全 文 :目前认为糖尿病并发症的形成及发展与组织器官中微血管
病变相关,而微血管病变的严重程度与 AGEs 的形成成正相关。
持续高血糖可形成大量糖基化终产物(AGEs) ,一方面 AGEs 沉
积在血管壁,损伤小血管[7];另一方面 AGEs 刺激血管内皮释放
ET,进一步加重对小血管的损伤,更加重对肾等重要器官的损
伤[8,9]。FBC能明显的抑制糖尿病大鼠血清和肾脏组织 AGEs的
形成,高剂量 FBC 抑制 AGEs 的形成作用更明显(P < 0. 01)。
FBC抑制肾损伤的作用机制可能是通过降低血糖、抑制 AGEs 的
形成产生的。具体是通过降低血糖而使 AGEs 形成减少,还是
FBC能直接抑制 AGEs的形成或二者兼有,确切机制有待进一步
研究。
总之,FBC对糖尿病大鼠肾脏损伤的抑制作用具有多靶点
性,多机制效应。虽然中药具有一定的降血糖作用,仍未达到理
想控制效果,一方面也说明了中医药在降血糖方面不及降糖西
药,另一方面也显示了中药在治疗 DM慢性并发症方面有较大的
优势。
参考文献:
[1] 韩淑英,陈小玉,王志路,等.荞麦花总黄酮对体内外蛋白质非酶糖
基化的抑制作用[J].中国药理学通报,2004,20(11) :1242.
[2] 韩淑英,张宝忠,朱丽莎,等.荞麦花总黄酮对实验性大鼠Ⅱ型糖尿
病高脂血症的防治作用[J].中国药理学通报,2003,19(4) :477.
[3] 韩淑英,贾秀荣,吕 华,等.荞麦种子总黄酮降血脂、血糖及抗
脂质过氧化作用的研究[J].中国药理学通报,2001,17(6) :694.
[4] Kim YS,Kim BC,Song CY,et al Advanced glycosylation end products
stimulate collagen mRNA synthesis in mesangial cells mediated by pro-
tein kinase C and transforming grow factor - beta[J]. Lab Clin Med,
2001,138(1) :59.
[5] 田 琳,李 才,于晓艳,等.糖基化终产物对大鼠肾小管上皮细胞
NRK - 52E 尾加压素ⅡmRNA 表达的影响[J]. 中国老年病学杂
志,2007,27(15) :1436.
[6] Mourao PA,Giumaraes B,Mulloy B. Antithrombotic activity of a fuco-
sylated chondrotin sulPhate from echinoderm:sulPhated fueose branches
on the Polysaccharid account for its antithromboti action[J]. Br J Hea-
matol,1998,101(4) :647.
[7] 陶凯忠,姜宗来,陈乐渝,等.晚期糖化终末产物对离体血管平滑肌
细胞的影响[J].第二军医大学学报,2000,21(2) :186.
[8] Dukic - Stefanovie S,Gasic - Milenkovic J,Deuther - Conrad W,et al.
Signal transduction pathways in mouse microglia N - 11 cell activated
by advanced glycation end product(AGEs) [J]. J neurochem,2003,87
(1) :44.
[9] Lohwasser C,Neureiter D,Popov Y,et al. Role of the receptor for ad-
vanced glycation end product in hepatic fibrosis[J]. World J Gastroen-
terol,2009,15:5789.
收稿日期:2011-11-21; 修订日期:2012-02-28
基金项目:河南省教育厅自然科学研究计划项目(No. 2010B180034)
作者简介:赵锦慧(1979-) ,女(汉族) ,河南周口人,现任河南省周口师范
学院生命科学系讲师,硕士学位,主要从事生物技术研究工作.
