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臭椿叶乙醇提取物对菜青虫生物活性的影响



全 文 :·植物保护· 北方园艺2016(13):122~124
第一作者简介:李莉(1984-),女,山西沁源人,硕士,实验师,现主
要从事天然产物等研究工作。E-mail:lili_qiji@163.com.
基金项目:长治学院校级科研资助项目(2013204);山西省重点扶
持学科资助项目(20141014)。
收稿日期:2015-12-16
DOI:10.11937/bfyy.201613032
臭椿叶乙醇提取物对菜青虫生物活性的影响
李   莉,金   山,铁   军
(长治学院 生物科学与技术系,山西 长治046011)
  摘 要:以菜青虫为研究对象,利用95%乙醇溶剂萃取臭椿叶中有效成分,测定了不同浓度
的臭椿叶乙醇提取物对菜青虫生物活性的影响。结果表明:臭椿叶乙醇提取物对菜青虫具有明
显的拒食和生长抑制作用,毒杀作用较好,且呈现出良好的剂量效应和时间效应。处理后24、
48h的半致死浓度(LC50)分别为20.14、14.22g·L-1,非选择拒食中浓度(AFC50)分别为13.73、
8.45g·L-1,生长抑制中浓度分别为10.89、8.09g·L-1。
关键词:臭椿;提取物;生物活性;菜青虫
中图分类号:S 482.5 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2016)13-0122-03
  菜青虫是菜粉蝶(Pieris rapae L.)的幼虫,属鳞翅
目(Lepidoptera)粉蝶科(Pieridae),主要危害白菜、甘蓝、
油菜等十字花科植物,害虫高发期不仅导致蔬菜大面积
减产,还可能引起软腐病的发生,危害十分严重。长期
以来,主要依赖化学农药进行防治,然而由于高毒农药
大量使用所引发的负面效应已引起世界范围的广泛关
注。植物源农药以其低毒、高效、环保、低成本等优点成
为新农药开发的一个重要方向。臭椿(Ailanthus altissi-
ma(Mil.)Swingle)属苦木科(Simaroubaceae DC.)臭椿
属(Ailanthus Desf.)植物,在我国分布广泛,是一种开发
价值很高的优良树种[1]。目前在利用臭椿提取物进行
病虫害防治方面已取得了一定的进展。研究表明臭椿
提取物对光肩星天牛、蚜虫及仓储害虫生物活性均具有
一定的影响[2-5]。但有关臭椿提取物对农田害虫菜青虫
活性影响的研究鲜有报道。该研究测定臭椿叶乙醇提
取物对菜青虫生物活性的影响,以期为进一步开发利用
臭椿提取物作为生物源农药奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
臭椿(Ailanthus altissima (Mil.)Swingle)采自长
治市老顶山。菜青虫(Pieris rapae L.)采自长治市郊区
未施农药的菜地,实验室饲养,选择生长良好,整齐一致
的4龄幼虫为试验对象。粉碎机LX-02(上海江信科技
有限公司)、RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器
厂)、SHE?ⅢD循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责
任公司)、B5A124S-CW 分析天平(赛多利斯科学仪器有
限公司)、YMJ-C活体叶面积测定仪(浙江托普仪器有限
公司)。主要供试试剂为95%乙醇(上海凌峰化学试剂
有限公司)。
1.2 试验方法
1.2.1 臭椿叶提取物的制备 采集臭椿叶,清洗晾干,
65℃烘干后粉碎过筛。称取粉末100g,加入10倍体积
的95%乙醇溶液,室温下振荡浸提24h,重复2次,合并
滤液并减压浓缩至浸膏,加入少量95%乙醇溶液溶解后
以蒸馏水定容至100g·L-1作为母液,4℃冰箱保存
备用。
1.2.2 臭椿叶提取物对菜青虫的毒杀活性测定 毒杀
作用采用饲喂法[6]测定。将新鲜白菜叶片剪成2cm×
2cm方形叶碟,浸入不同浓度(64、32、16、8、4g·L-1)的
臭椿叶提取液中,2~3s后取出,晾干,置于培养皿中(以
滤纸保湿),接入预先饥饿处理4h的4龄试虫,每20头
为1组,重复4次。对照组仅用蒸馏水处理。分别在24、
48h记录幼虫死亡头数,并计算死亡率。死亡率(%)=试
虫死亡数/试虫总数×100,校正死亡率(%)=(处理组死
亡率-对照组死亡率)/(100-对照组死亡率)×100。
1.2.3 臭椿叶提取物对菜青虫的非选择拒食活性测定
 采用叶碟法[7]测定。将新鲜白菜叶片剪成2cm×
2cm方形叶碟,浸入不同浓度(32、16、8、4、2g·L-1)的
臭椿叶提取液中,2~3s后取出晾干置于培养皿中(以滤
纸保湿),接入预先饥饿处理4h的4龄试虫1头,每个浓
度20个重复。对照组仅用蒸馏水处理。分别于24、48h
后用叶面积测定仪测量取食面积,计算非选择拒食率。非
选择拒食率(%)=(对照组取食面积-处理组取食面
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北方园艺2016(13):122~124 ·植物保护·
积)/对照组取食面积×100。
1.2.4 臭椿嫩叶提取物对菜青虫的生长抑制作用测定
 采用饲喂称重法[8]测定。药剂处理方法同1.2.3。分
