全 文 ：Ｊ．ＳＨＡＮＸＩ　ＡＧＲＩＣ．ＵＮＩＶ．（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
学报（自然科学版）２０１３，３３（４） ００３０４２
收稿日期：２０１３－０５－１１　　　修回日期：２０１３－０６－１８
作者简介：谢新蕊（１９８６－），女（汉），山东菏泽人，在读硕士，研究方向：蔬菜遗传育种与分子生物学。
通讯作者：张志忠，副教授，硕士生导师。Ｔｅｌ：１３８０９５０８９７２；Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｅａｄａ２００１＠１６３．ｃｏｍ
基金项目：福建省科技重大专项（２００８ＮＺ０００２－１）；福建农林大学园艺学院青年学术骨干培养基金（ＦＡＦＵ２０１２ＹＹＰＹ０８）
甜瓜根分泌物介导自毒作用差异基因表达分析
谢新蕊，高强，奚玉培，张志忠
（福建农林大学 园艺学院，福建 福州３５０００２）
摘　要：以甜瓜品种“新银辉”为试验材料，利用甜瓜根系分泌物胁迫处理甜瓜幼苗，通过ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ技术分析甜瓜
自毒作用相关基因及其表达情况。结果表明，利用６３对引物组合获得约１２００条ＴＤＦｓ（Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒａｇ－
ｍｅｎｔｓ），平均每对引物组合扩增出１５～３０条ＴＤＦ，长度在５０～７００ｂｐ之间。相关基因的表达模式可分为上调、下调、
瞬时和持续表达４类。选取表达差异明显片段进行回收、测序、比对，获得４２条同源性高的ＴＤＦｓ序列。甜瓜根系分
泌物介导的自毒作用相关差异表达基因涉及能量代谢、物质合成与运输、逆境诱导和基因调控及信号传导等过程，分
子调控机制较为复杂。
关键词：甜瓜；根系分泌物；自毒作用；差异表达转录衍生片段（ＴＤＦｓ）；ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ
中图分类号：Ｓ６５２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１６７１－８１５１（２０１３）０４－０３３２－０４
Ｇｅｎｅ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ　ｉｎ　Ｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｔｏ　Ａｕｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　Ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｂｙ　Ｒｏｏｔ　Ｅｘｕｄａｔｅｓ　ｉｎ　Ｍｅｌｏｎ
Ｘｉｅ　Ｘｉｎｒｕｉ，Ｇａｏ　Ｑｉａｎｇ，Ｘｉ　Ｙｕｐｅｉ，Ｚｈａｎｇ　Ｚｈｉｚｈｏｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｆｕｊｉａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ　Ｆｕｊｉａｎ　３５０００２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ，ａｌｅｌｏｐａｔｈｉｃ　ａｕｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｇｅｎｅｓ　ｏｆ＇Ｎｅｗ　Ｓｉｌｖｅｒｌｉｔ＇ｍｅｌｏｎｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｌｏｎ　ｒｏｏｔ　ｅｘｕｄａｔｅｓ　ａｔ
ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｓｔａｇｅ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ａｂｏｕｔ　１２００ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ－ｄｅ－