紫茉莉根提取物的体外抑菌实验
赵锦慧,赖 颖,葛红莲
(周口师范学院,河南 周口 466000)
摘要:目的 研究紫茉莉根两种提取物的抑菌效果。方法 分别用水提取法和 95%乙醇提取法制备紫茉莉根水提取物和
醇提取物,利用倍比稀释法进一步制备含有不同质量浓度紫茉莉根水提取物和醇提取物的液体培养基,接种大肠杆菌和
金黄色葡萄球菌,37℃恒温振荡培养,在不同培养时间测定培养液的 OD值。结果 紫茉莉根水提物和醇提物质量浓度分
别≥125 mg /ml和 62. 5 mg /ml时对大肠杆菌有抑制作用,紫茉莉根水提物质量浓度≤500 mg /ml时对金黄色葡萄球菌无
抑制作用,醇提物质量浓度≥250 mg /ml时对金黄色葡萄球菌有抑制作用。结论 紫茉莉根醇提物对两种菌均有抑制作
用,对大肠杆菌的抑制效果更明显,水提物仅对大肠杆菌有抑制作用;醇提物抑菌效果好于水提物。
关键词:紫茉莉; 提取物; 抑菌作用
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 06. 056
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)06-1444-02
紫茉莉根,又名入地老鼠,花粉头,水粉头,粉子头,胭脂花
头,系紫茉莉科植物紫茉莉 Mirabilis jalapa L. 的块根[1]。性微
寒,味甘,无毒。具有清热利湿、解毒活血的功效,用于淋浊、赤白
带下、肺痨吐血、痈疽发背、水肿、关节肿痛、跌打损伤等病症[2]。
通常一些清热药、泻下药、利水渗湿药、补虚药、止咳药、开窍药、
收敛药、消食药等具有抗菌活性,本试验以紫茉莉根为材料,研究
其对两种常见的致病菌(致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌)的
抑制效果,旨在为中草药紫茉莉根的开发和利用提供理论依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 高压蒸气灭菌锅,可见分光光度计,洁净工作台,离心
机,恒温振荡培养箱,恒温数显培养箱,旋转蒸发仪,移液器等。
1. 2 实验材料 紫茉莉根 Roots of Mirabilis jalapa,大肠杆菌 Esch-
erichia coli,金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus,营养肉汤、营养
琼脂培养基。
2 方法
2. 1 细菌基本培养基的配制[3] 配制营养肉汤、营养琼脂培养
基,并调节 pH为 7. 2。
2. 2 菌种的活化及菌液的制备 用无菌接种环分别从试管斜面
上挑取大肠杆菌和金黄色葡萄球菌少许接种于营养琼脂培养基
上,37℃活化培养 24 h。分别挑取活化后的大肠杆菌和金黄色葡
萄球菌的单个菌落放入无菌生理盐水中制备成菌液,调节菌液稀
释度,使菌体密度为 102 cfu /ml。
2. 3 紫茉莉根水提取物和醇提取物的制备 ①水提取物:称取紫
茉莉根 100 g,加水 400 ml,浸泡 30 min,文火加热煮沸 1 h,用纱
布过滤后得提取物,滤渣再用 4 倍水量煎煮后弃去,将两次所得
滤液混合,离心,取上清液,并浓缩至含生药 1 g /ml,调节 pH 为
7. 2,灭菌后 4℃保存备用。②醇提取物:将紫茉莉根粉碎,称取
粉末 100 g,加 95%乙醇 70℃下回流提取 2 次,2 h /次,合并 2 次
滤液,离心,取上清液,挥干溶剂后为醇提物,将醇提物用甲醇溶
·4441·
时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 6
解,蒸馏水稀释至含生药 1 g /ml,甲醇终浓度为 20%,调节 pH为
7. 2,灭菌后 4℃保存备用。
2. 4 药液培养基的制备 采用倍比稀释法[4]制备含不同质量浓
度紫茉莉根水提取物和醇提取物的液体培养基。在无菌条件下,
将容量为 150 ml的灭菌三角瓶分成 3 组(3 次重复) ,每组 2 排,
每排 9 个瓶(编号为 A1 ~ A9,B1 ~ B9)。先在 A1 ~ A8,B1 ~ B8 瓶
中各加入营养肉汤培养基 30 ml,再将水提物原液(1g /ml)30 ml
加入到 A1 中,混匀后吸取 30 ml 加入到 A2 中,依次类推直到加
入到 A4 中,从 A4 中吸取 30 ml弃去,这样 A1 ~ A4 瓶中水提物的
