全 文 ：定该化合物为异土木香内酯。
3　讨论
作为一种传统的药物资源 , 土木香在世界各地民间的使用历
史悠久 ,倍半萜是其中的特征性成分。通过反复硅胶柱层析 ,结合
制备薄层层析, 我们从土木香乙醇提取物的石油醚萃取部分分离
得到 13个单体化合物 ,并经理化性质测定和波谱分析确定了所有
化合物的结构。结果表明, 这此化合物均为倍半萜内酯 ,其中大多
具有桉叶烷骨架 , 化合物Ⅳ ～Ⅺ首次从土木香中分离得到。
本课题的研究 ,使我们对土木香的化学成分 , 特别是其中的
倍半萜类成分 ,有了较为全面的认识 , 也为进一步开发其药用价
值和相关质量标准的制订提供了科学依据。
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收稿日期:2007-03-14;　修订日期:2007-06-06
作者简介:熊亚平(1985-),男(汉族),湖北黄冈人 , 现为三峡大学化学与
生命科学学院学生 ,主要从事天然产物的活性成分研究工作.
＊通讯作者简介:但飞君 (1972-),女(汉族), 湖北荆门人 ,现任三峡大学
化学与生命科学学院副教授 ,博士学位 ,主要从事天然产物的应用基础研
究工作.
紫金砂体外抗菌活性的研究
熊亚平 , 但飞君＊ , 陈国华 , 朱　虎 , 汪鋆植
(天然产物研究与利用湖北省重点实验室·三峡大学化学与生命科学学院 ,湖北 宜昌 443002)
摘要:目的 紫金砂提取物及其提取部位抗菌活性的研究。方法 95%乙醇提取 , 系统溶剂萃取分离得到 5个部位 , 采用
纸片扩散法对提取物及提取部位进行体外抗菌活性研究。结果 紫金砂提取物对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌具有抑制作
用 , 氯仿提取部位对大肠杆菌 、枯草芽胞杆菌具有抑制作用 ,正丁醇提取部位对大肠杆菌 、绿脓杆菌具有抑制作用 。结论
紫金砂提取物及提取部位具有抗菌活性。
关键词:紫金砂;　抗菌活性;　提取物;　提取部位
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)11-2740-02
StudyontheAntibacterialActivityofAngelicaPolymorphaMaxim
XIONGYa-ping,DANFei-jun＊ ,CHENGuo-hua,ZHUHu, WANGJun-zhi
(HubeiKeyLaboratoryofNaturalProductsResearchandDevelopment, ColegeofChemistryandLifeSciences,
ChinaThreeGorgesUniversity, HubeiYichang443002, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheanti-bacterialactivityoftheextractanditsextractivefractionsofAngelicapolymorphaMax-
im.MethodsAngelicapolymorphaMaxim.wasextractedwith95% ethanol.Fivefractionswereobtainedbysystematicallysepa-
ratingtheextracts.Antibacterialefectinvitrowastestedusingdiskdiffusionmethod.ResultsTheextractshowedantibacterialac-
tivityagainstStaphylococcusaureusandEscherichiacoli.ThechloroformfractionshowedactivityagainstEscherichiacoliandBacil-
lussubtilis.ThenobutanolfractionshowedactivityagainstEscherichiacoliandPseudomonasaeruginosa.ConclusionTheextract
anditsfractionsofAngelicapolymorphaMaxim.haveanti-bacterialactivitives.
Keywords:AngelicapolymorphaMaxim.;　Anti-bacterialactivity;　Extract;　Extractivefraction
　　土家族常用中药紫金砂 ,为伞形科植物当归属植物白根独活
(又称拐芹)AngelicapolymorphaMaxim.的根 [ 1] 。 主要分布于湖
北 、湖南 、重庆 、陕西省等省区。具有温中散寒 、理气止痛的功效。
民间一直作为香独活入药 , 常用其治疗胃痛 、腹痛 、胸胁痛 、风湿
关节痛 、跌打损伤 、毒蛇咬伤等 , 疗效极佳 [ 2] 。 其化学成分主要
为生物碱 [ 3] 、挥发油 [ 4] 、香豆素 [ 5, 6] 、甾醇 [ 7]等 。文献报道抗菌植
物资源中伞形科较为丰富 ,这其中又以当归属等植物抗菌活性最
强 [ 8] 。在上述文献工作的基础上 , 本实验对伞形科当归属植物
拐芹的根 , 即紫金砂进一步进行体外抗菌实验 (纸片扩散
法 [ 9, 10])的研究 ,发现紫金砂初提物及不同萃取部位具有不同的
抗菌活性。为进一步活性追踪其化学成分提供了依据和导向。
1　器材
1.1　仪器 N-1001型旋转蒸发器(日本 EYELA)、ss-325型压