ｒｉｖｅｄ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ（ＴＤＦｓ）ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｖｉａ　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ　ｗｉｔｈ　６３ｐｒｉｍｅｒ　ｐａｉｒｓ，ａｎｄ　ｅａｃｈ　ｏｆ　ｔｈｅｍ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　１５～３０ＴＤＦｓ
ｗｉｔｈ　５０～７００ｂｐ　ｉｎ　ｌｅｎｇｔｈ．Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｏｆ　ｍｅｌｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｏｕｒ　ｃａｔｅｇｏｒｉｅｓ　ｗｈｉｃｈ
ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｕｐｗａｒｄ，ｄｏｗｎｗａｒｄ，ｉｎｓｔａｎｔａｎｅｏｕｓ　ａｎｄ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｆｏｒｔｙ　ｔｗｏ　ＴＤＦｓ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｈｏｍｏｌｏｇｙ
ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ，ｒｅｃｏｖｅｒｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｈｏｍｏｌ－
ｏｇｏｕｓ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎｃｌｕｄｅｄ　ｅｎｅｒｇｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｍａｔｅｒｉａｌ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔａｔｉｏｎ，ｓｔｒｅｓｓ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ，ｇｅｎｅ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｓｉｇｎａｌ　ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｗａｓ　ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｍｅｌｏｎ；Ｒｏｏｔ　ｅｘｕｄａｔｅｓ；Ａｌｅｌｏｐａｔｈｉｃ　ａｕｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ；Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ（ＴＤＦｓ）；ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ
　　甜瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓ　ｍｅｌｏ　Ｌ．）是重要的世界性园艺
作物，生产栽培中连作障碍问题日益突出。连作障
碍广泛存在于蔬菜、果树、花卉和粮食作物生产
中［１］，研究表明植物根系分泌产生的毒素是园艺植
物连作障碍的重要因子［２，３］，是植物自毒作用［４］的
主要成因。大多数作物都存在自毒作用，如根系分
泌物中的化感自毒物质肉桂酸能加重黄瓜枯萎病
的发生率，是黄瓜连作障碍因子［５］；大豆根系分泌
物可能刺激某些有害微生物的生长和繁殖，致使大
豆产生连作障碍［６］；西瓜根系分泌物极大地增强了
西瓜枯萎病菌孢子的萌发和形成，与水稻间作时会
减轻西瓜枯萎病的发生［７］。甜瓜化感作用的研究
较少，主要集中在探讨其他作物水浸液或根系分泌
物对甜瓜的影响［８～１０］，张志忠等［１１］新近研究了植
株水浸提液介导甜瓜自毒作用的差异基因表达情
况，为探讨甜瓜化感自毒作用的分子机理和相关基
因的克隆提供了理论依据。尚未有甜瓜根系分泌
物介导自毒作用分子机理的研究报道，鉴于根系分
