全 文 ：·76· Chinese Journal of Information on TCM Dec.2014 Vol.21 No.12
不同产地栽培及野生喜马拉雅紫茉莉中葫芦巴碱含量测定
林辉 1,赵婷 2,仁青加 3,邹慧琴 2,任智宇 2,李佳慧 2,彭莲 2,闫永红 2
1.华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部,湖北 武汉 430030；
2.北京中医药大学,北京 100102；3.西藏藏医学院,西藏 拉萨 850000
摘要：目的 比较不同产地栽培与野生喜马拉雅紫茉莉中所含葫芦巴碱的差异。方法 采用高效液相色谱
法测定喜马拉雅紫茉莉中葫芦巴碱的含量。采用 ZORBAX XDB-CN 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：乙
腈-0.03%冰醋酸(85∶15)；流速：0.8 mL/min；检测波长：265 nm,参比波长：360 nm；柱温：30 ℃。结果 以
峰面积对对照品溶液浓度进行回归计算,得回归方程 A＝23.409C－26.398,r＝0.999 8,葫芦巴碱在 2.004～
200.400 μg/mL 范围内与峰面积线性关系良好,葫芦巴碱的平均回收率为 99.57%,RSD＝1.11%。结论 不同产地
栽培与野生喜马拉雅紫茉莉中葫芦巴碱含量无明显差异,本研究为栽培喜马拉雅紫茉莉药材的使用奠定了基础。
关键词：喜马拉雅紫茉莉；葫芦巴碱；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.12.022
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2014)12-0076-04
Content Determination of Trigonelline in Wild and Cultivated Himalaica Mirabilis of
Different Districts LIN Hui1, ZHAO Ting2, REN Qing-jia3, ZOU Hui-qin2, REN Zhi-yu2, LI Jia-hui2, PENG Lian2,
YAN Yong-hong2 (1.Department of Pharmacy, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of
Science and Technology, Wuhan 430030, China；2.Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100102, China；
3.Tibetan Traditional Medical College, Lhasa 850000, China)
Abstract：Objective To compare differences and similarities of the content of trigonelline in
Himalaica mirabilis of either wild or cultivated materials from different places. Methods An HPLC
method was established to determine the content of trigonelline in Himalaica mirabilis. ZORBAX
XDB-CN column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) was used, with mobile phase of acetonitrile-0.03%
acetic acid (85∶15), flow rate of 0.8 mL/min, detection wavelength of 265 nm, determination
wavelength of 360 nm, and column temperature of 30 ℃. Results Regression calculation was made
on peak area with the reference solution concentration, and then got the regression equation A＝
23.409C－26.398, r＝0.999 8. Trigonelline showed good linear relation with peak area among the
range of 2.004-200.400 μg/mL. The average recovery of trigonelline was 99.57%, RSD＝1.11%.
Conclusion There was no significant difference in the content of trigonelline of either wild or
cultivated materials from different places. This study laid the foundation of application of the
cultivated Himalaica mirabilis.
Key words：Himalaica mirabilis；trigonelline；content determination
喜马拉雅紫茉莉为紫茉莉科植物喜马拉雅紫茉
莉 Mirabilis himalaica (Edgew.) Heim.的干燥根,
药用历史悠久,在藏医药名著《四部医典》和《晶珠
本草》中均有记载。据藏医籍载,喜马拉雅紫茉莉为
五根药的上品,味甘辛,可壮阳、引黄水、治下身寒
症[1],温肾、利尿排石,用于肾寒浮肿、腰及关节痛、