质量浓度分别为 500,250,125,62. 5 mg /ml。B1 ~ B4 瓶中同法制
备含水提物的液体培养基,A5 ~ A8、B5 ~ B8 瓶中同法制备含醇提
物的液体培养基,A9、B9 瓶中各加 15 ml 无菌水和 15 ml 营养肉
汤培养基,混匀后作为对照瓶(即药液质量浓度为 0 mg /ml)。
2. 5 接种培养 在 A1 ~ A9 瓶中各加入大肠杆菌菌液 0. 5 ml,B1
~ B9 瓶中各加入金黄色葡萄球菌菌液 0. 5 ml,用棉塞封瓶口,置
37℃下振荡培养。另取一个灭菌三角瓶,分别加入 15 ml营养肉
汤培养基、15 ml无菌水、0. 5 ml 无菌生理盐水,用作测 OD 值时
调 0。
2. 6 OD值测定 在两种菌分别培养 8,16,24,32 h后,用可见分
光光度计在 600 nm 波长处分别测定每瓶样品的吸光值(OD
值) ,每个样品测 3 次,求平均 OD值。
3 结果与分析
根据上述 OD值测定结果求取平均值,以药液质量浓度为横
坐标,平均 OD值为纵坐标作图。见图 1 ~ 4。
图 1 紫茉莉根水提物 图 2 紫茉莉根醇提物
对大肠杆菌的抑制效果 对大肠杆菌的抑制效果
图 3 紫茉莉根水提物 图 4 紫茉莉根醇提物
对金黄葡萄球菌的抑制效果 对金黄葡萄球菌的抑制效果
由图 1 可知,紫茉莉根水提物质量浓度在 125 ~ 500 mg /ml时
对大肠杆菌有不同程度的抑制作用。由图 2 可知,紫茉莉根醇提
物质量浓度在 62. 5 ~ 500 mg /ml 时对大肠杆菌均有抑制作用。
由图 3 可知,紫茉莉根水提物质量浓度≤500 mg /ml 时对金黄色
葡萄球菌无抑制作用。由图 4 可知,紫茉莉根醇提物质量浓度≥
250 mg /ml时对金黄色葡萄球菌有抑制作用。
图 1 ~ 4 均显示,在药液质量浓度对两种菌均表现出抑制作
用的情况下,与对照相比,随提取物质量浓度的增加和培养时间
的延长,测得的 OD值均呈下降趋势,质量浓度越大,下降趋势越
明显,且培养大肠杆菌的药液培养基的 OD值下降趋势明显大于
培养金黄色葡萄球菌的药液培养基的 OD值下降趋势,这表明紫
茉莉根提取物对大肠杆菌的抑制效果优于对金黄色葡萄球菌的
抑制效果;同时,在表现出抑制作用的药液质量浓度下,随培养时
间的延长,测得的药液培养基的 OD 值呈现先上升后下降的趋
势,说明紫茉莉根提取物对两种菌的有效抑制需要一定的作用时
间,作用 24 h后抑菌活性增强。图 1 ~ 4 还显示,紫茉莉根醇提
物对两种菌的抑制效果好于水提物。
4 结论与讨论
上述试验结果表明:紫茉莉根醇提物对两种菌均有抑制作
用,对大肠杆菌的抑制效果更明显;水提物对大肠杆菌有抑制作
用,对金黄色葡萄球菌无抑制作用;醇提物抑菌效果好于水提物。
紫茉莉根作为一种传统中草药,有抗癌、避孕、抗人类免疫缺
陷病毒等多种药理活性[5,6]。本试验结果显示其具有抑菌活性。
目前国内外对紫茉莉根的研究主要集中在紫茉莉蛋白(MAP)
上,对其化学成分研究的较少。对抑菌等药理活性物质的进一步
分离纯化及其结构解析将有助于人们更好的开发利用这一植物
资源。
同一种中草药,不同的来源、采摘季节、采摘部位、提取方法
等均会影响其成分,特别是有些活性成分对光和热不稳定,这些
不仅会造成试验误差,同时给中草药的开发带来一定的难度,需
要我们做进一步的研究工作。
参考文献:
[1] 江苏新医学院. 中药大辞典,下册[M]. 上海:上海人民出版社,
1977:2370.
[2] 危 英,杨小生,郝小江,等.紫茉莉根的化学成分[J].中国中药杂
志,2003,28(12) :1151.
[3] 陈金春,陈国强.微生物学实验指导[M].北京:清华大学出版社,
2005:37.
[4] 郑钧镛. 药物微生物及检验技术[M]. 北京:人民卫生出版社,
1985:351.
[5] 李光喜,杨培全.紫茉莉属药用植物研究进展[J].广东医药学院学
报,1994,10(4) :251.
[6] WANG Yifen,CHEN Jijun,YANG Yanzheng,et al. New Rotenoids from
Roots of Mirabilis jalapa[J]. Helvetica Chimica Acta,2002,85(8) :
2342.
·5441·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 6 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期