泌物在植物自毒效应中发挥重要作用，利用根系分
泌物处理甜瓜幼苗，采用ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ技术分析
相关基因及其表达情况，探讨甜瓜自毒作用的分子
机制。
DOI:10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2013.04.015
１　材料与方法
１．１　材料
　　甜瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓ　ｍｅｌｏ　Ｌ．）品种：新银辉，购于福
州市农嘉种业股份有限公司。
１．２　方法
１．２．１　材料处理
甜瓜种子接种于１／２ＭＳ培养基，每瓶５粒，
培养温度２６℃，光强２０００ｌｘ，光照１２ｈ，生长至根
系布满瓶底，切除根系以上部分。培养条件同上，
生长约３ｗ的甜瓜苗带根移栽至只有根系的培养
基中，处理０、２、４、６ｄ取幼苗叶片用于提取ＲＮＡ。
１．２．２　ＲＮＡ的获取和ｃＤＮＡ的合成
利用试剂盒提取甜瓜叶片总ＲＮＡ，第一链合成
参照Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ公司的 ＲｅｖｅｒｔＡｉｄＴＭ　Ｆｉｒｓｔ　Ｓｔｒａｎｄ
ｃＤＮＡ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒的说明书，取５μｇ　ＲＮＡ反
转录成ｃＤＮＡ。ｃＤＮＡ第二链的合成采用ＬＤ－ＰＣＲ
进行，双链ｃＤＮＡ用紫外分光光度法检测。
１．２．３　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ分析
经纯化的双链ｃＤＮＡ进行ＥｃｏＲＩ和Ｍｓｅ　Ｉ组
合酶切，酶切体系：ｃＤＮＡ　２０μＬ，Ｂｕｆｆｅｒ　Ｒ　４μＬ，
ＥｃｏＲＩ　０．５μＬ，Ｍｓｅ　Ｉ　０．５μＬ，补水至４０μＬ。
ＥｃｏＲⅠ 预扩增和选择性扩增引物分别为：５′－
ＧＡＣＴＧＣＧＡＴＣＣＡＡＴＴＣ－３′；５′－ＧＡＣＴＧＣＧＡＴＣ
ＣＡＡＴＴＣＮＮ－３′；ＭｓｅⅠ预扩增和选择性扩增引物
分 别 为：５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡ－３′；５′－
ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＡＣ－３′。预扩产物稀释
１００倍后，用于选择性扩增。选择性扩增产物在
６％聚丙烯酰胺凝胶上５０Ｗ 功率进行电泳分离，
银染法显示条带。回收具有明显差异的片段测序，
有效ＴＤＦｓ序列提交 ＮＣＢＩ进行ＢＬＡＳＴ比对，进
行相关生物信息学分析。
２　结果与分析
２．１　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ分析
　　利用６３对引物组合进行选择性扩增，平均每
对引物组合可扩增出１５～３０条ＴＤＦｓ，片段长度
在５０～７００ｂｐ之间。基因表达模式大致可分为：
上调、下调、瞬时和持续表达４类（图１）。
图１　部分引物组合的ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ图谱
Ｆｉｇ．１　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ　ｍａｐ　ｏｆ　ｓｅｖｅｒａｌ　ｐｒｉｍｅｒ　ｐａｉｒｓ
注：Ａ，上调表达；Ｂ，下调表达；Ｃ，瞬时表达；Ｄ，持续表达。
Ｎｏｔｅ：Ａ，ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ；Ｂ，ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ；Ｃ，ｔｒａｎｓｉｅｎｔｌｙ－ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ；Ｄ，ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｌｙ－ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ．
　　上调表达类随着处理时间延长表达量不断增
加，此类基因可能是甜瓜主动防御体系中的重要组
