广西金秀县
提供 )、上林药材 (广西上林县提供 ,均按绿茶工艺
炮制 )、60℃烘干药材 、晾干药材 、清炒药材 (以上原
107 中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牭牣牥牪牣牥牨牱
药材均购于上林县),经鉴定均为冬青科冬青属植
物海南冬青 Ilex ha inanensisMerr的干燥叶 。
2  测定方法
2.1  测定条件 用十八烷基硅烷化硅胶为填充
剂 ,乙腈-0.4%磷酸溶液 (含 0.1%三乙胺 )(8∶92)
为流动相 〔2 ~ 6〕;检测波长为 327 nm。理论塔板数按
绿原酸色谱峰计算应不低于 3000。
回归方程为:Y =159.48X +6.92, r=0.9996,
线性范围 0.84 ~ 5.04 μg。
2.2  供试品溶液的制备 取山绿茶不同炮制品粉
末 ,置烘箱 50℃烘 30 m in,取出 ,放冷 ,精密称取约 1
g,置 50 m l锥形瓶中 , 加醋酸乙酯-石油醚 (30 ~
60℃)(3∶1)混合溶液 20 m l,超声处理 45 m in,滤
过 ,混合溶液弃去 ,药渣挥干溶剂 ,加 50%甲醇 20
m l超声处理 45 m in,滤液置 25 m l量瓶中 ,药渣加
50%甲醇洗涤 3次 ,洗液合并至 25 m l量瓶中 ,加
50%甲醇稀释至刻度 ,摇匀 。取约 2 m l离心 10 m in
(10000 r /m in),取上清液作为供试品溶液。
3  样品测定结果
精密吸取供试品溶液及对照品溶液各 10μl,进
样 ,测定峰面积 ,用外标法计算各供试品中绿原酸的
含量。结果见表 1及图 1 ~ 6。
 表 1  样品测定结果
样品 平均含量(%) RSD(%)
金秀县药材 0. 150 1. 90
上林县药材 0. 186 2. 17
60℃烘干药材 0. 108 2. 23
晾干药材 0. 207 1. 68
清炒药材 0. 096 2. 01
图 1 绿原酸对照品(42 μg /m l)HPLC色谱图 a为绿原酸
图 2 60℃烘干药材 HPLC色谱图 a为绿原酸
图 3 金秀县药材 HPLC色谱图 a为绿原酸
图 4 清炒药材 HPLC色谱图 a为绿原酸
图 5 晾干药材 HPLC色谱图 a为绿原酸
图 6 上林县药材 HPLC色谱图 a为绿原酸
4 讨论
4.1 在供试品溶液的制备过程中 ,先用醋酸乙酯-
石油醚 30 ~ 60℃(3∶1)混合液进行脱脂处理 ,再用
50%甲醇超声提取 ,可以使绿原酸峰形分离更好 ,干
扰减少。
4.2 在提取过程中 ,长时间超声提取可能会使绿
原酸受热分解而导致含量下降 〔7〕 ,因此提取时间不
宜过长 ,本实验以超声提取 45 m in为宜 。
4.3 在流动相的选择中 ,经过反复摸索 ,选择酸性
流动相 ,因为绿原酸是有机酸 ,酸性条件可抑制其电
离 ,使峰形稳定 ,分离度更好 〔8〕。
4.4 考察测定山绿茶不同炮制品中绿原酸含量 ,
实验结果表明:不同产地来源药材或不同加工方法 ,
常导致绿原酸含量有较大变化。以晾干药材含量最
108 中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
高;其次是上林县药材 、金秀县药材 、60℃烘干药材;
含量最低是清炒药材 。清炒药材中绿原酸含量偏低
可能与炒制时温度过高 、放置过久 ,部分绿原酸成分
分解有关。而晾干药材中绿原酸基本不受破坏 ,故
含量最高。山绿茶不同炮制方法与绿原酸的变化关
系还有待进一步研究 。
4.5  采用 HPLC法测定山绿茶不同炮制品中绿原
酸的含量 ,分离度良好 ,快速 、准确 ,重现性好 ,方法
可靠 ,可用于山绿茶药材及其炮制品的质量控制。
基金项目:广西科技厅科技攻关项目(桂科攻 0322024-4B)
参 考 文 献
1 藏吾 , 等 .山绿茶降压片治疗原发性高血压 80例疗效
观察 .中成药 , 1997, (12)∶58
2 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .一部 .北京:
化学工业出版社 , 2000∶177
