全 文 ：·种子检验·
收稿日期:2009-09-28
基金项目:公益性行业(农业)科技专项经费项目(nyhyzx3-38)。
作者简介:包建平(1977-),女 ,新疆人;在读博士生 ,主要从事种子生
理研究;E-mail:baobao-xinjiang@ 126.com。
豆梨和榅桲种子生活力的快速测定
包建平 , 张绍铃 , 成 希 , 崔艳波 , 刘 妮
(南京农业大学园艺学院 , 江苏 南京 210095)
StudyonDeterminatingVigorofPryusocalleryanadecaisneand
CydoniaoblongaMil.SeedsRapidly
BAOJian-ping, ZHANGShao-ling, CHENGXi, CUIYan-bo, LIUNi
摘要:对豆梨和榅桲种子生活力测定方法和测定条件进行了研
究。结果表明 ,去种皮种子的染色率显著高于有种皮的。 用红
墨水法 、靛蓝法 、I-KI法和 TTC法测定去种皮的豆梨和榅桲种
子生活力 ,以 TTC法的染色率最高。去种皮的豆梨种子 , 在 30
℃的温度 、0.9%的 TTC浓度和 7h的染色时间下 , 可获得最佳
染色效果;而去种皮的榅桲种子 , 则在 30 ℃的温度 、 0.9%的
TTC浓度和 8h的染色时间下 , 可获得最佳染色效果。
关键词: 豆梨;榅桲;生活力
中图分类号: S330.3 +1 文献标志码: A
文章编号: 1001-4705(2010)01-0119-04
种子生活力是决定种子或种胚在发芽和出苗期间
的活力水平和行为的种子特性的综合表现[ 1] 。种子
生活力的测定 ,是种子检验工作的一个重要组成部分 ,
种子生活力测定方法则是人们一直关注的问题之一 。
目前 ,测定种子生活力的方法有生理测定法 、生化测定
法 、物理测定法 、生体染色及其他组织化学测定法 、以
及种子形态特征 ,物理性状的鉴定[ 2] 。许多植物种子
生活力测定方法已有报道[ 3 ～ 7] ,但豆梨和榅桲种子生
活力测定方法的研究则是空白。种子发芽法是一种能
够准确地反映种子生活力的测定方法。豆梨和榅桲种
子有休眠特性 ,不经层积处理 ,其种子发芽率低;采用
层积处理 ,时间较长 ,给用发芽法测定种子的生活力带
来了困难 。研究了药剂种类 、药剂浓度 、染色温度 、染
色时间对快速测定豆梨和榅桲种子生活力的影响 ,旨
在探索豆梨和榅桲种子生活力快速测定的最佳条件 ,
以期建立和筛选出准确 、简便 、快捷的测定方法 ,为贮
藏豆梨和榅桲种子生活力的鉴定提供可靠的依据 。
1 材料和方法
1.1 材 料
豆梨和榅桲种子分别采集于河南省和新疆维吾尔
自治区。采集后 ,在室温自然条件下干燥 ,挑选饱满 、
发育完好 、无破损的种子 。
1.2 研究方法
1.2.1 种子预处理
预处理试验设 2个水平 ,即全部去种皮和不去种
皮。每处理 100粒种子 ,重复 3次 ,加入 TTC溶液以完
全淹没种子为宜 , 在黑暗 25℃条件下染色 。
生活力(%)=有生活力种子数 /供试验种子数 ×
100%
1.2.2 TTC法测定种子生活力
(1)不同浓度的处理:参考宋自力 [ 8]的方法。将
TTC溶液分别配成 0.1%、 0.3%、 0.5%、 0.7%、
0.9%、1.1%等 6种溶液 ,存放于棕色试剂瓶中避光保
存。用刀片将去种皮的种子纵切成两瓣 ,取半粒种子
放入装有 TTC溶液的小试管染色。以下试验的种子
均为去种皮的种子 。
(2)不同浸种时间的处理:种子用 0.9%TTC溶液
分别染色 1、2、3、4、5、6、7、8、9h。