分。下调表达类随着处理时间延长表达量不断减
少，在胁迫初期有少量表达，处理后期部分已检测
不到，这类可能是被自毒效应抑制的相关过程中的
基因。瞬时表达类出现在胁迫处理的某个或某几
个阶段，可能是具有特殊作用的调控因子，在植株
受到胁迫时被诱导表达，发挥作用后迅速降解。持
续表达类在所有处理中无明显变化，可能是植物基
础代谢相关基因，其表达量不受或较少到受外界因
素影响。
３３３３３（４） 谢新蕊等：甜瓜根分泌物介导自毒作用差异基因表达分析
２．２　ｃＤＮＡ差异片段的回收、测序及同源性分析
选取有明显差异的片段进行纯化回收、测序。
将得到的这些ＴＤＦｓ序列在ＮＣＢＩ里进行比对，其
中４２条同源性高的ＴＤＦｓ序列列于下表（表１）。
表１　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ分析甜瓜化感自毒作用差异表达基因的同源性分析
Ｔａｂｌｅ　１　Ｈｏｍｏｌｏｇｉｅｓ　ｏｆ　ａｌｅｌｏｐａｔｈｙ　ＴＤＦ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｆｏｒ　ｍｅｌｏｎ　ｗｉｔｈ　ｓｅｌｆ－ａｌｅｌｏｐａｔｈｙ
功能分类
Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｔｙｐｅ
克隆编号
Ｃｌｏｎｅｓ　Ｃｏｄｅ
推测蛋白
Ｐｕｔａｔｉｖｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ
物种
Ｏｒｇａｎｉｓｍ
相似度
Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ／％
Ｅ值
Ｅ－ｖａｌｕｅ
差异条带类型
ＴＤＦｓ　ｔｙｐｅ
能量代谢
相关
ＴＤＦ２Ａ 生长素诱导的β－葡萄糖苷酶 玉米 ７４　 ３Ｅ－１０ 上调表达
ＴＤＦ１６ 过渡期的内质网ＡＴＰ酶 拟南芥 ９３　 ７Ｅ－１６ 瞬时表达
ＴＤＦ２１Ａ 真核细胞肽链释放因子亚基 苜蓿 ８３　 ６Ｅ－３０ 瞬时表达
ＴＤＦ２７Ａ β半乳糖苷酶 苜蓿 ６０　 ５Ｅ－２３ 下调表达
ＴＤＦ３１Ａ 转酮酶家族蛋白 拟南芥 ９４　 ６Ｅ－５３ 瞬时表达
ＴＤＦ４１Ｂ β淀粉酶 苜蓿 ７４　 ３Ｅ－１３ 瞬时表达
ＴＤＦ５０Ａ 核酮糖－１，５－二磷酸羧化酶亚基 野芭蕉 ５０　 ２Ｅ－０５ 上调表达
ＴＤＦ６２ 核酮糖－１，５－二磷酸羧化酶亚基 黄瓜 ８４　 １Ｅ－２１ 下调表达
物质合成
与运输相关
ＴＤＦ２Ｃ 依赖ＡＴＰ的ＳＫ１２／ＤＯＢ１蛋白 拟南芥 ７０　 １Ｅ－３３ 上调表达
ＴＤＦ６Ｂ 核糖体蛋白Ｓ３ 黄瓜 ９８　 ２Ｅ－３２ 上调表达
ＴＤＦ６Ｄ 核糖体蛋白Ｓ３ 黄瓜 ９７　 ３Ｅ－３２ 上调表达
ＴＤＦ１３Ａ 卤酸脱卤酶酸性磷酸酶亚族 拟南芥 ６１　 ９Ｅ－２３ 下调表达
ＴＤＦ２８Ａ 阳离子转运体ＮＣＳ１ 拟南芥 ６８　 ７Ｅ－４１ 瞬时表达
ＴＤＦ２８Ｂ 细胞色素ｂ５ 烟草 ８１　 ５Ｅ－２７ 下调表达
ＴＤＦ３０Ａ 精氨琥珀酸合成酶 拟南芥 ８４　 ５Ｅ－１８ 上调表达
ＴＤＦ３３Ａ 乙酰羟酸还原异构酶 豌豆 ８９　 ２Ｅ－０８ 下调表达
ＴＤＦ４１Ａ 质膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶 大豆 ８８　 ３Ｅ－４９ 瞬时表达
ＴＤＦ５１Ｄ ４０Ｓ核糖体蛋白Ｓ１８ 拟南芥 ８７　 ２Ｅ－２８ 上调表达
ＴＤＦ５２Ａ 水通道蛋白液泡膜内在蛋白 拟南芥 ８６　 ８Ｅ－３８ 瞬时表达
ＴＤＦ５２Ｅ 水通道蛋白 烟草 ９２　 ２Ｅ－０５ 瞬时表达
ＴＤＦ６１Ｃ 核糖体蛋白Ｓ３ 黄瓜 ９６　 １Ｅ－２３ 下调表达
逆境相关
ＴＤＦ１Ａ 依赖ＡＴＰ的ＲＮＡ解旋酶 苜蓿 ９２　 １Ｅ－７０ 上调表达
ＴＤＦ４Ｂ 热激蛋白 黄瓜 ９７　 ３Ｅ－６４ 上调表达
ＴＤＦ１９ 受伤响应蛋白 拟南芥 ５４　 １．３ 上调表达
ＴＤＦ２５Ａ 泛素活化酶Ｅ 苜蓿 ７８　 ３Ｅ－３９ 上调表达
ＴＤＦ２８Ｃ 铁氧还原蛋白 聚球藻属 ５０　 １ 上调表达
ＴＤＦ５０Ｂ 丝氨酸／苏氨酸特异性蛋白激酶 拟南芥 ７８　 ２Ｅ－１８ 下调表达
ＴＤＦ５１Ｃ 富含亮氨酸重复序列类抗病蛋白 大白菜 ８２　 ２Ｅ－２６ 下调表达
