全 文 ：于老树 , 以黔北地区的银杏叶质量为佳 。 一—干燥后的银杏叶密封 , 并暗处放置一年 ,总黄酮 注 : 本项工作为贵州省自然科学资助项 目昔含量降低较少 ,且温度的变化对其含量影响不大 。 参 考 文 献在模似工业化生产仓储条件下放置 , 含量呈下降趋 1 王英强 , 等 . 广东产银杏叶总黄酮含量变化
势 ,霉变后含量更显著降低 。 因此 , 为保证药 材质 20 1 , 24 (4 =) 247量 ,工业化生产中银杏叶存放时间不宜超过半年 , 尽 2 陈旭 , 等 . 不同采集期银杏叶总黄酮含量变化
可能在密封 、 暗处储存 。 2以x ) , 23 (s ) : 43 9
中药材 ,
中药材 ,
·鉴别 ·
凤尾草的形态组织学研究
广州中医药大学 (广州 51 0 《 )5 ) 刘清飞
南京中医药大学 (南京 21 以 )2 9 ) 秦明珠 王身艳
摘要 对凤尾草各器官的组织构造 、全草粉末 以及抱子的扫描电镜结构进行了系统研究 ,其中凤尾草叶表皮
的气孔 、脉状异形细胞和叶片 、 叶柄 、根茎横切面 以及抱子 、 抱子囊群等均具有一定特征 , 为凤尾草药材鉴别提供了
科学依据 。
关键词 凤尾草 形态组织学
凤尾 草 etP isr m “ It以反衣2 oP ir
. 为威类植物 , 广泛
分布于我国各地 , 民间及临床用全草清热利湿 、 抗菌
消炎 、 消肿止痛 , 凉血止血 , 治疗痢疾 、扁桃体炎 、 肝
炎 , 其根茎用于治疗糖尿病 、 抗肿瘤效佳 。 本文对其
形态组织学进行 了研究 。
1 实验材料与方法
凤尾草 ,全草 , 采 自南京紫金 山 , 经南京 中医药
大学中药学院 中药标本室鉴定 。 S EM 一飞利 浦扫描
电镜 ,临界点干燥仪 。
组织构造与粉末观察 ,采用临时装片法 、 石蜡切
片法 、 组织解离制 片法 。 饱子扫描电镜观察 : 取抱
子 , 用 3%戊二醛浸泡 , 0 . I M 磷酸缓冲液清洗 , 0 504
后固定 ,再用 0 . I M 磷酸缓冲液清洗 ,醋酸异戊醋置
换 , 临界点干燥 。
2 实验结果
2
.
1 叶的组织构造
2
.
1
.
1 叶表面观 :如图 1。 上下表皮细胞垂周壁波
状弯曲 , 可见气孔及少数腺毛 。 气孔主为不定式 , 少
数似直轴式 。 副卫细胞的排列有一定规律 : 气孔靠
近主脉一端被 1 个副卫细胞所完全包围 , 另一端则
与 1 一 3 个副卫细胞 连接 。 腺 毛无柄 ,腺 头 由 2 一 5
个分泌细胞组成 ,长 80 一 125 脚 ,直径 18 一 30 脚 ,细
胞含棕色分泌物 。 羽片表皮层下靠近侧脉处有脉状
异形细胞 , 与侧脉平行共 同支撑叶片 , 使羽片伸展 。
.
704
·
脉状异形细胞细长 , 两端尖 , 细胞壁呈波浪形 , 存在
于营 养 叶 内者壁 薄 , 存 在 于抱 子叶 内者 壁厚 , 长
1690
一 23如脚 , 直径 10 一 15 脚。
图 1 凤尾草叶表皮图
1
. 气孔 2 . 腺毛
2
.
1
.
2 叶横切 面 : 营养叶 : 如图 2 。 ( l) 表皮 : 上下
表皮细胞扁平 , 排列较整齐 。 上下表皮 均可见气孔
及腺毛 , 以下表皮为多 。 ( 2 )叶 肉 : 栅栏组织和海绵
组织分化不明显 , 细胞 内含叶绿体 。 (3) 主脉 : 主脉
上部与下部均 向外突起 。 维管束周韧型 ,其外有内
皮层 , 并可见凯氏点 , 木质部呈 V 字型 。 主脉上下
表皮 内侧可见厚壁组织 , 由 3 一 4 层厚壁细胞组成 。
抱子 叶 : 与营养 叶相 似 。 如图 3。 其 区 别 为 :
( l) 主脉上侧突起 , 可见凹槽 。 ( 2) 主脉两侧可见袍
子囊及饱子囊群盖 。
2
.