别于处理后24、48h称每皿虫体质量,计算生长抑制率。
生长抑制率(%)=(对照组平均增重-处理组平均增
重)/对照组平均增重×100。
1.3 数据分析
试验数据以平均数±SE表示,采用Excel 2003软
件和SPSS 16.0软件进行分析处理,在0.01水平进行单
因素方差分析。
2 结果与分析
2.1 臭椿叶提取物对菜青虫的毒杀活性
由表1可知,臭椿叶提取物对菜青虫具有一定的
毒杀作用,随着浓度的增加,杀虫活性逐渐增强,当浓
度为64g·L-1时,处理后24h校正死亡率达到
90.79%。此外,提取物对菜青虫的杀虫活性也存在时
间效应,随着时间延长,死亡率逐渐增加,半致死浓度
LC50逐渐减小,24h的LC50为20.14g·L-1,是48h
(14.22g·L-1)的1.42倍。
  表1 臭椿叶提取物对4龄菜青虫毒杀活性
  Table 1 Insecticidal activity ofextracts fromAilanthus altissima Swingle against the 4thinstar larvae of Pieris rapae
提取液浓度
Concentration of extracts/(g·L-1)
处理后24h24hours after treatment 处理后48h48hours after treatment
死亡率
Mortality/%
校正死亡率
Corrected mortality/%
死亡率
Mortality/%
校正死亡率
Corrected mortality/%
64  91.25  90.79  95.00  94.74
32  60.00  57.89  71.25  69.74
16  43.75  40.79  55.00  52.63
8  22.50  18.42  36.25  32.89
4  11.25  6.58  16.25  11.84
线性回归方程Linear regressing equation  y=2.251 4x+2.064 0 R2=0.976 9  y=2.191 0x+2.474 1 R2=0.974 5
  注:数据为平均数±标准误差,同列数据后不同字母表示差异显著(P<0.01)。下同。
Note:Data were mean±standard error;diferent letters in the same column meant significant diferences at 0.01level.The same below.
2.2 臭椿叶提取物对菜青虫的非选择拒食活性
由表2可知,臭椿叶提取物对菜青虫有明显的拒食
活性,菜青虫取食处理组叶片的面积与对照组相比差异
极显著(P<0.01)。且取食面积随施药质量浓度的增大而
减小,各处理组之间差异极显著(P<0.01)。质量浓度仅
为8g·L-1时,48h后菜青虫的拒食率可达46.56%。
  表2 臭椿叶提取物对4龄菜青虫的拒食活性
  Table 2 Antifeeding activities of extracts fromAilanthus altissima Swingle against the 4thinstar larvae of Pieris rapae
提取液浓度
Concentration of extracts/(g·L-1)
处理后24h24hours after treatment 处理后48h48hours after treatment
取食面积
Feeding area/cm2
拒食率
Antifeeding rate/%
取食面积
Feeding area/cm2
拒食率
Antifeeding rate/%
32  4.32±0.15f 70.33  6.05±0.44f 77.96
16  6.28±0.43e 56.87  9.88±0.50e 64.01
8  9.43±0.60d 35.23  14.67±0.70d 46.56
4  11.79±0.68c 19.02  17.64±0.98c 35.74
2  13.01±0.88b 10.65  21.87±1.11b 20.33
CK  14.56±0.90a - 27.45±1.79a -
线性回归方程Linear regressing equation  y=1.531 3x+3.258 1 R2=0.995 0  y=1.302 1x+3.793 0 R2=0.995 6
2.3 臭椿叶提取物对菜青虫的生长抑制
由表3可知,臭椿叶提取物对菜青虫的体重增长有
显著的抑制作用,且具有明显的浓度效应和时间效应。
处理组试虫的体重增长抑制率随给药浓度的增加和时
  表3 臭椿叶提取物对4龄菜青虫的生长抑制
  Table 3 Influence of extracts fromAilanthus altissima Swingle on the growth of the 4thinstar larvae of Pieris rapae
提取液浓度
Concentration of extracts
/(g·L-1)
处理前虫重
Weight of larvae before
treatment/mg
处理后24h24hours after treatment 处理后48h48hours after treatment
虫重
Weight of larvae/mg
