免费文献传递   相关文献

紫茉莉提取物的抑菌活性



全 文 :第48卷第2期
2009年2月
Vol. 48, No. 2
Feb. 2009
农 药
AGROCHEMICALS
紫茉莉提取物的抑菌活性
彭跃峰1,鲁红学2,李 娜2
(1.华南农业大学 图书馆, 广州 510642; 2.长江大学 农学院, 湖北 荆州 434025)
摘要:紫茉莉是紫茉莉科的一种多年生草本植物。 通过对其根、茎与叶提取物抑菌活性的室内测试结果表
明:紫茉莉根甲醇提取物与茎甲醇提取物对梨黑斑病菌和西瓜炭疽病菌菌丝生长具有较好的抑制作用。 其
中根甲醇提取物对以上2种病原真菌菌丝生长的抑菌率分别为85.49%和84.78%、茎甲醇提取物为98.36%和
75.38%;此外,该2种提取物对梨黑斑病菌、西瓜炭疽病菌与草莓灰霉病菌孢子的萌发也具有较好的抑制效
果。 前者对以上3种病原真菌孢子萌发的抑制率依次为90.50%、73.39%、77.94%;后者分别为89.91%、84.03%
和75.90%。
关键词:紫茉莉;提取物;抑菌活性;生物测定
中图分类号:S482.2 文献标志码:A 文章编号:1006-0413(2009)02-0147-03
Antifungal Activities from Mirabilis jalapa Linnaeus Extracts
PENG Yue-feng1, LU Hong-xue2, LI Na2
(1.Library, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;
2.College of Agriculture, Yangtze University, Jingzhou 434205, Hubei, China)
Abstract: Mirabilis jalapa Linnaeus is a perennial herb of Nyctaginaceae. Laboratory bioassay was conducted to
determine the antifungal activities from the root, stems and leaves extracts of Mirabilis jalapa. The results showed that
the methanol extracts of Mirabilis jalapa roots and stems had better inhibition actions to mycelial growth of Alternaria
kikuchiana Tanaka and Colletotrichum orbiculare. Which inhibition rates of the methanol extracts of root on the two
pathogens mentioned were 85.49 and 84.78%, the methanol extracts of stem were 98.36 and 75.38%, respectively.
Besides, they have better inhibitory effects to conidial germinations of Alternaria kikuchiana Tanaka, Colletotrichum
orbiculare and Botrytis cinerea. Which inhibition rates of the former on the three Pathogens mentioned were 90.50, 73.39 and
77.94%, the latter were 89.91, 84.03 and 75.90%, respectively.
Key words: Mirabilis jalapa Linnaeus; extract; antifungal activity; bioassay
紫茉莉(Mirabilis jalapa Linnaeus)俗称胭脂花、野茉
莉、地雷花、草茉莉等,属紫茉莉科(Nyctaginaceae),为
一年生草本植物,性寒、味甘,根、茎、叶、花、种子均
可入药。 有清热解毒、利湿消肿、活经通络的功效[1]。 经