1
.
3 叶柄横切面 : 如图 4 。 叶柄基部横切面为圆
中药材第 25 卷第 or 期 2X() 2 年 10 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2002. 10. 005
粒 。 基本组织外侧可见根迹和叶迹维管束 。
图 2 凤尾草营养叶横切面
上表皮 2 . 叶肉细胞 3 . 内皮层 4. 木质部 5. 韧皮
部 6 . 下表皮
图 5凤尾草根茎横切面
1
. 表皮 2 . 维管束 3 . 薄壁细胞
2
.
3 不定根横切面 如图 6 。 (l) 表皮 : 表皮细胞 1
列 ,扁平 。 (2) 皮层 : 皮层细胞多层 , 类圆形 ,其内可
见内皮层 。 ( 3) 维管柱 : 维管束外侧有 2 一 4 层厚壁
细胞 , 由中柱鞘细胞平周分裂形成 。 初生木质部二
原型 , 中间管胞直径大 ,两侧管胞直径小 。 初生韧皮
部位于初生木质部两侧 。
图 3 风尾草抱子叶横切面
1
. 上表层 2 . 叶肉细胞 3 . 下表皮 4 . 韧皮部 5 . 木质
部 6 . 内皮层 7 . 薄壁细胞 8 . 厚壁细胞 9 . 抱子囊
or
. 饱子囊群盖
形 ,上部为梯形 。 ( l) 表皮 : 表皮细胞类圆形 ,外壁稍
增厚 。 ( 2) 基本组织 : 表皮下方厚壁组织 由 4 一 6 层
厚壁细胞组成 。 薄壁细胞内含少量淀粉粒 , 单粒和
复粒 。 (3) 维管束 : 周 韧型 , 呈 V 字形 , 其外有 内皮
层 ,并可见凯氏点 。 木质部由纤维和管胞组成 ,纤维
主要位于 V 字型两侧顶端和基部 。
图 4 凤尾草叶柄横切面
1
. 厚壁组织 2 . 内皮层 3 . 韧皮部 4 . 木质部 5 . 薄壁
细胞
2
.
2 根茎横切面 如图 5 。 横切面圆形或长圆形 。
( l) 表皮 : 1列 ,其上可见棕色粗筛孔鳞片 。 ( 2) 基本
组织 : 基本组织 中有 6 一 8 个分体中柱 , 呈 圆形 、 条
形 、 V 字型 、 U 字型 ,排列成环 , 维管束周韧型 , 其外
可见内皮层 。 薄壁组织 中含少量淀粉粒 ,单粒和复
中药材第 25 卷第 10 期 2X( 犯 年 10 月
图 6 凤尾草不定根横切面
1
. 表皮 2 . 内皮层 3 . 厚壁细胞 4 . 韧皮部 5 . 木质部
6
. 皮层细胞
2
.
4 全草粉末 棕色 。 如图 7 。 ( 1 )叶表皮细胞波
浪式弯曲 , 较长 。 气孔主为不定式 , 少数似直轴式 ,
副卫细胞的排列有一定规律 , 即气孔靠近主脉一端
被一个副卫细胞完全包围 , 另一端则与 1 一 3个 副卫
细胞连接 。 腺毛无柄 , 基部圆形 , 腺头 由 2 一 5 个分
泌细 胞组 成 , 内含棕色分泌物 。 脉状异形细胞 , 长
16卯 一 2 340 脚 ,直径 10 一 巧 脚 。 ( 2 )梯纹管胞 , 长
so
一 108 0脚 , 直径 5 一 巧 脚 。 ( 3) 纤维 ,壁薄 ,长 130
一 1 150 脚 ,直径 5 一 10 娜。 ( 4 )粗筛孔鳞片 , 棕色 ,
长 1印 一 7 80 脚 ,直径 (最宽 ) 30 一 150 脚 。 ( 5) 抱子
囊长圆形或类 圆形 , 直径约 320 脚 ,环带纵行细胞
类长方形 ,外壁薄 , 内壁及侧壁增厚 ;环带纵行细胞
的另一侧细胞类圆形 ,壁薄 ,有利于抱子的散出 。 囊
柄 4 一 6 细胞 , 2 列 , 长短不一 。 抱子极面观类三角
形 ,直径 30 一 50 脚 , 近极面有三裂缝 ,具瘤状或颗
粒状纹饰 ,远极面观纹饰较大 , 呈块状 。 ( 6 )淀粉粒
·
70 5
.