(3)不同温度下的处理:种子放入 0.9%TTC溶液
中 ,分别在 20℃、25℃、30℃、35℃条件下染色。
1.2.3 红墨水法测定种子生活力
此法参考侯福林的种子活力的快速测定方法 [ 9] 。
红墨水浓度分别为:5%、7%、9%、11%。
1.2.4 靛蓝法测定种子生活力
参考郑光华的种子快速测定法 [ 10] 。
1.2.5 I-KI法测定种子生活力
参考李合生的测定方法 [ 11] 。
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种子检验 包建平 等:豆梨和榅桲种子生活力的快速测定
DOI :10.16590/j.cnki.1001-4705.2010.02.071
2 结果分析
2.1 预处理方法对种子生活力测定结果的影响
预处理对豆梨和榅桲种子的染色率有显著的影响
(图 1)。有种皮的种子在同样处理条件下 ,豆梨和榅
桲的染色率均未达到 8%;而去种皮的豆梨和榅桲种
子染色率均高达 95%以上 ,两种处理差异显著 。这表
明种皮影响种子对 TTC的通透性 ,进而影响显色效
果。同时还观察到 ,去种皮种子的染色速度比有种皮
种子的染色速度要快得多。因此 ,在快速检测豆梨和
榅桲种子的生活力时 ,应采用去掉种皮的种子。
图 1 不同预处理对豆梨和榅桲的染色率影响
2.2 不同测定方法所测定的豆梨和榅桲种子生活力
的差异
由图 2可知 ,豆梨和榅桲种子的染色率因测定方
法不同而有显著差异。 4种方法中 ,豆梨种子染色率
为TTC>红墨水 >靛蓝 >I-KI;榅桲种子染色率为 TTC
>红墨水 >I-KI>靛蓝。豆梨和榅桲种子均以 TTC法
染色率最高 ,分别为 96.67%、95.33%;其次为红墨水
法 ,豆梨和榅桲种子的染色率分别为 92.45%、
89.29%。
图 2 四种生活力测定方法的比较
2.3 染色时间对 TTC法测定的种子活力的影响
从图 3可看出 ,染色率与染色时间密切相关 。染
色 1h时 ,没有一粒种子的种胚被染色;染色 2h时 ,豆
梨和榅桲种子的染色率分别为 20.67%、 23.83%;
3 ～ 7h之间 ,随着染色时间的延长 ,染色率逐渐增加;
在 7h和 8h时 ,豆梨和榅桲种子的染色率分别达到最
大值 ,为 98.24%和 97.00%;随后种子的染色率有所
下降 。
图 3 染色时间对 TTC法测定豆梨和榅桲种子的影响
2.4 TTC浓度对所测种子生活力的影响
豆梨和榅桲种子在不同 TTC浓度下的生活力测
定结果见图 4。随着温度升高 ,染色率逐渐增加。在
0.1%时已开始染色 ,但显色反应过程较慢;至 0.9%
时 ,出现染色高峰 ,此时豆梨和榅桲种子的染色率分别
为 96.24%、95.83%;在 0.1%、0.3%、0.5%、0.7%和
1.1%TTC溶液中 ,豆梨种子的染色率分别为61.33%、
64.72%、79.20%、84.92%、94.07%,榅桲种子的染色
率分别为 52.96%、 66.73%、 71.92%、 81.16%、
95.00%。因此 ,染色浓度以 0.9%为宜 ,再增大浓度 ,
染色率差异不显著 。
图 4 TTC浓度对染色率的影响
2.5 不同温度对豆梨和榅桲种子 TTC法染色影响
由图 5可见 ,在不同温度下 ,豆梨和榅桲种子的染
色效果不一样 。 20 ～ 30℃之间 ,随着温度的升高 ,其
染色率随之增加。 30℃的染色效果最佳 ,可观察到有
97.53%的豆梨种子和 96.79%的榅桲种子被染色 ,而
35℃的染色率与 30℃染色率接近 ,但不如 30℃下的
染色效果好。至 40℃时 ,豆梨和榅桲种子的染色率分
