全 文 ：书收稿日期:2012-10-18; 修订日期:2013-02-01
基金项目:河南省教育厅自然科学研究计划项目( No． 2010B180034)
作者简介:赵锦慧( 1979-) ，女( 汉族) ，河南周口人，现任河南省周口师范
学院讲师，硕士学位，主要从事生物技术研究工作．
中草药凤尾草两种提取物的抑菌活性研究
赵锦慧，陈 璨，刘中华，郭 婕
(周口师范学院，河南 周口 466001)
摘要:目的 研究中草药凤尾草两种提取物的抑菌活性。方法 以蒸馏水和 70%乙醇为溶剂，制备中草药凤尾草水提物
和醇提物，进一步制备药液培养基，接种大肠杆菌和金黄葡萄球菌，37℃恒温振荡培养，不同培养时间下测定培养液的
OD值。结果 中草药凤尾草水提物和醇提物质量浓度分别≥62． 5 mg /ml和≥31． 25 mg /ml时对大肠杆菌有抑制作用，水
提物和醇提物质量浓度≥31． 25 mg /ml时对金黄葡萄球菌均有抑制作用。结论 中草药凤尾草两种提取物对两种致病菌
均有抑制作用，对金黄葡萄球菌的抑制效果更明显，醇提物抑菌效果优于水提物。
关键词:凤尾草; 提取物; 抑菌活性
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 05． 036
中图分类号:Ｒ284． 2; Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 05-1110-02
Study on the Bacteriostatic Activity of 2 Kinds of Extracts from Pteris Multifida
ZHAO Jin-hui，CHEN Can，LIU Zhong-hua，GUO Jie
( Zhoukou Normal University，Zhoukou 466001，China)
Abstract: Objective To study the bacteriostatic activity of 2 kinds of extracts from Pteris multifida． Methods Water － extracts
and ethonal － extracts from Pteris multifida were obtained with normal methods，furthermore，the liquid medium with different
mass concentration of extracts from Pteris multifida was prepared，then E． coli and Staphylococcus aureus were inoculated，oscilla-
ted the liquid medium of E． coli and Staphylococcus aureus at 37℃ and determined the values of OD of liquid medium at different
time． Ｒesults E． coli was inhibited when the mass concentration of water － extracts and ethonal － extracts was greater than or e-
qual to 62． 5mg /ml and 31． 25mg /ml respectively，Staphylococcus aureus was inhibited when the mass concentration of water － ex-
tracts and ethonal － extracts was greater than or equal to 31． 25mg /ml ． Conclusion 2 kinds of extracts from Pteris multifida all
had inhibitory action to E． coli and Staphylococcus aureus，the inhibitory effect to Staphylococcus aureus was more obvious，the
bacteriostatic effect of ethonal － extracts was better than that of water － extracts．
Key words: Pteris multifida; Extracts; Bacteriostatic activity
随着饲料工业的快速发展，人工合成的一些饲料添加剂如促
长素、抗生素、激素、防腐剂、调味剂等在饲料中普遍添加，添加剂
的应用对畜牧业起了巨大的推动作用，但其带来的负面效应如耐
药性、药物残留及对人和动物体的毒副作用等已经引起了国内外
广大科研工作者和消费者的关注和忧虑［1］。在当前状况下，具
有安全、纯天然特点的中草药饲料添加剂以其能预防动物疾病、
改善畜禽产品质量、提高畜禽产品产量而日益受到关注，从而促
进了中草药饲料添加剂的应用和发展。凤尾草系凤尾蕨科植物
凤尾草 Pteris multifida Poir．的全草，又名双凤尾、山鸡尾、凤凰草、
井口边草等，性味苦寒，有清热利湿、消肿解毒、凉血止血等功
效［2，3］。关于凤尾草的抗菌作用，国内外相关报道较少。本实验
对凤尾草水提物和醇提物的抑菌活性进行了研究，旨在为开发和
利用中草药饲料抗菌添加剂提供理论依据。
1 仪器和材料
