全 文 :[收稿日期] 2010-09-02 [ 修回日期] 2010-09-20
[基金项目] 海南省自然基金资助项目(30840)
[作者简介] 毛彩霓(1977-),女 ,湖南涟源人 ,讲师 ,硕士 , Tel:13698928074 , Email:jnmaomao2004@163.com 。
[通讯作者] 刘明生 , 13637630136 , Emai l:mingsliu2002@yahoo.com。
薜荔药材两种提取物的抗炎作用研究
毛彩霓 ,杨卫丽 ,刘明生
(海南医学院药学院 海南省热带药用植物研究与开发重点实验室 ,海南 海口 571101)
[摘要] 目的:比较薜荔水提取物与乙醇提取物的抗炎作用 。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和醋
酸致小鼠腹腔毛细管通透性增高法观察薜荔水提取物与乙醇提取物对炎症的抗炎作用。结果:醇提取
物对两种抗炎模型均有明显的抑制作用 ,能显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性增加及抑制小鼠耳廓肿
胀。结论:薜荔药材乙醇提取物的抗炎效果优于水提取物。
[关键词] 薜荔;提取物;抗炎
[中图分类号] R284 [文献标识码] B [文章编号] 1007-1237(2010)10-1256-03
Anti-inflammatory effects in different extracts of Ficus pumila L.
MAO Cai-ni ,Yang Wei-li , LIU Ming-sheng
(K ey Laboratory o f R &D on Tropical Medicinal Plants , School of Pharmacy , Hainan Medical U-
niversity , Haikou 571101 , China)
[Foundation Project] :Hainan Natural Science Foundation (30840)
[ Author] :MAO Cai-ni(1977-) , Female , Lianyuan Hunan , Lecturer , M.M., Tel:13698928074 ,
Email:jnmaomao2004 @163.com.
[ Correspondence to] :LIU Ming-sheng , Pro fessor , Doctor Tutor , Email:mingsliu2002 @yahoo.
com.
Received:2010-09-02 Rev ised:2010-09-20 J HMC ,2010;16(10):1256-1258
View from special ist:It is creative , and of certain scientific and educational value.
[ ABSTRACT] Objective:To observe the anti-inf lammatory ef fects in w ater ex t racts and alcohol ex-
t racts of Ficus pumila L.Methods:The ant i-inflammato ry action w as assessed by xylene-induced ear
sw elling in mice and HAc-induced peritoneal capillary permeability in mice.Results:Alcoho l ext racts of
Ficus pumila L .significant ly improved the ear swelling in mice and inhibited the phlogistic infil tration in
mice.Conclusion:Anti-inf lamma to ry ef fect o f alcohol ex tracts of Ficus pum ila L.i s be tter than alcoho l
e xt racts of F icus pum ila L.
[ KEY WORDS] Ficus p umila L.;Extracts;Anti-inf lammato ry
薜荔(Ficus pumila L.)是属桑科(Moraceae)
榕属(Ficus L.)攀援植物 ,又名木莲 、凉粉树 、爬墙
虎 、王不留行等[ 1] ,薜荔的茎 、叶可供药用 , 性平 ,味
淡酸微苦 ,可祛风除湿 ,通血活络 ,解毒消肿 ,产于我
国和日本 ,在我国主要分布于江西 、湖南 、四川 、海南
和台湾等省区 ,在海南主要产于昌江 ,白沙 ,文昌 ,万
宁与保亭等市县[ 1] 。药理研究显示薜荔具抗菌 、增
强免疫 、抗肿瘤 、抗诱导 、抗炎镇痛与驱蛔虫等活
1256
海南医学院学报 2010 , 16(10)
Journal of Hainan Med ical University
DOI :10.13210/j .cnk i.jhmu.2010.10.004
性[ 2] 。
本实验首次采用小鼠耳廓肿胀和醋酸致小鼠腹
腔毛细血管通透性炎症模型观察薜荔药材传统水煎
煮提取物与乙醇提取物的抗炎效果 ,为进一步开发
利用该植物资源提供依据 。
1 材料与方法
1.1 实验仪器与试药
R-205旋转蒸发仪(上海申胜生物技术公司);
SH2-D(Ⅲ)型循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪
器厂);日本 JASCO-650 紫外分光光度计(日本分
光);FA1104电子分析天平(梅特勒—托利多仪器
有限公司 ,上海);TGL-16c高速台式离心机(上海
安亭科学仪器厂);DK-98-11A 电热恒温水浴锅(天