别为 92.64%、95.13%,较 35℃下的有所下降 ,分别下
降 4.89%、1.66%。因此 , 30 ℃是豆梨和榅桲种子的
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第 29卷 第 2期 2010年 2月 种 子 (Seed) Vol.29 No.2 Feb. 2010
最佳染色温度 。
2.6 红墨水浓度对所测种子生活力的影响
红墨水浓度对豆梨和榅桲种子生活力测定有很大
的影响(图 6)。红墨水浓度越高 ,豆梨和榅桲种子的
染色率越高。当红墨水浓度达到 1.1%时 ,豆梨和榅
桲种子的染色率最高 ,分别为 92.00%和 95.33%。
图 5 温度对 TTC法测定豆梨和榅桲种子染色率的影响
图 6 红墨水浓度对种子染色率的影响
图 7 染色时间对 I-KI法测定豆梨和榅桲种子染色率的影响
2.7 染色时间对 I-KI法测定豆梨和榅桲种子的影响
由图 7可知 ,随着染色时间的延长 ,染色率随之增
加。在第 1天 ,由于染色时间短 ,种子的染色率均低于
20%,染色效果不显著 ,其中有 2 ～ 3粒种子因染色不
够充分而无法确定其有无生活力。染色 3d时 ,观察
种子切面可明确区分有无生活力 ,豆梨和榅桲种子的
染色率分别为 77.67%和 87.00%。豆梨和榅桲种子
最佳染色结果出现在第 5天和第 4天 ,染色率分别为
83.75%、88.46%。
3 讨 论
种子生活力对种子出苗整齐度 、植株生长和产量
均有影响 。在生产上 ,根据实际情况 ,选择正确的种子
生活力测定方法 ,使结果能准确 、快速地反映种子的发
芽率 ,有利于节省运输 、播种和耕作的费用 [ 12] 。本研
究采取的 4种方法测定豆梨和榅桲种子的生活力 ,均
以 TTC法的染色率最高 ,染色时间短 ,易鉴定。红墨
水法是日常生活中测定种子生活力常用的方法 ,简单
快速 ,经济准确 [ 13] 。靛蓝和 I-KI的染色时间较长。因
此 ,在快速测定豆梨和榅桲种子的生活力时 , TTC法和
红墨水法较好 。
TTC法是种子检验规程中生活力测定的标准方
法[ 14] 。在染色过程中 ,预处理 、溶液浓度 、温度和时间
对种子染色速度皆有影响 ,后三者之间关系密切 [ 15] 。
用 TTC法对豆梨和榅桲种子进行生活力测定时 ,应全
部去种皮 , 0.9%TTC溶液的染色率最高。在不同的温
度条件下 ,豆梨和榅桲种子染色率有较大差异 ,但二者
在 30℃时 ,染色率最高。试验观察到 ,在一定温度下 ,
豆梨和榅桲种子随着 TTC溶液浓度的增加 ,染色率增
加 ,染色速度加快 ,染色时间缩短。在较低温度下 ,随
着浓度的降低而染色时间显著地延长;在较高温度下 ,
浓度大小的影响渐减 。温度的影响大于浓度 ,是影响
染色速度的最主要因素 ,浓度次之 ,预处理亦有相当影
响。通常可适当提高温度 ,改进预处理方法 ,能比增大
浓度的效果更好[ 16] 。
控制适宜的染色时间十分重要 ,否则染成的颜色
不理想 , 给鉴定带来困难 ,影响测定结果。 TTC法测
定豆梨和榅桲种子最佳染色率分别出现在 7h和 8h,
I-KI法分别出现在第 5天和第 4天。用 TTC法 、红墨
水法 、靛蓝法和 I-KI法分析判断结果时 ,可以与胚的
结构和形态特征相结合 ,同时观察胚的健壮度 ,有助于
找出种子的衰弱度和成因 ,可及时为收获 、清选 、加工
处理 、贮存和调运工作提供指导意见。
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(转下页)