1． 1 仪器 可见分光光度计，高压蒸气灭菌锅，离心机，洁净工作
台，粉碎机，恒温数显培养箱、恒温震荡培养箱、旋转蒸发仪等。
1． 2 材料 凤尾草(Pteris multifida) ，购于周口市同和堂大药店;
大肠杆菌(Escherichia coli) ，金黄葡萄球菌(Staphylococcus au-
reus) ，牛肉膏蛋白胨培养基，由周口师范学院生命科学系提供。
2 方法
2． 1 细菌基本培养基的配制［4］ 配制营养琼脂和营养肉汤培养
基，并调节 pH值为 7． 2。
2． 2 菌种活化及菌液的制备 菌种活化参考赵锦慧等［5］活化方
法。分别挑取少许活化后的两种致病菌放入无菌生理盐水中，摇
匀后制备成菌液，调节菌液的稀释度，使菌体密度为 102 cfu /ml。
2． 3 凤尾草水提取物和醇提取物的制备
2． 3． 1 水提取物 称取凤尾草 50 g放入烧杯中，加 200 ml水，浸
泡 30 min，武火煮沸，文火持续加热 1 h，用纱布过滤后得滤液，滤
渣再用 4 倍水量煎煮 2 次后弃去，将 3 次所得滤液混合，离心，取
上清液，并浓缩至 100 ml，即水提物质量浓度为 0． 5 g /ml，调节
pH值为 7． 2，灭菌后 4 ℃保存备用。
2． 3． 2 醇提取物 将凤尾草粉碎，过 40 目筛，称取粉末 50 g，加
70%乙醇 70 ℃下回流提取 3 次，1． 5 h /次，合并 3 次滤液，离心，
取上清液，挥干溶剂后为醇提物，将醇提物用无水乙醇溶解，蒸馏
水稀释至醇提物质量浓度为 0． 5 g /ml，乙醇终浓度为 20%，调节
pH值为 7． 2，灭菌后 4 ℃保存备用。
2． 4 含不同质量浓度凤尾草水提取物和醇提取物的药液培养基
的制备 在无菌工作台上，将灭菌三角瓶(规格为 150 ml)分成 3组
(3次重复) ，每组 2排，每排 9 个瓶(编号为 A1 ～ A9，B1 ～ B9) ，参
考赵锦慧等［5］方法制备药液培养基，使 A1 ～ A4、B1 ～ B4 瓶中凤尾
草水提物的质量浓度分别为 250，125，62． 5，31． 25 mg /ml。A5 ～
A8、B5 ～ B8瓶中凤尾草醇提物的质量浓度分别为 250，125，62． 5，
31． 25 mg /ml。A9、B9瓶为对照瓶(药液质量浓度为 0 mg /ml)。
2． 5 2 种致病菌的培养 分别取大肠杆菌菌液 0． 5 ml加入 A1 ～
A9 瓶中，再分别取金黄葡萄球菌菌液 0． 5 ml加入 B1 ～ B9 瓶中，
加棉塞封瓶口，37 ℃下震荡培养。另取一个灭菌三角瓶，分别加
入 15 ml营养肉汤培养基、15 ml 无菌水、0． 5 ml 无菌生理盐水，
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 5 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 5
书用作测 OD值时调 0。
2． 6 OD值测定 两种致病菌分别培养 8，16，24，32 h 后，在 600
nm波长处分别测定每瓶样品的光密度值(OD值) ，每个样品测 3
次，求平均 OD值。
3 结果
以凤尾草药液质量浓度为横坐标，上述测定的平均 OD值为
纵坐标作图。见图 1 ～ 4。
图 1 凤尾草水提物对大肠杆菌抑制效果
图 2 凤尾草醇提物对大肠杆菌抑制效果
图 3 凤尾草水提物对金黄葡萄球菌抑制效果
图 4 凤尾草醇提物对金黄葡萄球菌抑制效果
由图 1 ～ 2 知，凤尾草水提物和醇提物质量浓度分别≥62． 5
mg /ml和≥31． 25 mg /ml 时对大肠杆菌有抑制作用;由图 3 ～ 4
知，凤尾草水提物和醇提物质量浓度≥31． 25 mg /ml 时对金黄色
葡萄球菌均有抑制作用。图 1 ～ 4 还显示，凤尾草醇提物对两种
致病菌的抑制效果好于水提物。
从图 1 ～ 4 可以看出，当凤尾草药液质量浓度对两种致病菌
表现出抑制作用时，与对照相比，随凤尾草提取物质量浓度的增
加，OD值呈下降趋势，凤尾草提取物质量浓度越大，OD 值下降
趋势越明显，而且培养金黄葡萄球菌的凤尾草药液培养基的 OD
值下降趋势比培养大肠杆菌的凤尾草药液培养基的 OD 值下降
趋势明显，这表明凤尾草提取物对金黄葡萄球菌的抑制效果优于
对大肠杆菌的抑制效果;同时，在表现出抑制作用的凤尾草药液
质量浓度下，随着培养时间的延长，测得的凤尾草药液培养基的
OD值呈先上升后下降的趋势，说明凤尾草提取物对两种致病菌
的抑菌活性在 24 h后增强。
4 结论与讨论
上述实验结果表明，凤尾草水提物和醇提物对两种常见致病
菌均有抑制作用，醇提物抑菌效果好于水提物。此外，凤尾草对
金黄葡萄球菌的抑制效果优于对大肠杆菌的抑制效果，这与余有
贵等［6］研究结果基本一致。
现代药理研究表明，凤尾草含黄酮类、萜类化合物、甾醇类、
挥发油、苯丙素类等成分，具有广谱抗菌、抗肿瘤、抗病毒作
用［6，7］。凤尾草在我国分布广泛，四季可采，加工简单，应用方
便，疗效显著，毒副作用小，因此具有广泛的开发和利用价值。
由于受到体内消化液及各种酶、激素等的影响，中草药抑菌
有效成分在体内和体外的作用效果不同［8］，凤尾草提取物的体
内抑菌活性有待进一步研究。
本实验以单方药材凤尾草为材料，研究其两种提取物的抑菌
活性，而临床应用上，往往都是将多种中草药混合在一起熬制食
用，今后可以考虑将凤尾草与其它中草药配伍后测试其抑菌活
性，从而为临床应用提供更多的参考资料。
参考文献:
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