基金项目：北京市青年英才计划(50010402/0101324003)；北京
中医药大学自主选题项目(2013-ZYY-03、500102/0100605076)
通讯作者：闫永红,E-mail：lxdyyh@yeah.net
下腹痛、膀胱结石[2]、各种性病及一些病毒感染[3]。
喜马拉雅紫茉莉为藏医常用成药央宗三宝、二十五味
鬼臼丸、五根散中的重要成分。野生喜马拉雅紫茉莉
分布比较局限,主要分布在西藏、甘肃和青海等地,目
前已基本实现人工栽培,具有广阔的开发前景[4]。但由
于缺乏完善的质量评价标准,无法有效控制药材及其
成药的质量。喜马拉雅紫茉莉中含有的葫芦巴碱为一
种生物碱,现代研究表明,含有该成分的药材多具有
温肾、祛寒、止痛的功效,而葫芦巴碱化合物本身具
有抗肿瘤及降血糖活性[5],因此,测定葫芦巴碱含量对
2014 年 12
喜马拉雅紫
立葫芦巴碱
栽培及野生
为不同产地
依据。
1 仪器与试
BP 110S
D 型电子天
型数控超声
有限公司
Agilent 11
(4.6 mm×2
(4.6 mm×25
0.45 μm 针
喜马拉
购于中国食
(98%,批号
公司。乙腈
纯,水为屈臣
喜马拉
市场(见表
紫茉莉科植
(Edgew.) H
编号
1 中
2 甘
3 甘
4 甘
5 拉
6 拉
7 拉
8 拉
9 拉
10 拉
11 拉
12 安
13 安
14 西
15 西
16 西
17 西
18 西
19 西
月第 21 卷
茉莉的质量
含量测定的
样品进行含
栽培及野生
药
电子天平(
平(十万分之
波清洗器(5
),Agilent
00 色谱工作
50 mm,5 μm
0 mm,5 μm),
筒式微孔滤
雅紫茉莉对
品药品检定
ZN1117BA13
为色谱纯,甲
氏纯净水。
雅紫茉莉药
1),经北京中
物喜马拉雅
eim.的干燥
表 1 喜马拉
来源
国食品药品检定
肃甘南州
肃甘南州
肃甘南州
萨夺底沟
萨夺底沟
萨夺底沟
萨夺底沟
萨夺底沟
萨夺底沟
萨市售
国市售(西藏产
国市售(西藏产
藏扎浪县
藏贡嘎县
藏贡嘎县(基地
藏贡嘎县(基地
藏贡嘎县(基地
藏林芝
第 12 期
控制具有重要
方法,并对所
量测定,比
喜马拉雅紫
万分之一,Sa
一,德国赛多
00 W,40 kHz
1100 型高
站,ZORBAX
),ZORBAX E
2 mL 一次性
膜过滤器。
照药材(批号
研究院。
)购于上海源
醇、乙醇、

材自采或购于
医药大学闫
紫茉莉 Mira
根。
雅紫茉莉药材信
研究院(对照)
)
)
)
)
)

作用。本研
收集的不同
较各样品的
茉莉的应用
rtorius),B
利斯),KQ-
,昆山市超声
效液相色谱
XDB-CN 色
xtend-C18 色
使用无菌注
121395-20
葫芦巴碱对
叶生物科技
冰醋酸等为
拉萨、安国
永红教授鉴
bilis hima
息
野生/栽
野生
野生
野生
野生
野生
野生
野生
野生
野生
野生
栽培
栽培
野生
栽培
栽培
栽培
栽培
野生
中国中医药
究建
产地
差异,
提供
P 211
500DE
仪器
仪,
谱柱
谱柱
射器,
0401)
照品
有限
分析
药材
定为
laica
培


















2
2.

置
口
率
补
2.

容
的
照
10
的
2.

5 μ
0.
柱
2.
各
仪
相
碱
7.
信息杂志
方法与结果
1 供试品溶
取样品(编
50 mL 具塞锥
薄膜密封,称
40 kHz) 4
足减失的质
2 对照品溶
精密称取
量瓶中,加甲
葫芦巴碱对
品溶液,以
.020、20.0
对照品溶液
3 色谱条件
采用 ZOR
m)；流动相
8 mL/min；检
温：30 ℃。
4 系统适用
分别取对
10 μL,按“
进行测定,色
邻色谱峰的
计算不低于
4 min。
图 1 喜
1 2
1 2


液的制备
号5)粗粉(
形瓶中,加
定质量,30
0 min,室温静
量,摇匀,过滤
液的制备
5.01 mg 葫
醇稀释至刻
照品贮备液
甲醇稀释成
40、40.080
。

BAX XDB-CN
：乙腈-0.0
测波长：2

性试验
照品溶液(20
2.3”项下色
谱图见图
分离度大于
2500,拖尾因
注：A.供试
马拉雅紫茉莉中

3 4
3 4

过4号筛)约
甲醇 20 mL,
℃超声提取
置,冷却,再
,即得。
芦巴碱对照
度,得浓度为
。分别精密吸
浓度为 2.
、80.160、
色谱柱(4.6
3%冰醋酸(8
65 nm；参比
.040 μg/mL
谱条件注入
1。结果样品
1.5,理论塔
子为 1.04


A


B
品；B.对照品
葫芦巴碱高效液
5 6
5 6
·77
1 g,精密称
盖上瓶塞,用
(功率 500 W
次称定质量
品,置于 25
200.4 μg/
取一定量的
004、4.008
160.320 μg/
mm×250 m
5∶15)；流速
波长：360 n
)、供试品溶
高效液相色
中葫芦巴碱
板数以葫芦
,保留时间约
相色谱图
t/m
葫芦巴碱
葫芦巴碱
7 8 9
7 8 9
·
定,
封
,频
,
mL
mL
对
、
mL
m,
：
m；
液
谱
和
巴
为