津市泰斯特仪器有限公司)。
薜荔采自海南省万宁市兴隆华侨农场 ,经中国
医学科学院药用植物研究所海南分所鉴定为桑科
(Moraceae)榕属(F icus L.)植物薜荔(F icus pumi-
la L.)药材;阿司匹林肠溶片(湖南新汇制药有限公
司提供 ,批号:090201);伊文思蓝(国药集团化学试
剂有限公司 ,批号:WC20090209);二甲苯 、正丁醇 、
乙酸乙酯均为分析纯;生理盐水(海南医学院药学院
实验室配制)。
1.2 实验动物
昆明种小鼠 ,体重 18 ~ 22 g ,雌雄各半 ,由湖南
省长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供(许
可证号:SCXK(湘)2006-0001)。根据实验性质和性
别分笼喂养 ,自由采食饮水。
1.3 薜荔药材不同提取物的制备
1.3.1 薜荔水提取物
取干燥薜荔茎叶药材 300 g ,加 10倍量水煎煮
提取两次 ,每次 1.5 h ,滤过 ,两次滤液合并 ,浓缩至
每毫升对应薜荔生药 5 g 。
1.3.2 薜荔醇提取物
取干薜荔茎叶药材 300 g , 加 7 倍量 75%乙
醇[ 3]回流提取 3次 ,合并滤液 ,减压回收乙醇至无醇
味 ,浓缩至每毫升对应薜荔生药 5 g 。
1.4 抗炎实验
1.4.1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀法[ 4]
选取昆明小鼠 40只 ,体重 18 ~ 22 g ,雌雄各半 ,
随机分为 4组 ,雌雄各半 ,每组 10只。给药组分别
为水提取物组 、乙醇提取物组(二者剂量均为按生药
量计 100 g/kg), 阳 性对照组为 阿司匹林 组
(0.2 g/kg),空白对照组给予等体积的生理盐水 。
各组灌胃给药 , 1次/d ,给药容积 0.4 mL/20 g 小鼠
体重 , 连续 7 d , 于末次给药 1 h 后 , 将二甲苯
(20μL/只)均匀涂于每只小鼠右耳正反两面 ,左耳
不涂作对照 ,致炎 30 min 后脱颈椎处死小鼠 ,沿耳
廓基线剪下双耳 ,用打孔器(直径 9mm)在相同位置
取下圆耳片 ,电子天平称重 ,计算左耳片和右耳片的
重量差值(肿胀度)及肿胀率:
肿胀率(%)=(右耳重 -左耳重)/左耳重 ×
100%。
1.4.2 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高法[ 5]
取昆明种小鼠 40只 ,体重 18 ~ 20 g ,雌雄各半 ,
随机分为 4 组 , 每组 10 只 ,组别与给药方法都同
“1.4.1”项。末次给药 20 min后给各小鼠尾静脉注
射 0.5%伊文思兰溶液 10 mL/kg ,随即腹腔注射
0.6%醋酸溶液 0.01 mL/只 。20 min 后脱颈椎处
死 ,暴露腹腔 ,用 5 mL 生理盐水洗涤腹腔 ,吸取洗
涤液约3 mL ,3 000 r/min离心 15 min ,取上清液于
590 nm 处用比色法测定吸光度(A)。
1.5 统计学处理
各组数据以 x±s表示 ,组间差异比较用 t检验 ,检
验水准α=0.05。
2 结果
2.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
二甲苯致小鼠耳肿胀模型是急性非特异性炎症
模型 ,薜荔水提取物组 、乙醇提取物组均能使小鼠耳
廓肿胀明显降低 ,与空白对照组比较均有统计学差
异(P<0.01)。说明薜荔水提取物 、乙醇提取物对
急性 、早期炎症具有很好的抗炎作用。结果见表 1 。
表 1 薜荔药材提取物对耳廓肿胀的影响( x±s)
组别 n 剂量(按生药量计 g/ kg)
肿胀度
(mg)
肿胀率
(%)
空白对照组 10 ― 8.9±1.8 102.4±19.6
水提取物组 10 100.0 5.7±3.3** 55.2±32.0
乙醇提取物组 10 100.0 5.7±2.1** 59.4±15.4
阿司匹林组 10 0.2 5.7±3.3* 59.1±33.2
注:与空白对照组比较 , *P<0.05 , **P<0.01。
3.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
薜荔药材乙醇提取物能降低醋酸引起的小鼠毛
细血管通透性增加 ,使腹腔内渗出的染料明显减少
(P<0.05),与水提取物比较 ,差异具有统计学意义
(P<0.05),说明薜荔醇提取物可以降低毛细血管
的通透性 ,减少急性 、早期炎症的渗出 ,而水提取物
无效果。结果见表 2 。
1257毛彩霓等.薜荔药材两种提取物的抗炎作用研究
表 2 薜荔药材提取物对小鼠腹腔毛细血管
通透性的影响( x±s)
组别 n 剂量(按生药量计 g/ kg) 吸光度
空白对照组 10 ― 0.514 0±0.307 0
水提取物组 10 100 0.313 4±0.097 0
乙醇提取物组 10 100 0.200 0±0.099 0*#
阿司匹林组 10 0.2 0.217 2±0.066 0*
注:与空白对照组比较 , *P<0.05;与水提取物组比较 , #P<
0.05。
3 结论
本实验首先通过预实验考察了二者是否具有抗
炎作用及具有抗炎效果的最佳剂量 。本预实验采用
二甲苯所致小鼠耳廓肿胀模型进行预实验 ,每组
6只小鼠 ,将给药组分为低 、中 、高剂量组 ,实验结果
表明 ,中剂量组抗炎效果明显 ,故确定给药量为中剂
量 ,即:按生药量计 100 g/kg 。
薜荔醇提取物可显著抑制两种抗炎模型(P <
0.01),而薜荔水提取物仅能抑制二甲苯所致小鼠耳
廓肿胀(P<0.05),说明薜荔药材醇提取物能抑制
毛细血管扩张 、通透性增加 、渗出性水肿为主的炎症
早期反应 ,且抗炎效果优于水提取物 ,此结果为进一
步寻找抗炎有效成分提供科学依据。
参考文献
1 中华本草编委会.中华本草[ M] .上海:上海科技出版社 ,
1999.499.