抑制率
Inhibitory rate/%
虫重
Weight of larvae/mg
抑制率
Inhibitory rate/%
32  161.30±10.00a 175.73±10.61e 79.66  190.92±14.27f 81.14
16  158.19±13.64a 192.28±11.84d 51.96  216.18±13.91e 63.08
8  159.99±9.56a 198.95±11.53cd  45.10  234.33±16.34de  52.67
4  163.02±13.04a 215.25±10.65b 26.40  270.88±15.60c 31.34
2  161.47±12.46a 223.67±12.45ab  12.34  286.59±12.89bc  20.34
CK  158.38±14.45a 229.34±14.65a - 315.45±13.52a -
线性回归方程Linear regressing equation  y=1.545 8x+3.396 8 R2=0.970 9  y=1.410 0x+3.720 2 R2=0.990 2
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·植物保护· 北方园艺2016(13):122~124
间的延长而逐渐升高,与对照组相比,差异极显著(P<
0.01)。24h时,浓度为16g·L-1的抑制率约为
51.96%,48h时达63.08%。其中24、48h的生长抑制
中浓度分别为10.89、8.09g·L-1。
3 讨论与结论
该研究表明,臭椿叶乙醇提取物对菜青虫具有毒
杀、拒食及生长抑制活性。当处理浓度为32g·L-1时,
24h后校正死亡率仅为57.89%,而拒食率和生长抑制
率分别达到70.33%、79.66%。同时提取物对菜青虫的
生物活性具有明显的浓度和时间效应。随着浓度增加
和时间的延长,其生物活性显著增强。与徐红星等[9]报
道的雷公藤总生物碱对小菜蛾的作用方式相似。在试
验期间发现,预先饥饿处理的试虫在刚开始均有不同程
度的取食,但一段时间后取食量明显减少,并出现呕吐、
腹泻等一系列中毒症状,进而停止进食至死亡。据报
道,臭椿的主要活性成分为生物碱类和苦木素类化合
物[10-12],这些化合物具有抗癌、抗菌以及杀虫等多种生
物活性[2-6,10-13]。因此推测菜青虫对臭椿叶乙醇提取物
的拒食反应可能是由于该活性成分在试虫体内积累,致
其代谢紊乱所引起的一种中毒反应。臭椿,作为一种园
林绿化植物被广泛栽培,利用其开发新型植物农药前景
十分乐观。该试验研究了臭椿叶乙醇提取物对菜青虫
的毒杀、拒食以及生长抑制作用,但对其生物活性成分
的分离、鉴定尚待进一步研究。
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Biological Activities of Extracts FromAilanthus altissima Swingle Leaves by
95%Alcohol Against Pieris rapae Larvae
LI Li,JIN Shan,TIE Jun
(Department of Biological Sciences and Technology,Changzhi University,Changzhi,Shanxi 046011)
Abstract:Taking Pieris rapae as research object,the efective components of leaves of Ailanthus altissima Swingle were
extracted with 95%alcohol,and the biological activities of extracts were detected against Pieris rapae Larvae.The results
showed that the extracts had significant antifeeding activity,growth inhibition activity and certain stomach toxicity to
Pieris rapae Larvae.The biological activities of extracts were dose dependent and time-dependent.After the extracts were
fed for 24hours,48hours,the LC50in Pieris rapae Larvae were 20.14g·L-1,14.22g·L-1,respectively;while AFC50
were 13.73g·L-1,8.45g·L-1,respectively.Meanwhile,the growth inhibitions of 50% were 10.89g·L-1,
8.09g·L-1,respectively.
Keywords:Ailanthus altissima Swingle;extracts;biological activities;Pieris rapae Larvae
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