药理研究证明紫茉莉的根有抗癌、抑菌成分,叶有利
尿、儿茶酚胺作用,种子有避孕、溶血和凝血成分[ 2 ]。
刘道贵采用半叶法验证紫茉莉根具有抑制TMV、CMV、
TUMV病毒的物质—紫茉莉抗病毒蛋白(Mirabilis An-
tiviral Protein,MAP)[3]。 徐汉虹综述性提到紫茉莉花含
有生物碱(有效成分为tigonelline)可驱避和麻醉蚊虫,制
成蚊香[4]。 刘明久等用生长速率法测定了紫茉莉浸提液对
桃软腐病菌菌丝生长具有一定的抑制作用[5]。 笔者曾研究
发现,紫茉莉茎氯仿提取物对菜粉蝶(Pieris rapae L.)卵具
有较强的毒杀作用,处理5 d后的校正死亡率达82.76%;
且对小菜蛾具有较强的产卵驱避作用,3 d后的驱避率为
87.40%;紫茉莉茎石油醚提取物对4龄菜粉蝶幼虫具有较
强的触杀活性,在取食3 d后的校正死亡率达85%,取食
5 d后的校正死亡率达100%;4龄菜粉蝶幼虫在取食氯仿提
取物及其正己烷萃取物处理的甘蓝叶碟7 d后的毒杀效果为
87.50%和78.90%[6-7]。 本文着重试验了紫茉莉根、茎和叶提
取物对草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)、梨黑斑病菌
(Alternaria kikuchiana Tanaka)与西瓜炭疽病菌
(Colletotrichum orbiculare)等3种常见瓜果类植物病原真菌
的抑菌活性,旨在为进一步开展植物资源的开发利用及开
展同类研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 供试菌种
梨黑斑病菌(Alternaria kikuchiana Tanaka)、草莓灰霉
病菌(Botrytis cinerea)、西瓜炭疽病菌(Colletotrichum
orbiculare)均由长江大学农学院病理实验室提供。
1.2 供试植物材料
紫茉莉(Mirabilis jalapa Linn eus)于盛花期,从长
江大学西校区农学院分根、茎与叶采集,阴干后分别置
收稿日期:2008-10-29
基金项目:长江大学校基金资助(编号:HNIDI200303)
作者简介:彭跃峰(1975—),女,讲师,硕士,主要从事植物源农药方面的研究。 E-mail :pengyuef@163.com。
应用技术-
148 第48卷农 药 AGROCHEMICALS
45 ℃恒温烘箱内鼓风吹干,再用微型植物试样粉碎机
(DWF-100)粉碎称重,装入棕色瓶贮存备用。
1.3 紫茉莉根、茎与叶提取物的制备
采用索式提取法,准确称取3份50 g紫茉莉根(茎、叶)
干粉,分别用滤纸包好,置于索氏提取器内,加入干粉重
6倍量的有机溶剂(正己烷、氯仿、甲醇)300 mL,回流48 h。
提取液过滤3次后,再置于旋转蒸发器内减压浓缩至稠膏
状,再用丙酮定容至1 kgDW/L(DW为植物干粉重)的母液
后,装入棕色细口瓶内,存于4 ℃冰箱中备用。 具体提取
程序见图1。
径(mm),并根据公式(1)、(2)计算菌丝生长抑菌率。
菌落净生长量(mm)=测量菌落直径(mm)-5 (1)

抑菌率(%)=
对照菌落净生长量-处理菌落净生长量
×100 (2)
对照菌落净生长量
1.5 孢子萌发试验的测定
将母液用丙酮稀释成0.2 gDW/mL提取液,待测病菌
用灭菌水制成孢子悬浮液(低倍镜下每视野30~100个孢
子)。 各取1滴提取液和孢子悬液于凹玻片上混合,使提
取物的质量浓度为0.1 kgDW/L,于25 ℃下恒温培养,以
含50%灭菌水的丙酮溶液作对照,每处理重复3次,对照
重复6次。 24 h后镜检孢子萌发数量(芽管长度大于孢子
短半径视为萌发),并根据公式(3)、(4)计算出孢子萌发率
和抑制率。

萌发率(%)=
孢子萌发个数
×100 (3)
总检查孢子数

抑制率(%)=
对照萌发率-处理萌发率
×100 (4)
对照萌发率
2 结果与分析
2.1 紫茉莉提取物对各病原菌菌丝生长的抑制作用
由表1可知:不同极性溶剂的紫茉莉提取物对梨黑斑病
菌、草莓灰霉病菌和西瓜炭疽病菌菌丝的生长均有显著的
抑制活性。 其中,紫茉莉叶正己烷提取物、茎甲醇提取物
与根甲醇提取物对梨黑斑病菌菌丝的生长有较强的抑制效