为单粒和复粒 ,脐点为点状 , 无层纹 。
图 7 凤尾草粉末图
1
. 管胞 2 . 木栓细胞 ( a . 顶 面观 b . 侧 面观 ) 3 . 纤维 ( .a
木纤维 b . 韧皮纤维 ) 4 . 鲜片 5 . 表皮细胞 ( a . 气孔 .h
腺毛 ) 6 . 脉状异形 细胞 7 . 淀粉拉 8 . 袍子 9 . 袍子囊
2
.
5 抱子电镜扫描观察 如图 8。 抱 子极 面观类
三角形 。 近极面观有瘤状和颗粒状纹饰 , 有由一点
向三个角延伸的三条隆起的线 , 线平滑而直 ,几达饱
子赤道环 ;远极面观具有瘤状和颗粒状纹饰 。 瘤状
纹饰球形 、 V 字形 、 条形 。 赤道面观扁球形 , 具有一
条沿赤道的环 ,环平滑 , 并偏向于近极面 。
3 小结
本文系统研究 了风尾草各器官的组织构造 、 全
草粉末及抱子扫描 电镜观察 , 发现 了凤尾草叶表皮
的气孔 、脉状异形细胞和叶片 、 叶柄 、 根茎横切 面以
及抱子 、 抱子囊群等特有的特征 , 可作为凤尾草药材
的显微鉴别依据 。
图 8 凤尾草抱子电镜扫描图
a
、
b
. 极面观 c . 赤道 面观
注 : 本 文为江苏省教委自然科学基金 资助项 月 (编 号协粼 )59
参 考 文 献
宋 立人主编 . 中华本草 (精选本 , 卜卷 ) . 北京 : 人 民卫 生
出版社 , 1少关) : 12
江苏省植物研究所 . 江苏植物志 . 南京 : 江苏人 民出版
社 , 19 7 7 : 2 82
杨春澎主编 . 药用植物学 . 上海 : 上海科学技术出版社 ,
l卯 7 二 162 , 17 2
( 2 (X) l
一 0 8 一 13 收稿 )
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706 中药材第 25 卷第 10 期 2《X) 2 年 or 月
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红外光谱法和反相高效液相法鉴别人胎盘和羊胎盘
上海交通大学药学院 (上海 2(幻2喇 ) ) 黄 洁 李晓波
清华大学生物科学与技术 系 (北京 1X( x〕84 ) 王 钊
摘要 胎盘具有很高的药用价值和营养价值 ,但目前市场上销售的人胎盘和 羊胎盘的质量控制方法单一 , 可
靠性较低 。 本文利用红外光谱 ( F】、 I)R 和 反相高效液相 (川无 1 11生C )的方法初步建立了一种鉴别人胎盘和羊胎盘蛋
白水解物的新方法 ,为胎盘质量控制提供参考 。
关键词 胎盘 红外光谱 反相高效液相 质量控制
胎盘俗称衣胞或胎衣 , 中医称为紫河车 。 现代
科学研究证明 ,胎盘中含有胎盘免疫调节因子〔`从转
化生长因子图及膜基质金属蛋白酶阁和妊娠相关糖
蛋白闭等多种蛋白成分 。 同时胎盘还含有促肾 _ L腺
皮质激素释放激素囚等激素成分 , 以及含氮脂多糖 、
红细胞生成素 、 维生素 A 结合蛋白 、 日一内啡肮 、 蛋 一脑
啡肤 ( M e ht io n ine 一 e吐 e p ll a li n , M 一E NK ) 、 强啡肤 ( 1 )y l lor -
p hi n
,
DY N) 和神经肤闹等多种活性成分 , 已有研究者
对此进行 了全面的综述闭 。 胎盘 因具 有抗氧化 、 抗
衰老和免疫调节等多种生物活性 ,长期以来作为珍
贵药材和保健品受到人们重视 。
市场上销售的胎盘 主要有羊胎盘和人胎盘两
种 , 目前一般选用氨基酸总含量作为质量控制标准 。
由于氨基酸易于获得且价格低廉 , 造成 了市场上鱼
目混珠的劣质产品出现 。 同时由于羊胎盘比人胎盘
来源更方便 ,成本更低 , 故市场上又出现了以羊胎盘
冒充人胎盘销售的现象 。 因此 目前急需一种能特异
性区分羊胎盘和人胎盘的质量控制标准 。 又 由于胎
盘是组织生物制剂 , 生产时必须先加胰 蛋白酶以 消
化 ,用常规方法区分人胎盘与羊胎盘的难度就更大
了 。 本研究利用红外光谱和反相高效液相两种方
法 ,初步建立了一种鉴别人胎盘和羊胎盘蛋 白水解
物的新方法 , 为今后建立质量控制标准奠定基础 。
, 材料和方法
1
.