力蒸气灭菌锅(日本 TOMY)、SPX-1508B型恒温培养箱(天津
泰斯特)、AL204万分之一电子天平(METTLWRTOLEDO)、SW-
CJ-1F型超净工作台(苏州净化设备有限公司)。
1.2 　药材 自采药材 , 2005-07-09采于神农架林区木鱼镇。经
鉴定为伞形科植物当归属植物拐芹(AngelicapolymorphaMax-
im.)的根。
1.3 　试剂 95%乙醇(武汉化工厂 , 化学纯)、石油醚 、三氯甲
烷 、醋酸乙酯 、正丁醇等(天津博迪化学试剂 分析纯);102型滤
纸(杭州新华造纸厂)。
1.4　培养基 营养肉汤(北京双旋微生物培养基制品厂), 琼脂
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.11　
粉(上海惠兴生化试剂有限公司)。
1.5　菌种 金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌和绿脓杆菌由湖北省宜
昌市中心医院提供 ,枯草芽孢杆菌由湖北省宜昌市三峡大学化学
与生命科学学院微生物室提供。
2　方法与结果
2.1　供试液的制备 取干燥的紫金砂根 , 研磨成细粉 , 过 20目
筛。用 95%乙醇回流提取 , 提取液减压浓缩得总浸膏。 总浸膏
用适量水溶解后 , 依次用石油醚 、氯仿 、醋酸乙酯 、正丁醇分别反
复萃取。各萃取液及最后水溶液减压回收溶剂 ,浓缩得不同极性
部位浸膏。精密称取所得各部位浸膏 1.00g,依次将浸膏配制成
10 ml, 即 10 g/100 ml浓度的药液备用。具体过程及结果见
图 1。
图 1　提取分离流程示意图
2.2 　固体培养基的制备 称取营养琼脂置于三角烧瓶中 , 用去
离子水将其充分溶解 ,取适量脱脂棉塞住瓶口并用滤纸包扎好放
入高压灭菌锅中 , 121 ℃灭菌 15 min, 待冷却到 60 ℃后取出 , 在
无菌操作台上倒入一次性培养皿中 (培养基直径 60cm, 所倒入
的琼脂的厚度为 4 mm)。待冷却凝固后放入冰箱中 , 4℃保存
备用 。
2.3 　菌悬液的制备 取 3只试管 , 分别倒入等量生理盐水至试
管的 1/3处 ,于紫外灯下灭菌 20 min,然后用无菌棉签蘸取新鲜
菌种少量 4 ～ 5个菌落 放入生理盐水充分搅动使细菌分散均匀。
校正菌液浓度与标准比浊管相同 ,即达 015号麦氏比浊管浊度 ,
所有步骤均在无菌操作台上完成。
2.4 　纸片的制备 将无药纸片(材料:滤纸;直径:6mm)放入高
压灭菌锅中 , 121 ℃灭菌 15 min, 取出后置恒温培养箱中干燥备
用。在无菌操作台上用移液器移取 20 μl已配制好的药液均匀
注入已灭菌的纸片上(每药液做 3个纸片), 使药液完全被纸片
吸收 ,待药片上的溶剂挥干后 , 在紫外灯下灭菌 20 min备用。
2.5 　提取物的抑菌实验 分别用无菌移液管吸取上述制备的 4
种供试菌悬液 0.1 ml添加到平板培养基上 , 用无菌三角玻璃涂
布棒涂布均匀 ,同时用乙醇做空白对照。按无菌操作将预先灭菌
烘干并浸蘸提取液的 6 mm滤纸圆片平贴在含菌培养基上 ,在每
只含菌平板上间隔一定的距离贴 3片 , 呈三角状排列 , 共重复 3
次 , 结果取平均值。同时用浸有乙醇的滤纸片做空白对照。培养
皿倒置在培养箱中 , 37 ℃, 培养 24 ～ 48 h,取出测定滤纸片抑菌
圈的直径大小 ,比较抑菌效果。
2.6　紫金砂萃取部位的抑菌实验 石油醚 、氯仿 、醋酸乙酯 、正丁
醇萃取得相应的萃取物 , 用萃取溶剂作对照 , 按 “ 2.5”的方法操
作 , 比较抑菌效果。
2.7　结果 紫金砂乙醇提取物(AP)、石油醚提取部位(APP)、
氯仿提取部位(APC)、醋酸乙酯提取部位(APE)、正丁醇提取部位
(APB)及水部位(APW)经纸片扩散法测定后 , 抗菌活性抑菌圈
直径的实验结果见表 1。
表 1　紫金砂提取物及不同提取部位抑菌环直径 mm
受试菌种 AP APP APC APE APB APW
金黄色葡萄球菌 6 - 2 2 - -
大肠杆菌　　　 6 - 12 - 6 -
绿脓杆菌　　　 - - - - 10 -
枯草孢牙杆菌　 - 4 6 5 2 -
　　“ -”表示抑菌环直径小于 2mm
由表 1可知紫金砂 95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌 、大
肠杆菌有不同程度的抑制作用 ,对绿脓杆菌 、以及枯草芽孢杆菌
无抑制作用。
由表 1结果还可以表明 , 紫金砂氯仿提取部位对大肠杆菌 、
枯草芽孢杆菌具有抑制作用 , 其中对大肠杆菌抑制作用较强 , 对
受试的金黄色葡萄球菌 、绿脓杆菌无抑制作用。紫金砂正丁醇提
取部位对大肠杆菌 、绿脓杆菌具有抑制作用 , 其中对绿脓杆菌抑
制作用较强 ,对受试的金黄色葡萄球菌 、枯草芽孢杆菌无抑制作
用。其石油醚 、醋酸乙酯提取部位只对受试细菌中的枯草芽孢杆
菌有一定的抑制作用 , 对其他 3种则无抑制效果 , 而水提取部位
对受试的 4种细菌均无抑制作用。
3　讨论
紫金砂提取物及提取部位具有的一定抗菌活性。我们将对
紫金砂氯仿和正丁醇提取部位的活性成分做进一步的追踪 , 再
进行抗菌活性的测定 ,最终分离出其具有生物活性的单体成分。
同时 , 该实验为抗菌药物的筛选 、抗菌谱的测定 、药价测定 、提取
过程的追踪等提供了可供参考的数据资料 ,为紫金砂的进一步开
发利用提供了一些基础资料。
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