2 Zhong XQ , Xu HH.Summary of the research about Fi-
cus officina l plant [ J] .Chin T radit Herb Drug s , 2000 , 31
(9):a3-a4.
3 范明松 ,叶冠 , 黄成钢.薜荔化学成分研究[ J] .中草药 ,
2005 , 7(7):36.
4 Xu SY , Bian R L , Chen X.Methodology o f pharmaco-
log ical e xperiment[ M ] .Beijing:People′s Medical Pub-
lishing H ouse , 1991.
5 Chen Q.Methodolog y in pharmaco lo gical study on Chi-
ne se materia medica[ M] .Beijing:People′s Medical Pub-
lishing House , 1993.
(责任编辑 李晶)
(上接第 1255页)
可检测出 T T 、TM 、MM 3种基因型 , M235T 突变
位点可检测出 MM 、MT 、TT 3种基因型 。其基因
分型结果与 DNA 测序结果完全相符 ,说明基因分
型结果的特异性和准确率均较高。
总之 ,本文建立的等位基因特异性 PCR技术 ,
对 AG T 基因分型稳定 ,具有重复性好 、特异性和准
确率均较高的特点 ,为开展 AGT 基因的研究提供
了简便 、快速 、准确的基因分型方法 。
参考文献
1 和姖苓 , 孙洪英 , 杨国安 , 等.血管紧张素原基因
T704C 多态性与脑血管病的关系[ J] .临床神经病学杂
志 , 2009 , 22(3):190-192.
2 万迎新 , 张铁忠.原发性高血压患者血管紧张素原基因
M235T 与中医证候分型的关系[ J] .中国中西结合杂
志 , 2008 , 28(1):36-38.
3 沈志霞 ,吴寿岭 , 李宏芬 ,等.血管紧张素原基因多态性
与原发性高血压之间的关系[ J] .中国现代医学杂志 ,
2008 , 18(6):722-728.
4 Lahiri DK , Schnabel B.DNA iso lation by a rapid meth-
od f rom human blo od samples:Effects of M gCl2 , ED-
TA , stor age time , and temperature on DNA y ield and
quality[ J] .Biochem Genet , 1993 , 31(7-8):321-328.
5 贾永平 ,郭晓红 , 杨俊平 , 等.肾素-血管紧张素系统基
因多态性与冠心病的关系[ J] .中国动脉硬化杂志 ,
2008 , 16(12):981-985.
6 孙烈 , 胡文志 , 杨季明 , 等.血管紧张素原基因 T174M
和血管紧张素转换酶基因 I/ D 多态性与急性心肌梗死
的相关性[ J] .中国动脉硬化杂志 , 2006 , 14(8):697-
700.
7 琚小红 ,牛小媛 , 王利军 ,等.中青年脑梗死患者血管紧
张素原基因 M 235T 多态性的研究[ J] .中国优生与遗
传杂志 , 2006 , 14(6):13-15.
8 江悦华 ,杜琴 , 陈阳 ,等 应用 ARMS 法对地中海贫血进
行基因型分析[ J] .中华血液学杂志 , 2000 , 21(10):541-
542.
9 马厚勋 ,牛永红 , 李章勇 ,等.等位基因特异性引物 PCR
技术及其应用研究[ J] .生物技术 , 2005 , 15(1):15-18.
10 Jones DC , Bunce M , Fugg le SV , e t al.H uman platele t
alloantig ens(HPAs):PCR-SSP genotyping o f a UK
population fo r 15 HPA alleles[ J] .Eur J Immunogenet ,
2003 , 30:415-419.
(责任编辑 崔蓉)
1258 海南医学院学报 Vol.16 No.10 Oct.2010