in
·78· Chinese Journal of Information on TCM Dec.2014 Vol.21 No.12
2.5 线性关系考察
吸取“2.2”项下不同浓度的对照品溶液各 10 μL,
按“2.3”项下色谱条件分别测定,以峰面积(A)对对
照品溶液浓度(C)进行回归计算,得回归方程 A＝
23.409C－26.398,r＝0.999 8,结果表明葫芦巴碱在
2.004～200.400 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。
2.6 精密度试验
取浓度为 20.040 μg/mL 的葫芦巴碱对照品溶液
10 μL,连续进样 5次,测定峰面积并计算,结果葫芦巴
碱峰面积的均值为 449.1,RSD＝0.15%,表明仪器精密
度较好。
2.7 稳定性试验
取喜马拉雅紫茉莉供试品溶液(编号 5),在 0、1、
2、4、6、8、12、24 h 分别进样 10 μL,记录峰面积,
结果峰面积均值为 158.9,RSD＝1.62%,表明供试品溶
液在 24 h 内稳定。
2.8 重复性试验
取同一批号(编号 5)样品 6 份,按“2.1”项下方
法制备供试品溶液,按“2.3”项下色谱条件测定,记
录峰面积,结果峰面积均值为 137.5,计算得到样品中
葫芦巴碱平均含量为 0.139 8 mg/g,RSD＝2.19%,表明
本方法重复性较好。
2.9 加样回收率试验
精密称取已知含量喜马拉雅紫茉莉样品(编号 5)
约 1 g,共 6 份,分别精密加入浓度为 200.400 μg/mL
的葫芦巴碱对照品溶液 0.4、0.4、0.7、0.7、1.1、
1.1 mL,按“2.1”项下方法制备供试品溶液,按“2.3”
项下色谱条件进样 10 μL 进行分析,计算加样回收率,
结果见表 2。
表 2 葫芦巴碱加样回收率试验
取样量
(g)
样品中
含量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1.000 8 0.139 9 0.080 16 0.217 9 97.31
1.001 5 0.140 0 0.080 16 0.224 3 100.05
1.001 7 0.140 0 0.140 28 0.282 1 100.01
99.57 1.11
1.000 7 0.139 9 0.140 28 0.286 3 100.03
1.000 6 0.139 9 0.220 44 0.365 5 100.02
1.001 1 0.140 0 0.220 44 0.365 9 100.02
2.10 样品含量测定
取不同编号喜马拉雅紫茉莉样品(各3份)及对照
药材,按“2.1”项下方法制备供试品溶液,按“2.3”
项下色谱条件进行测定,计算葫芦巴碱的含量,结果
见表 3。
表 3 葫芦巴碱含量测定结果(mg/g)
编号 含量 1 含量 2 含量 3 均值 RSD(%)
1 0.506 8 0.502 8 0.507 6 0.505 7 0.52
2 0.238 7 0.239 4 0.248 4 0.242 1 2.24
3 0.207 9 0.210 3 0.212 4 0.210 2 1.06
4 0.181 5 0.185 5 0.185 6 0.184 2 1.27
5 0.156 7 0.157 9 0.160 2 0.158 3 1.12
6 0.193 8 0.192 3 0.190 1 0.192 1 0.98
7 0.136 3 0.135 9 0.141 0 0.137 7 2.08
8 0.141 1 0.138 0 0.138 6 0.139 2 1.17
9 0.106 6 0.105 4 0.116 1 0.109 4 5.34
10 0.120 3 0.116 4 0.117 3 0.118 0 1.74
11 0.162 1 0.159 5 0.164 9 0.162 2 1.66
12 0.168 9 0.169 2 0.169 5 0.169 2 0.18
13 0.155 7 0.155 8 0.155 9 0.155 8 0.05
14 0.131 4 0.128 8 0.140 2 0.133 5 4.48
15 0.172 3 0.157 6 0.159 0 0.163 0 4.96
16 0.210 3 0.212 6 0.212 8 0.211 9 0.65
17 0.131 0 0.132 3 0.132 4 0.131 9 0.60
18 0.143 7 0.150 3 0.142 3 0.145 4 2.95
19 0.294 0 0.289 1 0.286 2 0.289 7 1.35
3 讨论
供试品溶液制备中,分别以甲醇和乙醇为溶剂,
超声提取 40 min,结果甲醇提取样品中葫芦巴碱含量
(峰面积 157.3)明显高于乙醇提取(峰面积 24.0),因
此确定甲醇为提取溶剂。分别超声提取20、30、40 min,
测得其峰面积分别为 126.4、155.8、161.5,表明超声
提取 40 min 含量最高,因此选择超声提取 40 min。
以不同比例乙腈-水、乙腈-冰醋酸、甲醇-水为
流动相进行试验,结果流动相为乙腈-0.03%冰醋酸
(85∶15)时葫芦巴碱保留时间较长,分离度高,稳定
性较好。分别选择氰基柱及 C18 柱进行试验,发现 C18
柱分离效果差、拖尾严重,而氰基柱分离效果较好,保
留时间合适,因此,本试验选择氰基柱作为色谱柱。
样品含量测定结果表明,样品中葫芦巴碱含量较
对照药材低,这可能与药材生长年限有关。本研究采
集的野生药材生长年限不详,而栽培药材由于每个采
收期采挖不完全,导致下一个采收期采集的药材生长
年限不确定。另外,西藏林芝地区药材中葫芦巴碱含
量较高,或与林芝地区良好的生长环境有关；甘肃甘
南州药材中葫芦巴碱含量高于西藏产者；西藏产药材
之间葫芦巴碱含量差别较小；栽培与野生样品中葫芦
巴碱含量也无明显差异。表明生长环境差异可导致药
材中化合物的含量变化,这对栽培品规范化种植的选
址具有重要的参考意义。
2014 年 12 月第 21 卷第 12 期 中国中医药信息杂志 ·79·
知母中牡荆素的分离及盐炙前后含量比较
宋泽璧,吴莹,高慧
辽宁中医药大学药学院,国家中医药管理局中药炮制原理解析重点研究室,
辽宁省中药炮制工程技术研究中心,辽宁 大连 116600