3 张丹 ,等 .H PLC测定金银花 、茵陈及其 10种中成药中绿
原酸的含量 .药物分析杂志 , 1996, 16(2)∶83
4 钟小群 ,等 .H PLC法测定石韦药材中绿原酸的含量 .江
西中医学院学报 , 2002, 14(2)∶26
5 张华年 ,等 .HPLC同时测定双黄连注射剂中绿原酸和黄
芩苷 2种指标成份含量 .中国现代应用药学杂志 , 1999,
16(6)∶231
6 马守栋 ,等 .高效液相色谱法测定清消口服液中绿原酸
的含量 .中国医院药学杂志 , 1999, 19(3)∶134
7 阎东海 . 提取三要素在金银花提取过程中对绿原酸提
出率及稳定性的相关性研究 . 中国中药杂志 , 1994, 19
(9)∶545
8 凌云 , 等 .H PLC法测定蒲公英中绿原酸的含量 . 中草
药 , 1998, 29(8)∶521
(2004 - 08 -19收稿)
Chlorogenic Acid ContentCompar ison ofD ifferent Processed Products of Ilex ha inanensisMerr
Chen Yong, L i Yaohua, Xie Zhen, L iu Jing, X in H ua, L iu Baocun, Yu Yanchao
(Guangx i Co llege of T raditiona l ChineseM edic ine, Nanning 530001)
Abstrac t Objective:To con tro l differen t processed produc ts o f I lex hainanensisM err quality. M ethods:Using HPLC to de te r-
m ine ch lo rogenic acid o f I lex hainanensisM err. M easure w ave length is 327 nm. Resu lts:The linear range of ch lo rogenic acid was good
from 0.84 μg to 5.04μg ( r=0.9996). The average recove ry w as 100.46%(RSD =1.33%). Conc lusion:This me thod is conven-
ien t, fast, accurate, can be applied to quality con tro l of the differen t processed products o f Ilex ha inanensisM err.
K ey words  Ilex hainanensisM err. HPLC;Ch lo rogenic acid
药理
松萝酸钠促皮肤创伤愈合的实验研究
靳菊情 董亚琳 贺浪冲
(西安交通大学 ,西安 710061)
  摘要 目的:研究松萝酸钠对成纤维细胞增殖及促皮肤创伤愈合的影响。方法:培养 L929成纤维细胞 , 体外
加入不同浓度的松萝酸钠 , MTT法观察其对成纤维细胞增殖的影响。整体观察松萝酸钠对大鼠实验性皮肤损伤的
修复作用。结果:松萝酸钠浓度为 0. 5 ~ 8 μg /m l对 L929成纤维细胞的增殖没有影响。整体实验表明 ,松萝酸钠外
涂对实验性大鼠皮肤损伤有加速修复作用。松萝酸钠对成纤维细胞增殖无促进作用。结论:松萝酸钠具有促伤口
愈合作用 , 其促修复作用不是通过促进成纤维细胞增殖而加速皮肤创伤愈合 。
关键词 松萝酸钠;成纤维细胞;创伤愈合
  长松萝 (Usnea longissima A ch.)为松萝科松萝
属地衣植物 ,具有清热解毒 、止咳化痰 、杀菌消炎等
功效 ,其中主要成分为松萝酸。据报道 〔1〕 ,松萝酸
不仅具有抗菌消炎作用 ,还具有促伤口愈伤作用 。
笔者将长松萝中提取的松萝酸制成了钠盐 〔2〕 ,研究
松萝酸钠对成纤维细胞增殖及皮肤创伤的修复作
用。
1 材料
1.1  试剂与仪器  溴化-3-(4, 5-二甲基乙噻唑
基-)-2, 5二苯基四氮唑(MTT)(美国 , S igm a),新生
109 中药材第 28卷第 2期 2005年 2月