1 待测样品及预处理 人和羊的新鲜胎盘 (由
浙江康德药业有限公 司提供 )经健康检查和 乙肝病
毒检验后洗净绞碎 , 按药典规定加胰酶 印℃ 水解 4
h
, 过滤去渣 ,所得滤液经低温减压浓缩后 ,分别置冷
冻干燥机中冻干备用 (4 ℃保存 ) 。
1
.
2 试剂 甲醇 (天津 市四友生物医学技术有限
公司 ) 、 乙睛 ( D】KM A ) 、 三氟乙酸 ( r r FA , rE DI A ) , 均为
色谱纯 。
1
.
3 仪器 】双l一冷冻干燥 机 (军事 医学科学 院实
验仪 器 厂 ) ; 红 外 光 谱 仪 51姆 ct ~ xG ( PE R K IN
E
ML
E R )和高效液相色谱仪 (Wa et 。 以刃 E H p LC uP 哪
和 W at e二 9 6 二极管阵列检测器 ) 。
1
.
4 伴 IR Z mg 胎盘粉末与 2以〕mg 一干燥澳化钾研细调匀 , 压片后放人仪器中检测 。 扫描 16 次 , 分
辨率 : 4 C雨 , 。
1
.
5 R P
一
H P LC
1
.
5
.
1 上样前准备 : 两种胎盘粉末各称 Zo gm ,用
超纯水定容至 50 而 。 用 0 . 45 拌m 滤膜过滤 , 取 10
川上色谱柱 。
1
.
5
.
2 色谱条件 : 色谱柱 : 2 50 ~ x 4
.
6 ~ 1C
8柱 ;
流速 : 0 . 8 m l/ 而 n ;上样量 : 10 讨 ;柱温 : O4 ℃ ;检测波
长 : 28 0 ln 。 流 动 相 : A : 含 0 . 1% 〕下A 的 水 , B : 含
0
.
1%
r
f FA 的乙睛 。 梯度洗脱见表 。
2 结果与讨论
2
.
1 F Y
一
IR 分析 胎盘的主要成分是活性蛋 白 , 而
蛋白被水解后是多肤和氨基酸 , 所以我们重点讨论
氨基酸和多肤的红外光谱特征峰 。 众所周知 , 肤键
( CO NH )为蛋白质和多肤所特有 , 而氨基酸没有 ,表
现在红外光谱 上即为 , 多肤和 蛋 白质具 有酞胺 工
( 16印 C-m , 附近 )和酞胺 flI ( l2 6( 〕 C m 一 , )的特征吸收 ,
而 氨 基 酸 则 具 有 比多 肤 和 蛋 白 质 更 强 的 梭基
( C 0 0
一
)特征吸收 ( 1以X ) C` ’和 14 10 C爪 ’附近 )和更强
的氨基 ( N+sH )吸收 ( z韶 o C m 一 ,和 z 52 o cm 一 ,附近 )。 从
下 图的红外光谱分析可见 , 羊胎盘的和人胎盘的酞
中药材第 25 卷第 or 期 2以〕2 年 10 月