果,抑菌率依次为91.84%、98.36%和85.49%;紫茉莉根甲醇
与氯仿提取物对西瓜炭疽病菌菌丝生长也有较好的抑制作
用,抑菌率均达80%以上;而紫茉莉各提取物对草莓灰霉
病菌的抑制效果较差,最好的根甲醇抑菌率仅为46.41%。
图1 紫茉莉连续提取程序
1.4 菌丝生长速率的测定
将1 mL丙酮母液加入到9 mL已融化冷却至45 ℃ PDA
培养基中,摇匀后使紫茉莉提取物质量浓度为0.1 kgDW/L,
再分装到直径为9 cm的培养皿中,并以丙酮作对照,每
处理重复3次,对照重复6次。 接菌时,用直径5 mm的打
孔器从菌丝的边缘打菌饼,放在平板的中央。 置于25 ℃
的恒温培养箱内培养5 d后,用十字交叉法测量菌落的直
表1 紫茉莉提取物对各病原菌菌丝生长的抑制作用
提取物 质量浓度/ 梨黑斑病菌 草莓灰霉病菌 西瓜炭疽病菌
(kg·L-1,干粉重) 菌落净生长量/mm抑菌率/%菌落净生长量/mm 抑菌率/% 菌落净生长量/mm抑菌率/%
叶正己烷 0.1 4.33 91.84b 34.00 25.93e 25.00 48.58e
叶氯仿 0.1 16.67 68.58d 35.80 22.00ef 28.87 40.62f
叶甲醇 0.1 20.27 61.79e 30.20 34.20c 18.07 62.83cd
茎正己烷 0.1 31.57 40.49h 36.30 20.92f 19.40 60.10d
茎氯仿 0.1 21.70 59.10ef 31.63 31.09cd 15.93 67.24c
茎甲醇 0.1 0.87 98.36a 26.67 41.90b 11.97 75.38bc
根正己烷 0.1 24.87 53.12g 33.07 27.95de 18.67 61.60cd
根氯仿 0.1 23.43 55.83fg 32.10 30.07cd 8.73 82.04ab
根甲醇 0.1 7.70 85.49c 24.60 46.41a 7.40 84.78a
对照 53.05 0i 45.90 0g 48.62 0g
注:1)表中为丙酮对照;2)表中数据为对照6次重复、处理3次重复的平均值。
2.2 紫茉莉提取物对各病原真菌孢子萌发抑制效果
方差分析的结果表明:紫茉莉各提取物对梨黑斑病
菌、草莓灰霉病菌和西瓜炭疽病菌孢子的萌发均有不同
程度的抑制作用。 其中紫茉莉根、茎及叶甲醇提取物对
梨黑斑病菌、草莓灰霉病菌与西瓜炭疽病菌孢子萌发均
有较好的抑制作用。 这3种提取物以对梨黑斑病菌孢子
萌发的抑制效果最强,抑制率依次为90.50%、89.91%、
86.53%;对草莓灰霉病菌孢子萌发的抑制效果依次为
第2期 149
77.91%、75.90%、66.92%;对西瓜炭疽病菌孢子萌发
的抑制率依次为73.39%、84.03%、63.50%。 此外,
3 结论与讨论
紫茉莉原产热带美洲,18世纪作为观赏植物引入中
国[8]。 其生性强健,土壤适应能力强,极少病虫害,且生
长速度快,繁殖力强,在我国的安徽、江苏、浙江、江
西、湖北、福建、四川等地均有栽培[9]。 各地逸为野生后
主要生长在路旁和荒地,有扩散蔓延到全国各地的趋势,
现已被定为中国的入侵植物[10]。 目前国内外对其化感作用
和药用性研究的比较多,而对其生物活性研究的比较少。
若从植物源农药的角度上去研究紫茉莉的杀虫抑菌活性,
将其变害为利,会具有十分重要的理论意义和实际价值。
在对紫茉莉抑菌活性初筛的过程中,试验依次用极性
不同的正己烷、氯仿、甲醇溶剂对紫茉莉各部位活性物质
进行了连续的提取,即将样品先经正己烷提取,其渣继以
氯仿提取,之后其渣再以甲醇提取。 该提取程序可将大
多数有效的抑菌成分提取出来,以防止活性成分“漏
筛”,并进一步明确起抑菌的活性物质是属于非极性成分
还是极性成分,为以后的分离打下基础。 室内生物活性
测定的结果显示,不同极性的紫茉莉提取物对3种供试病
原菌的抑制作用有明显的差异。 以紫茉莉根和茎甲醇提
取物的抑制效果最好。 而且两者对梨黑斑病菌的孢子萌
发和菌丝生长的抑制作用最强,其次为西瓜炭疽病菌,对
草莓灰霉病菌的抑制效果最差。 这进一步表明紫茉莉植
物中起抑菌作用的活性成分主要集中在根茎部位,且抑菌
紫茉莉根氯仿提取物对西瓜炭疽病菌孢子萌发也有较
好的抑制作用,见表2。
表2 紫茉莉提取物对病原菌的孢子萌发抑制作用