ＴＤＦ６１Ａ 水杨酸诱导葡糖基转移酶 烟草 ５８　 ８Ｅ－１６ 瞬时表达
ＴＤＦ６１Ｂ 丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶 苜蓿 ７６　 ２Ｅ－０９ 上调表达
基因调控
与信号
传导相关
ＴＤＦ４Ａ Ｆ－ｂｏｘ蛋白质 苜蓿 ６０　 ３Ｅ－１６ 上调表达
ＴＤＦ７ 锌指蛋白 拟南芥 ５３　 ６Ｅ－１９ 上调表达
ＴＤＦ１７Ａ 锚蛋白 粳稻 ５５　 １Ｅ－０６ 瞬时表达
ＴＤＦ１７Ｂ 锌指蛋白（ＣＣＣＨ类） 拟南芥 ８３　 ３Ｅ－３２ 上调表达
ＴＤＦ２７Ｂ ＳＣＬ１３（ｓｃａｒｅｃｒｏｗ－ｌｉｋｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　１３－ｌｉｋｅ）蛋白 黄瓜 ９６　 ２Ｅ－２８ 上调表达
ＴＤＦ３１Ｂ 核酸内切酶 西葫芦 ９８　 ４Ｅ－２５ 上调表达
ＴＤＦ５１Ｂ Ｒａｓ相关小ＧＴＰ结合蛋白 拟南芥 ７８　 ７Ｅ－２２ 下调表达
ＴＤＦ５２Ｃ 磷脂酶Ｄ 黄瓜 ５９　 ９Ｅ－１９ 瞬时表达
ＴＤＦ５３Ａ ＡＵＸ／ＩＡＡ蛋白 黄瓜 ９６　 ２Ｅ－０７ 下调表达
ＴＤＦ５７Ａ 锚蛋白重复蛋白 拟南芥 ７６　 ５Ｅ－２５ 下调表达
ＴＤＦ５７Ｃ 锌指Ｒａｎ结合结构域蛋白 苜蓿 ５０　 ３Ｅ－０４ 下调表达
ＴＤＦ６０Ｂ 锌指蛋白（ＣＣＨＣ类） 拟南芥 ６８　 ４Ｅ－０９ 下调表达
３　讨论与结论
利用ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ技术分析甜瓜化感作用，
获得的和甜瓜根系分泌物自毒作用相关的差异表
达基因片段，广泛地涉及能量代谢、物质合成与运
输、逆境诱导和基因调控及信号传导等过程，说明
４３３ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１３
甜瓜化感自毒作用的分子调控机制十分复杂。实
验中获得的有效ＴＤＦｓ中上调表达比例最高，表明
甜瓜更多地是通过主动调控来抵抗化感自毒作用
的伤害。如β－葡萄糖苷酶（ＴＤＦ２Ａ）参与能量代
谢过程，属于水解酶类，与萜烯类有密切关系［１２］，
在许多植物中萜烯类都是很重要的化感物质，随着
胁迫处理时间延长，此基因表达量增加，可能和甜
瓜化感物质合成有关。水通道蛋白（ＴＤＦ５２Ａ）参
与物质合成与运输，包括４个家族［１３］，在植物水分
运输、离子的选择透过性、渗透调节、种子萌发的吸
胀作用等许多生理过程中均起重要作用［１４，１５］。该
基因在胁迫６ｄ时才表达，可能在处理后期植物通
过增强这类基因的表达进而加强对细胞膨压的主
动调节以抵抗逆境。泛素活化酶（ＴＤＦ２５Ａ）参与
细胞周期调控，抗逆、抗病、衰老和信号转导等多个
过程［１６～１８］。泛素活化酶随胁迫处理时间延长表达
量增加，可能在甜瓜自毒作用中起重要作用。锌指
蛋白参与基因调控与信号转导等过程，和植物生长
发育调控、胁迫应答关系密切［１９］，多个家族的锌指
蛋白参与了甜瓜的自毒作用调节，表现出不同的表
达模式，此课题值得深入研究。
参　考　文　献
［１］高子勤，张淑香．连作障碍于根际微生态研究ｉｖ．根系分泌物及其生态效应［Ｊ］．应用生态学报，１９９８，９（５）：５４９－５５４．
［２］Ｙｕ　Ｊ　Ｑ，Ｍａｔｓｕｉ　Ｙ．Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｙｔｏｔｏｘｉｃ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ　ｉｎ　ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｈｙｄｒｏｐｏｎｉｃ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ
ｔｏｍａｔｏ［Ｊ］．Ｓｏｉｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｐｌａｎｔ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９９３，３９（４）：６９１－７００．
［３］王芳．茄子连作障碍机理研究［Ｄ］．中国农业大学，２００３．
［４］喻景权，杜尧舜．蔬菜设施栽培可持续发展中的连作障碍问题［Ｊ］．沈阳农业大学学报，２０００，３１（１）：１２４－１２６．
