全 文 ：收稿日期:2014-04-09
基金项目:国家大学生创新创业计划训练项目(201210694032);科技部国家科技支撑计划(2011BA113B6)
作者简介:普布多吉(1991-)，男，在读本科生，专业方向:药学;Tel:0891-6832839，E-mail:545842262@ qq. com。
* 通讯作者:聂丽娟，Tel:0891-6826478，E-mail:ester_lijuan@ 163. com。
HPLC测定西藏不同海拔、不同直径喜马拉雅
紫茉莉根中胡芦巴碱的含量
普布多吉，巴桑卓玛，卓玛央宗，聂丽娟* ，王聚乐，阿呷尔布，卓玛东智
(西藏大学医学院，西藏 拉萨 850000)
摘要 目的:建立喜马拉雅紫茉莉根中胡芦巴碱含量测定的 HPLC 法，考察海拔和生长年限对药材中胡芦巴
碱含量的影响。方法:采用 Agilent Porlaris-NH2色谱柱，流动相乙腈-水(87∶ 13)，检测波长 264 nm，测定不同海拔、
不同直径的喜马拉雅紫茉莉根中胡芦巴碱的含量。以同一地点的药材直径大小反映药材生长年限的长短。结果:
胡芦巴碱浓度在 1. 0109 ～ 101. 9 μg /mL范围内与峰面积线性关系良好，r = 0. 9997;平均加样回收率 95. 7%，ＲSD
为 1. 12%(n = 9)。海拔 2 900 m药材中胡芦巴碱含量为 171. 5 mg /kg，海拔 3 630 m 以上药材平均含量为 267. 3
mg /kg;拉萨市药材直径从 1. 5 ～ 7. 5 cm，胡芦巴碱含量依次为 309. 26、319. 86、173. 85、197. 91 mg /kg。结论:喜马拉
雅紫茉莉药材中胡芦巴碱的含量与海拔、药材生长年限有关，海拔较高的药材含量较高;药材生长到一定年限后，
胡芦巴碱含量显著下降。
关键词 喜马拉雅紫茉莉;胡芦巴碱;海拔;生长年限
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2015)02-0263-02
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2015. 02. 013
喜马拉雅紫茉莉 Mirabilis himalaica(Edgew. )
Heim. 为紫茉莉科紫茉莉属植物，一年或多年生草
本，以根入药，分布于我国西藏东部和喜马拉雅山
区，以及川、滇部分地区，藏医中作“巴朱”用药。传
统藏医理论认为，该药有温肾、生肌、利尿、干“黄
水”之功效，主治胃寒、肾寒、下身寒、阳痿、浮肿、膀
胱结石、腰痛、关节痛、“黄水病”〔1〕。有文献报道，
喜马拉雅紫茉莉中含有 β-谷甾醇、胡萝卜苷、胡芦
巴碱、挥发油、甾体、三萜、神经酰胺、不饱和脂肪酸
酯等成分〔2，3〕。现代药理研究表明，胡芦巴碱同时
具有抗肿瘤和降血糖活性〔4〕，可作为指标成分，用
于喜马拉雅紫茉莉根药材初步的质量控制。已有文
献〔5〕报道人工种植和野生喜马拉雅紫茉莉中胡芦
巴碱的含量测定。本研究进一步考察海拔和生长年
限对喜马拉雅紫茉莉根药材中胡芦巴碱含量的影
响，为该药材的合理利用提供理论指导。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 HT2010A 液相色谱仪(日本岛津公
司);Mini-1240 紫外分光光度计(日本岛津公司);
FA2004B万分之一电子天平(上海精密科学仪器有
限公司);XP6 百万分之一电子天平(瑞士 MET-
TLEＲ TOLEDO公司);KH-250DE 型数控超声波清
洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)。
1. 2 药品与试剂 甲醇和乙腈均为色谱纯，天津
市科密欧化学试剂有限公司;无水乙醇为分析纯，成
都市科龙化工试剂厂;液相用水为娃哈哈瓶装饮用
纯净水。胡芦巴碱对照品(批号:MVST-110 60201)
购于成都曼斯特生物科技有限公司。喜马拉雅紫茉
莉根药材分别采自西藏林芝(人工种植)、拉萨市、
扎囊县、尼木县，经笔者卓玛东智教授鉴定为喜马拉
雅紫茉莉 Mirabilis himalaica(Edgew. )Heim. 的根;
各地区采集的野生药材分别混合作一个试样。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:Agilent Polaris NH2柱(250
mm ×4. 6 mm，5 μm);流动相:乙腈-水(87 ∶ 13);流
速:1. 0 mL /min;柱温:25 ℃;检测波长:264 nm;进
样体积:10 μL。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取胡芦巴碱对照
品 25. 272 mg，置 25 mL量瓶，加甲醇定容并超声溶
解，得 1. 011 mg /mL 的胡芦巴碱对照品储备液。将
储备液分别稀释至 505. 44、202. 18、101. 09、50. 544、
10. 109、2. 0218、1. 0109 μg /mL 作为对照品溶液，低
温保存备用。
2. 3 供试品溶液的制备 喜马拉雅紫茉莉根药材
样品分别按直径分类，切片，阴干，粉碎。精密称取
粉末 2. 0 g，加入 30 mL 甲醇，浸泡后超声(250 W，
40 kHz)提取 60 min，经 0. 45 μm 微孔滤膜过滤，即
为供试品溶液。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 线性关系考察:取各浓度对照品溶液，按