提取物 质量浓度/ 梨黑斑病菌 草莓灰霉病菌 西瓜炭疽病菌
(kg·L-1,干粉重) 萌发率/% 抑菌率/% 萌发率/% 抑菌率/% 萌发率/% 抑菌率/%
叶正己烷 0.1 59.79 34.78e 69.33 15.05ef 42.33 51.72de
叶氯仿 0.1 77.10 15.89f 64.00 21.58e 39.00 55.52cd
叶甲醇 0.1 12.35 86.53b 27.00 66.92b 32.00 63.50c
茎正己烷 0.1 33.48 63.48d 55.00 32.60d 55.67 36.50e
茎氯仿 0.1 27.30 70.22cd 49.67 39.14cd 37.00 57.79cd
茎甲醇 0.1 9.25 89.91a 19.67 75.90a 14.00 84.03a
根正己烷 0.1 67.06 26.85ef 74.33 8.92f 61.67 29.66f
根氯仿 0.1 25.95 71.69c 41.00 49.76c 25.33 71.11b
根甲醇 0.1 8.71 90.50a 18.00 77.94a 23.33 73.39b
对照 91.67 0g 81.61 0g 87.67 0g
注:1)表中对照为含50%灭菌水的丙酮溶液对照;2)表中数据为对照重复6次、每处理重复3次的平均值。
活性成分主要为强极性物质,甲醇为其有效提取溶剂。
此外,本文仅对紫茉莉抑菌活性进行了室内初步的研
究,至于其活性成分是什么物质,还有待今后对其提取物
作进一步的分离提纯,并需作进一步的大田验证,为今后
植物源杀菌剂的开发提供了理论依据。
参考文献:
[1]彭学苏. 花卉[M]. 合肥: 安徽科学技术出版社, 1982: 241.
[2]中国科学院上海药物研究所. 中草药有效成分的提取与分离[M].
上海: 上海科学出版社, 1986.
[3]刘道贵, 程伟星, 汤牛根, 等. 植物抽提物防治植物病毒病的
研究[J]. 安徽农业科学, 2000, 28(6): 764-766.
[4]徐汉虹. 杀虫植物与植物性杀虫剂[M]. 北京: 中国农业出版
社, 2001: 386.
[5]刘明久, 许桂芳. 三种入侵植物浸提液对桃软腐病菌菌丝生长
的抑制作用[J]. 氨基酸和生物资源, 2008, 30(2): 9-11.
[6]彭跃峰, 鲁红学, 周勇. 紫茉莉茎提取物的生物活性研究[J]. 贵
州农业科学, 2006, 34(6): 22-24.
[7]彭跃峰, 鲁红学, 刘铁铮. 紫茉莉茎提取物及其萃取物对菜粉
蝶幼虫生物活性[J]. 安徽农业科学, 2007, 35(13): 3907-3908,
3937.
[8]徐海根, 强胜. 中国外来入侵物种编目[M]. 北京: 中国环境科
学出版社, 2004.
[9]李西安, 李丕高, 曹庆生, 等. 陕北紫茉莉种子的化学成分研
究[J]. 延安大学学报(自然科学版), 2002, 21(4): 42-43.
[10]周晓奎, 马丹炜, 何薇, 等. 入侵植物紫茉莉遗传毒性的初步
研究[J]. 西南农业学报, 2008, 21(1): 152-155.
责任编辑:赵平
[3]卫生部食品卫生监督检验所. GB/T 5009.146-2 03. 植物性
食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的测定[S]. 北京:
中国标准出版社, 2003.
[4]广东省食品卫生监督检验所. GB/T 5009.110-2 03. 植物性
食品中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯残留量的测定[S]. 北
京: 中国标准出版社, 2003.
[5]农业部环境监督检验测试中心(天津). NY/T 761.2.2008. 蔬
菜、水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯多残
留农药测定[S]. 北京: 中国农业出版社, 2008.
[6]上海市计量技术研究所. JJG 196-19 . 中华人民共和国国
家计量检定规程[S]. 北京: 中国计量出版社, 1996.
责任编辑:李新
(上接第129页)
彭跃峰,等: 紫茉莉提取物的抑菌活性