［５］Ｙｅ　Ｓ　Ｆ，Ｙｕ　Ｊ　Ｑ，Ｐｅｎｇ　Ｙ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｗｉｌｔ　ｉｎ　Ｃｕｃｕｍｉｓ　ｓａｔｉｖｕｓ　Ｌ．ｉｓ　ｐｒｏｍｏｔｅｄ　ｂｙ　ｃｉｎｎａｍｉｃ　ａｃｉｄ，ａｎ　ａｕｔｏｔｏｘｉｎ　ｉｎ　ｒｏｏｔ
ｅｘｕｄａｔｅｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　ａｎｄ　Ｓｏｉｌ，２００４，２６３（１）：１４３－１５０．
［６］韩丽梅，王树起，鞠会艳，等．大豆根分泌物的鉴定及其化感作用的初步研究［Ｊ］．大豆科学，２０００，１９（２）：１１９－１２５．
［７］Ｗｅｎ　Ｙ　Ｈ，Ｌｉ　Ｘ　Ｒ，Ｗｅｉ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ａｌｅｌｏｐａｔｈｉｃ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｒｏｏｔ　ｅｘｕｄａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ　ａｎｄ　ｒｉｃｅ　ｐｌａｎｔｓ　ｏｎ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ．ｓｐ．
ｎｉｖｅｕｍ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｓｏｉｌ，２０１０，３３６（１－２）：４８５－４９７．
［８］陈友根，朱世东，陶鸿，等．大蒜根系水浸液处理对连作甜瓜光合及荧光特性的影响［Ｊ］．中国农学通报，２００８，２４（１２）：３３９－３４３．
［９］庄敬华，杨长成，唐树戈，等，几种设施蔬菜根系浸提液对甜瓜的化感作用［Ｊ］．种子，２００９，２８（１１）：９４－９６．
［１０］金扬秀，谢关林，孙祥良，等，大蒜轮作与瓜类枯萎病发病的关系［Ｊ］．上海交通大学学报：农业科学版，２００３，２１（１）：９－１２．
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［１２］李远华，江昌俊，余有本．茶树β－葡萄糖苷酶基因ｍＲＮＡ的表达［Ｊ］．南京农业大学学报，２００５，２８（２）：１０３－１０６．
［１３］Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ　Ｉ，Ｋａｒｌｓｓｏｎ　Ｍ，Ｊｏｈａｎｓｏｎ　Ｕ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ａｑｕａｐｏｒｉｎｓ　ｉｎ　ｃｅｌｕｌａｒ　ａｎｄ　ｗｈｏｌｅ　ｐｌａｎｔ　ｗａｔｅｒ　ｂａｌａｎｃｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　ｅｔ　Ｂｉｏ－
ｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ（ＢＢＡ）－Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ，２０００，１４６５（１－２）：３２４－３４２．
［１４］李仁，吴新新，李蔚，等．番茄水通道蛋白基因ＳｌＡＱＰ的克隆与序列分析［Ｊ］．中国农业科学，２０１２，４５（２）：３０２－３１０．
［１５］林江波，王伟英，邹晖，等．中国水仙水通道蛋白基因ｃＤＮＡ克隆、序列分析与表达［Ｊ］．福建农业学报，２０１１，２６（３）：３７１－３７６．
［１６］许传俊，李玲．泛素／２６Ｓ蛋白酶体途径与植物的生长发育［Ｊ］．西北植物学报，２００７，２７（３）：６３５－６４３．
［１７］黄海杰，陈雄庭．植物泛素／２６Ｓ蛋白酶体途径研究进展［Ｊ］．中国生物工程杂志，２００８，２８（７）：１２７－１３２．
［１８］宋素胜，谢道昕．泛素蛋白酶体途径及其对植物生长发育的调控［Ｊ］．植物学通报，２００６，２３（５）：５６４－５７７．
［１９］玉晓红，曾正明，苗雁文，等．水稻锌指蛋白基因ＯｓＺＲＬ过表达对根系发育的影响［Ｊ］．山西农业大学学报：自然科学版，２０１１，３１
（４）：３４３－３４８．
５３３３３（４） 谢新蕊等：甜瓜根分泌物介导自毒作用差异基因表达分析