摘要：目的 对知母化学成分进行研究,建立测定知母中牡荆素含量的方法,比较盐炙前后牡荆素含量差异。
方法 采用硅胶柱色谱等技术对知母 70%乙醇提取物进行分离、纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。
采用高效液相色谱法测定,Ecosil 色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),乙腈-0.2%冰醋酸溶液(14.5∶85.5)为流动
相,流速 1.0 mL/min,检测波长 340 nm。结果 该化合物为牡荆素,在 0.039 8～1.99 μg 范围内线性关系良
好,r＝0.999 8,平均回收率为 98.02%,RSD＝0.21%。生知母中牡荆素含量为 0.008 5%,盐知母含量为 0.008 1%。
结论 从知母中首次分离得到牡荆素,所建立的方法准确、专属性强、灵敏度高,知母盐炙后牡荆素含量略降低。
关键词：知母；牡荆素；结构鉴定；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.12.023
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2014)12-0079-03
Separation and Content Comparison of Vitexin from Anemarrhenae Rhizoma Before and
After Salt Processing SONG Ze-bi, WU Ying, GAO Hui (Key Laboratory of Processing Theory Analysis of
State Administration of TCM, Engineering Technology Research Center of TCM Processing of Liaoning Province,
Pharmacy College of Liaoning University of TCM, Dalian 116600, China)
Abstract：Objective To study the chemical components of Anemarrhenae Rhizoma；To establish
a method to determine the content of vitexin；To compare the content difference of vitexin from
Anemarrhenae Rhizoma before and after salt processing. Methods 70% ethanol extract of
Anemarrhenae Rhizoma was separated and purified by silica gel column chromatography
technique, and compound was identified by physicochemical properties and spectral data. HPLC
was used with Ecosil column (4.6 mm×150 mm, 5 μm), mobile phase of acetonitrile-0.2% acetic
acid solution (14.5∶85.5), velocity of 1.0 mL/min, and determine wavelength of 340 nm. Results The
compound was vitexin, a good linearity (r＝0.999 8) in the range of 0.039 8-1.99 μg. The average
recovery rate was 98.02%, RSD＝0.21%. Vitexin content was 0.008 5% in crude Anemarrhenae
Rhizoma, 0.008 1% in processed products. Conclusion This is the first time separation of vitexin
from Anemarrhenae Rhizoma. The method for content determination of vitexin is accurate, specific,
and highly sensitive in the present experiment. Content of vitexin decreases slightly in processed
products of Anemarrhenae Rhizoma compared with crude Anemarrhenae Rhizoma.
Key words：Anemarrhenae Rhizoma；vitexin；structural identification；content determination

基金项目：国家自然科学基金(81102810)；教育部博士学科点
专项基金(20012133120009)
通讯作者：高慧,E-mail：gaohuitcm@163.com
知母为百合科植物知母 Anemarrhena
asphodelloides Bge.的干燥根茎,具有清热泻火、生
津润燥等功效[1]。盐知母是历版《中华人民共和国药
典》收载及临床常用的炮制品种,传统理论认为知母

参考文献：
[1] 帝玛尔·舟增彭措.晶珠本草[M].上海：上海科学技术出版社,1986：88.
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植物资源,1996,15(2)：38-39.
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甘肃科技纵横,2006,35(3)：228,187.
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2012,40(10)：5876-5878,5914.
(收稿日期：2014-07-31；编辑：陈静)