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种子检验 包建平 等:豆梨和榅桲种子生活力的快速测定
(接上页)
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收稿日期:2009-11-05
作者简介:田茂盛(1965-),男 ,高级农艺师 ,主要从事农业环境 、农业
投入品及农产品农药残毒检测工作;E-mail:xxnjtmsh800@
tom.com。
农作物种子发芽试验不确定度评定的探讨
田茂盛
(湘西自治州农产品质量检验检测中心 , 湖南 吉首 416000)
DiscussiononAssessingUncertaintyofAgricultrualSeedGerminationTest
TIANMao-sheng
摘要:对种子发芽试验结果不确定度的评定与表示进行了探
讨 ,认为种子发芽试验结果的不确定度以 95%置信水平的置信
区间的半宽表示为宜。同时 ,应用平均发芽率加不确定度来表
示发芽试验结果 ,可以更加直观地反映检测结果的可靠性。
关键词: 种子;发芽试验;不确定度;评定
中图分类号: S339.3 文献标志码: A
文章编号: 1001-4705(2010)01-0122-02
测量不确定度的评定 ,在其他检测方面已广泛运
用。目前 ,判定种子质量检测结果数据的可靠性时仍
使用最大容许差距 。为满足当前实验室检测结果数据
比较 ,须采用测量不确定度的要求 ,现就农作物种子质
量检测中发芽试验结果不确定度的评定进行探讨 。
1 发芽试验数据统计模式与假设
1.1 数据统计模式与假设
种子发芽试验遵循二项分布 [ 1] (农作物种子检验
员考核学习读本 P124)。它是一种离散概率分布 ,其
概率函数为[ 2] :
P(X=x)= nxpx(1-p)n-x, x=1, 2 , …n
式中:0
x! (n-x)! 。
1.2 二项分布的极限
如果试验次数 n适当大 ,例如 ,大于 30,而 p值又
不过于小 ,例如不靠近 0值 ,并且 np及 nq均不少于 5
时 ,那么 ,这个二项分布将趋近正态分布 [ 3] 。
鉴于在进行种子发芽检验时 ,每次检验 100粒种
子 , 4次重复 ,相于当做了 400次试验 。因此 ,只要种
子的发芽率不是特别低 ,例如接近于 0,那么 ,种子发
芽试验结果则可以看做连续性的正态分布。
2 种子发芽试验不确定度的 A类评定
2.1 种子发芽试验结果不确定度的表示
测量不确定度的表示 ,可以是标准差或其倍数 ,或
是说明了置信水准的区间的半宽。以标准差表示的不
确定度称为标准不确定度 ,以 u表示。以标准差的倍
数表示的不确定度称为扩展不确定度 ,以 U表示 。扩
展不确定度表明了具有较大置概率的区间的半宽
度[ 4] 。种子发芽试验结果的不确定度以扩展不确定
度表示比较合理 ,可以比较清楚地说明发芽试验结果
的取值范围。因此 ,种子发芽试验结果的测量不确定
度以 Up表示 , p表示置信水平 。实际工作中 , p一般应
取 95%,可得到较小的分散性 。若 p取 99%,可导致
置信区间过大而使结果的分散性加大。
2.2 发芽试验不确定度来源分析
2.2.1 扦样所引起的不确定度
严格按 GB/T3543.1-3543.7-1995农作物种子
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第 29卷 第 2期 2010年 2月 种 子 (Seed) Vol.29 No.2 Feb. 2010