·362·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 2 期 2015 年 2 月
“2. 1”项下色谱条件进样，记录峰面积，以对照品溶
液的峰面积为纵坐标，以对照品溶液浓度为横坐标
进行线性回归，回归方程为:y = 38539x + 2975. 7，r
= 0. 9997;线性范围为 1. 0109 ～ 101. 9 μg /mL。
2. 4. 2 精密度试验:同一供试品溶液按“2. 1”项下
色谱条件连续进样 6 次，计算胡芦巴碱峰面积 ＲSD
为 1. 99%。结果表明仪器精密度较好。
2. 4. 3 稳定性试验:取高、中、低 3 个浓度的对照
品溶液，分别于 0、2、4、6 d按“2. 1”项下色谱条件测
定，3 个浓度对照品溶液胡芦巴碱峰面积 ＲSD 分别
为 0. 27%、0. 43%、1. 64%。结果表明待测成分低
温保存 6 d稳定性良好。
2. 4. 4 加样回收率试验:取已知含量的喜马拉雅
紫茉莉根药材样品 3 份，分别加入适量对照品储备
液，按“2. 3”项下方法制备供试品溶液，“2. 1”项下
色谱条件检测，计算加样回收率。高、中、低 3 个浓
度水平的平均加样回收率分别为 96. 0%、95. 9%、
95. 2%，平均回收率 95. 7%，总体 ＲSD 为 1. 12%
(见表 1)。表明检测方法准确度良好。
表 1 加样回收率试验结果
样品
取样量 /g
样品中
含有量 /μg
对照品
加入量 /μg
测定
结果 /μg 回收率
/%
2. 0034 343. 58 107. 59 446. 90 96. 03
2. 0034 343. 58 107. 59 447. 25 96. 36
2. 0034 343. 58 107. 59 443. 94 93. 28
2. 0034 343. 58 430. 39 751. 83 94. 86
2. 0034 343. 58 430. 39 758. 32 96. 36
2. 0034 343. 58 430. 39 759. 23 96. 58
2. 0034 343. 58 1072. 3 1380. 16 96. 67
2. 0034 343. 58 1072. 3 1372. 14 95. 92
2. 0034 343. 58 1072. 3 1368. 22 95. 56
2. 5 样品测定 取“2. 3”项下供试品溶液，按
“2. 1”项下色谱条件测定胡芦巴碱含量。结果见表
2，其中，Z01 为人工栽培药材，YA、YB、YC 分别代表
3 个地区采集的野生药材。
表 2 西藏不同海拔、不同直径喜马拉雅紫茉莉根
药材中胡芦巴碱的含量
样品编号 采集地 海拔 /m 直径 /cm 胡芦巴碱
含量 /(mg /kg)
Z01 林芝 2900 1. 5 ～ 2. 5 171. 50
YA1 扎囊县 3630 4. 0 ～ 4. 5 269. 30
YB1 拉萨市 3700 1. 5 ～ 2. 5 309. 26
YB2 拉萨市 3700 3. 0 ～ 5. 0 319. 86
YB3 拉萨市 3700 5. 0 ～ 6. 0 173. 85
YB4 拉萨市 3700 7. 0 ～ 7. 5 197. 91
YC1 尼木县 3790 3. 5 ～ 4. 0 296. 11
YC2 尼木县 3790 5. 5 ～ 7. 0 305. 13
3 讨论
3. 1 不同海拔喜马拉雅紫茉莉根药材中胡芦巴碱
含量的差异 海拔 2 900 m的种植药材中胡芦巴碱
含量明显低于海拔 3 600 m 以上的野生药材，根据
刘青等〔5〕的研究，人工种植药材含量略高于野生药
材，表明种植药材与野生药材间不存在明显差异，因
此推测本实验结果的差异主要源于海拔的影响。
3. 2 不同直径喜马拉雅紫茉莉根药材中胡芦巴碱
含量的差异 从拉萨市采集到的直径 1. 5 ～ 7. 5 cm
的药材，直径小于 5. 0 cm 的药材含量明显高于直径
大于 5. 0 cm的药材，且药材直径继续增加对含量影
响不明显。由此推测，生长年限对该药材中胡芦巴
碱的含量有明显影响，生长年限较长者含量较低，前
者对后者的影响可能是跳跃式的。从尼木县采集到
的直径 3. 5 ～ 4. 0 cm和 5. 5 ～ 7. 0 cm的药材胡芦巴
碱含量相当，也印证了药材生长年限对胡芦巴碱含
量的影响并非渐变式的。由此说明，到一定年限后，
胡芦巴碱含量显著降低。
4 小结
本研究建立了测定喜马拉雅紫茉莉根药材中胡
芦巴碱含量的 HPLC方法，通过对不同海拔、不同直
径药材中胡芦巴碱的含量进行测定，发现胡芦巴碱
的含量与药材生长的海拔有一定关系。经实验比
较，结合参考文献，推测海拔较高的药材胡芦巴碱含
量较高。然而，由于本实验中只有两个数据比较，这
一推测还有一定的局限，需要更多数据进一步验证。
通过拉萨市采集的 4 组不同直径药材的比较，及尼
木县两组不同直径药材的检测结果辅证，表明喜马
拉雅紫茉莉根在生长初期胡芦巴碱含量相对稳定，
生长到一定年限后，胡芦巴碱的含量显著下降;这一
年限的具体值及其与药材的生长环境是否相关还有
待研究。这一研究结果为藏药喜马拉雅紫茉莉的质
量控制提供了理论指导，有利于该药材的合理利用。
参 考 文 献
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·462· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 2 期 2015 年 2 月